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中国药学杂志 2001年第1期36卷 38-42页

作者：马利敏张强李玉珍顾忠伟北京大学人民医院药剂科北京100044 北京大学药学院药剂研究室北京100083 国家计划生育委员会科学技术研究所北京100081

:目的　探讨ε 己内酯 D ,L 丙交酯嵌段共聚物纳米粒 (PCLA NP)作为新型药物载体的可能性。方法　采用双乳化溶媒蒸发法制备了胰岛素嵌段共聚物纳米粒 (INS PCLA NP) ,透射电镜考察其形态 ;HPLC测定胰岛素的包封率 ,并考察了影响纳米粒... 详细信息

:目的　探讨ε 己内酯 D ,L 丙交酯嵌段共聚物纳米粒 (PCLA NP)作为新型药物载体的可能性。方法　采用双乳化溶媒蒸发法制备了胰岛素嵌段共聚物纳米粒 (INS PCLA NP) ,透射电镜考察其形态 ;HPLC测定胰岛素的包封率 ,并考察了影响纳米粒粒径及包封率的各种因素 ;应用抗体捕捉实验验证纳米粒的载药机制 ;考察INS PCLA NP的体外释药特性 ;建立了糖尿病大鼠模型 ,通过葡萄糖氧化酶法 (GOD PAP)测定血糖浓度来评价INS PCLA NP经皮注后的降血糖作用 ,并计算INS PCLA NP的药理生物利用度 (pharmacologicalbioavailability ,PBA)。结果　INS PCLA NP的平均粒径为 16 7.3nm ;纳米粒的平均包封率为 37.79 % ;PVA浓度和超声时间对粒径及包封率影响显著 ;抗体捕捉实验证实被包封的胰岛素大部分 (约 5 3 % )存在于纳米粒的表面 ;INS PCLA NP的体外释药曲线分为两相 :突释释药相和缓释平台相 ;药效学研究表明 ,12u·kg-1的INS PCLA NP经皮下给药后即有明显的降血糖作用 ,药理生物利用度为 74.76 %。结论　PCLA

关键词： ε-己内酯-D,L-丙交酯嵌段共聚物胰岛素降血糖作用聚酯纳米粒

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补肾生血中药血管生成活性整体效应的初步探讨

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中医杂志 2001年第11期42卷 683-685页

作者：王蕾吴志奎张树成吕新霞王介东中国中医研究院广安门医院分子生物学室北京市宣武区北线阁5号100053 国家计划生育委员会科学技术研究所细胞生物室

以鸡胚绒毛尿囊膜模型(鸡胚CAM)用中药血清药理学方法,研究补肾生血中药对血管生成活性的影响,并用IPP计算机图像处理系统分析新生血管。结果表明,补肾生血中药含药血清可促进鸡胚CAM的血管增加,并以细小血管为主,这符合新生血管特征。... 详细信息

以鸡胚绒毛尿囊膜模型(鸡胚CAM)用中药血清药理学方法,研究补肾生血中药对血管生成活性的影响,并用IPP计算机图像处理系统分析新生血管。结果表明,补肾生血中药含药血清可促进鸡胚CAM的血管增加,并以细小血管为主,这符合新生血管特征。提示补肾生血中药有促进血管生成和血管生成活性样作用。提出中医肾生髓理论可能与血脉生成有关,补肾生血与血脉生成的关系值得探讨。

关键词：补肾药药理学补血药鸡胚CAM 整体效应中药血管生成活性

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卵泡发育和闭锁过程中肾素-血管紧张素系统与甾体激素的作用

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生殖医学杂志 2001年第3期10卷 148-153页

作者：裴开颜吴尔若连瑞红焦丽红王红国家计划生育委员会科学技术研究所生殖内分泌研究室北京100081 中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室北京100080

目的 :研究在卵泡发育和闭锁过程中 ,卵巢的肾素 -血管紧张素系统 ( RAS)及其与甾体激素生成的相互作用。方法 :制备人胎盘羊膜双池培养系统 ,分离了猪卵巢颗粒细胞和卵泡膜细胞 ,并分为健康和闭锁两组 ,在促性腺激素刺激下协同培养。 ... 详细信息

目的 :研究在卵泡发育和闭锁过程中 ,卵巢的肾素 -血管紧张素系统 ( RAS)及其与甾体激素生成的相互作用。方法 :制备人胎盘羊膜双池培养系统 ,分离了猪卵巢颗粒细胞和卵泡膜细胞 ,并分为健康和闭锁两组 ,在促性腺激素刺激下协同培养。 48h后应用放射免疫测定法 ( RIA)测定两种细胞培养液中的血管紧张素 II( Ang II)、肾素活性、雌二醇 ( E2 )、孕酮 ( P)以及睾酮 ( T)水平。收集健康和闭锁卵泡的卵泡液同时进行上述各项指标的测定。并运用免疫组化染色方法对健康和闭锁卵泡的 Ang II定位进行了观察。结果 :卵泡在闭锁状态下的 Agn II水平在卵泡液中以及卵泡膜细胞培养液中均显著升高 ,肾素活性水平明显下降 ;颗粒细胞培养液中两项指标均无明显改变。闭锁卵泡的卵泡液、颗粒细胞和卵泡膜细胞培养液中的 E2 水平均显著下降 ;P、T水平也有不同程度的降低。结论 :卵泡闭锁与高浓度 Ang II相关 ,而活性肾素水平的降低可能反映了 RAS中存在自身的反馈调节机制。 RAS的变化主要发生在卵泡膜细胞 ,可能与卵泡膜细胞层具有丰富的血管而颗粒细胞层中无血管有关。 E2 、P、T具有不同程度的促进卵泡发育和抑制闭锁的作用。免疫组化显示闭锁卵泡中 Ang

关键词：卵泡发育卵泡闭锁肾素-血管紧张素甾体激素

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闭锁卵泡中肾素──血管紧张素系统的变化

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Developmental and Reproductive Biology 2001年第B10期10卷 13-14页

作者：吴尔若裴开颜焦丽红王红国家计划生育委员会科学技术研究所中国北京100081 中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室中国北京100080

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胰岛素聚酯微粒的制备及大鼠体内药效学研究

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药学学报 2000年第11期35卷 850-853页

作者：马利敏张强李玉珍顾忠伟北京医科大学人民医院药剂科北京100044 北京医科大学药学院药剂研究室北京100083 国家计划生育委员会科学技术研究所北京100081

目的　探讨利用一种新型聚酯材料—ε 己内酯 D ,L 丙交酯嵌段共聚物 (PCLA)制备微粒型药物载体的可能性。方法　通过双乳化溶剂蒸发技术制备ε 己内酯 D ,L 丙交酯嵌段共聚物微粒 (PCLA MP) ,用扫描电镜观察其形态 ,粒径分析仪 (part... 详细信息

目的　探讨利用一种新型聚酯材料—ε 己内酯 D ,L 丙交酯嵌段共聚物 (PCLA)制备微粒型药物载体的可能性。方法　通过双乳化溶剂蒸发技术制备ε 己内酯 D ,L 丙交酯嵌段共聚物微粒 (PCLA MP) ,用扫描电镜观察其形态 ,粒径分析仪 (particleanalyser)测定粒径 ;以胰岛素 (INS)为模型药物 ,制备胰岛素聚酯微粒 (INS PCLA MP) ;建立了测定INS包封率的HPLC方法 ;INS抗体捕捉实验考察PCLA MP载药机理 ;以pH 7 4的磷酸盐缓冲液为介质 ,探讨INS PCLA MP体外释药特性 ;建立了药物致大鼠糖尿病模型 ,通过葡萄糖氧化酶法 (GOD PAP)测定血糖值来评价INS PCLA MP经皮下给药后的降血糖作用 ;以INS SOL为对照 ,计算药理相对生物利用度。结果　制备的微粒大小均匀 ,表面光滑圆整 ,平均粒径 1 9μm ;INS的包封率为 76 46 % ;抗体捕捉实验证实 ,被包封的INS中只有小部分 (18 2 5 % )分布在MP的表面 ;INS PCLA MP的体外释放曲线包括突释相及随后的缓慢释放相 ;药效学研究表明 ,12u·kg-1的INS PCLA MP经糖尿病大鼠皮下给药后具有明显的降血糖作用 ,药理相对生物利用度为132 95 %。结论　PCLA嵌段共聚物作为药物输送系统的载体材料有着良好的前景 ,PCLA

关键词： PCLA 药物载体胰岛素聚酯微粒

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鸡胚绒毛尿囊膜血管生成模型在中药研究中应用方法探讨

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中药药理与临床 2000年第6期16卷 46-47页

作者：王蕾张树成吴志奎王介东中国中医研究院广安门医院分子生物学室北京100053 国家计划生育委员会科学技术研究所细胞生物室北京100081

本文对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成模型 (鸡胚CAM )进行改良 ,尝试用中药血清药理学方法、组织匀浆、中药多糖及生药等给药方式 ,将本血管活性整体模型引入中医药研究中。

关键词：鸡胚绒毛尿囊膜血管生成血清药理学组织匀浆多糖中药研究应用方法鸡胚绒毛尿囊膜血管生成模型鸡胚CAM

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人子宫内膜蜕膜反应的体外模型及其与腺体的关系

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解剖科学进展 2000年第4期6卷 307-311页

作者：张芳婷宋天保王介东深圳市中心医院检验科深圳518036 西安医科大学组织胚胎学教研室西安710061 国家计划生育委员会科学技术研究所细胞生物学2室北京100081

蜕膜反应是子宫内膜的一种特殊分化过程 ,与女性月经、妊娠有密切的关系 ,并在控制滋养细胞有度入侵的过程中起着决定性的作用。近年来 ,人们广泛开展了人子宫内膜细胞的培养和体外研究。本文着重介绍蜕膜反应的调控 ,子宫内膜细胞的培... 详细信息

蜕膜反应是子宫内膜的一种特殊分化过程 ,与女性月经、妊娠有密切的关系 ,并在控制滋养细胞有度入侵的过程中起着决定性的作用。近年来 ,人们广泛开展了人子宫内膜细胞的培养和体外研究。本文着重介绍蜕膜反应的调控 ,子宫内膜细胞的培养 ,体外蜕膜化及其指标 ,子宫腺细胞与蜕膜反应的关系等方面的研究进展。

关键词：子宫内膜蜕膜反应子宫腺细胞腺体

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重组质粒pPIC9K-oLHαhCGβCTP的构建及在毕赤酵母中的表达

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中国生物化学与分子生物学报 1999年第2期15卷 175-178页

作者：王桂玉刘润梅潘善培李伟雄国家计划生育委员会科学技术研究所分子生物室暨南大学生殖免疫研究所

将人绒毛膜促性腺激素β－亚基的羧基肽（ＣＴＰ）与羊黄体生成素（ｏＬＨ）的α－亚基融合，通过设计两对引物，用部分重叠聚合酶链式反应（ｏｖｅｒｌａｐｐｉｎｇＰＣＲ）的方法构建了羊的α亚基ＣＴＰ嵌合体．这个嵌合体被克隆到ｐ... 详细信息

将人绒毛膜促性腺激素β－亚基的羧基肽（ＣＴＰ）与羊黄体生成素（ｏＬＨ）的α－亚基融合，通过设计两对引物，用部分重叠聚合酶链式反应（ｏｖｅｒｌａｐｐｉｎｇＰＣＲ）的方法构建了羊的α亚基ＣＴＰ嵌合体．这个嵌合体被克隆到ｐＰＩＣ９Ｋ质粒中，用电打孔方法转入巴氏毕赤酵母（Ｐｉｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓ），并获高效表达．表达蛋白经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹证明分子量约为２８ｋＤ．２．５Ｌ发酵罐大量培养，产量可达２．０ｇ／Ｌ．

关键词： HCG PCR 部分重叠巴氏毕赤酵母基因表达

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IGF-Ⅰ及其受体、IGF结合蛋白-2和LH受体mRNA在卵泡中的表达

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动物学报 1999年第4期45卷 427-434页

作者：罗文祥祝诚吴燕婉中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室北京100080 国家计划生育委员会科学技术研究所细胞室北京100081

利用原位杂交和原位DNA－3’末端标记的方法研究了胰岛素样生长因子河（IG－I）、IGF－I受体、IGF结合蛋白－2、和促性腺激素受体的信使核糖核酸（mRNA）在不同生长与闭锁阶段的大鼠卵巢卵泡中表达的变化。结果表明：IGF－I主要在正常... 详细信息

利用原位杂交和原位DNA－3’末端标记的方法研究了胰岛素样生长因子河（IG－I）、IGF－I受体、IGF结合蛋白－2、和促性腺激素受体的信使核糖核酸（mRNA）在不同生长与闭锁阶段的大鼠卵巢卵泡中表达的变化。结果表明：IGF－I主要在正常生长的初级卵泡、窦前卵泡和小窦状卵泡中表达。在各生长与成熟阶段的卵泡中都检测到IGF－I受体mRNA，闭锁卵泡的IGF－I受体表达降低。窦前与窦状的生长和闭锁卵泡均表达IGFBP－2。促卵泡激素（FSH）受体在窦前和小窦状卵泡的表达水平比其在大卵泡中的高。窦前与小窦状卵泡仅在膜细胞中表达黄体生成素（LH）受体mRNA，大卵泡的膜细胞与颗粒细胞均表达LH受体，在闭锁卵泡中仅在膜细胞中观察到LH受体的信号。综上结果，提示IGF－I，IGF－I受体和FSH受体在窦前和小窦状卵泡中的协同表达对卵泡的早期发育有重要作用。LH受体mRNA特异地在大卵泡的颗粒细胞中表达可能与优势卵泡选择相关。

关键词：卵泡受体 mRNA 原位杂交 IGF-I IGFBP-2

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一种与不育有关的人精子蛋白质的组织特异性及表达

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中国医学科学院学报 1999年第3期21卷 166-169页

作者：张梅林周雪峰曹登峰缪时英吴燕婉邢志军宗书东王琳芳中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室国家计划生育委员会科学技术研究所

目的通过对已被ＧｅｎＢａｎｋ接受、编码与不育有关的人精子蛋白质的ｃＤＮＡ片段（ＢＳＤ－２．４）的组织特异性及表达阶段的研究，进一步了解其特性。方法采用Ｄｏｔｂｌｏｔ、Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ和组织原位杂交技术。结果该... 详细信息

目的通过对已被ＧｅｎＢａｎｋ接受、编码与不育有关的人精子蛋白质的ｃＤＮＡ片段（ＢＳＤ－２．４）的组织特异性及表达阶段的研究，进一步了解其特性。方法采用Ｄｏｔｂｌｏｔ、Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ和组织原位杂交技术。结果该ｃＤＮＡ只在人和大鼠睾丸组织中表达；在人睾丸曲细精管的精原细胞、精母细胞和精子细胞中均有转录。结论ＢＳＤ－２．４ｃＤＮＡ编码蛋白具有睾丸组织特异性，并在精子发生的各个阶段均有不同程度的表达。

关键词：人精子蛋白质组织特异性组织原位杂交

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