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第十二届药用真菌学术研讨会

作者：冯杰刘艳芳唐传红张劲松农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所

灵芝是我国著名的药用真菌,研究历史悠久。灵芝多糖作为灵芝的重要代谢产物之一,具有多种药理活性,因此是众多灵芝产品的主要功效成分和标志性成分,产品中多糖含量的多少会显著影响灵芝产品的质量和市场潜力。从液态发酵原料胞外液和菌... 详细信息

灵芝是我国著名的药用真菌,研究历史悠久。灵芝多糖作为灵芝的重要代谢产物之一,具有多种药理活性,因此是众多灵芝产品的主要功效成分和标志性成分,产品中多糖含量的多少会显著影响灵芝产品的质量和市场潜力。从液态发酵原料胞外液和菌丝体获得多糖具有周期短、可定向产生目标产物和易实现规模化生产等优势,是获取灵芝多糖更有效的途径。然而,我国灵芝种质资源丰富,质量参差不齐,缺少适用于液态发酵的优势菌株。本研究对实验室保藏的41株灵芝菌株进行筛选,分别筛选出高产胞内外多糖的菌株,然后在50L发酵罐中进行放大发酵,进一步探究其液态发酵中多糖的生长变化,为多糖的产业化应用提供科学数据。主要研究结果如下:(1)筛选出液态发酵高产灵芝菌丝体多糖的优势菌株。通过液态发酵的方式对实验室保藏的41株灵芝杂交菌株在菌丝体干重、胞内多糖含量、多糖得率、分子量分布特征和细胞免疫活性等方面进行了系统分析。筛选出菌丝体干重最高的菌株GZ04,菌丝体干重为29.86 g/L,比亲本G0130、G0154分别提高95%、63%;胞内多糖得率最高的菌株GZ02,胞内多糖得率为1.34 g/L,比亲本G0130、G0154分别提高64%、101%。(2)高稳定性液体菌种最优制作工艺研究:通过研究液体菌种制备工艺流程,发现平板培养、初级摇瓶培养、摇瓶制备和发酵罐制备等过程中的影响因素。通过优化平板装液量和选择最佳菌丝体位置,以及初级摇瓶培养时间和还原率,结合人工神经网络和遗传算法优化碳源和氮源浓度,获得最优液体菌种制作工艺参数。在最优条件下,生物量和还原糖得率分别提高18.03%和27.41%。比较不同摇瓶规模和发酵罐制备液体菌种的代谢活力,发现250 mL摇瓶和50 L发酵罐制备的液体菌种最佳,综合生物量和代谢活力考虑,液体菌种选择培养5天。(3)研究胞内高分子量多糖的最优培养基,以灵芝为指标,通过筛选碳源和氮源并探究氮源浓度影响。最佳碳源为葡萄糖,最佳氮源为酵母自溶粉。分子量和含量随氮源浓度升高而增加和下降。BP神经网络结合遗传算法优化得到最佳培养基配方:葡萄糖29.0 g/L、酵母自溶粉4.0 g/L、七水硫酸镁0.3 g/L,优化后含量提高40.8%。(4)研究接种量、通气量和不同规模发酵等因素对灵芝胞内高分子量多糖的影响。最佳接种量为0.5 g/100 mL,通气量为1.0 vvm时菌丝体生物量和多糖含量最高。不同发酵规模下,胞内多糖含量由高到低为250 mL摇瓶、50 L发酵罐和3 L发酵罐。补料方法可提高菌丝体生物量和多糖含量。该方法可减少工业化生产成本并提高底物利用率。

关键词：灵芝液态发酵菌株筛选菌丝体多糖

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CO2浓度和光照对金针菇子实体早开伞现象的影响

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食用菌学报 2025年第2期 1-8页

作者：刘建雨王瑞娟陆欢徐珍于海龙宋春艳谭琦尚晓冬农业部应用真菌资源与利用重点开放实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点实验室上海市农业科学院食用菌研究所

对金针菇（Flammulina filiformis）子实体早开伞程度进行分级，并以菌盖直径为主要指标，考察不同体积浓度（3%和1.5%）CO2和光照（蓝光400 lx）对早开伞的影响，同时检测早开伞和未开伞子实体中激素含量。结果表明：3%CO2可以有效抑... 详细信息

对金针菇（Flammulina filiformis）子实体早开伞程度进行分级，并以菌盖直径为主要指标，考察不同体积浓度（3%和1.5%）CO2和光照（蓝光400 lx）对早开伞的影响，同时检测早开伞和未开伞子实体中激素含量。结果表明：3%CO2可以有效抑制菌盖开伞；与对照（黑暗条件，未开伞）相比，光照组菌盖直径增大、早开伞严重。在早开伞的菌盖中，9种激素含量减少，1种激素含量增加；而在早开伞的菌柄中，7种激素含量增加，3种激素含量减少。研究结果为工厂化生产中解决金针菇早开伞问题提供参考。

关键词：金针菇 CO2 蓝光激素早开伞

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粗毛纤孔菌新品种‘沪黄1号’

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园艺学报 2021年第S02期48卷 3023-3024页

作者：李正鹏李玉陈万超张赫男吴迪杨焱上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403

‘沪黄1号’是从新疆新和县野生粗毛纤孔菌中系统选育出的新品种。子实体1年生,单生或覆瓦状叠生,直径12cm左右,烘干后变黑;菌盖表面黄褐色,平展至半圆形,被粗毛,边缘钝。接种后菌包培养140 d可进入出菇阶段,20~25 d采收,每袋900 g左右... 详细信息

‘沪黄1号’是从新疆新和县野生粗毛纤孔菌中系统选育出的新品种。子实体1年生,单生或覆瓦状叠生,直径12cm左右,烘干后变黑;菌盖表面黄褐色,平展至半圆形,被粗毛,边缘钝。接种后菌包培养140 d可进入出菇阶段,20~25 d采收,每袋900 g左右湿料一潮菇平均产量94 g,子实体含水量88%,生物转化率26.11%,子实体总黄酮含量达7.27%,粗多糖含量达3.46%。适宜代料栽培。

关键词：粗毛纤孔菌高产高总黄酮含量

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不同温度对羊肚菌淀粉代谢的调控研究

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上海农业学报 2024年第2期40卷 31-36页

作者：白静李欣苹赵怡然陈辉张津京上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部应用真菌资源与利用重点开放实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点实验室上海201403 上海海洋大学食品学院上海201306 南京农业大学生命科学学院南京210014

研究了不同温度对淀粉培养基中羊肚菌菌丝生长、淀粉酶活[腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(AGPase)、α-淀粉酶、β-淀粉酶、淀粉分支酶(DBE)、淀粉脱分支酶(SBE)]、淀粉含量(直链淀粉、支链淀粉)和淀粉相关酶基因表达的影响。结果表明:在10... 详细信息

研究了不同温度对淀粉培养基中羊肚菌菌丝生长、淀粉酶活[腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(AGPase)、α-淀粉酶、β-淀粉酶、淀粉分支酶(DBE)、淀粉脱分支酶(SBE)]、淀粉含量(直链淀粉、支链淀粉)和淀粉相关酶基因表达的影响。结果表明:在10—25℃温度条件下,随着温度的增加,淀粉培养基上菌丝生长速度加快,菌丝浓密度和菌丝尖端分叉增加;AGPase、DBE、α-淀粉酶、β-淀粉酶在20℃下活性最高,SBE则在10℃下活性最高。直链淀粉含量和支链淀粉剩余含量在10℃下最高。相关性分析结果显示,温度与α-淀粉酶活性和SBE活性相关性不显著,与β-淀粉酶活性、AGPase活性、DBE活性呈显著负相关,与直链淀粉含量和支链淀粉含量呈极显著负相关。综上,在15—20℃温度条件下,羊肚菌对培养基中的淀粉代谢能力最强,10℃低温或者25℃高温都不利于羊肚菌对培养基质中淀粉的利用。研究可为羊肚菌的菌种制作和人工种植提供理论支撑。

关键词：羊肚菌淀粉酶活淀粉含量基因表达

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基于HS-SPME-GC-MS法分析春生田头菇子实体不同部位挥发性成分

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食品与生物技术学报 2021年第8期40卷 95-104页

作者：陆欢徐宁刘建辉王小艳夏义良上海市农业科学院食用菌研究所/农业农村部应用真菌资源与利用重点开放实验室/国家食用菌工程技术研究中心/上海市农业遗传育种重点实验室上海201403 湖南省食用菌研究所湖南长沙410013 南京财经大学食品科学与工程学院江苏南京210023

春生田头菇具有独特的香味风格。采用顶空固相微萃取法结合气相色谱-质谱联用技术,对春生田头菇子实体菌盖和菌柄的挥发性成分进行测定。从菌盖和菌柄分别鉴定出48种和47种化合物,其中16种为相同物质,占挥发性物质的20.25%。主要以烷类... 详细信息

春生田头菇具有独特的香味风格。采用顶空固相微萃取法结合气相色谱-质谱联用技术,对春生田头菇子实体菌盖和菌柄的挥发性成分进行测定。从菌盖和菌柄分别鉴定出48种和47种化合物,其中16种为相同物质,占挥发性物质的20.25%。主要以烷类、酮类、酯类和酸类化合物为主,其中十甲基环五硅氧烷、2-甲基-3-庚酮、丙位壬内酯、3-羟基扁桃酸乙酯和苯乙酸为菌盖和菌柄共同含有且相对含量最高的化合物。对春生田头菇挥发性成分进行了系统研究,为进一步开发利用田头菇中活性物质提供支撑。

关键词：春生田头菇挥发性成分顶空固相微萃取气相色谱-质谱联用

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高雄山虫草生物学特性及人工驯化条件优化

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菌物学报 2021年第6期40卷 1480-1497页

作者：杨双双林群英朱丽娜鲍大鹏陈明杰李传华上海海洋大学食品学院上海201306 上海市农业科学院食用菌研究所国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 南京野生植物综合利用研究院江苏南京210042

高雄山虫草Cordyceps tenuipes是一种重要的珍稀野生虫草,无性型为细脚棒束孢Isaria tenuipes。对采集的野生无性型高雄山虫草生物学特性进行了研究,采用小麦和大米为栽培基质,通过添加不同营养成分进行人工驯化和栽培条件优化,对后续... 详细信息

高雄山虫草Cordyceps tenuipes是一种重要的珍稀野生虫草,无性型为细脚棒束孢Isaria tenuipes。对采集的野生无性型高雄山虫草生物学特性进行了研究,采用小麦和大米为栽培基质,通过添加不同营养成分进行人工驯化和栽培条件优化,对后续提高其孢梗束产量和商业化栽培具有重要意义。试验结果表明,该虫草菌丝在固体和液体培养条件下生长所需的最佳营养组成一致,通过单因素和多因素正交试验得出菌丝在固体和液体条件下生长的最佳培养基配方为蔗糖30g/L、酵母粉15g/L、磷酸二氢钾2g/L、七水硫酸镁2g/L,最佳培养条件为温度25℃,pH7。以小麦为培养基栽培的孢梗束生物学效率介于(45.750±6.062)%-(67.820±6.018)%,总体优于大米培养基(23.410±5.242)%-(36.880±8.812)%。以添加蚕蛹粉的小麦培养基栽培的孢梗束生物转化率最高,达67.820%,高于已有的报道。通过生物学特性分析和人工驯化条件的优化,为高雄山虫草的规模化人工栽培提供参考。

关键词：无性型碳源氮源正交试验培养

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灵芝液态深层发酵产物中10种不饱和脂肪酸类化合物的鉴定

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菌物学报 2021年第7期40卷 1800-1810页

作者：朱晓璐张劲松周帅韩伟唐庆九王金艳冯娜冯杰上海市农业科学院食用菌研究所国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 华东理工大学药学院制药工程与过程化学教育部工程研究中心上海市新药设计重点实验室上海200237

通过规模化液态深层发酵获得灵芝发酵产物,采用多种硅胶色谱柱层析及重结晶的方式,从中分离得到10个化合物。通过核磁、质谱等波谱分析,鉴定出这些化合物均属于含羟基或酮基的不饱和脂肪酸类化合物,分别为(9S,10R,11E,13R)-9,10,13-trih... 详细信息

通过规模化液态深层发酵获得灵芝发酵产物,采用多种硅胶色谱柱层析及重结晶的方式,从中分离得到10个化合物。通过核磁、质谱等波谱分析,鉴定出这些化合物均属于含羟基或酮基的不饱和脂肪酸类化合物,分别为(9S,10R,11E,13R)-9,10,13-trihydroxyoctadec-11-enoicacid(1)和(9S,10R,11E,13S)-9,10,13-trihydroxyoctadec-11-enoicacid(2)的混合物、12S^(*),13S^(*)-dihydroxy-9-oxo-10(E)-octadecenoicacid(3)、9R^(*),10R^(*)-dihydroxy-13-oxo-11(E)-octadecenoicacid(4)、12S^(*),13R^(*)-dihydroxy-9-oxo-10(E)-octadecenoicacid(5)、9S^(*),10R^(*)-dihydroxy-13-oxo-11(E)-octadecenoicacid(6)、10(S)-hydroxy-8(Z)-octadecenoic acid(7)、12-oxooctadeca-8,10-dienoic acid(8)、9,12-dihydroxy-10-eicosenoic acid(9)和9-oxooctadeca-10,12-dienoicacid(10)。这些化合物均为首次从灵芝发酵产物中获得,且具有不同程度的体外抗肿瘤活性。其中,化合物8和化合物10对L1210细胞增殖抑制的IC_(50)值分别为13.00μmol/L和16.88μmol/L,对K562细胞增殖亦有良好的抑制效果,是具有抗肿瘤潜力的天然产物。

关键词：灵芝规模化深层发酵结构鉴定体外抗肿瘤活性

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金针菇子实体综合利用初探

金针菇子实体综合利用初探

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第十二届药用真菌学术研讨会

作者：贾薇冯婷余冬生刘肖肖王慧敏张继宁汪雯翰张劲松上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室

以金针菇工厂化子实体、切根及栽培废弃物为原料,研究功能成分如多糖等活性物质的分离纯化及结构;结合免疫、抗冻和降脂体内、外药理试验及检测技术为循环利用金针菇及其废弃物提供明确的科学技术支撑。对金针菇子实体水溶性多糖进行体... 详细信息

以金针菇工厂化子实体、切根及栽培废弃物为原料,研究功能成分如多糖等活性物质的分离纯化及结构;结合免疫、抗冻和降脂体内、外药理试验及检测技术为循环利用金针菇及其废弃物提供明确的科学技术支撑。对金针菇子实体水溶性多糖进行体外免疫活性试验,结果表明FVPB2和FVPB1具有较好的免疫调节作用:(1)可刺激小鼠脾淋巴细胞增值,并激活淋巴细胞,使其释放免疫球蛋白;(2)刺激小鼠B淋巴细胞增值并激活,并可以激活B细胞中的调节性B细胞(Breg)使其释放IL-10;同时可以激活T淋巴细胞和巨噬细胞,使被激活的免疫细胞执行各自的生物功能。对金针菇子实体水提后残渣,研究不同提取方法获得金针菇抗冻活性多糖,结合抗冻实验模型获得金针菇抗冻活性多糖的制备工艺,发现经冷处理的碱提取物具有较好的抗冻活性,可以有效提高多糖抗冻活性。利用体外细胞模型、体内斑马鱼模型、高脂饮食小鼠模型和粪菌移植等手段等研究降脂作用。经脂质沉积细胞模型和斑马鱼幼鱼模型初步验证发现,金针菇水溶性多糖能够明显减少Ox-LDL诱导的脂质沉积细胞中脂滴的数量,且能显著抑制脂质在斑马鱼幼鱼的胃肠道和血管内沉积,抑制效果呈现剂量依赖性。高脂小鼠喂养实验显示金针菇水溶性切根多糖可显著降低高脂小鼠体重增长量和肝脏指数,降低小鼠血清血脂水平、小鼠肝脏脂质水平,增加了载脂蛋白A1的水平,降低了载脂蛋白B的水平。并改善了高脂饮食导致的小鼠脂肪肝、脂肪空泡的现象,表现出明显的肝保护作用,并改善高脂小鼠的肠道菌群结构,显示金针菇水溶性多糖具有良好的降脂活性。对切根和菌渣等金针菇废弃物调研目前处理工艺和利用现状,诊断限制其处理处置的主要制约因素。选取以堆肥和炭化处理模式,提升堆肥和炭化产品质量,促进废弃物资源化利用。

关键词：金针菇多糖理化性质结构活性循环利用

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双孢蘑菇培养料一次发酵——预湿堆置时间对麦秸秆结构及成分的影响

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食用菌学报 2021年第5期28卷 64-70页

作者：王倩肖婷婷黄建春隽加香张津京陈辉徐佳佳蔡斌强上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 上海联中食用菌专业合作社上海201516

为探讨双孢蘑菇(Agaricus bisporus)培养料制作过程中预湿阶段不同堆置时间对麦秸秆温度、结构、持水量及成分的影响,将麦秸秆方捆浸泡90 s至饱和,横排堆置于场地上,分别堆置0(对照)、24、48、72、96、120 h。每组随机取3捆测量温度,采... 详细信息

为探讨双孢蘑菇(Agaricus bisporus)培养料制作过程中预湿阶段不同堆置时间对麦秸秆温度、结构、持水量及成分的影响,将麦秸秆方捆浸泡90 s至饱和,横排堆置于场地上,分别堆置0(对照)、24、48、72、96、120 h。每组随机取3捆测量温度,采用扫描电子显微镜观察麦秸秆的内外表面结构,采用傅里叶变换红外光谱仪检测外表面的官能团信息,并测定持水量以及可溶性糖、半纤维素、纤维素和木质素含量。结果表明:麦秸秆堆置0~72 h温度由16.6℃(0 h)升高至64.5℃(72 h);堆置24~48 h蜡质晶体明显减少,堆置48 h后麦秸秆内表面结构开始打开;堆置24~120 h Si-O伸缩振动峰和多糖类的C-O伸缩振动峰强度降低,表明麦秸秆外表面蜡质层、多糖类物质变少;麦秸秆持水量由堆置0 h的565.2%增加至72 h的701.8%,在堆置24 h后可溶性糖含量迅速下降,在堆置24~72 h期间木质纤维素组分没有变化;堆置96 h时,麦秸秆方捆温度达到69.3℃,与堆置0 h相比麦秸秆中半纤维素含量降低了16.9%;堆置120 h,麦秸秆方捆的温度降低至65.5℃,麦秸秆结构破坏明显,木质纤维素骨架暴露,与堆置0 h相比纤维素和木质素含量分别下降了11.7%和13.6%。

关键词：双孢蘑菇麦秸秆堆置结构成分

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面向规模化应用的竹荪多糖液态深层发酵工艺优化

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食品科学 2020年第2期41卷 181-187页

作者：冯杰冯娜刘艳芳唐庆九周帅刘方张劲松杨焱农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所

利用规模化生产工艺提高竹荪菌丝体胞内多糖得率,通过对竹荪菌丝体液态深层发酵培养基组分的筛选,采用单因素试验与Box-Behnken响应面法确定竹荪菌丝体液态深层发酵的最佳培养基配方为:葡萄糖32.3 g/L,酵母粉4.5 g/L,磷酸二氢钾2.1 g/L... 详细信息

利用规模化生产工艺提高竹荪菌丝体胞内多糖得率,通过对竹荪菌丝体液态深层发酵培养基组分的筛选,采用单因素试验与Box-Behnken响应面法确定竹荪菌丝体液态深层发酵的最佳培养基配方为:葡萄糖32.3 g/L,酵母粉4.5 g/L,磷酸二氢钾2.1 g/L,硫酸镁2.5 g/L。在此条件下竹荪胞内多糖得率的预测值为1.23 g/L,摇瓶实验验证胞内多糖得率为1.19 g/L,与预测值相当。在5、30 L和50 L发酵罐中验证胞内多糖得率分别达到1.43、1.28 g/L和1.26 g/L,分别高于预测值16.26%、4.06%和2.43%。本研究优化获得的竹荪菌丝体液态深层发酵工艺有效促进了竹荪胞内多糖的高产,该工艺可为竹荪多糖的规模化生产应用提供较好的参考。

关键词：竹荪多糖菌丝体发酵工艺优化规模化生产

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