检索结果-内蒙古大学图书馆

鲍氏层孔菌（桑黄）的化学成分与药理活性研究进展

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天然产物研究与开发 2014年第A01期26卷 142-145,165页

作者：汪雯翰张劲松上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点开发实验室上海201403

鲍氏层孔菌（Phellinusbaumii）是一种著名的民间药用真菌，多糖大分子和黄酮等小分子是其重要的活性成分。本文就近年来鲍氏层孔菌化学成分和药理活性的研究进展进行综述，旨在为鲍氏层孔菌进一步研究提供参考。

关键词：鲍氏层孔菌结构分析药理活性

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草菇漆酶基因vv-lac1和vv-lac6的克隆及异源表达

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微生物学报 2014年第7期54卷 828-835页

作者：吴林阳经慧陈明杰汪虹鲍大鹏国家食用菌工程技术研究中心、农业部南方食用菌资源利用重点实验室、上海市农业遗传育种重点开放实验室、上海市农业科学院食用菌研究所上海201403 西北农林科技大学生命科学学院陕西杨凌712100

【目的】克隆草菇漆酶基因vv-lac1和vv-lac6的全长cDNA,证实其编码的蛋白具有漆酶活性,最终建立草菇漆酶基因的异源表达及纯化体系。【方法】利用RACE技术克隆全长cDNA序列,并利用生物信息学技术进行序列分析,在此基础上,去除全长cDNA... 详细信息

【目的】克隆草菇漆酶基因vv-lac1和vv-lac6的全长cDNA,证实其编码的蛋白具有漆酶活性,最终建立草菇漆酶基因的异源表达及纯化体系。【方法】利用RACE技术克隆全长cDNA序列,并利用生物信息学技术进行序列分析,在此基础上,去除全长cDNA的编码信号肽的序列并在3'端添加His-tag碱基序列,把修饰后的cDNA片段克隆到表达载体pPIC9K上,并转化到毕赤酵母GS115中进行表达,对重组蛋白利用Ni柱进行分离纯化并以ABTS底物法检测重组蛋白的漆酶活性。【结果】vv-lac1和vv-lac6的全长cDNA的长度分别为1599 bp和1554 bp,且分别含有19和15个外显子;其编码的蛋白的理论分子量分别是57.3 kDa和56.3 kDa,理论等电点分别为4.73和5.62,且都属于分泌型的胞外蛋白;表达出的重组蛋白RBvvlac1和RBvvlac6,其分子量大小约为70 kDa,说明存在翻译后修饰;含有150 mmol/L咪唑的缓冲液对RBvvlac1和RBvvlac6发酵液进行洗脱所得到的蛋白溶液具有最高漆酶活性(333.17 U/L和227.63 U/L)。【结论】草菇漆酶基因vv-lac1和vv-lac6能够编码有活性的漆酶蛋白,本研究建立的异源表达及纯化体系适用于草菇或其它漆酶基因的异源表达与纯化。

关键词：草菇漆酶基因异源表达漆酶活性

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利用原生质体紫外诱变技术选育耐高温香菇菌株

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微生物学通报 2014年第7期41卷 1350-1357页

作者：王丽宁赵妍张宝粉陈明杰上海市农业科学院食用菌研究所上海市农业遗传育种重点开放实验室农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海201403 上海海洋大学食品学院上海201306

【目的】运用原生质体紫外诱变技术选育香菇耐高温新菌株。【方法】以香菇菌株18为出发菌株,紫外诱变处理其原生质体,通过47°C热激3 h后菌丝恢复生长的情况来筛选获得耐高温诱变株,测定18及其所有诱变株在木屑培养基中的恒温长速... 详细信息

【目的】运用原生质体紫外诱变技术选育香菇耐高温新菌株。【方法】以香菇菌株18为出发菌株,紫外诱变处理其原生质体,通过47°C热激3 h后菌丝恢复生长的情况来筛选获得耐高温诱变株,测定18及其所有诱变株在木屑培养基中的恒温长速、高温长速以及恢复长速,并进行高温出菇试验。【结果】筛选得到57株耐高温诱变株,其中诱变株N6、N44和N24的综合性状较好。恒温长速、高温长速以及恢复长速与出菇性状具有相关性,恢复长速与出菇产量、单菇性状、耐高温能力呈正相关,可初步作为预测耐高温菌株综合性状的指标。【结论】利用原生质体紫外诱变技术,可初步选育出耐高温香菇新菌株。

关键词：香菇紫外诱变原生质体耐高温

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刺芹侧耳谷氨酰胺合成酶编码基因克隆和表达分析

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菌物学报 2014年第5期33卷 1036-1044页

作者：程向阳王莹鲍大鹏谭琦国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用重点开放实验室上海市农业遗传育种重点实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海201403 上海海洋大学食品学院上海201306

谷氨酰胺合成酶(GS)是真菌氮素同化代谢和谷氨酸合成中的关键酶,采用3’RACE和5’RACE实验技术,克隆获得刺芹侧耳(杏鲍菇)谷氨酰胺合成酶编码基因(PE‐GS)全长序列,长度为1 271bp,具有4个内含子和5个外显子,编码353个氨基酸残基。系统... 详细信息

谷氨酰胺合成酶(GS)是真菌氮素同化代谢和谷氨酸合成中的关键酶,采用3’RACE和5’RACE实验技术,克隆获得刺芹侧耳(杏鲍菇)谷氨酰胺合成酶编码基因(PE‐GS)全长序列,长度为1 271bp,具有4个内含子和5个外显子,编码353个氨基酸残基。系统进化树分析表明,刺芹侧耳PE‐GS与糙皮侧耳GS在分子进化关系上相近。通过real time RT‐PCR方法对PE‐GS基因在刺芹侧耳基质菌丝体和子实体中的表达情况进行了分析,结果表明,刺芹侧耳PE‐GS基因在子实体具有较高的表达水平,这暗示刺芹侧耳PE‐GS基因在子实体的氮素代谢中可能承担重要功能。

关键词：刺芹侧耳谷氨酰胺合成酶氮素营养

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草菇基因组中11个漆酶同源基因的生物信息学分析及铜离子对其表达的影响

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菌物学报 2014年第2期33卷 323-333页

作者：吴林朱刚陈明杰汪虹鲍大鹏国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海201403 上海海洋大学食品科学与工程学院上海201306

通过分析草菇基因组中11个漆酶同源基因所编码的蛋白的性质、转录调控元件和测定铜离子存在条件下的草菇漆酶活性及11个漆酶基因的转录水平,揭示了草菇漆酶基因的各自特性、差异以及基因功能与进化机制。分析表明,这11个漆酶同源基因编... 详细信息

通过分析草菇基因组中11个漆酶同源基因所编码的蛋白的性质、转录调控元件和测定铜离子存在条件下的草菇漆酶活性及11个漆酶基因的转录水平,揭示了草菇漆酶基因的各自特性、差异以及基因功能与进化机制。分析表明,这11个漆酶同源基因编码的蛋白具有508–562aa个氨基酸,分子量和理论等电点分别为56.25–60.75kDa和4.51–6.18(未经翻译后修饰),且都具有真菌漆酶铜离子结合区域的特征序列、4个能够结合催化底物的环形结构以及信号肽序列,都属于分泌性的胞外蛋白,但其底物结合位点数目、loop序列的一致性、跨膜区域数目和位置以及信号肽位置等存在较大差异。草菇11个漆酶起始密码子上游2 000bp的序列中含有真核生物的基本转录调控元件(TATA‐box,CAAT‐box及GC‐box)和多个潜在的调控元件(MRE、XRE、STRE、HSE、ARE、TRE、NIT元件等),但每个基因所含调控元件数目及种类各有不同。在液体培养条件下,铜离子能够诱导除vv‐lac2、vv‐lac3和vv‐lac7之外的其余8个草菇漆酶基因的表达,且适宜浓度的铜离子有助于草菇漆酶活性的增加。

关键词：草菇漆酶基因铜离子表达

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鲍姆纤孔菌(桑黄)不同方式发酵的菌丝体生物活性比较

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菌物学报 2014年第5期33卷 1103-1111页

作者：邵倩杨焱李婷婷冯杰刘艳芳颜梦秋谭琦农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海201403 上海师范大学上海200234 上海海洋大学上海201306

利用液体发酵、木屑固体发酵和米饭固体发酵3种方式培养鲍姆纤孔菌(桑黄)菌丝体,对菌丝体醇提物的体外抗氧化、抗肿瘤和抗衰老生物活性进行了研究。结果表明,木屑固体发酵、液体发酵和米饭固体发酵的菌丝体醇提物清除H2O2自由基的IC50... 详细信息

利用液体发酵、木屑固体发酵和米饭固体发酵3种方式培养鲍姆纤孔菌(桑黄)菌丝体,对菌丝体醇提物的体外抗氧化、抗肿瘤和抗衰老生物活性进行了研究。结果表明,木屑固体发酵、液体发酵和米饭固体发酵的菌丝体醇提物清除H2O2自由基的IC50值分别为78.28±0.32、27.73±0.57和7.84±0.37;米饭培养的桑黄菌丝体醇提物在低浓度500μg/mL下对超氧阴离子自由基清除作用到达80%,在相同的浓度下对DPPH自由基清除率也明显高于其他两种方法,表现出较高的抗氧化活性。木屑以及米饭培养方法得到的菌丝体对PC12神经细胞损伤修复均有较好的效果,液体培养的桑黄菌丝体表现的修复作用较低;液体发酵培养的菌丝体醇提物浓度在100μg/mL时,对肿瘤细胞HepG2的抑制率达70%,高于其他两种培养方法的抑制作用。

关键词：桑黄菌丝体液体发酵固体发酵生物活性

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利用电子PCR分析草菇基因组SSR标记多态性

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微生物学通报 2014年第10期41卷 2070-2075页

作者：熊登坤鲍大鹏边银丙华中农业大学应用真菌研究所湖北武汉430070 国家食用菌工程技术研究中心农业部食用菌南方资源利用重点实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海201403

【目的】利用电子PCR分析草菇基因组SSR标记多态性,并通过PCR验证分析结果的可靠性。【方法】利用MISA程序定位草菇基因组SSR位点并结合Primer3.0程序设计SSR分子标记引物,运用电子PCR进行SSR分子标记多态性分析,基于分析结果进行PCR验... 详细信息

【目的】利用电子PCR分析草菇基因组SSR标记多态性,并通过PCR验证分析结果的可靠性。【方法】利用MISA程序定位草菇基因组SSR位点并结合Primer3.0程序设计SSR分子标记引物,运用电子PCR进行SSR分子标记多态性分析,基于分析结果进行PCR验证。【结果】随机选取658对SSR引物在草菇同核体菌株V23-1和PD19中进行真实PCR检测,结果表明28.6%的SSR引物具有多态性。数据分析表明,如果SSR标记来源于电子PCR产物长度没有差异的类型,仅4.8%的SSR引物在真实PCR中表现出多态性;如果SSR标记来源于电子PCR产物长度差异大于或者等于3 bp的类型,其中至少48.3%的SSR引物在真实PCR中表现出多态性。【结论】PCR验证结果表明利用电子PCR可以提高SSR多态性引物的筛选效率。

关键词：草菇 SSR 多态性电子PCR

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灵芝菌丝体中灵芝酸T、R和S的HPLC测定方法的建立和应用

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食品工业科技 2014年第16期35卷 71-75页

作者：赵娜冯娜贾薇冯杰刘艳芳张劲松国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海201403 上海海洋大学食品科学与工程上海201306

采用YMCC,8柱（250min×4．6mm，5μm），以0．5％冰醋酸溶液（A）-甲醇（B）为流动相梯度洗脱（0—20min，85％B→100％B；20—30min，100％B），检测波长在245nm，流速1mL／min，柱温为30℃的条件下，用HPLC考察灵芝酸T、灵芝酸S... 详细信息

采用YMCC,8柱（250min×4．6mm，5μm），以0．5％冰醋酸溶液（A）-甲醇（B）为流动相梯度洗脱（0—20min，85％B→100％B；20—30min，100％B），检测波长在245nm，流速1mL／min，柱温为30℃的条件下，用HPLC考察灵芝酸T、灵芝酸S、灵芝酸R在不同灵芝菌丝体中的含量差异。结果表明，不同种类的灵芝菌丝体中三种灵芝酸成分的含量存在显著的差异，p=0．0003，而且此方法操作简便，稳定性和重复性良好，适用于同时快速检测灵芝菌丝体中三种灵芝酸含量。

关键词：灵芝菌丝体灵芝酸T 灵芝酸S 灵芝酸R

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原生质体紫外诱变选育香菇耐高温菌株

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食品工业科技 2014年第23期35卷 171-174,181页

作者：王丽宁赵妍张宝粉陈明杰上海市农业科学院食用菌研究所、上海市农业遗传育种重点开放实验室、农业部南方食用菌资源利用重点实验室、国家食用菌工程技术研究中心上海201403 上海海洋大学食品学院上海201306

为了选育香菇耐高温新菌株,以香菇菌株沪农2号为出发菌株,紫外诱变处理其原生质体后,通过47℃处理2h初筛得到沪农2号耐高温诱变株24株。测定沪农2号及其所有诱变株在木屑培养基中的恒温长速、高温长速以及恢复长速,并进行高温出菇实验... 详细信息

为了选育香菇耐高温新菌株,以香菇菌株沪农2号为出发菌株,紫外诱变处理其原生质体后,通过47℃处理2h初筛得到沪农2号耐高温诱变株24株。测定沪农2号及其所有诱变株在木屑培养基中的恒温长速、高温长速以及恢复长速,并进行高温出菇实验。对诱变株的生长速度及子实体性状进行综合分析发现,沪农2号的诱变株N14、N15、N21及N24的恢复长速快于出发菌株,表征子实体主要性状的单菇重量、菌盖厚度、菌盖直径也优于出发菌株,表明这4株诱变株的综合性状较好。

关键词：香菇原生质体紫外诱变耐高温栽培

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基因组重排技术及其在真菌育种中的应用

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食品工业科技 2014年第18期35卷 362-365页

作者：王丽宁赵妍奚丽萍陈明杰上海市农业科学院食用菌研究所上海市农业遗传育种重点开放实验室农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海201403 上海海洋大学食品学院上海201306

基因组重排(genome shuffling)是一种快速提高细胞表型的新颖的全基因组工程方法,它是基于多亲本的原生质体递归融合,提供了在缺少基因组序列数据或网络信息情况下的全基因组重组的优势。文中介绍了基因组重排的原理、优点及过程,概述... 详细信息

基因组重排(genome shuffling)是一种快速提高细胞表型的新颖的全基因组工程方法,它是基于多亲本的原生质体递归融合,提供了在缺少基因组序列数据或网络信息情况下的全基因组重组的优势。文中介绍了基因组重排的原理、优点及过程,概述了基因组重排在真菌育种中的应用,并展望了该技术的前景。

关键词：基因组重排递归原生质体融合真菌育种

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