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第十届全国食用菌学术研讨会

作者：张丹宋春艳章炉军巫萍鲍大鹏尚晓冬谭琦上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点开放实验室南京农业大学生命科学学院

香菇是世界主要栽培食用菌之一,香菇菌种的准确鉴定是香菇大规模生产和菌种知识产权保护的重要前提。本研究基于香菇全基因组序列开发了200对SSR标记用于25份常用香菇栽培菌种的遗传多样性分析和菌种鉴定。结果表明,供试材料的遗传相似... 详细信息

香菇是世界主要栽培食用菌之一,香菇菌种的准确鉴定是香菇大规模生产和菌种知识产权保护的重要前提。本研究基于香菇全基因组序列开发了200对SSR标记用于25份常用香菇栽培菌种的遗传多样性分析和菌种鉴定。结果表明,供试材料的遗传相似性较高,遗传相似系数平均值为0.776,最小值为0.567,最大值为1。基于遗传多样性分析结果,筛选出7对带型清晰且重复性好的SSR标记构建了11份香菇商业菌种的多位点SSR指纹图谱。这11份菌种分别为:Cr-02、闵丰1号、香菇241-4、森源1号、森源8404、香九、广香51号、华香5号、L952、L9319、L808。

关键词：香菇简单重复序列商业菌种遗传多样性指纹图谱

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高效液相色谱法测定葛仙米水溶性多糖含量

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上海农业学报 2020年第1期36卷 105-110页

作者：苏攀峰唐庆九陈盛赵立彬王玉兰刘艳芳周帅许剑锋上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 上海海洋大学食品学院上海201306 上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心上海201306 湖南炎帝生物工程有限公司株洲412000

通过建立高效液相法(HPLC)测定葛仙米水溶性多糖含量的方法,对HPLC测定葛仙米水溶性多糖含量的方法学进行考察。以纯化的葛仙米多糖为标准品,应用HPLC对经过不同预处理的葛仙米水溶性多糖进行含量测定。结果表明:选择柱型为TSKgel G6000... 详细信息

通过建立高效液相法(HPLC)测定葛仙米水溶性多糖含量的方法,对HPLC测定葛仙米水溶性多糖含量的方法学进行考察。以纯化的葛仙米多糖为标准品,应用HPLC对经过不同预处理的葛仙米水溶性多糖进行含量测定。结果表明:选择柱型为TSKgel G6000 PWXL液相色谱分析柱的效果较好,标准品的定量上、下限分别为10mg/mL和0.078625mg/mL;标准溶液浓度(Y)在0.15625~5mg/mL范围内,峰面积与进样量(X)呈良好的线性关系,线性方程Y=1995695.548X-170.597、R^2=0.999;精密度、重复性和稳定性的RSD分别为1.59%、1.13%、2.56%,平均加样回收率为97.8%、RSD为1.72%,说明该方法灵敏度高、重复性和稳定性较好,试验结果可靠,所建方法适用于葛仙米水溶性多糖含量的测定。

关键词：葛仙米水溶性多糖高效液相色谱法含量

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灵芝子实体中三萜类物质抗氧化活性的谱效关系

灵芝子实体中三萜类物质抗氧化活性的谱效关系

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多彩菌物美丽中国——中国菌物学会2019年学术年会

作者：杨妍张劲松汪雯翰上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验上海海洋大学食品学院

灵芝(Ganoderma lingzhi)为担子菌门、伞菌纲、多孔菌科灵芝真菌,是我国重要的药用真菌之一,已有2000多年的记载和利用历史。灵芝的抗氧化清除自由基作用一直是受到学术界关注的研究课题,自由基是细胞代谢过程中产生的活性物质,自由基... 详细信息

灵芝(Ganoderma lingzhi)为担子菌门、伞菌纲、多孔菌科灵芝真菌,是我国重要的药用真菌之一,已有2000多年的记载和利用历史。灵芝的抗氧化清除自由基作用一直是受到学术界关注的研究课题,自由基是细胞代谢过程中产生的活性物质,自由基可以造成Aβ(Amyloidβ-protein,Aβ)沉积及微管相关蛋白tau蛋白(microtubule-associated protein tau,tau)的磷酸化,会进一步使AD(Alzheimer's disease,AD)大脑中的氧化还原反应失衡,而过多的Aβ沉积及Tau蛋白高度磷酸化则造成严重脑部损伤。目的研究灵芝三萜特征图谱和抗氧化活性的相关性,探讨灵芝三萜抗氧化活性的物质基础,并筛选活性色谱峰。方法在以HPLC法建立灵芝指纹图谱分析方法的基础上,采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl, DPPH)法测定灵芝样品抗氧化活性,运用偏最小二乘回归分析,将灵芝醇提物抗氧化活性与指纹图谱共有峰的峰面积相关联,并结合三萜标准品在HPLC上进样,匹配活性色谱峰,研究灵芝抗氧化作用的物质基础及谱效关系。结果从27个匹配特征峰中筛选出S9、S10与灵芝清除DPPH自由基能力呈显著正相关,并通过与对照品比对确定了S9为灵芝酸B、S10为灵芝酸LM2。结论灵芝抗氧化活性指纹图谱在乙醇提取物基础上建立,不但可系统表征该灵芝复方成分-药效的相关性,也可准确追踪并分离药理活性部位,为灵芝药材资源的质量控制及进一步开发利用奠定基础。

关键词：灵芝高效液相色谱指纹图谱 DPPH清除活性谱效关系

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不同镉耐受性香菇菌株对镉胁迫生理响应研究

不同镉耐受性香菇菌株对镉胁迫生理响应研究

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中国菌物学会2023年学术年会

作者：翟丹丹于浩吴燕莎谭琦尚晓冬于海龙李玉吉林农业大学食药用菌教育部工程研究中心上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发中心上海市农业遗传育种重点开放实验室

香菇Lentinula edodes是我国产量最大的菇种,也是我国消费者普遍喜爱的食用菌品种之一。近年来,随着消费者对食品安全重视程度的不断提高,食用菌中重金属超标现象越来越引起人们关注。前期团队对我国香菇主产区香菇中重金属含量进行跟... 详细信息

香菇Lentinula edodes是我国产量最大的菇种,也是我国消费者普遍喜爱的食用菌品种之一。近年来,随着消费者对食品安全重视程度的不断提高,食用菌中重金属超标现象越来越引起人们关注。前期团队对我国香菇主产区香菇中重金属含量进行跟踪分析,发现香菇中存在一定比例的镉超标现象,后续对种质资源库中有代表性的99份香菇种质资源进行镉耐受性评价,获得了不同镉耐受性的香菇菌株。以两个不同镉耐受性香菇菌株4606(低镉积累)和4625(高镉积累)为材料,探究其在镉胁迫下菌丝阶段抗氧化系统响应差异,并以关键酶为指标筛选出关键发育阶段进行蛋白组学研究;并通过外源添加镉的方式进一步研究了镉胁迫下不同镉耐受性香菇菌株在不同发育阶段的镉累积特性。结果表明:不同镉耐受性香菇菌株的抗氧化酶活性含量、非酶类抗氧化剂含量、渗透调节性物质含量均存在显著差异,其对镉胁迫的响应时间及响应能力均存在差异;通过TMT标记定量蛋白组测序方法进行蛋白组表达差异分析,两个菌株镉胁迫前后共鉴定到3235个差异表达蛋白,且受到镉胁迫后0.5 h时蛋白层面已经发生了显著性变化。镉胁迫后两个菌株参与解毒生物过程的差异蛋白增多,具有转录因子活性、蛋白质结合等分子功能的差异蛋白增多。4625菌株在参与抗氧化活性分子功能的差异表达蛋白多于4606菌株,4625菌株抗氧化酶活性及非酶类抗氧化剂整体高于4606菌株,这可能与参与抗氧化活性分子功能蛋白的差异表达有关。通过KEGG富集分析发现4606和4525两个菌株主要富集到的是丙酮酸代谢、嘌呤代谢、丙酸代谢、氮代谢、糖酵解/糖异生、半胱氨酸和蛋氨酸代谢、柠檬酸循环(TCA循环)、果糖和甘露糖代谢等重要通路。镉胁迫对两个菌株子实体农艺性状和产量都产生影响,但不同镉耐受性菌株受影响的农艺性状和受影响程度不同。两个菌株不同生长发育阶段单位干质量子实体中镉含量均有随着生长发育时间的延长而显著降低的趋势。受到镉胁迫后菌株4606的MDA含量在生长期显著升高,成熟期显著下降,开伞期极显著降低;菌株4625受到镉胁迫后开伞期的MDA含量显著降低,其余阶段未受到显著影响。菌株4606对照组与镉胁迫处理组的可溶性蛋白含量均随生长时间延长显著降低,菌株4625对照组与镉胁迫处理组的可溶性蛋白含量均随生长时间延长先显著升高后显著降低;镉胁迫导致菌株4606开伞期的可溶性蛋白含量显著降低,而菌株4625在原基期、生长期、开伞期的蛋白含量均极显著升高。综上,不同镉耐受性香菇菌株子实体对镉胁迫的生理响应存在一定差异,这为进一步深入研究香菇在镉胁迫响应和镉吸收过程中的分子机理及超低镉吸收菌株奠定了基础。

关键词：镉胁迫抗氧化系统品种发育阶段蛋白组

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基于湖北随州气候条件下香菇菌株品比试验

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食用菌 2015年第4期37卷 18-19页

作者：于海龙杨颖李亚楠宋春艳章炉军尚晓冬谭琦上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海奉贤201403 上海市浦东新区农业服务中心上海浦东201299 山东农业大学生命科学学院山东泰安271018

在随州气候条件以及生产模式下对5个香菇菌株进行筛选,以发菌时间、转色时间、出菇时间、农艺性状以及产量等为筛选考察指标。结果表明:泌阳6号在农艺性状、产量等方面要明显优于其余4个菌株,最适合在湖北随州栽培。

关键词：香菇随州品种筛选

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樟芝发酵液中抗肿瘤活性物质的研究

樟芝发酵液中抗肿瘤活性物质的研究

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中国菌物学会第六届会员代表大会（2014年学术年会）暨贵州省食用菌产业发展高峰论坛

作者：贾薇白岩岩张劲松上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室河南农业大学生命科学学院

分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇等对樟芝发酵液进行萃取,对四个萃取相提取物的体外生物活性进行了研究,细胞实验显示樟芝发酵液提取物具有体外抗肿瘤、免疫调节、抗衰老以及抗氧化等的生物活性,其中抗肿瘤活性最为显著。对抗肿... 详细信息

分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇等对樟芝发酵液进行萃取,对四个萃取相提取物的体外生物活性进行了研究,细胞实验显示樟芝发酵液提取物具有体外抗肿瘤、免疫调节、抗衰老以及抗氧化等的生物活性,其中抗肿瘤活性最为显著。对抗肿瘤活性较强的氯仿相和乙酸乙酯相采用硅胶吸附色谱法进行分离,由氯仿相获得得到化合物Ⅰ和化合物Ⅱ。采用HNMR,C NMR以及高分辨质谱等现代光谱技术,进行结构鉴定,确定化合物Ⅰ为新化合物,命名为3-isobutyl-1-methoxy-4-(4-(3-methylbut一2-enyloxy)phenyl)-1H-pyrrole-2,5-dione,化合物Ⅱ为5-羟甲基呋喃甲醛。两个化合物具有很好的体外抗肿瘤活性。

关键词：樟芝发酵液抗肿瘤活性

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金针菇工厂化栽培过程中游离氨基酸变化情况的初步研究

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上海农业学报 2016年第6期32卷 5-9页

作者：王红梅程向阳张光忠余养朝王瑞娟鲍大鹏茅文俊上海市农业科学院农产品质量标准与检测技术研究所上海201403 上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 江苏华绿生物科技股份有限公司江苏223700

为了探索金针菇栽培过程中氮素营养成分的变化规律,对金针菇整个栽培周期基质-菌丝体混合物中游离氨基酸含量和子实体中游离氨基酸含量的动态变化进行了研究。结果表明:基质-菌丝体混合物中总游离氨基酸含量在发菌期显著上升,至出原基... 详细信息

为了探索金针菇栽培过程中氮素营养成分的变化规律,对金针菇整个栽培周期基质-菌丝体混合物中游离氨基酸含量和子实体中游离氨基酸含量的动态变化进行了研究。结果表明:基质-菌丝体混合物中总游离氨基酸含量在发菌期显著上升,至出原基期达到最高为初始状态的12.95倍,搔菌前含量最丰富的氨基酸为精氨酸,达到最高值2 279.57μg/g(占比15.57%),搔菌后,精氨酸快速积累趋势改变,而谷氨酸、丙氨酸、天冬酰胺等氨基酸继续积累,至原基形成时,含量最高的氨基酸分别是精氨酸2 213.39μg/g(占比10.41%)和谷氨酸2 147.53μg/g(占比10.10%),出原基到子实体成熟过程中基质菌丝体中几乎所有游离氨基酸含量都逐渐减少。在子实体中谷氨酸、谷氨酰胺、丙氨酸是含量最高的氨基酸。由此推测在金针菇子实体形成过程中,菌丝可以转运与利用精氨酸、谷氨酸、丙氨酸等多种氨基酸,多种游离氨基酸的运输为金针菇子实体的快速发育提供了物质保障。

关键词：金针菇菌丝体子实体氮素营养氨基酸工厂化栽培

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高雄山虫草生物学特性及人工驯化条件优化

高雄山虫草生物学特性及人工驯化条件优化

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中国菌物学会2023年学术年会

作者：杨双双林群英朱丽娜鲍大鹏陈明杰李传华上海海洋大学食品学院农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所南京野生植物综合利用研究院

高雄山虫草Cordyceps tenuipes是一种重要的珍稀野生虫草,无性型为细脚棒束孢Isaria tenuipes。对采集的野生无性型高雄山虫草生物学特性进行了研究,采用小麦和大米为栽培基质,通过添加不同营养成分进行人工驯化和栽培条件优化,对后续... 详细信息

高雄山虫草Cordyceps tenuipes是一种重要的珍稀野生虫草,无性型为细脚棒束孢Isaria tenuipes。对采集的野生无性型高雄山虫草生物学特性进行了研究,采用小麦和大米为栽培基质,通过添加不同营养成分进行人工驯化和栽培条件优化,对后续提高其孢梗束产量和商业化栽培具有重要意义。试验结果表明,该虫草菌丝在固体和液体培养条件下生长所需的最佳营养组成一致,通过单因素和多因素正交试验得出菌丝在固体和液体条件下生长的最佳培养基配方为蔗糖30g/L、酵母粉15g/L、磷酸二氢钾2g/L、七水硫酸镁2g/L,最佳培养条件为温度25℃,pH 7。以小麦为培养基栽培的孢梗束生物学效率介于(45.750±6.062)%–(67.820±6.018)%,总体优于大米培养基(23.410±5.242)%–(36.880±8.812)%。以添加蚕蛹粉的小麦培养基栽培的孢梗束生物转化率最高,达67.820%,高于已有的报道。通过生物学特性分析和人工驯化条件的优化,为高雄山虫草的规模化人工栽培提供参考。

关键词：无性型碳源氮源正交试验培养

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樟芝活性化合物抗非小细胞肺癌活性及作用机制研究

樟芝活性化合物抗非小细胞肺癌活性及作用机制研究

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中国菌物学会2018年学术年会

作者：杨海芮贾薇张劲松张赫男杨焱汪雯翰上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验石河子大学生命科学学院

肺癌在全球癌症死亡率中占据第一位。非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer, NSCLC)在所有类型肺癌中所占比例最大。目前主要用于治疗NSCLC的方法是化疗法,然而,临床使用的化疗药物普遍具有较大的毒副作用,且容易产生耐药性。食药... 详细信息

肺癌在全球癌症死亡率中占据第一位。非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer, NSCLC)在所有类型肺癌中所占比例最大。目前主要用于治疗NSCLC的方法是化疗法,然而,临床使用的化疗药物普遍具有较大的毒副作用,且容易产生耐药性。食药用真菌在东方有着独特的经济和医药价值,其天然组分的活性研究更是深得广大研究学者的青睐。因此,从食药用真菌中提取高效低毒的抗肿瘤活性先导化合物,用以研发新药将是生物医药界学者们研究的热点和难点。樟芝是原产于我国台湾的一种珍稀药用菌,具有多种生理活性,尤其是它卓越的抗肿瘤活性。樟芝中的明星分子,安卓喹诺儿,对NSCLC有很好的抑制作用,目前已进入FDA批准的NSCLC二期临床实验。然而,安卓喹诺儿主要来源于樟芝子实体,由于樟芝依赖生长的牛樟树是珍稀保护树种,且子实体生长极其缓慢,使得其研究成本居高不下,不利于科研的顺利进展。液态深层发酵具有原料来源广泛、成本低廉、生长过程短、操作易控制等优点,从液态发酵产物中分离纯化得到与安卓喹诺儿类似的活性物质,就成为十分值得开发的途径。本研究首先以樟芝液态发酵产物的粗提物为材料,研究其对NSCLC的抑制作用,发现其对NSCLC有较好的抑制作用,可引起S期细胞周期阻滞,诱导细胞发生凋亡。然而,粗提物是混合物,包含着许多成分不明的活性物质,很难从中发现发挥主要作用的活性单体物质。因此,后续研究采用实验室前期分离得到的两种单体化合物By-1和Antrodin C进行抗肺癌活性评价,并进一步探究其作用机制。其中,By-1主要来源于发酵液,Antrodin C主要来源于发酵菌丝体。通过对细胞迁移、细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡及凋亡相关蛋白、细胞自噬等检测来评价By-1和Antrodin C的抗肺癌活性,并探究自噬和凋亡的交互式调控是否参与抗肺癌活性中,进一步探究作用的信号通路。实验发现,By-1和Antrodin C均对非小细胞肺癌SPCA-1细胞株有较好的抑制作用,其作用机制主要是由于引起S期细胞周期阻滞,上调P53蛋白,P53参与ROS和Bcl-2介导的线粒体细胞凋亡途径,进一步引起Caspase家族的级联反应,促进凋亡执行因子Caspase-3的释放,进而诱导细胞凋亡。通过检测自噬性结构,自噬流的发生以及自噬标记蛋白LC3 II表达和LC3 I向LC3 II转变,发现By-1和Antrodin C可诱导SPCA-1细胞发生自噬。并进一步发现自噬发生是通过下调Akt/mTOR通路来介导的。通过自噬抑制剂和自噬激活剂处理细胞,对细胞增殖的检测,发现自噬在By-1和Antrodin C的抗肺癌活性中起保护性作用。将促凋亡化合物和抑制自噬化合物联用,将明显增加对肿瘤细胞的抑制能力,这可能为NSCLC治疗提供一条新思路。肺癌细胞中存在多种类型的基因突变,其中EGFR突变占到了总突变类型的一半以上。有数据表明,对EGFR突变型肺癌,采用靶向性治疗的方法,能达到更好的效果,且预后良好。通过对EGFR突变型细胞株HCC827细胞进行细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡的相关检测,发现By-1和Antrodin C可以抑制该细胞增殖,将细胞阻滞在S期,并能诱导细胞发生凋亡。本研究采用不同类型的人非小细胞肺癌细胞系探究By-1和Antrodin C的抗肺癌活性及其分子机制,发现By-1和Antrodin C对NSCLC有较好的抑制作用,其作用机制是由于凋亡和自噬的交互式调控所致。由此可见,By-1和Antrodin C都有可能发展成为潜在的抗肺癌治疗的化疗药物,这也为后续的深入研究提供了理论依据。

关键词：樟芝非小细胞肺癌细胞凋亡细胞自噬

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香菇单核菌丝生长速度差异的相关基因分析

香菇单核菌丝生长速度差异的相关基因分析

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中国菌物学会2023年学术年会

作者：黄万兵侯娣周陈力李燕杨瑞恒鲍大鹏上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点开放实验室贵州省农业科学院贵州省农作物品种资源研究所贵州省食用菌育种重点实验室上海海洋大学食品学院

以双核香菇Lentinula edodes菌株中分离获得两个亲和的单核体Y0040-1和Y0040-3为材料,在不同的培养基上进行培养,进行差异性状评价和表达差异性分析。结果表明在不同的培养基(PDA和2%木屑PDA)上两个单核体菌丝生长速度都存在差异,其中Y0... 详细信息

以双核香菇Lentinula edodes菌株中分离获得两个亲和的单核体Y0040-1和Y0040-3为材料,在不同的培养基上进行培养,进行差异性状评价和表达差异性分析。结果表明在不同的培养基(PDA和2%木屑PDA)上两个单核体菌丝生长速度都存在差异,其中Y0040-1的生长速度显著高于Y0040-3。进一步分析转录组数据发现,在不同培养基上两个单核体比较组(Y0040-3 vs.Y0040-1)有1 633个共同的差异基因,这些共同变化的基因可能是导致两者性状差异的主要原因,这些基因中共同上调有155个,共同下调有136个。对这些基因进行注释分析,发现共同上调的基因参与代谢过程中的氨基酸代谢和碳水化合物代谢等,分析木质纤维素酶发现,Y0040-1上调基因数量高于Y0040-3,且Y0040-1中的纤维素降解酶和木质素降解酶表达量都明显高于Y0040-3。

关键词：香菇单核体异核体 Cazymes家族木质纤维素酶

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