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第十二届药用真菌学术研讨会

作者：罗童妍梁锐王金艳唐庆九上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点实验室上海海洋大学食品学院

多糖是灵芝孢子粉中主要的活性成分之一,但灵芝孢子粉双层胞壁结构严重阻碍了其中有效成分的释放,特别是多糖成分溶出率低。为增加胞壁多糖的溶出,分别比较物理法、化学法和酶法对溶出率的影响,寻找一种多糖溶出率高、产物丰富、简单易... 详细信息

多糖是灵芝孢子粉中主要的活性成分之一,但灵芝孢子粉双层胞壁结构严重阻碍了其中有效成分的释放,特别是多糖成分溶出率低。为增加胞壁多糖的溶出,分别比较物理法、化学法和酶法对溶出率的影响,寻找一种多糖溶出率高、产物丰富、简单易行的提取方法。以脱脂孢子粉水提残渣为原料,比较分析处理后总糖含量和分子量分布,结果表明:化学法和酶法可提高多糖的得率,但降解后获得的多糖分子量均小于10～4 g/mol;物理法中超声破碎提取法、微波提取法、辐照提取法和高能纳米球磨法也均可提高灵芝孢子粉胞壁多糖的得率,超声破碎提取得到的水提物分子量大于10～4 g/mol,辐照提取得到的水提物分子量小于10～5 g/mol,而微波消解法和高能纳米球磨法得到的水提物分子量分布均较广,其中高能纳米球磨法多糖得率可提高到9.42%。选择高能纳米球磨法作为提取灵芝孢子粉胞壁多糖的方法进一步采用分级醇沉从灵芝孢子粉胞壁粗多糖中分离得到四个不同分子量段的组分,分别为1.90×10～5、3.11×10～4、1.09×10～4、和4.99×10～3 g/mol,本研究可为灵芝孢子粉胞壁多糖的高效制备和分离纯化奠定基础。

关键词：灵芝孢子粉胞壁多糖高能纳米球磨法分子量分布

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十八种食用菌子实体β-(1→3)葡聚糖提取条件优化及含量测定

十八种食用菌子实体β-(1→3)葡聚糖提取条件优化及含量测定

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第十二届药用真菌学术研讨会

作者：连泽柔刘静张劲松唐庆九冯杰周帅刘艳芳上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点实验室上海海洋大学食品学院

食用菌是指大型可食用真菌,营养丰富且含有多种活性物质,如多糖、蛋白质、萜类、核苷和酚类化合物等。其中,多糖中的β-葡聚糖因其抗肿瘤、提高免疫力等功效显著而成为研究热点。大部分食用菌子实体β-葡聚糖是由热水提取或碱提法(NaOH... 详细信息

食用菌是指大型可食用真菌,营养丰富且含有多种活性物质,如多糖、蛋白质、萜类、核苷和酚类化合物等。其中,多糖中的β-葡聚糖因其抗肿瘤、提高免疫力等功效显著而成为研究热点。大部分食用菌子实体β-葡聚糖是由热水提取或碱提法(NaOH、KOH)制备,结构上是以β-(1→3)-糖苷键连接为主链、β-(1→6)-糖苷键连接为支链的葡聚糖。苯胺蓝荧光法是以4,4′-[羰基双(苯-4,1-二基)双(亚氨基)]双(苯磺酸)钠作为荧光剂,在溶液中与β-(1→3)-葡聚糖的结合有较高特异性,综合考虑检测成本和食用菌子实体β-葡聚糖结构,苯胺蓝荧光法更适用于测定食用菌子实体β-(1→3)-葡聚糖含量。但对不同食用菌中β-葡聚糖含量差异需进一步研究。为明确不同食用菌子实体β-(1→3)-葡聚糖含量及在水提物和水提残渣中的分布情况,本研究以刺芹侧耳水提残渣为原料,以碱液种类、碱液浓度、料液比、提取时间和温度为单因素,以β-(1→3)-葡聚糖含量为指标,进行提取条件优化,获得最佳提取工艺:以1 mol·L-1KOH溶液按照料液比1∶60(g∶m L)添加,在60°C水浴条件下提取1.5h,测得刺芹侧耳水提残渣β-(1→3)-葡聚糖含量为26.28%。以该条件对18种食用菌子实体、水提物和水提残渣的β-(1→3)-葡聚糖含量进行测定,结果表明:绣球菌和猴头菌子实体中β-(1→3)-葡聚糖含量较高,分别为24.91%和20.64%;毛头鬼伞、蛹虫草、羊肚菌、姬松茸和黑木耳中含量均低于3%。不同食用菌水提物得率差异较大,范围在4.98%～50.45%,除灵芝外,各食用菌水提物中β-(1→3)-葡聚糖含量均较低,范围在0.41%～4.21%。不同食用菌子实体中β-(1→3)-葡聚糖含量差异较大,绣球菌、猴头菌、牛肝菌和刺芹侧耳水提残渣β-(1→3)-葡聚糖含量较高,均超过20%,可作为制备食用菌β-(1→3)-葡聚糖的优质原料进行后续研究。

关键词：食用菌苯胺蓝荧光法 β-(1→3)-葡聚糖含量

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HPLC-ELSD测定灵芝孢子粉及其相关产品中脂肪酸的含量

HPLC-ELSD测定灵芝孢子粉及其相关产品中脂肪酸的含量

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第十二届药用真菌学术研讨会

作者：孙泽东王金艳唐庆九上海海洋大学食品学院上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点实验室

灵芝(Ganodema língzhi)是中国传统的扶正固本、滋补强壮的名贵药材,灵芝孢子粉是从灵芝生长成熟后从菌盖中弹射出的生殖细胞,含有多糖类、三萜类、脂肪酸类和甾醇类等,具有抗肿瘤、抗衰老、养肝护肝、免疫、降血糖和抗氧化等药理... 详细信息

灵芝(Ganodema língzhi)是中国传统的扶正固本、滋补强壮的名贵药材,灵芝孢子粉是从灵芝生长成熟后从菌盖中弹射出的生殖细胞,含有多糖类、三萜类、脂肪酸类和甾醇类等,具有抗肿瘤、抗衰老、养肝护肝、免疫、降血糖和抗氧化等药理活性。破壁后的孢子粉在受到外界如光、热、氧气等因素时会发生氧化形成游离脂肪酸,会导致肠胃不适、严重超标会对人体的健康产生损害。目前国标中测定酸价主要是冷溶剂滴定法,测定的是脂肪酸的总量。本实验建立了高效液相色谱-蒸发光显色器(HPLC-ELSD)测定孢子油中游离脂肪酸的含量。通过优化色谱条件,建立了亚油酸、棕榈酸和油酸的HPLC的定量测定方法,该方法精密度、重复性和稳定性好,可靠性强,可用于灵芝孢子粉、孢子油及其相关产品中亚油酸、棕榈酸和油酸成分的定量测定。将国标化学法与HPLC-ELSD测定结果进行对比,两种方法的匹配度较好,其中化学法测定的是滴定消耗的KOH的量,是脂肪酸的总量,而液相法测定的是脂肪酸的绝对含量。通过比较分析发现,国内四个灵芝主产地的灵芝孢子粉脂肪酸含量相差较大,贮存时间对破壁灵芝孢子粉脂肪酸影响最大,存放5年脂肪酸含量提高了26倍。通过对8种不同品牌市售灵芝孢子油产品的脂肪酸含量测定,发现脂肪酸含量相差较大,其中含量最高的为4.3%,最低的为0.21%。通过建立HPLC-ELSD可以更加精确测定脂肪酸的含量,为目前市场上灵芝孢子类产品的质量检验提供科学依据。

关键词：灵芝孢子粉高效液相色谱法脂肪酸酸价

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不同制备方法的灵芝孢子粉水溶性糖比较

不同制备方法的灵芝孢子粉水溶性糖比较

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中国菌物学会2023年学术年会

作者：罗童妍梁锐王金艳唐庆九上海海洋大学食品学院上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点实验室

灵芝是一种具有多种生物活性的药用真菌,在生长成熟期从菌管弹射出的卵形生殖细胞俗称灵芝孢子粉,具有双层坚韧胞壁。多糖是灵芝孢子粉中的主要活性成分之一,其中容易被人体利用的是其中水溶性多糖成分,而大部分多糖固定于细胞壁上难以... 详细信息

灵芝是一种具有多种生物活性的药用真菌,在生长成熟期从菌管弹射出的卵形生殖细胞俗称灵芝孢子粉,具有双层坚韧胞壁。多糖是灵芝孢子粉中的主要活性成分之一,其中容易被人体利用的是其中水溶性多糖成分,而大部分多糖固定于细胞壁上难以应用,因此如何提取制备水溶性多糖是提高灵芝孢子粉利用率的关键。本研究对灵芝孢子粉水溶性多糖和不同制备方法获得的多糖进行分析比较、分离纯化和结构表征,以阐明灵芝孢子粉中多糖的分布和结构特征。灵芝孢子粉水溶性糖含量为1-2%,不同的破壁方法获得的水溶性糖得率可提高近一倍,因此通过破壁处理可以将胞壁多糖化学键断裂,从而有效提高多糖的利用率。运用不同的物理法和酶法处理灵芝孢子粉,以总糖含量和分子量分布为评价指标分析比较不同方法的提取制备效果,并对获得的水溶性糖进行分离纯化和结构鉴定。结果表明,物理法中超声破碎提取法、微波提取法、辐照提取法和高能纳米球磨法均可提高灵芝孢子粉胞壁水溶性糖的得率,其中高能纳米球磨法水溶性糖提取率最高,可提高到9.42%。酶法处理也能有效提高水溶性糖的含量,特别是溶壁酶,优化工艺参数后水溶性糖得率可达17.86%。通过物理法和酶法均大大提高了提取物中水溶性糖含量,通过分离纯化和结构表征发现,未破壁灵芝孢子粉水提物中多糖、物理法和酶法获得的灵芝孢子粉水溶性糖均为β-型葡聚糖,物理法处理后多糖分布范围广,从1.90×105到4.99×103 g/mol,糖残基的比例和连接方式比较接近,而酶法获得的大多为低聚糖和寡糖。通过本研究工作获得灵芝孢子粉大量不同分子量的一系列β-葡聚糖,为进一步开发利用灵芝孢子粉并进行构效关系的研究建立了很好的化学基础。

关键词：灵芝孢子粉水溶性糖酶法提取

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不同处理方法对灵芝β-葡聚糖降解效果的比较研究

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菌物学报 2021年第9期40卷 2495-2504页

作者：秦秀刘艳芳张劲松唐庆九周帅冯杰王晨光李德顺韩伟华东理工大学药学院制药工程与过程化学教育部工程研究中心上海市新药设计重点实验室上海200237 上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点实验室上海201403 上海百信生物科技有限公司上海201403

本研究采用酸法、碱法、酶法和微波法对灵芝β-葡聚糖进行降解,通过降解率、产物分子量变化、产物聚合度分布等指标比较了不同方法的降解效果。结果表明,微波法降解率高达94%,处理后产物的分子量明显降低,寡糖产物聚合度分布广。酶法降... 详细信息

本研究采用酸法、碱法、酶法和微波法对灵芝β-葡聚糖进行降解,通过降解率、产物分子量变化、产物聚合度分布等指标比较了不同方法的降解效果。结果表明,微波法降解率高达94%,处理后产物的分子量明显降低,寡糖产物聚合度分布广。酶法降解率约为40%,寡糖产物中含有DP2-5的成分。酸法及碱法降解率低于20%,寡糖产物少。研究表明,与其他3种方法相比,微波法降解率高、产物丰富、操作条件易于控制,是一种简单、高效的降解灵芝β-葡聚糖、制备灵芝β-葡寡糖的方法。

关键词：灵芝β-葡聚糖 β-葡寡糖降解

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响应面法优化鹿茸菇蒸汽爆破提取多糖的工艺研究

响应面法优化鹿茸菇蒸汽爆破提取多糖的工艺研究

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第十二届药用真菌学术研讨会

作者：罗羽张劲松冯杰刘利平郭庆彬刘艳芳天津科技大学食品科学与工程学院上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点实验室

以鹿茸菇子实体为试验原料,采用蒸汽爆破辅助热水提取鹿茸菇多糖。以多糖提取率为响应值,在单因素试验基础上,采用响应面法优化蒸汽爆破处理工艺,得到最佳条件为压力2.0 MPa,维压时间90 s,物料大小为3 mm。在此条件下,多糖提取率的试验... 详细信息

以鹿茸菇子实体为试验原料,采用蒸汽爆破辅助热水提取鹿茸菇多糖。以多糖提取率为响应值,在单因素试验基础上,采用响应面法优化蒸汽爆破处理工艺,得到最佳条件为压力2.0 MPa,维压时间90 s,物料大小为3 mm。在此条件下,多糖提取率的试验验证值为12.43%。经过三次平行验证实验,得到的鹿茸菇多糖提取率为(12.65±0.15)%,与预测值接近,说明该模型可以用于拟合分析。扫描电镜结果也表明经过蒸汽爆破处理后,其表面结构有明显的裂纹,缝隙明显,有利于多糖组分的溶出。对蒸汽爆破处理前后的多糖进行了理化性质对比,其主要活性成分β-葡聚糖含量得到大幅度的提高,含量为40.73%,是对照组(17.89%)的2.28倍。通过检测样品对Dectin-1受体的激活程度来表征样品的免疫活性,其结果显示经过蒸汽爆破处理后富集β-葡聚糖的鹿茸菇多糖活性显著优于对照组鹿茸菇子实体多糖。

关键词：蒸汽爆破技术鹿茸菇子实体多糖响应面优化理化性质免疫活性

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高速逆流色谱法制备灵芝萜烯酮醇

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菌物学报 2021年第5期40卷 1190-1199页

作者：彭小芳田振韩伟王晨光冯娜张劲松上海市农业科学院食用菌研究所国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研究分中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 华东理工大学药学院制药工程与过程化学教育部工程研究中心上海市新药设计重点实验室上海200237 上海百信生物科技有限公司上海201403 上海海洋大学上海201306

本研究建立一种从灵芝子实体提取物中快速制备灵芝萜烯酮醇的方法。以沪农灵芝1号子实体为原料,经乙醇提取、D101大孔树脂富集后,再经一次正相色谱柱层析,获得富含灵芝萜烯酮醇的流分。采用高速逆流色谱法对该流分进行分离,优化分离条件... 详细信息

本研究建立一种从灵芝子实体提取物中快速制备灵芝萜烯酮醇的方法。以沪农灵芝1号子实体为原料,经乙醇提取、D101大孔树脂富集后,再经一次正相色谱柱层析,获得富含灵芝萜烯酮醇的流分。采用高速逆流色谱法对该流分进行分离,优化分离条件,获得的最佳条件为:溶剂体系为正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(V/V/V/V,12:24:18:9),流速2.0mL/min,转速900r/min,上样量500mg,一次上样可得到纯度为90.9%的灵芝萜烯酮醇52.1mg,得率达到10.4%。该方法具有操作简单、污染小、成本低、得率和纯度高的特点,是规模化制备灵芝萜烯酮醇的一种新方法。

关键词：灵芝活性三萜快速制备

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基于UPLC-MS/MS定量检测法优化灵芝三萜热回流提取工艺的研究

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菌物学报 2021年第9期40卷 2480-2494页

作者：彭小芳程池露唐庆九张劲松唐传红王晨光冯娜韩伟华东理工大学药学院制药工程与过程化学教育部工程研究中心上海市新药设计重点实验室上海200237 上海市农业科学院食用菌研究所国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 上海百信生物科技有限公司上海201403 上海海洋大学食品学院上海201306

基于超高效液相-三重四级杆质谱联用(UPLC-MS/MS)定量检测法优化出一种灵芝三萜热回流提取的工艺。通过本实验建立的灵芝三萜UPLC-MS/MS精确方法检测不同来源的7个栽培品种灵芝子实体中19个三萜化合物的含量,筛选出三萜含量较高的sd-2... 详细信息

基于超高效液相-三重四级杆质谱联用(UPLC-MS/MS)定量检测法优化出一种灵芝三萜热回流提取的工艺。通过本实验建立的灵芝三萜UPLC-MS/MS精确方法检测不同来源的7个栽培品种灵芝子实体中19个三萜化合物的含量,筛选出三萜含量较高的sd-2灵芝子实体作为提取原料,以三萜含量和提取物得率为指标,通过单因素和响应面实验对灵芝三萜的热回流工艺进行优化,获得的最佳条件为:乙醇浓度75%、提取时间2.5h、液料比14:1、提取次数2次。对获得的最佳提取工艺进行中试实验,灵芝子实体乙醇提取物的得率为6.10%,三萜含量为11.8591mg/g。研究结果可为灵芝三萜的工业大规模提取提供理论依据,为灵芝高附加值产品的开发利用提供技术支撑。

关键词：三萜类化合物液质联用分析中试提取响应面优化

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面向规模化应用的竹荪多糖液态深层发酵工艺优化

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食品科学 2020年第2期41卷 181-187页

作者：冯杰冯娜刘艳芳唐庆九周帅刘方张劲松杨焱农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所

利用规模化生产工艺提高竹荪菌丝体胞内多糖得率,通过对竹荪菌丝体液态深层发酵培养基组分的筛选,采用单因素试验与Box-Behnken响应面法确定竹荪菌丝体液态深层发酵的最佳培养基配方为:葡萄糖32.3 g/L,酵母粉4.5 g/L,磷酸二氢钾2.1 g/L... 详细信息

利用规模化生产工艺提高竹荪菌丝体胞内多糖得率,通过对竹荪菌丝体液态深层发酵培养基组分的筛选,采用单因素试验与Box-Behnken响应面法确定竹荪菌丝体液态深层发酵的最佳培养基配方为:葡萄糖32.3 g/L,酵母粉4.5 g/L,磷酸二氢钾2.1 g/L,硫酸镁2.5 g/L。在此条件下竹荪胞内多糖得率的预测值为1.23 g/L,摇瓶实验验证胞内多糖得率为1.19 g/L,与预测值相当。在5、30 L和50 L发酵罐中验证胞内多糖得率分别达到1.43、1.28 g/L和1.26 g/L,分别高于预测值16.26%、4.06%和2.43%。本研究优化获得的竹荪菌丝体液态深层发酵工艺有效促进了竹荪胞内多糖的高产,该工艺可为竹荪多糖的规模化生产应用提供较好的参考。

关键词：竹荪多糖菌丝体发酵工艺优化规模化生产

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香菇单核菌丝生长速度差异的相关基因分析

香菇单核菌丝生长速度差异的相关基因分析

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中国菌物学会2023年学术年会

作者：黄万兵侯娣周陈力李燕杨瑞恒鲍大鹏上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点开放实验室贵州省农业科学院贵州省农作物品种资源研究所贵州省食用菌育种重点实验室上海海洋大学食品学院

以双核香菇Lentinula edodes菌株中分离获得两个亲和的单核体Y0040-1和Y0040-3为材料,在不同的培养基上进行培养,进行差异性状评价和表达差异性分析。结果表明在不同的培养基(PDA和2%木屑PDA)上两个单核体菌丝生长速度都存在差异,其中Y0... 详细信息

以双核香菇Lentinula edodes菌株中分离获得两个亲和的单核体Y0040-1和Y0040-3为材料,在不同的培养基上进行培养,进行差异性状评价和表达差异性分析。结果表明在不同的培养基(PDA和2%木屑PDA)上两个单核体菌丝生长速度都存在差异,其中Y0040-1的生长速度显著高于Y0040-3。进一步分析转录组数据发现,在不同培养基上两个单核体比较组(Y0040-3 vs.Y0040-1)有1 633个共同的差异基因,这些共同变化的基因可能是导致两者性状差异的主要原因,这些基因中共同上调有155个,共同下调有136个。对这些基因进行注释分析,发现共同上调的基因参与代谢过程中的氨基酸代谢和碳水化合物代谢等,分析木质纤维素酶发现,Y0040-1上调基因数量高于Y0040-3,且Y0040-1中的纤维素降解酶和木质素降解酶表达量都明显高于Y0040-3。

关键词：香菇单核体异核体 Cazymes家族木质纤维素酶

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