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多彩菌物美丽中国——中国菌物学会2019年学术年会

作者：冯杰冯娜刘艳芳唐庆九周帅颜梦秋唐传红张劲松农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所

本研究利用液态深层发酵法以提高灵芝三萜的含量为目的,对发酵过程进行了系统的优化。（1）对灵芝菌丝体液态深层发酵中油酸的添加策略进行研究。结果表明添加油酸对灵芝三萜的合成有重要的促进作用。在发酵的0 h添加30 m L/L的油酸效... 详细信息

本研究利用液态深层发酵法以提高灵芝三萜的含量为目的,对发酵过程进行了系统的优化。（1）对灵芝菌丝体液态深层发酵中油酸的添加策略进行研究。结果表明添加油酸对灵芝三萜的合成有重要的促进作用。在发酵的0 h添加30 m L/L的油酸效果最佳。在6 L发酵罐上验证灵芝三萜的最大值为1.076 g/L,与模型的预测值1.080 g/L相差不多。（2）通过不同搅拌转速条件下灵芝三萜液态深层发酵的跟踪分析,对发酵过程的数据进行进一步分析,通过分析比生长速率,比消耗速率和比合成速率三个动力学参数,提出两阶段搅拌转速控制策略,即在发酵40 h前,控制搅拌转速为150 rpm,40 h后调整转速至100 rpm。运用此发酵策略,使得灵芝三萜的最大浓度为0.720 mg/100 mg,灵芝三萜对葡萄糖得率为0.051 g/g,灵芝三萜生产强度为0.0055 g/（L·h）,相比于最好的单因素搅拌转速分别提高了5.56%,0.66%和20.59%。（3）在对不同温度下灵芝菌丝体液态深层发酵合成灵芝三萜的过程进行详尽分析的基础上,建立液态深层发酵动力学模型,并分析了温度与动力学参数之间的函数关系,提出灵芝菌丝体高产量、高得率和高生产强度液态发酵合成灵芝三萜的温度控制轨迹:在发酵初始阶段（0-61 h）控制发酵温度为32℃以维持较高的菌丝体生长速率和灵芝三萜合成速率;发酵中期（62-127 h）,逐步将发酵温度降到31-30℃以获取代谢流强化和菌丝体衰亡之间的最佳平衡;然后维持29℃至发酵结束以提高菌丝体后续合成灵芝三萜的能力。采用这一最佳温度控制轨迹,灵芝三萜产量（0.269 g/L）、对葡萄糖产率（0.0101 g/g）和生产强度[0.00207 g/（L h）]比29℃恒温发酵分别提高了27.32%、13.94%和37.11%。（4）在50 L发酵罐中采用四种补料培养方式对灵芝菌丝体液态深层发酵合成灵芝三萜进行了比较。实验发现通过补料可以明显地促进灵芝菌丝体的生长和灵芝三萜的合成,同时还发现不同的补料方式对菌丝体生长和灵芝三萜合成有不同的影响:采用指数补料方式可获得较高的菌丝体浓度,并提高了灵芝三萜的含量,与传统的发酵方式相比,采用此补料策略取得了较好的效果。发酵终点灵芝菌丝体干重达到17.68 g/L,灵芝三萜含量达到4.58 g/100 g干菌丝体,分别比分批发酵提高了65.70%和100.88%。

关键词：灵芝液态深层发酵灵芝三萜控制策略搅拌转速温度补料培养

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运用SNP-CAPS分子标记定位香菇重要功能基因的研究

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上海农业学报 2015年第2期31卷 13-17页

作者：黄杰谭琦鲍大鹏国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用重点开放实验室上海市农业遗传育种重点实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海201403 上海海洋大学食品学院上海201306

根据香菇单核菌丝体135A和135B的全基因组测序,通过生物信息学方法分析筛选出香菇功能基因CAP、GLA1、TLG1结构域中的非同义SNP位点,开发出3对SNP-CAPS分子标记。结果表明:这3对功能基因SNP-CAPS分子标记可将23个香菇单核体供试菌株分成... 详细信息

根据香菇单核菌丝体135A和135B的全基因组测序,通过生物信息学方法分析筛选出香菇功能基因CAP、GLA1、TLG1结构域中的非同义SNP位点,开发出3对SNP-CAPS分子标记。结果表明:这3对功能基因SNP-CAPS分子标记可将23个香菇单核体供试菌株分成135A型(分别为16株、20株、2株)和135B型(分别为7株、3株、21株),这些标记表现出的多态性为进一步研究香菇菌株的来源和功能基因的定位提供参考价值;并建立起可以简单、快速、准确地调查重要功能基因的SNP位点变异情况的方法。

关键词：香菇功能基因非同义 SNP SNP-CAPS 标记

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草菇漆酶基因生物信息学及诱导转录分析

草菇漆酶基因生物信息学及诱导转录分析

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2012年中国菌物学会学术年会

作者：朱刚鲍大鹏吴林国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用专业重点实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所

漆酶是一类含铜的多酚氧化酶(EC1.10.3.2),广泛存在于真菌中,在木质素的降解、酚类化合物转化成低毒物质、子实体的形态发育等过程中起作用。草菇V23菌株能够产生多种形式的胞外漆酶,通过对其基因组分析,发现了11种漆酶基因,lacl-1ac10... 详细信息

漆酶是一类含铜的多酚氧化酶(EC1.10.3.2),广泛存在于真菌中,在木质素的降解、酚类化合物转化成低毒物质、子实体的形态发育等过程中起作用。草菇V23菌株能够产生多种形式的胞外漆酶,通过对其基因组分析,发现了11种漆酶基因,lacl-1ac10成簇的分布在Scaffold 6上,而lac11单独分布在Scaffold 8上。根据进化树和内含子的相对位置,将11个漆酶基因分为两个亚族:一类包括lac6和lac11,另外一类包括lacl-lac5和lac7-lac10。该菌株漆酶基因的5端上游2000bp左右区域中存在多个潜在的顺式作用元件序列位点,包括TATAbox、CAATbox、GCbox、MRE、XRE、CreA结合位点和氮因子调控位点等。这些调控元件的存在部分地对应了菌株摇瓶发酵条件下漆酶基因的表达规律。草菇V23漆酶的活性易受到培养基中的氮源、碳源、铜离子和锰离子的影响,另外,芳香族化合物,如2,5-二甲基苯胺也能够影响漆酶的活性。反转录PCR结果证实了以上物质对漆酶活性的作用体现在基因的转录水平。我们检测到了8种漆酶基因的转录,lac2、lac3和lac7在以上诱导条件下一直没有转录。由于对草菇的遗传学背景的了解比较薄弱,因而在分子水平上对草菇的分解木质纤维素的研究一直没有重要的突破。本研究希望借助于草菇的全基因组测序的完成,在全基因组水平上更好的了解草菇降解木质纤维素的机制。

关键词：草菇漆酶漆酶亚族转录调控生物信息学

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自交选育适用工厂化栽培的白色金针菇菌种

自交选育适用工厂化栽培的白色金针菇菌种

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第九届全国食用菌学术研讨会

作者：徐珍尚晓冬谭琦农业部应用真菌资源与利用重点开放实验室上海市食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点实验室上海市农业科学院食用菌研究所

以黄色金针菇菌株F3为亲本,选取有性孢子进行多孢自交实验。选育出性状优良的白色金针菇菌株F3-6和F3-31,再将两个自交子代各自进行多孢自交,选育出性状优良的白色自交子代6-299、6-318、31-70。对自交后代的综合分析表明,不同自交后代... 详细信息

以黄色金针菇菌株F3为亲本,选取有性孢子进行多孢自交实验。选育出性状优良的白色金针菇菌株F3-6和F3-31,再将两个自交子代各自进行多孢自交,选育出性状优良的白色自交子代6-299、6-318、31-70。对自交后代的综合分析表明,不同自交后代间在自交成功率、自交后代子实体颜色、菌丝生长速度和子实体单产等性状方面表现各自特点,其中F3的自交获取双核体成功率最高,为98.2%;F3-6和F3-3的成功率分别为95.1%和70.0%;3组自交后代可统计栽培产量的菌株数占参加栽培实验的菌株数的比例分别为95.4%、92.4%和66.0%。两组数据分别反映了不同组合间交配型因子的差异程度和自交后代对栽培条件的适应性。3组自交后代子实体颜色与其亲本相比均产生分化,F3的菌株为黄色,自交后代中白色菌株占26.9%,黄色菌株占73.1%;F3-6和F3-31的菌株为白色,自交后代中白色菌株占49%和22.2%,黄色菌株占51%和77.8%;自交子代平均生长周期均短于其亲本,其中F3-6和F3-31的自交后代6-299、6-318、31-70的生长周期均短于亲本及F3,单产均高于亲本及F3。栽培实验结果显示,菌丝生长速度和单产间不具有相关性,用多孢自交的方法选育白色金针菇菌种是有效可行的。

关键词：金针菇多孢自交菌株选育

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灵芝中真菌免疫调节蛋白LZ-8和LZ-9的比较分析

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上海农业学报 2017年第4期33卷 1-5页

作者：鲍大鹏白睿高英女李燕王莹国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海201403 上海海洋大学食品学院上海201306

利用生物信息学方法从蛋白质基本理化特性、蛋白质三维结构以及蛋白表面电荷性质等方面,对灵芝中两种真菌免疫调节蛋白LZ-8和LZ-9进行了预测和比较分析。结果表明:LZ-9蛋白结构柔性较好,N端疏水性更强;利用同源建模构建的LZ-9三维结构... 详细信息

利用生物信息学方法从蛋白质基本理化特性、蛋白质三维结构以及蛋白表面电荷性质等方面,对灵芝中两种真菌免疫调节蛋白LZ-8和LZ-9进行了预测和比较分析。结果表明:LZ-9蛋白结构柔性较好,N端疏水性更强;利用同源建模构建的LZ-9三维结构模型具有稳定的空间立体结构。比较分析LZ-9与LZ-8蛋白表面静电势能,发现LZ-9中5个突变(R9G、K41Q、D45G、N58D和T89K)改变了蛋白表面静电性质,影响了LZ-9与细胞表面受体的结合,从而产生了与LZ-8不同的生物功能。

关键词：灵芝理论预测真菌免疫调节蛋白

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中国香菇育种技术进展及自交的应用

中国香菇育种技术进展及自交的应用

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中国菌物学会第六届会员代表大会（2014年学术年会）暨贵州省食用菌产业发展高峰论坛

作者：谭琦尚晓冬宋春艳章炉军于海龙上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点开放实验室

本文系统回顾、分析了我国香菇育种工作的发展历程,并重点介绍了利用自交技术对香菇‘135’、‘939’及其杂交后代‘申香16号’等多个香菇栽培品种进行的F2代群体构建与性状分析结果。研究发现,自交过程中,来自于杂合亲本的遗传物质发... 详细信息

本文系统回顾、分析了我国香菇育种工作的发展历程,并重点介绍了利用自交技术对香菇‘135’、‘939’及其杂交后代‘申香16号’等多个香菇栽培品种进行的F2代群体构建与性状分析结果。研究发现,自交过程中,来自于杂合亲本的遗传物质发生了重组,并产生了新的基因型,表现出超显性、上位性等遗传效应。自交过程使这些香菇品种的F2代群体的多数性状都表现程度不同的分化,其中少量综合表现超亲的材料已经用于工厂化香菇新品种的培育。自交技术的应用将香菇杂种优势利用及杂交育种由先前的F1代推进到F2代。

关键词：香菇育种自交

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桑黄子实体和菌丝体中次级代谢物的分离纯化和生物活性的研究

桑黄子实体和菌丝体中次级代谢物的分离纯化和生物活性的研究

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中国菌物学会2015年学术年会

作者：杨焱邵倩吴娜冯娜张超汪雯翰张劲松唐传红农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所

桑黄纤孔菌Inonotus sanghuang Sheng ***,***.&***,俗称桑黄菇、桑耳,是近年来开发的一种寄生于桑树的多年生药用真菌,最早收载于李时珍《本草纲目》中,《药性论》中称桑臣、桑耳。研究发现桑黄中存在一些抗氧化和抗肿瘤的活性成分... 详细信息

桑黄纤孔菌Inonotus sanghuang Sheng ***,***.&***,俗称桑黄菇、桑耳,是近年来开发的一种寄生于桑树的多年生药用真菌,最早收载于李时珍《本草纲目》中,《药性论》中称桑臣、桑耳。研究发现桑黄中存在一些抗氧化和抗肿瘤的活性成分,在治疗癌症、保肝护肝、增强免疫、神经修复等方面有活性作用。对桑黄中次级代谢物的研究已有一些报道,但多以子实体中的为主,菌丝体中报道的较少。对于子实体和菌丝体生长过程中产生的次级代谢物有何差异,目前还鲜有报道,菌丝体的功效是否可替代子实体也尚不明确。本研究以我们收集、保藏并进行分子鉴定的桑黄菌株Inonotus sanghuang为研究对象,分别进行了子实体栽培和液体及固体发酵培养,对栽培子实体和发酵菌丝体中的次级代谢物进行了分离纯化和抑制肿瘤细胞生长、抗氧化、抗衰老及体外降血糖活性研究。分别用等体积的石油醚,氯仿,乙酸乙酯和正丁醇依次萃取桑黄子实体醇提物,得到四种有机溶剂萃取相。以体外修复受损神经细胞和清除自由基能力为指标进行有效部位的筛选。实验结果表明:四个萃取相的抗衰老能力存在一定的差异。其中乙酸乙酯相和正丁醇相的活性要好于其他两个萃取相。乙酸乙酯和正丁醇与损伤的神经细胞之间均有显著性差异(P<0.05)。乙酸乙酯相清除超氧阴离子,过氧化氢和DPPH的IC50值分别为589.17μg/mL,5.60μg/mL,209.00μg/mL。正丁醇相清除三种自由基的IC50值分别为:483.12μg/mL,0.42μg/mL,56.22μg/mL。用硅胶、Sephadex LH-20等柱层析手段对抗衰老活性较高的乙酸乙酯相进行分离纯化,经过柱层析和重结晶反复纯化,得到11个单一化合物。对纯化后的样品进行1H NMR,13C NMR,DEPT,1H-1HCOSY,HMQC等波谱分析并结合相关文献报道数据,鉴定出六种化合物,它们分别为:星鱼甾醇,麦角甾-6,22-二烯-3β,5α,8α-三醇,灵芝醇B,灵芝酸DM,Inoscavin A,麦角甾-7,22-二烯-3β-醇十五烷酸酯。除了灵芝酸DM,其余的化合物对肿瘤细胞K562的生长具有很好的抑制作用。利用液体发酵、木屑固体发酵和米饭固体发酵三种方式培养桑黄菌丝体,对菌丝体醇提物的体外抗氧化、抗肿瘤和抗衰老生物活性进行了研究。结果发现,木屑固体发酵、液体发酵和米饭固体发酵的菌丝体醇提物清除H2O2自由基的IC50值分别为78.28±0.32、27.73±0.57和7.84±0.37μg/mL;米饭培养的桑黄菌丝体醇提物在低浓度500μg/mL下对超氧阴离子自由基清除作用到达80%,在相同的浓度下对DPPH自由基清除率也明显高于其它两种方法,表现出较高的抗氧化活性。木屑以及米饭培养方法得到的菌丝体对PC12神经细胞损伤修复均有较好的效果,液体培养的桑黄菌丝体表现的修复作用较低;液体发酵培养的菌丝体醇提物浓度在100μg/mL时,对肿瘤细胞HepG2的抑制率到达70%,高于其他两种培养方法的抑制作用。采用有机溶剂萃取、硅胶柱分离和高速逆流色谱法对固体发酵培养的桑黄菌丝体中的次级代谢物进行了分离纯化,经硅胶柱分离纯化出6个化合物,利用红外光谱(IR)、紫外光谱(UV),质谱(MS)及核磁共振技术(NMR)对分离纯化出的化合物进行了结构解析。经鉴定其中2个化合物为脂肪酸,其余化合物分别为Ergosterol麦角甾醇,Ergosta-7,22-dien-3β-yl pentadecanoate,原儿茶醛Benzaldehyde,3,4-dihydroxy-,3,4-二羟基苯甲醛;经高速逆流色谱法结合硅胶柱层析纯化出7个化合物,分别为Inoscavin A,24-Ethylcholesta-5,22-dien-3beta-ol,Baicalein,Naringenine-7-rhamnosidoglucoside,Benzaldehyde,3,4-dihydroxy-,3,4-二羟基苯甲醛。对得到的化合物进行了体外抑制肿瘤细胞生长和抗氧化活性实验,结果表明:Benzaldehyde,3,4-dihydroxy-,3,4-二羟基苯甲醛,Inoscavin A,Naringenine-7-rhamnosidoglucoside和Baicalein在抗肿瘤和抗氧化实验中都表现出较好的活性,对K562细胞的抑制作用效果明显。在清除过氧化氢实验中,柚皮苷和黄芩素在浓度80μg/mL时,清除率就达到70%左右。采用细胞来源的二肽基肽酶Ⅳ抑制剂筛选模型对桑黄子实体和菌丝体中分离的化合物进行了体外降血糖活性研究,子实体化合物麦角甾-7,22-二烯-3β-醇十五酸酯和麦角甾-7,-二烯-3β-醇对DPPIV抑制效果最佳;菌丝体化合物中原儿茶醛、柚皮

关键词：桑黄子实体菌丝体发酵培养次级代谢物生物活性

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香菇主要育种技术研究进展

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生物学杂志 2015年第2期32卷 92-95页

作者：赵妍林锋宋春艳谭琦尚晓冬陈明杰上海市农业科学院食用菌研究所上海市农业遗传育种重点开放实验室农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海201403 上海海洋大学食品学院上海201306

香菇是仅次于双孢蘑菇的世界第二大类食用菌,在中国食用菌产业中占有举足轻重的地位。综述了香菇的主要育种技术及其应用研究进展,包括人工选择育种、杂交育种、诱变育种、原生质体融合育种、基因工程育种以及分子标记辅助育种等,并针... 详细信息

香菇是仅次于双孢蘑菇的世界第二大类食用菌,在中国食用菌产业中占有举足轻重的地位。综述了香菇的主要育种技术及其应用研究进展,包括人工选择育种、杂交育种、诱变育种、原生质体融合育种、基因工程育种以及分子标记辅助育种等,并针对当前香菇产业发展需求,对香菇育种今后的发展方向进行了展望。

关键词：香菇育种技术育种趋势

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桑黄活性化合物的分离纯化及抗氧化和降血糖活性的研究

桑黄活性化合物的分离纯化及抗氧化和降血糖活性的研究

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2012年中国菌物学会学术年会

作者：杨焱王钦博冯娜汪雯翰吴娜刘艳芳张劲松农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所

研究采用四种不同极性的有机溶剂对桑黄（Phellinus Baumii）子实体乙醇提取液依次萃取得到石油醚相、氯仿相、乙酸乙酯相、正丁醇相和醇水相;对五种萃取相分别进行了清除NO自由基、超氧阴离子、羟基自由基、HO自由基、DPPH自由基及还... 详细信息

研究采用四种不同极性的有机溶剂对桑黄（Phellinus Baumii）子实体乙醇提取液依次萃取得到石油醚相、氯仿相、乙酸乙酯相、正丁醇相和醇水相;对五种萃取相分别进行了清除NO自由基、超氧阴离子、羟基自由基、HO自由基、DPPH自由基及还原力测定和抗脂质过氧化实验,结果表明乙酸乙酯相的抗氧化活性均高于其它萃取相。采用硅胶、Sephadex LH-20和聚酰胺等对抗氧化活性较高的乙酸乙酯相继续分离纯化,得到5个单一化合物:PB-EA-1、PB-EA-2、PB-EA-3、PB-EA-4和PB-EA-5。对PB-EA-2、PB-EA-3、PB-nB三种样品进行抗氧化和修复损伤神经细胞实验,结果发现分离得到的化合物PB-EA-3抗氧化活性显著,对其进行核磁共振及质谱等波谱分析并结合相关文献报道数据,解析得到其化学式(CHO)和化学结构。对桑黄醇提物和乙酸乙酯萃取物进行了链脲佐菌素糖尿病小鼠的降血糖实验,结果表明,与模型组相比,给药后第7天,桑黄醇提取物高剂量组和乙酸乙酯萃取物中高剂量组均能明显地降低糖尿病小鼠的空腹血糖（P<0.05）;给药后第14天,桑黄醇提取物中剂量组和乙酸乙酯萃取物低剂量组能明显降低了糖尿病小鼠的空腹血糖（P<0.05）,醇提取物高剂量组和乙酸乙酯萃取物中高剂量组极明显地降低糖尿病小鼠的空腹血糖（P<0.01）和糖化血清蛋白（P<0.01）,增加了血清胰岛素水平（P<0.01）。桑黄醇提物中高剂量组和乙酸乙酯萃取物高中低剂量组的视野平均胰岛面积明显增多,能增大糖尿病小鼠的胰岛体积、增加胰岛细胞数目;胰岛素阳性表达的β细胞增多、胰岛素阳性区域IOD均极明显增加。试验说明桑黄醇提取物和乙酸乙酯萃取物均有降低链脲佐菌素糖尿病小鼠的血糖作用,作用效果与增加胰岛β细胞、提高血清胰岛素水平有关。

关键词：桑黄子实体抗氧化降血糖活性化合物

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液态发酵灵芝多糖的优势菌株筛选及定向发酵研究

液态发酵灵芝多糖的优势菌株筛选及定向发酵研究

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第十二届药用真菌学术研讨会

作者：冯杰刘艳芳唐传红张劲松农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所

灵芝是我国著名的药用真菌,研究历史悠久。灵芝多糖作为灵芝的重要代谢产物之一,具有多种药理活性,因此是众多灵芝产品的主要功效成分和标志性成分,产品中多糖含量的多少会显著影响灵芝产品的质量和市场潜力。从液态发酵原料胞外液和菌... 详细信息

灵芝是我国著名的药用真菌,研究历史悠久。灵芝多糖作为灵芝的重要代谢产物之一,具有多种药理活性,因此是众多灵芝产品的主要功效成分和标志性成分,产品中多糖含量的多少会显著影响灵芝产品的质量和市场潜力。从液态发酵原料胞外液和菌丝体获得多糖具有周期短、可定向产生目标产物和易实现规模化生产等优势,是获取灵芝多糖更有效的途径。然而,我国灵芝种质资源丰富,质量参差不齐,缺少适用于液态发酵的优势菌株。本研究对实验室保藏的41株灵芝菌株进行筛选,分别筛选出高产胞内外多糖的菌株,然后在50L发酵罐中进行放大发酵,进一步探究其液态发酵中多糖的生长变化,为多糖的产业化应用提供科学数据。主要研究结果如下:(1)筛选出液态发酵高产灵芝菌丝体多糖的优势菌株。通过液态发酵的方式对实验室保藏的41株灵芝杂交菌株在菌丝体干重、胞内多糖含量、多糖得率、分子量分布特征和细胞免疫活性等方面进行了系统分析。筛选出菌丝体干重最高的菌株GZ04,菌丝体干重为29.86 g/L,比亲本G0130、G0154分别提高95%、63%;胞内多糖得率最高的菌株GZ02,胞内多糖得率为1.34 g/L,比亲本G0130、G0154分别提高64%、101%。(2)高稳定性液体菌种最优制作工艺研究:通过研究液体菌种制备工艺流程,发现平板培养、初级摇瓶培养、摇瓶制备和发酵罐制备等过程中的影响因素。通过优化平板装液量和选择最佳菌丝体位置,以及初级摇瓶培养时间和还原率,结合人工神经网络和遗传算法优化碳源和氮源浓度,获得最优液体菌种制作工艺参数。在最优条件下,生物量和还原糖得率分别提高18.03%和27.41%。比较不同摇瓶规模和发酵罐制备液体菌种的代谢活力,发现250 mL摇瓶和50 L发酵罐制备的液体菌种最佳,综合生物量和代谢活力考虑,液体菌种选择培养5天。(3)研究胞内高分子量多糖的最优培养基,以灵芝为指标,通过筛选碳源和氮源并探究氮源浓度影响。最佳碳源为葡萄糖,最佳氮源为酵母自溶粉。分子量和含量随氮源浓度升高而增加和下降。BP神经网络结合遗传算法优化得到最佳培养基配方:葡萄糖29.0 g/L、酵母自溶粉4.0 g/L、七水硫酸镁0.3 g/L,优化后含量提高40.8%。(4)研究接种量、通气量和不同规模发酵等因素对灵芝胞内高分子量多糖的影响。最佳接种量为0.5 g/100 mL,通气量为1.0 vvm时菌丝体生物量和多糖含量最高。不同发酵规模下,胞内多糖含量由高到低为250 mL摇瓶、50 L发酵罐和3 L发酵罐。补料方法可提高菌丝体生物量和多糖含量。该方法可减少工业化生产成本并提高底物利用率。

关键词：灵芝液态发酵菌株筛选菌丝体多糖

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