检索结果-内蒙古大学图书馆

菌物学报 2013年第5期32卷 919-927页

作者：朱刚吴林陈明杰汪虹谭琦鲍大鹏上海海洋大学食品科学与工程学院上海201306 国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用专业重点实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海201403

在草菇全基因组中发现了4个担子菌锰过氧化物酶MnP基因同源物(vv-mnp1、vv-mnp2、vv-mnp3和vv-mnp4)的基础上,对这4个MnP进行了生物信息学分析,并对其基因表达和酶活性进行测定。结果表明vv-mnp1与vv-mnp2基因结构相同,vv-mnp3与vv-mnp... 详细信息

在草菇全基因组中发现了4个担子菌锰过氧化物酶MnP基因同源物(vv-mnp1、vv-mnp2、vv-mnp3和vv-mnp4)的基础上,对这4个MnP进行了生物信息学分析,并对其基因表达和酶活性进行测定。结果表明vv-mnp1与vv-mnp2基因结构相同,vv-mnp3与vv-mnp4基因结构相似。在4个草菇MnP基因启动子区域存在AP-2、cAMP、MRE、XRE和HSE等调控元件,预示着草菇中MnP基因的转录可能会受到氮源、碳源、重金属离子、芳香族化合物以及热击的影响。草菇MnP具有信号肽,不存在跨膜区域,表明其是分泌蛋白。草菇MnP中形成4个二硫键的8个半胱氨酸、潜在的锰离子和钙离子结合位点,在担子菌MnP中高度保守。系统进化树分析显示草菇MnP1和MnP2与香菇MnP1亲缘关系最近,而MnP3和MnP4与灰盖鬼伞过氧化物酶有较近的亲缘关系。RT-PCR检测到vv-mnp1、vv-mnp3与vv-mnp4能在含锰离子的培养基中表达,但运用锰离子氧化法没有检测到MnP活性,推测草菇中的MnP不具有将Mn2+氧化成Mn3+的能力。

关键词：草菇锰过氧化物酶生物信息学 RT-PCR

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金针菇菌丝体γ-氨基丁酸快速检测方法

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菌物学报 2024年第7期43卷 135-147页

作者：卢雪伟李晓晖鲍大鹏周陈力陈洪雨冯占李贺文王瑞娟邵悠然吴莹莹上海海洋大学食品学院上海201306 上海市农业科学院食用菌研究所、国家食用菌工程技术研究中心、农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室、上海市农业遗传育种重点实验室上海201403 江苏华绿生物科技股份有限公司江苏宿迁223700

γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)是一种对人体具有重要生理功能的非蛋白氨基酸,其在金针菇中含量丰富。为获得一种高效便捷检测金针菇菌丝体GABA含量的方法,本研究以工厂化栽培的金针菇菌株Fv-HL23为实验对象,在筛选菌丝体液体... 详细信息

γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)是一种对人体具有重要生理功能的非蛋白氨基酸,其在金针菇中含量丰富。为获得一种高效便捷检测金针菇菌丝体GABA含量的方法,本研究以工厂化栽培的金针菇菌株Fv-HL23为实验对象,在筛选菌丝体液体培养基的基础上,结合单因素和Box-Benhnken试验,以微板法测得的GABA含量作为响应值,对GABA提取过程中的料液比、裂解温度、超声功率以及超声时间等参数进行优化。结果表明,以YPD为液体培养基,在料液比1:43.82(质量体积比)、裂解温度81.03℃、超声功率325.95W、超声时间10.09min的条件下,Fv-HL23菌丝体中GABA得率最高,达(3566.16±93.25)μg/g。使用上述方法检测得到的同一金针菇菌株菌丝体GABA含量与子实体GABA含量关联性良好。本研究建立的金针菇菌丝体GABA检测方法可为节约检测成本、缩短GABA强化型食用菌育种进程提供参考。

关键词： γ-氨基丁酸单因素试验响应面重复性分析比色法

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利用β1-微管蛋白部分基因对香菇栽培菌株进行分型

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食用菌学报 2019年第3期26卷 1-10页

作者：宋晓霞赵妍陈明杰尚晓冬谭琦宋春艳奚莉萍安应波上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 安顺学院贵州安顺561000

通过对50个香菇(Lentinula edodes)栽培菌株的β1-微管蛋白部分基因进行测序、聚类和构建多态性图谱。结果表明:含有3条不同序列的菌株数为1,含有2条不同序列的菌株数为37,含有1条序列的菌株数为12;89条序列分为3个类型:Ⅰ型包括66条序... 详细信息

通过对50个香菇(Lentinula edodes)栽培菌株的β1-微管蛋白部分基因进行测序、聚类和构建多态性图谱。结果表明:含有3条不同序列的菌株数为1,含有2条不同序列的菌株数为37,含有1条序列的菌株数为12;89条序列分为3个类型:Ⅰ型包括66条序列,Ⅱ型包括12条序列,Ⅲ型包括9条序列;根据对基因序列的分型,30个菌株属于Ⅰ型,11个菌株属于Ⅰ和Ⅱ型,5个菌株属于Ⅰ和Ⅲ型,1个菌株属于Ⅱ和Ⅲ型,1个菌株属于Ⅲ型;Cr02属于Ⅰ、Ⅲ和待定型,广香9号属于Ⅰ和待定型。

关键词：香菇菌株多态性基因型

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利用酵母双杂交系统筛选金针菇DASH型隐花色素互作蛋白

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食用菌学报 2023年第1期30卷 27-35页

作者：李婧霆陆欢李巧珍徐珍宋春艳尚晓冬王瑞娟刘建雨上海海洋大学食品学院上海201306 上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发中心上海201403

提取金针菇(Flammulina filiformis)单核体菌株Dan 3菌丝的总RNA,分离纯化mRNA,合成双链cDNA,依次构建酵母双杂交初级和次级cDNA文库。通过酶切连接法构建诱饵载体pGBKT 7-CRY,其无自激活活性和毒性,与构建的次级cDNA文库共转化酵母感... 详细信息

提取金针菇(Flammulina filiformis)单核体菌株Dan 3菌丝的总RNA,分离纯化mRNA,合成双链cDNA,依次构建酵母双杂交初级和次级cDNA文库。通过酶切连接法构建诱饵载体pGBKT 7-CRY,其无自激活活性和毒性,与构建的次级cDNA文库共转化酵母感受态细胞,筛选与金针菇DASH型隐花色素(FfCRY-DASH)互作的蛋白,对筛选到的6个蛋白进行回补验证,最终发现一个与金针菇DASH型隐花色素互作的蛋白。

关键词：金针菇 FfCRY-DASH 酵母双杂交互作蛋白

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灵芝亲本及其杂交菌株液态发酵胞外多糖理化特征及刺激Dectin-1受体和巨噬细胞活性比较

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食用菌学报 2023年第3期30卷 60-67页

作者：段语嫣冯杰唐传红刘利平谭贻周帅刘艳芳张劲松上海海洋大学食品学院上海201306 上海市农业科学院食用菌研究所国家食用菌工程技术研究中心农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌加工技术研发分中心上海201403

在相同条件下分别液态发酵培养赤芝(Ganoderma lucidum)G0119、G0154及其杂交菌株GZ36,比较不同发酵时间(24、48、72、96 h)所得胞外多糖的含量、重均分子量分布特征、单糖组成特征和免疫活性差异。结果表明:3个菌株的胞外液在21~26、34... 详细信息

在相同条件下分别液态发酵培养赤芝(Ganoderma lucidum)G0119、G0154及其杂交菌株GZ36,比较不同发酵时间(24、48、72、96 h)所得胞外多糖的含量、重均分子量分布特征、单糖组成特征和免疫活性差异。结果表明:3个菌株的胞外液在21~26、34~44 min时间段均出现2个峰(P1、P3),而GZ36在26~33 min时出现峰P 2。在实验范围内,随着发酵时间延长,3个菌株的不同组分含量均呈现增加趋势。发酵终点72 h的胞外多糖P1、P2、P3的重均分子量分别为5.193×10^(6)~8.957×10^(6)、4.437×10^(6)、6.033×10^(4)~8.148×10^(4)g·mol^(-1)。与60%乙醇沉淀组分(60 E)相比,3个菌株胞外多糖的20%乙醇沉淀(20 E)组分的产量较高。与亲本菌株G0119、G0154的20E组分相比,杂交菌株GZ36的20E组分产量(0.46 g·L^(-1))较高,其多糖含量(82.96%)也较高;3个菌株的60E组分相比,菌株GZ36、G0154的产量(0.13、0.14 g·L^(-1))较高,菌株GZ36的多糖含量(78.76%)较高。杂交菌株GZ 36胞外多糖20 E组分(主要由葡萄糖组成)和60 E组分(主要由木糖组成)在单糖组成和比例上更接近亲本菌株G0154。与阴性对照相比,3个菌株的胞外多糖20E组分均表现出刺激Dectin-1受体的活性;60E组分均具有诱导巨噬细胞释放NO的活性。与亲本菌株相比,在200μg·mL^(-1)时,杂交菌株GZ36的60 E组分活性较强。研究结果为了解灵芝亲本与杂交菌株胞外多糖的异同提供参考。

关键词：灵芝胞外多糖液态发酵单糖组成免疫活性

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构建香菇转化的同源筛选标记的研究

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食用菌学报 2019年第4期26卷 16-22页

作者：李菲章炉军姜宁刘建雨于海龙尚晓冬宋春艳谭琦上海海洋大学食品学院上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室

通过比对分析多种导致真菌内源萎锈灵抗性的琥珀酸脱氢酶B亚基(SdhB)氨基酸序列的突变位点,将香菇(Lentinula edodes)SdhB氨基酸序列第243位的组氨酸替换为亮氨酸,构建了香菇萎锈灵抗性同源筛选标记载体,以农杆菌介导转化小米粒培养的... 详细信息

通过比对分析多种导致真菌内源萎锈灵抗性的琥珀酸脱氢酶B亚基(SdhB)氨基酸序列的突变位点,将香菇(Lentinula edodes)SdhB氨基酸序列第243位的组氨酸替换为亮氨酸,构建了香菇萎锈灵抗性同源筛选标记载体,以农杆菌介导转化小米粒培养的香菇菌丝。转化子经5次传代后,PCR扩增验证插入片段,并观察绿色荧光蛋白(EGFP)的表达情况。结果显示:香菇单核体和双核体菌株经转化后,均能筛选到具有萎锈灵抗性的转化子,单核体菌株的转化率为34%,显著高于双核体菌株(4%);单核体转化子中的同源筛选标记及报告基因稳定性较好。本研究构建的萎锈灵抗性同源筛选标记可有效地在香菇遗传转化体系中应用。

关键词：香菇萎锈灵抗性基因同源筛选标记农杆菌转化绿色荧光蛋白

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农杆菌介导的斑玉蕈遗传转化

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微生物学通报 2014年第9期41卷 1793-1799页

作者：孙运奇陈辉张津京陈明杰冯志勇汪虹南京农业大学生命科学学院江苏南京210095 上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403

【目的】将农杆菌介导的转化应用于重要的工厂化栽培食用菌斑玉蕈中,建立稳定的农杆菌介导的斑玉蕈遗传转化技术。【方法】将构建的双元载体pYN6982转入农杆菌LBA4404菌株中,以斑玉蕈SIEF3133菌株打碎的双核菌丝为受体材料,利用根癌农... 详细信息

【目的】将农杆菌介导的转化应用于重要的工厂化栽培食用菌斑玉蕈中,建立稳定的农杆菌介导的斑玉蕈遗传转化技术。【方法】将构建的双元载体pYN6982转入农杆菌LBA4404菌株中,以斑玉蕈SIEF3133菌株打碎的双核菌丝为受体材料,利用根癌农杆菌介导的转化方法进行斑玉蕈转化试验。【结果】经潮霉素抗性筛选、PCR鉴定以及有丝分裂稳定性试验验证,表明潮霉素磷酸转移酶基因(hph)已经整合到斑玉蕈的基因组中;转基因斑玉蕈菌丝在荧光显微镜下可以观测到绿色荧光,表明增强型绿色荧光蛋白基因(egfp)已经在转基因斑玉蕈菌株中获得了表达;通过PCR检测,随机挑选的8个转基因斑玉蕈菌株中有2个可以扩增出载体转移DNA(T-DNA)边界重复序列外的卡那霉素基因(kan)序列。【结论】获得了稳定遗传和表达的斑玉蕈转基因菌株,建立了农杆菌介导的斑玉蕈遗传转化方法。农杆菌介导的斑玉蕈遗传转化中,存在载体T-DNA边界重复序列之外的DNA序列转移到转基因斑玉蕈中的现象,有待进一步研究。

关键词：斑玉蕈农杆菌 EGFP 遗传转化

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栽培地域和木屑对瓦尼桑黄子实体化学成分及生物活性的影响

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食用菌学报 2023年第6期30卷 76-85页

作者：王雨阳李正鹏陈万超张忠刘朋吴迪李文杨焱上海海洋大学食品学院上海201306 上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发中心上海201403

测定浙江海宁桑树,陕西榆林枣树、桑树以及湖北宜昌桑树、栎树木屑的化学成分,采用这五种木屑栽培瓦尼桑黄(Sanghuangporus vaninii),测定子实体多糖、总三萜、总酚、黄酮含量,并研究子实体醇提物抗氧化、体外抑制肿瘤细胞活性。结果表... 详细信息

测定浙江海宁桑树,陕西榆林枣树、桑树以及湖北宜昌桑树、栎树木屑的化学成分,采用这五种木屑栽培瓦尼桑黄(Sanghuangporus vaninii),测定子实体多糖、总三萜、总酚、黄酮含量,并研究子实体醇提物抗氧化、体外抑制肿瘤细胞活性。结果表明:陕西榆林枣树木屑栽培的子实体多糖含量最高,为3.06%;浙江海宁桑树木屑栽培的子实体总三萜、总酚和黄酮含量均最高,分别为0.63%、16.09%、15.59%,且子实体醇提物对DPPH和ABTS自由基的清除率、对肿瘤细胞HepG-2、MCF-7、HeLa的抑制率最高。研究结果为利用栽培基质提高瓦尼桑黄子实体活性成分含量提供参考。

关键词：瓦尼桑黄木屑活性成分抗氧化活性肿瘤细胞抑制率

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不同来源的蛹虫草子实体活性成分的比较

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菌物学报 2018年第12期37卷 1695-1706页

作者：朱丽娜刘艳芳张红霞周帅张忠李传华高新华唐庆九上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 上海市农业科学院生态环境保护研究所上海201403

通过比较不同来源的蛹虫草子实体的活性成分以探讨蛹虫草品质的差异。对17个蛹虫草菌株栽培得到的子实体及16个市售样品中的多糖、核苷类成分、游离糖醇及小分子糖类的含量进行分析测定,并比较其核苷类成分HPLC指纹图谱。结果表明,因菌... 详细信息

通过比较不同来源的蛹虫草子实体的活性成分以探讨蛹虫草品质的差异。对17个蛹虫草菌株栽培得到的子实体及16个市售样品中的多糖、核苷类成分、游离糖醇及小分子糖类的含量进行分析测定,并比较其核苷类成分HPLC指纹图谱。结果表明,因菌株不同蛹虫草子实体的活性成分具有不同程度的差异,菌株对虫草素含量的影响最大,其次是N6-(2-羟乙基)腺苷,因菌株不同虫草素含量可相差14倍,N6-(2-羟乙基)腺苷的含量差异可达6倍以上。市售样品中的核苷类成分分析结果也证明了在测定的几种成分中,虫草素是含量差异最大的活性成分。17个蛹虫草菌株子实体的多糖含量为1.81%–4.92%,甘露醇含量为1.44%–4.47%,海藻糖含量为3.58%–25.43%。16个市售样品的多糖含量为2.84%–5.55%,甘露醇含量为0.96%–3.93%,海藻糖含量为1.04%–19.91%。采用数据归一化法进行子实体品质综合评价研究,结果表明菌株G7a、G10a、G15a综合品质较好,多数成分含量均大于平均值,是生产高品质蛹虫草的合适菌株。

关键词：蛹虫草多糖核苷甘露醇海藻糖

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金针菇子实体化学成分的研究

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食用菌学报 2015年第4期22卷 53-57页

作者：韩乐冯娜韩伟上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 华东理工大学药学院上海200237

对金针菇(Flammulina velutipes)子实体进行乙醇提取,依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取,经柱层析分离得到12个化合物。经核磁共振及质谱鉴定,这12个化合物分别为:阿糖醇(1)、麦角甾醇(2)、顺式-9-二十三烯(3)、尿嘧啶(4)、烟酰... 详细信息

对金针菇(Flammulina velutipes)子实体进行乙醇提取,依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取,经柱层析分离得到12个化合物。经核磁共振及质谱鉴定,这12个化合物分别为:阿糖醇(1)、麦角甾醇(2)、顺式-9-二十三烯(3)、尿嘧啶(4)、烟酰胺(5)、黄嘌呤(6)、甘油(7)、腺苷(8)、海藻糖(9)、甘露醇(10)和酪氨酸(11),其中化合物3、5、6、7和11为首次从金针菇子实体中分离得到。

关键词：金针菇子实体分离纯化结构鉴定

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