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食用菌学报 2012年第1期19卷 13-16页

作者：孙晓红汪虹杨晓达冯爱萍陈明杰潘迎捷上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 南京农业大学生命技术学院江苏南京210095 上海海洋大学上海201306 北京大学医学部药学院北京100083

将草菇(Volvariella volvacea)冷诱导基因Cor3cDNA序列经EcoR I酶切克隆到原核表达载体pPROK-1中,转化大肠杆菌(Escherichia coli)JM109,经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达、分离纯化发现该蛋白的分子量约为43kD,等电聚焦... 详细信息

将草菇(Volvariella volvacea)冷诱导基因Cor3cDNA序列经EcoR I酶切克隆到原核表达载体pPROK-1中,转化大肠杆菌(Escherichia coli)JM109,经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达、分离纯化发现该蛋白的分子量约为43kD,等电聚焦电泳结果表明,该蛋白的等电点为6.1,HPLC检测说明合成方向的酶活性为每毫克蛋白每分钟4.5μmol,DNTB与同型半胱氨酸颜色反应测定水解方向的酶活性为每毫克蛋白每分钟0.7μmol,根据上述特性可以确定草菇冷诱导基因Cor3所编码的蛋白是S-腺苷同型半胱氨酸水解酶(SAHH)。

关键词： S-腺苷同型半胱氨酸水解酶基因草菇冷诱导基因

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猴头菌提取物抗氧化活性研究

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食用菌学报 2012年第2期19卷 95-99页

作者：潘伟刘瑞娜章炉军俞康莹尚晓冬赵国屏谭琦上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 南京农业大学生命科学学院江苏南京210095 中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所上海200032

分别采用还原力测定法、Fenton法、2,2-二苯基-1-苦肼基(DPPH)分析法和改良邻苯三酚自氧化法,对猴头菌子实体水提物和醇提物的总还原力,清除.OH、DPPH.和O2-.自由基的能力进行测定。结果表明:醇提物还原力较强,且还原力大小与浓度成正比... 详细信息

分别采用还原力测定法、Fenton法、2,2-二苯基-1-苦肼基(DPPH)分析法和改良邻苯三酚自氧化法,对猴头菌子实体水提物和醇提物的总还原力,清除.OH、DPPH.和O2-.自由基的能力进行测定。结果表明:醇提物还原力较强,且还原力大小与浓度成正比;猴头菌水提物和醇提物均有清除.OH、DPPH.和O2-.自由基的能力,且水提物的效果比醇提物好;水提物和醇提物对.OH、DPPH.和O2-.的清除能力依次为DPPH.、.OH和O2-.,并且在一定浓度范围内,清除率与浓度成正比。

关键词：猴头菌清除自由基抗氧化活性

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草菇漆酶基因生物信息学及诱导转录分析

草菇漆酶基因生物信息学及诱导转录分析

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2012年中国菌物学会学术年会

作者：朱刚鲍大鹏吴林国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用专业重点实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所

漆酶是一类含铜的多酚氧化酶(EC1.10.3.2),广泛存在于真菌中,在木质素的降解、酚类化合物转化成低毒物质、子实体的形态发育等过程中起作用。草菇V23菌株能够产生多种形式的胞外漆酶,通过对其基因组分析,发现了11种漆酶基因,lacl-1ac10... 详细信息

漆酶是一类含铜的多酚氧化酶(EC1.10.3.2),广泛存在于真菌中,在木质素的降解、酚类化合物转化成低毒物质、子实体的形态发育等过程中起作用。草菇V23菌株能够产生多种形式的胞外漆酶,通过对其基因组分析,发现了11种漆酶基因,lacl-1ac10成簇的分布在Scaffold 6上,而lac11单独分布在Scaffold 8上。根据进化树和内含子的相对位置,将11个漆酶基因分为两个亚族:一类包括lac6和lac11,另外一类包括lacl-lac5和lac7-lac10。该菌株漆酶基因的5端上游2000bp左右区域中存在多个潜在的顺式作用元件序列位点,包括TATAbox、CAATbox、GCbox、MRE、XRE、CreA结合位点和氮因子调控位点等。这些调控元件的存在部分地对应了菌株摇瓶发酵条件下漆酶基因的表达规律。草菇V23漆酶的活性易受到培养基中的氮源、碳源、铜离子和锰离子的影响,另外,芳香族化合物,如2,5-二甲基苯胺也能够影响漆酶的活性。反转录PCR结果证实了以上物质对漆酶活性的作用体现在基因的转录水平。我们检测到了8种漆酶基因的转录,lac2、lac3和lac7在以上诱导条件下一直没有转录。由于对草菇的遗传学背景的了解比较薄弱,因而在分子水平上对草菇的分解木质纤维素的研究一直没有重要的突破。本研究希望借助于草菇的全基因组测序的完成,在全基因组水平上更好的了解草菇降解木质纤维素的机制。

关键词：草菇漆酶漆酶亚族转录调控生物信息学

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培养方法对灵芝菌丝体胞内三萜和抗肿瘤活性的影响

培养方法对灵芝菌丝体胞内三萜和抗肿瘤活性的影响

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2012年中国菌物学会学术年会

作者：贾薇骆军鑫冯娜张劲松农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌所

灵芝液体深层发酵培养过程中,采用液体震荡一静置两阶段培养法不仅不会降低菌丝体生物量,而且能够有效提高灵芝菌丝体胞内总三萜的含量和产量。研究发现,在静置过程中,上层为白色菌丝体,下层为黄色菌球;而且上层菌丝体总三萜含量和产量... 详细信息

灵芝液体深层发酵培养过程中,采用液体震荡一静置两阶段培养法不仅不会降低菌丝体生物量,而且能够有效提高灵芝菌丝体胞内总三萜的含量和产量。研究发现,在静置过程中,上层为白色菌丝体,下层为黄色菌球;而且上层菌丝体总三萜含量和产量远远高于下层菌丝体。另外在静置阶段采用培养瓶不会影响灵芝菌丝体总三萜含量,却能够大大提高上层菌丝体的生物量从而提高了上层菌丝体总三萜产量。高效液相色谱（HPLC）分析表明上层菌丝体中含有的三萜组分种类比下层菌丝体多,细胞实验表明上层菌丝体的醇提取物对肝癌细胞HepG2有显著的抑制作用。

关键词：两阶段培养法总三萜产量灵芝菌丝体体外抗肿瘤活性

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桑黄活性化合物的分离纯化及抗氧化和降血糖活性的研究

桑黄活性化合物的分离纯化及抗氧化和降血糖活性的研究

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2012年中国菌物学会学术年会

作者：杨焱王钦博冯娜汪雯翰吴娜刘艳芳张劲松农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所

研究采用四种不同极性的有机溶剂对桑黄（Phellinus Baumii）子实体乙醇提取液依次萃取得到石油醚相、氯仿相、乙酸乙酯相、正丁醇相和醇水相;对五种萃取相分别进行了清除NO自由基、超氧阴离子、羟基自由基、HO自由基、DPPH自由基及还... 详细信息

研究采用四种不同极性的有机溶剂对桑黄（Phellinus Baumii）子实体乙醇提取液依次萃取得到石油醚相、氯仿相、乙酸乙酯相、正丁醇相和醇水相;对五种萃取相分别进行了清除NO自由基、超氧阴离子、羟基自由基、HO自由基、DPPH自由基及还原力测定和抗脂质过氧化实验,结果表明乙酸乙酯相的抗氧化活性均高于其它萃取相。采用硅胶、Sephadex LH-20和聚酰胺等对抗氧化活性较高的乙酸乙酯相继续分离纯化,得到5个单一化合物:PB-EA-1、PB-EA-2、PB-EA-3、PB-EA-4和PB-EA-5。对PB-EA-2、PB-EA-3、PB-nB三种样品进行抗氧化和修复损伤神经细胞实验,结果发现分离得到的化合物PB-EA-3抗氧化活性显著,对其进行核磁共振及质谱等波谱分析并结合相关文献报道数据,解析得到其化学式(CHO)和化学结构。对桑黄醇提物和乙酸乙酯萃取物进行了链脲佐菌素糖尿病小鼠的降血糖实验,结果表明,与模型组相比,给药后第7天,桑黄醇提取物高剂量组和乙酸乙酯萃取物中高剂量组均能明显地降低糖尿病小鼠的空腹血糖（P<0.05）;给药后第14天,桑黄醇提取物中剂量组和乙酸乙酯萃取物低剂量组能明显降低了糖尿病小鼠的空腹血糖（P<0.05）,醇提取物高剂量组和乙酸乙酯萃取物中高剂量组极明显地降低糖尿病小鼠的空腹血糖（P<0.01）和糖化血清蛋白（P<0.01）,增加了血清胰岛素水平（P<0.01）。桑黄醇提物中高剂量组和乙酸乙酯萃取物高中低剂量组的视野平均胰岛面积明显增多,能增大糖尿病小鼠的胰岛体积、增加胰岛细胞数目;胰岛素阳性表达的β细胞增多、胰岛素阳性区域IOD均极明显增加。试验说明桑黄醇提取物和乙酸乙酯萃取物均有降低链脲佐菌素糖尿病小鼠的血糖作用,作用效果与增加胰岛β细胞、提高血清胰岛素水平有关。

关键词：桑黄子实体抗氧化降血糖活性化合物

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基于ITS序列和ERIC-PCR研究虫草属真菌及相关分离物

基于ITS序列和ERIC-PCR研究虫草属真菌及相关分离物

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2012年中国菌物学会学术年会

作者：唐传红唐庆九刘艳芳张劲松杨焱上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室

利用ITS序列并结合国际分子生物学数据库中的相关序列进行分析,发现蛹虫草与其无性分离物蛹草拟青霉的差异极小,它们聚在了一起,说明蛹虫草的无性型就是蛹草拟青霉,这也验证了此前的相关报道;蛹虫草同蝉花无性分离物及轮枝孢属关系较近... 详细信息

利用ITS序列并结合国际分子生物学数据库中的相关序列进行分析,发现蛹虫草与其无性分离物蛹草拟青霉的差异极小,它们聚在了一起,说明蛹虫草的无性型就是蛹草拟青霉,这也验证了此前的相关报道;蛹虫草同蝉花无性分离物及轮枝孢属关系较近,而冬虫夏草分离物雪白白僵菌同冬虫夏草的关系较近。ERIC-PCR的分析结果表明,蛹虫草及其无性分离物(Paecilomyces militaris)关系较近,而蝉花的无性分离物(Paecilomyces cicadae)同冬虫夏草的无性分离物雪白白僵菌的关系近,并同Verticillium fungicola聚在一起;同时,笔者也发现即便是蛹虫草与其无性型之间相似性水平也不高。另外,ERIC-PCR研究结果同虫草素含量之间存在着一致性,即虫草素含量高的样本聚在一起,而虫草素含量极低甚至不产的样本聚在一起。

关键词：虫草无性分离物 ITS序列 ERIC-PCR 亲缘关系

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灵芝发酵菌丝体中活性物质的研究

灵芝发酵菌丝体中活性物质的研究

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2012年中国菌物学会学术年会

作者：冯娜骆军鑫贾薇张劲松上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室

采用液体震荡-静置两阶段培养法发酵灵芝(Ganoderma lucidum),以抗肿瘤细胞K562、HEPG2和LNCaP的增殖为指标,寻找活性化合物。将富含萜类物质并具有较好活性的上层菌丝体收集,95%乙醇提取后依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取。... 详细信息

采用液体震荡-静置两阶段培养法发酵灵芝(Ganoderma lucidum),以抗肿瘤细胞K562、HEPG2和LNCaP的增殖为指标,寻找活性化合物。将富含萜类物质并具有较好活性的上层菌丝体收集,95%乙醇提取后依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取。从抗肿瘤细胞增殖活性较好的氯仿部分中分离得到4个化合物,通过波谱分析,分别鉴定为星鱼甾醇(Stellasterol,1)、lanosta-7,9(11),24-trien-3α-acetoxy-26-oicacid(2)、灵芝酸R(Ganoderic acid R,3)和灵芝酸S(Ganoderic acid S,4)。其中,我们首次对化合物2作出了核磁信号的全归属。细胞实验结果表明,化合物3和4具有较好的抑制肿瘤细胞K562、HEPG2和LNCaP增殖的作用,在作用浓度为25μg/ml(45.1μmol/L)时化合物3对三种肿瘤细胞的增殖抑制率都达到60%以上,化合物4在作用浓度50μg/ml(97.7μmol/L)时对肿瘤细胞的抑制率也达到了60%以上。

关键词：灵芝两阶段液体发酵三萜细胞毒性

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交配型对香菇单、双核菌丝体菌丝生长速度的影响

交配型对香菇单、双核菌丝体菌丝生长速度的影响

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上海市园艺学会2012年年会

作者：鲍大鹏李宏盛冯磊梁保东林范学国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海 201403 国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海 201403 上海海洋大学食品学院上海 201306 济宁学院食用菌研究所济宁学院生命科学与工程系曲阜 273155 国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海 201403 济宁学院食用菌研究所济宁学院生命科学与工程系曲阜

本文以120个香菇单核体及480个杂交双核体为供试材料，探讨了交配型对香菇单、双核体菌丝生长速度的影响及单、双核体菌丝生长速度之间的相关性，以其为香菇遗传育种提供参考。

关键词：香菇遗传育种双核菌丝体单核菌丝体生长速度交配型

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香菇高密度SNP遗传连锁图构建

香菇高密度SNP遗传连锁图构建

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上海市园艺学会2012年年会

作者：林范学李宏盛鲍大鹏黄丹枫国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海 201403 济宁学院生命科学与工程系曲阜 273155 上海交国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海 201403 上海交通大学农业与生物学院上海 200240

本研究利用香菇135菌株46个single-spore-isolates作为作图群体，通过Solexa高通量测序技术对135菌株的2个原生质体单核体135A和135B及作图群体基因组DNA进行测序，利用筛选的2253个SNP标记和2个交配型位点构建了一张包含14条连锁群的... 详细信息

本研究利用香菇135菌株46个single-spore-isolates作为作图群体，通过Solexa高通量测序技术对135菌株的2个原生质体单核体135A和135B及作图群体基因组DNA进行测序，利用筛选的2253个SNP标记和2个交配型位点构建了一张包含14条连锁群的香菇遗传连锁图普。这将是首张基于全基因组序列的香菇遗传图谱，对于后续的香菇QTL定位、分子标记辅助选择等研究具有重大意义。

关键词：香菇遗传连锁图 SNP标记基因测序

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工厂化生产中相对温度对杏鲍菇生长的影响

工厂化生产中相对温度对杏鲍菇生长的影响

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上海市园艺学会2012年年会

作者：于海龙杨娟尚晓冬李玉王瑞娟周峰冯志勇农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心农业部应用真菌资源与利用重点开放实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海 201403 上海市农业科学院数字农业工程与技术研究中心上海 201403

使用荷兰AEM公司生产的食用菌环控系统对杏鲍菇工厂化生产过程的环境进行调控，通过对杏鲍菇整个生育过程进行全程跟踪，监测了不同相对湿度对杏鲍菇生长发育的影响。结果表明：不同相对湿度对杏鲍菇生长过程具有显著影响;菌丝恢复速度... 详细信息

使用荷兰AEM公司生产的食用菌环控系统对杏鲍菇工厂化生产过程的环境进行调控，通过对杏鲍菇整个生育过程进行全程跟踪，监测了不同相对湿度对杏鲍菇生长发育的影响。结果表明：不同相对湿度对杏鲍菇生长过程具有显著影响;菌丝恢复速度随着生长环境中相对湿度的增加而加快;原基数目随着生长环境相对湿度的增加而增加;子实体生长过程在相对湿度为91％-93％时最优，产量最高。

关键词：杏鲍菇相对湿度工厂化生产

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