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食用菌学报 2014年第4期21卷 1-9页

作者：赵妍汪虹李正鹏禄连静陈明杰上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 上海市农业科学院农业科技信息研究所上海201403

在0℃低温胁迫下比较低温敏感型草菇(Volvariella volvacea)菌株V23和耐低温型菌株VH3糖原磷酸化酶(glycogen phosphorylase)pyg基因的表达情况。以α-微管蛋白为内参基因,采用实时荧光定量PCR技术测定pyg基因的表达,结果表明:低温处理4... 详细信息

在0℃低温胁迫下比较低温敏感型草菇(Volvariella volvacea)菌株V23和耐低温型菌株VH3糖原磷酸化酶(glycogen phosphorylase)pyg基因的表达情况。以α-微管蛋白为内参基因,采用实时荧光定量PCR技术测定pyg基因的表达,结果表明:低温处理4h时,V23的pyg基因相对表达量仅为0h的0.49倍,低温处理6h时有所回升,但仍低于处理0h的水平。VH3的pyg基因相对表达量从低温处理2h时急剧下降,至低温处理8h时达到最低值,仅为0h的0.28倍。随着低温处理时间的延长,pyg基因的相对表达量在V23和VH3中均呈下降趋势,相同的低温处理时间下,该基因在菌株V23中的下降幅度小于VH3中。

关键词：草菇低温胁迫糖原磷酸化酶基因实时荧光定量PCR

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农杆菌介导的斑玉蕈遗传转化

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微生物学通报 2014年第9期41卷 1793-1799页

作者：孙运奇陈辉张津京陈明杰冯志勇汪虹南京农业大学生命科学学院江苏南京210095 上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403

【目的】将农杆菌介导的转化应用于重要的工厂化栽培食用菌斑玉蕈中,建立稳定的农杆菌介导的斑玉蕈遗传转化技术。【方法】将构建的双元载体pYN6982转入农杆菌LBA4404菌株中,以斑玉蕈SIEF3133菌株打碎的双核菌丝为受体材料,利用根癌农... 详细信息

【目的】将农杆菌介导的转化应用于重要的工厂化栽培食用菌斑玉蕈中,建立稳定的农杆菌介导的斑玉蕈遗传转化技术。【方法】将构建的双元载体pYN6982转入农杆菌LBA4404菌株中,以斑玉蕈SIEF3133菌株打碎的双核菌丝为受体材料,利用根癌农杆菌介导的转化方法进行斑玉蕈转化试验。【结果】经潮霉素抗性筛选、PCR鉴定以及有丝分裂稳定性试验验证,表明潮霉素磷酸转移酶基因(hph)已经整合到斑玉蕈的基因组中;转基因斑玉蕈菌丝在荧光显微镜下可以观测到绿色荧光,表明增强型绿色荧光蛋白基因(egfp)已经在转基因斑玉蕈菌株中获得了表达;通过PCR检测,随机挑选的8个转基因斑玉蕈菌株中有2个可以扩增出载体转移DNA(T-DNA)边界重复序列外的卡那霉素基因(kan)序列。【结论】获得了稳定遗传和表达的斑玉蕈转基因菌株,建立了农杆菌介导的斑玉蕈遗传转化方法。农杆菌介导的斑玉蕈遗传转化中,存在载体T-DNA边界重复序列之外的DNA序列转移到转基因斑玉蕈中的现象,有待进一步研究。

关键词：斑玉蕈农杆菌 EGFP 遗传转化

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SPSS统计软件在食用菌研究中的应用

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食用菌学报 2014年第4期21卷 81-86页

作者：唐拥政张忠周帅颜梦秋唐庆九盐城工学院江苏盐城224001 国家食用菌工程技术研究中心农业部应用真菌资源与利用重点开放实验室上海市农业遗传育种重点实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海201403

结合实例介绍了SPSS软件在食用菌研究中的应用,包括主成分分析、聚类分析、回归分析、相关分析和方差分析等,该软件为食用菌研究提供了简便、快捷和准确的统计工具。

关键词： SPSS软件食用菌统计分析

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草菇不同菌株木聚糖酶xyn基因的表达及其酶活性分析

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菌物学报 2014年第5期33卷 1074-1083页

作者：王孟兰赵妍陈明杰汪虹国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海201403 南京农业大学生命科学学院江苏南京210095

木聚糖酶是半纤维素酶系的重要组成部分,能够分解水稻、小麦等农作物秸秆中的半纤维素。研究探讨木聚糖酶相关基因及其功能,为进一步探讨木聚糖酶与草菇生物转化率之间的关系提供理论依据。首先通过生物信息学手段构建了草菇2个木聚糖... 详细信息

木聚糖酶是半纤维素酶系的重要组成部分,能够分解水稻、小麦等农作物秸秆中的半纤维素。研究探讨木聚糖酶相关基因及其功能,为进一步探讨木聚糖酶与草菇生物转化率之间的关系提供理论依据。首先通过生物信息学手段构建了草菇2个木聚糖酶基因xyn1和xynII编码氨基酸序列的系统进化树,然后从生物转化率不同的草菇菌株分别提取各自的RNA,反转录为cDNA后,采用实时荧光定量PCR技术分析了xyn1和xynII基因的转录表达情况;最后应用DNS法对这些菌株中的木聚糖酶活性进行了测定。研究结果表明,xyn1编码的氨基酸序列与草腐菌相似性较高,而xynII编码的氨基酸序列与木腐菌遗传差异较小。在木聚糖酶活性测定和实时荧光定量PCR结果中,不同菌株的木聚糖酶活性趋势与xynII的转录表达趋势相似,均呈现依次递减。草菇的木聚糖酶活性与其生物转化率之间存在正相关性,推测草菇不同菌株木聚糖酶活性差异可能表现在转录水平上的差异。

关键词：草菇木聚糖酶实时荧光定量PCR 系统进化树

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草菇育种方法及相关分子标记研究进展

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热带作物学报 2014年第3期35卷 609-615页

作者：林锋李国贤赵妍汪虹陈明杰国家食用菌工程技术研究中心农业部应用真菌资源与利用重点开放实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海201403 上海海洋大学食品学院上海201306 上海市奉贤区食用菌技术推广站上海201499

草菇是一种原产于中国热带与亚热带地区的栽培食用菌,对草菇主要育种方法,包括人工选择育种、杂交育种、诱变育种、原生质体融合育种、基因工程育种及相关分子标记技术,如RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism)、RAPD(Random ... 详细信息

草菇是一种原产于中国热带与亚热带地区的栽培食用菌,对草菇主要育种方法,包括人工选择育种、杂交育种、诱变育种、原生质体融合育种、基因工程育种及相关分子标记技术,如RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism)、RAPD(Random Amplified Polymorphic DNA)、SRAP(Sequence-Related Amplified Polymorphism)、SCAR(Sequence-Characterized Amplified Regions)、草菇交配型基因的分子标记、SSR(Simple Sequence Repeat)、SNP(Single Nucleotide Polymorphism)的研究进展进行了综述,并针对当前存在的问题与现状,对草菇育种今后的发展方向进行了展望。

关键词：草菇育种方法分子标记

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草菇纤维素酶活力测定条件确定及应用分析

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上海农业学报 2014年第4期30卷 89-92页

作者：周慧敏李亚鹏赵妍汪虹陈明杰上海海洋大学食品学院上海201306 国家食用菌工程技术研究中心农业部应用真菌资源与利用重点开放实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海201403

为确定纤维素酶活力最高时的培养条件,研究了草菇菌株V23液体基本培养基的最佳碳源浓度与培养时间。结果表明:在微晶纤维素为碳源的情况下,微晶纤维素质量体积浓度为1%时草菇V23的纤维素酶活力最高;在1%微晶纤维素浓度下,培养第5天时草... 详细信息

为确定纤维素酶活力最高时的培养条件,研究了草菇菌株V23液体基本培养基的最佳碳源浓度与培养时间。结果表明:在微晶纤维素为碳源的情况下,微晶纤维素质量体积浓度为1%时草菇V23的纤维素酶活力最高;在1%微晶纤维素浓度下,培养第5天时草菇V23的纤维素酶活力达到最高值。在此基础上,对产量不同的草菇菌株V23和A8进行相同条件培养,分别测定其菌丝生长速度与纤维素酶活力。结果表明:在棉籽壳培养基中V23的菌丝生长速度显著快于A8;V23的纤维素酶活力也显著高于A8。

关键词：草菇纤维素酶活生长速度

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不同草菇菌株的生物学特性比较

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广东农业科学 2014年第17期41卷 29-32页

作者：林锋高永艳赵妍颜素雅陈明杰上海海洋大学食品学院上海201306 国家食用菌工程技术研究中心/农业部南方应用真菌资源与利用重点开放实验室/上海市农业遗传育种重点开放实验室/上海市农业科学院食用菌研究所上海201403

草菇是一种原产自我国热带与亚热带地区的腐生性食用真菌。对17个不同来源的草菇(Volvariella volvacea)菌株的原基出现时间、大量采收时间、菌膜厚度及生物转化率等生物学特性进行了比较。结果表明:原基出现时间、大量采收时间与生物... 详细信息

草菇是一种原产自我国热带与亚热带地区的腐生性食用真菌。对17个不同来源的草菇(Volvariella volvacea)菌株的原基出现时间、大量采收时间、菌膜厚度及生物转化率等生物学特性进行了比较。结果表明:原基出现时间、大量采收时间与生物转化率无直接的相关性;但原基出现时间、大量采收时间越短,生物转化率相对较高;菌膜厚度越厚,越不容易开伞,菌株VV007的菌膜厚度最薄、为0.52 mm,最容易开伞;各菌株间的生物转化率差异显著,其中VV001的生物转化率最高,达21.73%。

关键词：草菇生物转化率生物学特性

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低温对草菇高半胱氨酸水解酶代谢途径基因表达变化的影响

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上海农业学报 2014年第2期30卷 29-32页

作者：吴国铭汪虹陈明杰鲍大鹏万鹏上海海洋大学食品学院上海201306 国家食用菌工程技术研究中心农业部应用真菌资源与利用重点开放实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海201403

采用同源克隆结合已完成的草菇基因组测序结果,克隆SAHH代谢途径中的3个相关基因胱硫醚合成酶(CGS)、5-甲基四氢蝶酰三谷氨酸盐-高半胱氨酸-S-甲基转移酶(MHM)、蛋氨酸腺苷转移酶基因(MAT)并进行相关基因表达的定量分析,根据基因表达结... 详细信息

采用同源克隆结合已完成的草菇基因组测序结果,克隆SAHH代谢途径中的3个相关基因胱硫醚合成酶(CGS)、5-甲基四氢蝶酰三谷氨酸盐-高半胱氨酸-S-甲基转移酶(MHM)、蛋氨酸腺苷转移酶基因(MAT)并进行相关基因表达的定量分析,根据基因表达结果结合V23与VH3的特性,推测草菇不耐低温的特性可能与低温下SAHH代谢途径受到抑制有关。

关键词：草菇代谢途径低温应答基因表达

来源：评论

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低温胁迫下草菇甘油‐3‐磷酸酰基转移酶基因表达变化的研究

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菌物学报 2014年第2期33卷 334-340页

作者：姜威赵妍汪虹冯爱萍陈明杰南京农业大学生命科学学院江苏南京210095 上海市农业科学院食用菌研究所上海市农业遗传育种重点开放实验室农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海201403

以草菇低温敏感型V23菌株与耐低温型VH3菌株为试验材料,将二者菌丝体置于冰浴中进行不同时间的低温胁迫处理。首先提取RNA,反转录为cDNA,然后构建含有微管蛋白(tubulin,TUB)基因片段和甘油‐3‐磷酸酰基转移酶(glycerol‐3‐phosphate a... 详细信息

以草菇低温敏感型V23菌株与耐低温型VH3菌株为试验材料,将二者菌丝体置于冰浴中进行不同时间的低温胁迫处理。首先提取RNA,反转录为cDNA,然后构建含有微管蛋白(tubulin,TUB)基因片段和甘油‐3‐磷酸酰基转移酶(glycerol‐3‐phosphate acyltransferase,GPAT)基因片段的质粒,最终对GPAT基因在低温胁迫不同处理时间下的表达进行定量。结果表明,耐低温型的VH3菌株,在低温处理2h时,GPAT基因相对表达量上升,4h,表达量下降,6h上升,之后逐渐下降。低温敏感型V23菌株,在低温处理2h时,表达量下降,4h,表达量上升,此后逐渐下降;除低温处理4h外,V23菌株的GPAT基因表达量始终低于VH3菌株,初步推测GPAT基因的高表达与草菇的耐低温能力相关。

关键词：草菇低温甘油-3-磷酸酰基转移酶基因实时荧光定量PCR

来源：评论

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担子菌中甲羟戊酸途径影响萜类物质合成的研究

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中国农业科技导报 2014年第3期16卷 53-61页

作者：李亮尚晓冬谭琦上海市农业科学院食用菌研究所国家食用菌工程技术研究中心农业部应用真菌资源与利用重点开放实验室上海市农业遗传育种重点实验室上海201106 上海海洋大学食品科学学院上海200090

担子菌中具有多种萜类活性物质,这些活性物质对人类的营养和健康有着很重要的影响。甲羟戊酸途径是担子菌合成萜类物质的一条主要途径,萜类物质的含量水平受到甲羟戊酸途径的控制,但是生物细胞内萜类物质的产量很低,并且目前活性萜类物... 详细信息

担子菌中具有多种萜类活性物质,这些活性物质对人类的营养和健康有着很重要的影响。甲羟戊酸途径是担子菌合成萜类物质的一条主要途径,萜类物质的含量水平受到甲羟戊酸途径的控制,但是生物细胞内萜类物质的产量很低,并且目前活性萜类物质的化学以及生物合成方法效率低、成本高,因此为了能够更好的增加萜类物质在担子菌细胞内的产量,介绍了担子菌甲羟戊酸途径中乙酰辅酶A、HMG-CoA、甲羟戊酸激酶影响萜类物质的合成作用,旨在通过调控这些物质来增加目标萜类物质的产量。

关键词：担子菌甲羟戊酸途径萜类物质

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