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第十二届药用真菌学术研讨会

作者：杨焱吴迪李巧珍张赫男张忠陈万超李文上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心

猴头菌是以养胃著称的药食两用菌,因其既可入药也可做食品而成为深加工利用最为广泛的食用菌。多糖是猴头菌中的主要功效成分,作者团队围绕猴头菌多糖品质提升的开发利用,系统进行了高多糖品种选育与分子机制发掘、高效加工技术创新和...

猴头菌是以养胃著称的药食两用菌,因其既可入药也可做食品而成为深加工利用最为广泛的食用菌。多糖是猴头菌中的主要功效成分,作者团队围绕猴头菌多糖品质提升的开发利用,系统进行了高多糖品种选育与分子机制发掘、高效加工技术创新和产品创制,并实现产业化应用,提升了猴头菌种源质量和产业发展水平。建立了猴头菌核心种质资源库,优选出高多糖野生型亲本菌株,经ARTP诱变选育获得多糖含量高、抗逆性强的猴头菌新品种,子实体多糖含量提高20%以上。基于猴头菌全基因组和诱变高多糖菌株的差异组学分析,对亲本菌株与诱变高产多糖菌株进行差异组学分析,利用生物信息学技术和基因靶向验证,挖掘到与猴头菌多糖合成密切相关的关键基因14个,并证实碳水化合物代谢通路中变化的蛋白可促进葡萄糖-6-磷酸酶的产生,为多糖合成提供中间体,解析了诱变高产多糖的分析机制;挖掘出RAS-cAMP-PKA通路下调可促进β-葡聚糖高产的机制,为β-葡聚糖定向调控提供了重要理论依据。针对猴头菌多糖分离纯化过程繁琐、得率低、成本高的技术缺陷,开创了沸水提取、低温冻融协同梯度乙醇沉淀的分离制备技术,分离纯化出高纯度猴头菌β-葡聚糖,含量达到96.80%,结构鉴定表明其以β-1,3连接为主链、1,6-连接为支链的葡聚糖,分子量2390kDa;该β葡聚糖可诱导淋巴细胞增殖和增强THP-1巨噬细胞分泌细胞因子IL-6,TNF-α和IL-1β的水平,显示出良好的体外免疫活性。通过超声降解技术,使大分子猴头菌β葡聚糖的特性粘度从原来的1231.99 L/kg降至97.72 L/kg,溶解度提高300%,获得更易吸收利用的多糖组分。对明确结构的猴头菌β-葡聚糖H6PC20和α-岩藻半乳聚糖HPB-3保护大鼠胃粘膜损伤的作用及机制进行了系统研究,阐明猴头菌多糖对胃粘膜损伤保护作用主要是通过激活胃粘膜的修复防御系统,提高防御修复因子EGF、bFGF、PGE2,降低炎症反应和减轻氧化损伤方面发挥功效作用。大分子β-葡聚糖保护胃粘膜的机制是通过增强防御因子分泌,激活机体防御和修复系统;而低分子量α-岩藻半乳聚糖通过抗炎作用发挥保护效果,为猴头菌多糖的定向开发利用提供了理论支撑。创新复合酶解技术,将子实体多糖释放率提高130%;创制了猴头菌复合酶解粉产品,保护胃粘膜活性提高80%,促进了猴头菌食品化产品的品质提升。开发了系列猴头菌营养健康食品,促进了其全产业链提质增效。

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糖谱法分析灵芝子实体多糖特征及谱效关系研究

糖谱法分析灵芝子实体多糖特征及谱效关系研究

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第十二届药用真菌学术研讨会

作者：刘艳芳刘静冯杰张劲松唐庆九唐传红周帅上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心

灵芝(Ganoderma spp.)是一种药用真菌,因具有广泛的药理作用和极低的毒性,已被大量应用于功能食品和中药产品中。多糖是其发挥免疫调节功能的主要成分,常作为灵芝类产品的质控指标。但由于灵芝来源多样、多糖结构复杂、缺失标志性活性... 详细信息

灵芝(Ganoderma spp.)是一种药用真菌,因具有广泛的药理作用和极低的毒性,已被大量应用于功能食品和中药产品中。多糖是其发挥免疫调节功能的主要成分,常作为灵芝类产品的质控指标。但由于灵芝来源多样、多糖结构复杂、缺失标志性活性多糖组分等问题,导致其质量控制体系还不成熟。本研究针对收集得到的100多份赤芝(Ganoderma lucidum)子实体水提粗多糖的分子量分布特征进行了系统分析,发现其主要由分子量为2.97×10～6～5.47×10～6 g/mol(GLP1)、2.15×10～6～5.73×10～6 g/mol(GLP2)和1.75×10～3～1.14×10～4 g/mol(GLP3)的三类多糖组分组成,其中GLP3为所有菌株的共有组分,而GLP1和GLP2在不同菌株中分布不同。对GLP1和GLP2进行了纯化和结构鉴定,明确GLP1是以β-(1→3)-连接为主链、以β-(1→6)-连接为支链的葡聚糖,而GLP2组分是以α-(1→4)-连接为主链、α-(1→6)-连接为支链的葡聚糖,GLP1组分与Dectin-1受体结合激活免疫的活性优于GLP2。不同菌株灵芝的低分子量组分(GLP3)是以葡萄糖为主并含有不同比例甘露糖和半乳糖的杂多糖,不同菌株GLP3组分诱导巨噬细胞释放NO、TNF-α和IL-6细胞因子的活性有差异。为了揭示GLP3组分特征与活性的关系,明确活性多糖的特征识别峰,本研究建立了低分子量灵芝多糖的指纹图谱和谱效关系模型。通过分析多糖分子量分布、单糖组成以及部分酸水解产物与多糖活性的相关性,发现重均分子量在4.27×10～3～5.27×10～3g/mol和1×10～4～1.14×10～4g/mol之间的两个峰与多糖的免疫活性关联度更高;多元线性回归分析表明多糖中的半乳糖、甘露糖、葡萄糖醛酸摩尔百分比与该组分刺激巨噬细胞释放NO的量呈正相关性,而岩藻糖与之相反。偏最小二乘回归分析表明部分酸水解产物图谱中的P2、P3、P8、P10组分与多糖的免疫活性密切相关,是多糖发挥免疫功能的主要物质基础。基于本研究中谱效关系模型识别的特征峰可为灵芝多糖及其产品免疫活性的评价提供参考。

关键词：灵芝多糖结构特征免疫活性指纹图谱谱效关系

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不同碳氮源对香菇液体菌种生长的影响

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上海农业学报 2024年第1期40卷 40-46页

作者：王宇星董浩然章炉军李玉李巧珍谭琦赵勇周峰上海海洋大学食品学院上海201306 上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点实验室上海201403 山东御苑生物科技有限公司临沂276000

以香菇‘沪香F2’为试验材料,探究了9种碳源配方和10种氮源配方对菌丝在固体培养基上生长速度、在液体培养基中菌丝生物量和发酵固形物体积比以及发酵完成时接种后菌丝在木屑试管中生长速度的影响。结果表明:在固体培养基上,以糖蜜为碳... 详细信息

以香菇‘沪香F2’为试验材料,探究了9种碳源配方和10种氮源配方对菌丝在固体培养基上生长速度、在液体培养基中菌丝生物量和发酵固形物体积比以及发酵完成时接种后菌丝在木屑试管中生长速度的影响。结果表明:在固体培养基上,以糖蜜为碳源时,菌丝生长速度最快,达6.10 mm∕d,以木糖为碳源时,菌丝生长速度最慢,仅3.84 mm∕d;以麸皮为氮源时,菌丝生长速度为4.01 mm∕d,以尿素为氮源时,菌丝生长速度最慢,仅3.19 mm∕d。在液体培养基中,以糖蜜为主要碳源时,菌丝生物量达8.04 g∕L,发酵固形物体积比达98.69%;以麸皮为主要氮源时,菌丝生物量达7.90 g∕L,发酵固形物体积比达96.57%。相关性分析发现,在不同碳源的固体培养基上,菌丝生长速度与菌丝生物量呈显著正相关;在不同氮源的液体培养基中,菌丝生物量与发酵固形物体积比呈显著正相关;不同碳氮源的菌丝生物量与菌丝接种后在木屑试管中的生长速度呈显著正相关。综上,糖蜜和麸皮是香菇液体菌种最佳的碳氮源组合。该研究结果可为工厂化香菇液体菌种原材料的选择提供参考。

关键词：香菇液体菌种菌丝生长速度菌丝生物量发酵固形物体积比

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大球盖菇子实体不同部位挥发性成分的比较分析

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现代食品科技 2022年第7期38卷 271-281,196页

作者：陆欢尚晓冬王小艳王春晖刘建辉陈晚朱王瑞娟徐宁上海市农业科学院食用菌研究所农业部应用真菌资源与利用重点开放实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点实验室上海201403 湖南省食用菌研究所湖南长沙410013 南京财经大学食品科学与工程学院江苏南京210023 茶陵县兴农食用菌种植农民专业合作社湖南茶陵412400

通过顶空固相微萃取法结合气相色谱-质谱联用方法,对比分析了大球盖菇子实体菌盖和菌柄的挥发性成分,并进行主成分分析(PCA)。结果表明,从大球盖菇子实体菌盖和菌柄都分别鉴定出50种化合物,其中菌盖主要以醇类、酯类和烷类化合物为主,... 详细信息

通过顶空固相微萃取法结合气相色谱-质谱联用方法,对比分析了大球盖菇子实体菌盖和菌柄的挥发性成分,并进行主成分分析(PCA)。结果表明,从大球盖菇子实体菌盖和菌柄都分别鉴定出50种化合物,其中菌盖主要以醇类、酯类和烷类化合物为主,分别占总比例19.93%、19.43%、9.79%;菌柄主要以醇类、酯类和酮类化合物为主,分别占总比例23.04%、21.04%、12.35%。所检测出的化合物中以3,4-二羟基-2-甲基吡啶-5-甲醇、4-哌啶醇、马来酸二乙基己酯、环己烷和3-壬烯-2-酮相对百分含量最高,对大球盖菇香味形成具有重要作用。主成分分析结果显示了醇类化合物为大球盖菇菌盖和菌柄的主要挥发性成分,且菌盖和菌柄在挥发性成分组成上具有明显差异。该研究结果为大球盖菇风味品质评价和大球盖菇品质育种提供了参考。

关键词：大球盖菇挥发性成分顶空固相微萃取气相色谱-质谱联用主成分分析

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灵芝菌丝体三萜及其药理活性的研究进展

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菌物学报 2022年第9期41卷 1341-1353页

作者：冯娜岳亚文程池露杨梅汪旵张劲松上海市农业科学院食用菌研究所国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 华东理工大学药学院制药工程与过程化学教育部工程研究中心上海市新药设计重点实验室上海200237 上海海洋大学食品学院上海201306 华东理工大学化工学院上海200237

菌丝体作为灵芝生长发育过程中的一个特定生理阶段,会产生不同于子实体和孢子的特定结构的灵芝酸类三萜化合物。本文总结了灵芝菌丝体中已发现和鉴定的三萜化合物结构、生物活性及其构效关系的研究进展,以期为灵芝菌丝体三萜在生物合成... 详细信息

菌丝体作为灵芝生长发育过程中的一个特定生理阶段,会产生不同于子实体和孢子的特定结构的灵芝酸类三萜化合物。本文总结了灵芝菌丝体中已发现和鉴定的三萜化合物结构、生物活性及其构效关系的研究进展,以期为灵芝菌丝体三萜在生物合成、代谢调控等的基础研究及相关产品的开发应用提供科学参考。

关键词：灵芝菌丝体四环三萜药理活性

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泛素化结合酶E2抑制剂对草菇15℃保鲜的影响

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菌物学报 2022年第12期41卷 2074-2082页

作者：龚明尹昕黄天宇郑婷婷唐利华张赫男汪滢上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 长春工业大学化学与生命科学学院吉林长春130012 江苏海洋大学食品科学与工程学院江苏连云港222005 上海海洋大学食品学院上海201306

为了改进草菇低温保鲜方法,在15℃贮藏条件下,采用泛素化结合酶E2(UBEV2)抑制剂对草菇子实体进行处理,并开展相关生理指标和基因表达检测。结果表明,使用100μmol/L的UBEV2抑制剂L345-0044维持了草菇较好的品质,提高了草菇可溶性糖的含... 详细信息

为了改进草菇低温保鲜方法,在15℃贮藏条件下,采用泛素化结合酶E2(UBEV2)抑制剂对草菇子实体进行处理,并开展相关生理指标和基因表达检测。结果表明,使用100μmol/L的UBEV2抑制剂L345-0044维持了草菇较好的品质,提高了草菇可溶性糖的含量。低温明显提升抑制剂处理下的碱性蛋白酶和中性蛋白酶活力,并证实了低温胁迫显著提高了抑制剂处理下的一种类型蛋白酶肽基赖氨酸金属内肽酶的表达。本研究证实了草菇可溶性糖和高活性的冷诱导金属内肽酶对于延长草菇的低温保鲜时间是必须的。

关键词：草菇泛素化结合酶E2 蛋白酶金属内肽酶低温保鲜

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基于网络药理学策略分析桑黄对药源性肝损伤的保护作用

基于网络药理学策略分析桑黄对药源性肝损伤的保护作用

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第十二届药用真菌学术研讨会

作者：刘朋李文陈万超吴迪张忠刘艳芳张劲松杨焱上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发中心

挖掘桑黄醇提物对对乙酰氨基酚(APAP)诱导的肝损伤的保护机制及其物质作用基础。研究结果表明:在APAP诱导的正常肝细胞L-02损伤模型上,桑黄醇提物可提高损伤肝细胞的生存率,降低活性氧(Reactive oxygen species,ROS)、脂质过氧化物水平... 详细信息

挖掘桑黄醇提物对对乙酰氨基酚(APAP)诱导的肝损伤的保护机制及其物质作用基础。研究结果表明:在APAP诱导的正常肝细胞L-02损伤模型上,桑黄醇提物可提高损伤肝细胞的生存率,降低活性氧(Reactive oxygen species,ROS)、脂质过氧化物水平,提高总抗氧化能力(Total antioxidant capacity,T-AOC)、谷胱甘肽(Reduced glutathione,GSH)水平。在APAP诱导的小鼠肝损伤模型上,桑黄醇提物可以降低损伤肝脏的炎症反应,抑制白细胞介素(Interleukin, IL)-1、IL-6等炎症因子的m RNA水平,抑制氧化应激损伤,通过调控Nrf2/GPX4信号通路阻滞损伤肝细胞的铁死亡。LC-MS/MS技术分析显示,本研究中的桑黄醇提物主要为Hispolone、Hispidin、Citrinin等36个黄酮类、三萜类等化合物。基于网络药理学分析策略建立疾病、铁死亡和防治干预靶点库,分析显示,EGFR、m TOR、TLR4等12个核心基因参与了桑黄醇提物改善APAP性肝损伤的疾病进程,参与该些基因调控的桑黄醇提物成分有Caffeic acid、Phelliridin J、Phelliridin A等15种化学分子。综上,桑黄醇提物对APAP诱导的小鼠肝损伤具有良好的改善效果,其保护机制可能与抑制铁死亡相关。

关键词：桑黄对乙酰氨基酚铁死亡网络药理学肝损伤

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油酸促进灵芝三萜液态深层发酵的工艺研究及规模化验证

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菌物学报 2021年第9期40卷 2445-2460页

作者：苏晓薇唐庆九张劲松冯娜王金艳周帅冯杰俞苓上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 上海应用技术大学香料香精技术与工程学院上海201418

灵芝三萜是灵芝中主要的活性成分之一,前期研究发现油酸可以促进灵芝三萜液态深层发酵下的发酵合成。本研究主要对油酸促进灵芝三萜液态深层发酵的工艺进行优化,并进行3L发酵罐规模的验证。通过单因素实验考察油酸的添加方式、添加时间... 详细信息

灵芝三萜是灵芝中主要的活性成分之一,前期研究发现油酸可以促进灵芝三萜液态深层发酵下的发酵合成。本研究主要对油酸促进灵芝三萜液态深层发酵的工艺进行优化,并进行3L发酵罐规模的验证。通过单因素实验考察油酸的添加方式、添加时间和添加浓度对灵芝三萜的影响,结合响应面实验,获得最优工艺条件并进行验证:在发酵第32h添加1.21%高温灭菌油酸,最高灵芝三萜含量为42.69mg/g;在发酵第7h添加1.35%过滤除菌油酸,最高三萜含量为43.38mg/g,分别比对照提高2.04倍和2.08倍。在1000m L摇瓶中添加高温灭菌油酸和过滤除菌油酸,灵芝三萜含量分别为32.18和32.48mg/g,为对照的1.96倍和1.95倍;在3L发酵罐规模下灵芝三萜含量分别为28.66和25.13mg/g,为对照的1.62倍和1.42倍。本研究系统优化了油酸促进灵芝三萜液态深层发酵的工艺条件,并在与工业生产相对应的3L发酵罐上进行验证。该研究可为灵芝三萜的规模化发酵提供重要参考和借鉴。

关键词：灵芝三萜工艺优化响应面油酸规模化

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香菇菌渣蛋白聚糖的分离纯化、结构特征和抗炎活性研究

香菇菌渣蛋白聚糖的分离纯化、结构特征和抗炎活性研究

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第十二届药用真菌学术研讨会

作者：张忠吴迪李文陈万超刘艳芳张劲松杨焱上海市农业科学院食用菌研究所国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室

采用单因素和响应面实验,在高压-复合酶作用下,提取香菇（Lentinula edodes）废弃菌渣粗多糖,得到最佳提取条件:料液比1︰20（W︰V）,最佳复合酶配比为纤维素酶∶木聚糖酶∶β-葡聚糖酶=3∶2∶1,总加酶量660U·g,pH 5.20,温度45℃,... 详细信息

采用单因素和响应面实验,在高压-复合酶作用下,提取香菇（Lentinula edodes）废弃菌渣粗多糖,得到最佳提取条件:料液比1︰20（W︰V）,最佳复合酶配比为纤维素酶∶木聚糖酶∶β-葡聚糖酶=3∶2∶1,总加酶量660U·g,pH 5.20,温度45℃,酶解时间6 h,在此条件下总糖提取率为13.4%,提取物得率为22.4%。香菇菌渣粗多糖再经过醇沉、透析和凝胶Sephacryl S-300 HR柱层析得到蛋白聚糖LEPS1。LEPS1的平均分子量为1.18×10～4 g/mol,其中多糖部分含量为88.9%,由葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖、木糖和甘露糖组成,摩尔比为1.2:1.2:1.0:2.3:1.1。LEPS1的蛋白质部分含量为8.5%,是通过O-糖苷键与多糖链结合。LEPS1可通过抑制NO分泌和降低促炎因子（TNF-α、IL-1β和IL-6）水平,显著改善LPS刺激的巨噬细胞RAW264.7的炎症损伤。LEPS1分别通过调节JAK表达、STAT1磷酸化和p38磷酸化来抑制JAK-STAT1和p38 MAPK信号通路。此外,LEPS1可促进巨噬细胞修复标志物CD 206和IL-10的表达。实验结果表明,LEPS1具有抗炎活性,有可能作为一种新型抗炎剂。本研究可为食药用菌产业中废弃基质的高值化利用提供科学依据和新的思路。

关键词：香菇菌渣蛋白聚糖分离纯化结构特征抗炎活性

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粗毛纤孔菌新品种‘沪黄1号’

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园艺学报 2021年第S02期48卷 3023-3024页

作者：李正鹏李玉陈万超张赫男吴迪杨焱上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403

‘沪黄1号’是从新疆新和县野生粗毛纤孔菌中系统选育出的新品种。子实体1年生,单生或覆瓦状叠生,直径12cm左右,烘干后变黑;菌盖表面黄褐色,平展至半圆形,被粗毛,边缘钝。接种后菌包培养140 d可进入出菇阶段,20~25 d采收,每袋900 g左右... 详细信息

‘沪黄1号’是从新疆新和县野生粗毛纤孔菌中系统选育出的新品种。子实体1年生,单生或覆瓦状叠生,直径12cm左右,烘干后变黑;菌盖表面黄褐色,平展至半圆形,被粗毛,边缘钝。接种后菌包培养140 d可进入出菇阶段,20~25 d采收,每袋900 g左右湿料一潮菇平均产量94 g,子实体含水量88%,生物转化率26.11%,子实体总黄酮含量达7.27%,粗多糖含量达3.46%。适宜代料栽培。

关键词：粗毛纤孔菌高产高总黄酮含量

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