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上海农业学报 2019年第6期35卷 11-16页

作者：王倩隽加香陈辉张津京徐珍蔡斌强宋晓霞黄建春上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 上海联中食用菌专业合作社上海201516

为筛选出适合工厂化栽培的双孢蘑菇(Agaricus bisporus)菌株,收集国内外共20个双孢蘑菇菌株,在工厂化栽培条件下进行比较试验,综合分析不同菌株在PDA平板上的菌丝生长状态、生长速度以及工厂化生产过程中子实体出菇时间、产量、质量等... 详细信息

为筛选出适合工厂化栽培的双孢蘑菇(Agaricus bisporus)菌株,收集国内外共20个双孢蘑菇菌株,在工厂化栽培条件下进行比较试验,综合分析不同菌株在PDA平板上的菌丝生长状态、生长速度以及工厂化生产过程中子实体出菇时间、产量、质量等农艺性状。结果表明:根据菌丝在PDA平板上的生长形态,将20个菌株分为两类,一类为气生/半气生型,表现为菌丝生长速度快,气生菌丝旺盛;另一类为贴生型,表现为基内菌丝发达,菌索明显,菌丝生长速度慢。贴生型菌株的产量高于气生/半气生型菌株。根据出菇时间、采收时间、产量及子实体质量性状评价得到4个(AZ1509、J5、AU02、AZ1109)出菇时间早(覆土后16—17 d)、采菇时间集中(一潮菇采收时间5 d)、产量高(3.6-4.5 kg/筐)、品质佳,适合市场鲜销的菌株。

关键词：双孢蘑菇工厂化栽培菌株比较

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樟芝皿培菌丝提取物体外对SPCA-1肺癌细胞增殖的抑制作用

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食用菌学报 2019年第2期26卷 88-96页

作者：龙云凤吴莹莹贾薇杨海芮白旭张劲松杨焱张赫男栾军高玲王毅谦汪雯翰江苏出入境检验检疫局动植物与食品检测中心江苏南京210019 上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 药明康德新药开发有限公司上海200131 石河子大学生命科学学院新疆石河子832000

利用细胞克隆实验、划痕实验和alamarBlue^TM细胞活力测定实验评价樟芝皿培菌丝体醇提物石油醚萃取相和氯仿萃取相对SPCA-1非小细胞肺癌的体外抑制作用,并进一步利用流式细胞术Annexin V-FITC(fluorescein isothiocyanate)/PI(propidium... 详细信息

利用细胞克隆实验、划痕实验和alamarBlue^TM细胞活力测定实验评价樟芝皿培菌丝体醇提物石油醚萃取相和氯仿萃取相对SPCA-1非小细胞肺癌的体外抑制作用,并进一步利用流式细胞术Annexin V-FITC(fluorescein isothiocyanate)/PI(propidium iodide)双染测定细胞早期凋亡率、流式细胞术2',7'-二氯荧光素二乙酸酯(2',7'-dichlorofluorescindiacetate,H2DCFDA)单染测定ROS(reactive oxygen species)释放量、流式细胞术PI单染测定细胞周期变化和ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay)检测细胞凋亡相关蛋白Caspase-3、p53和PARP的表达,探讨樟芝皿培菌丝体醇提物石油醚萃取相和氯仿萃取相抑制SPCA-1增殖的作用机理。研究结果表明:樟芝皿培菌丝体醇提物石油醚萃取相和氯仿萃取相均能抑制SPCA-1细胞克隆的形成、迁移和增殖,石油醚萃取相的活性明显好于氯仿萃取相;石油醚萃取相通过促进SPCA-1释放ROS来诱发线粒体依赖性早期凋亡的发生,并使促凋亡蛋白Caspase-3和p53表达上升,同时抑制蛋白PARP表达,从而发挥其抑制SPCA-1肺癌细胞增殖的作用;而氯仿萃取相主要通过将SPCA-1细胞阻滞在S期抑制其增殖。

关键词：克隆形成迁移活性氧凋亡细胞周期 Caspase-3 p53 PARP

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工厂化栽培的不同杏鲍菇菌株非挥发性风味成分分析及风味评价

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上海农业学报 2019年第1期35卷 38-42页

作者：李巧珍李晓贝吴迪李正鹏杨焱国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室上海市农业遗传育种重点实验室菌物分室上海市农业科学院食用菌研究所上海201403

采用离子色谱仪、高效液相色谱仪、氨基酸自动分析仪分别对7个工厂化栽培的不同杏鲍菇菌株子实体中的非挥发性风味成分组成、含量进行分析,并利用等鲜浓度值对其鲜味进行评价。结果表明:不同工厂化栽培的杏鲍菇菌株可溶性糖及糖醇总量... 详细信息

采用离子色谱仪、高效液相色谱仪、氨基酸自动分析仪分别对7个工厂化栽培的不同杏鲍菇菌株子实体中的非挥发性风味成分组成、含量进行分析,并利用等鲜浓度值对其鲜味进行评价。结果表明:不同工厂化栽培的杏鲍菇菌株可溶性糖及糖醇总量、游离氨基酸总量、有机酸总量、碳水化合物、粗脂肪、粗蛋白、还原糖含量均有显著差异,不同菌株间的呈味核苷酸总量、灰分和水分含量无显著差异。根据等鲜浓度值(EUC)计算得出150菌株呈鲜效果最明显,100 g干物质EUC值为40. 96 g MSG。

关键词：杏鲍菇不同菌株风味成分

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运用萎锈灵抗性基因构建香菇聚乙二醇介导的遗传转化方法

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微生物学通报 2018年第8期45卷 1824-1828页

作者：鲍大鹏杨瑞恒王莹茅文俊汪滢李燕国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用专业重点实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海201403

【背景】萎锈灵抗性基因作为筛选标记在植物和真菌中得到广泛应用。【目的】构建可以使用萎锈灵作为筛选标记的香菇遗传转化技术。【方法】利用溶壁酶消化培养4 d的香菇菌株411-4的菌丝体获得原生质体,加入适量pL-cbx质粒和聚乙二醇溶液... 详细信息

【背景】萎锈灵抗性基因作为筛选标记在植物和真菌中得到广泛应用。【目的】构建可以使用萎锈灵作为筛选标记的香菇遗传转化技术。【方法】利用溶壁酶消化培养4 d的香菇菌株411-4的菌丝体获得原生质体,加入适量pL-cbx质粒和聚乙二醇溶液,混合物涂布于再生筛选培养基上,培养后挑选菌落进行验证试验。【结果】在原生质体数目>108个和添加4μg质粒DNA的情况下,得到了40个抗性转化子。利用PCR实验和转代实验对转化子进行验证,结果显示38个转化子的抗性可稳定遗传,表明萎锈灵抗性基因整合进入了供试菌株的基因组中。【结论】利用香菇411-4菌株建立了一套运用萎锈灵抗性基因作为分子标记的遗传转化技术体系。

关键词：香菇聚乙二醇介导的原生质体转化萎锈灵

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杂交选育的优良猴头菌株发酵菌丝体多糖结构特征及体外免疫活性

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上海农业学报 2019年第4期35卷 1-8页

作者：宋甜甜张赫男吴迪李巧珍刘艳芳周帅汪雯翰杨焱上海师范大学生命科学学院上海200234 国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海201403

对猴头菌杂交选育的3株高产多糖菌株(15、91、611)和亲本菌株进行液体发酵培养,比较其液体发酵生物量与多糖含量;发酵菌丝体经水提、分级醇沉获得10个胞内多糖组分,对10个多糖组分的相对分子质量分布、单糖组成、多糖基本结构特征和体... 详细信息

对猴头菌杂交选育的3株高产多糖菌株(15、91、611)和亲本菌株进行液体发酵培养,比较其液体发酵生物量与多糖含量;发酵菌丝体经水提、分级醇沉获得10个胞内多糖组分,对10个多糖组分的相对分子质量分布、单糖组成、多糖基本结构特征和体外刺激RAW 264. 7细胞释放NO的活性进行了研究。结果表明:3株杂交菌株在液体发酵生物量和多糖含量方面较亲本菌株有不同程度的提升,菌株15糖含量提升率达到107%;杂交菌株菌丝体20%、60%(体积分数)醇沉多糖组分在相对分子质量分布、单糖组成与某一亲本菌株相似,变化较小,一般介于两亲本菌株的遗传特性之间。杂交菌株与亲本的多糖组分在红外光谱方面无明显差异; 10个醇沉的多糖组分均具有体外刺激巨噬细胞释放NO的活性,其中H15P20、H91P60、H911P60具有较高的免疫活性,活性与多糖含量具有一定的相关性。研究表明,经杂交选育获得的高产多糖菌株,其发酵菌丝体多糖的结构特征与亲本差异不大,而含量大幅提高,为猴头菌相关产品的开发提供了优质资源。

关键词：猴头菌杂交育种胞内多糖多糖含量免疫活性

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利用金针菇菌渣和甜菊渣栽培草菇初探

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上海蔬菜 2019年第1期 72-73,75页

作者：李正鹏李巧珍余昌霞周峰李玉陈明杰上海市农业科学院食用菌研究所国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海奉贤201403

为探明用金针菇菌渣和甜菊渣配制栽培料栽培草菇的效果,试验设置多种栽培料配方,研究各配方处理对草菇生长发育的影响。试验结果表明,甜菊渣含量超过60%的栽培料配方,草菇平均单菇重量小于其他配方。金针菇菌渣含量超过50%、甜菊渣含量... 详细信息

为探明用金针菇菌渣和甜菊渣配制栽培料栽培草菇的效果,试验设置多种栽培料配方,研究各配方处理对草菇生长发育的影响。试验结果表明,甜菊渣含量超过60%的栽培料配方,草菇平均单菇重量小于其他配方。金针菇菌渣含量超过50%、甜菊渣含量低于60%处理的草菇产量明显高于其他配方,说明适当添加甜菊渣可以获得较高产量。

关键词：草菇栽培金针菇菌渣甜菊渣产量

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香菇基因组中L-半胱氨酸亚砜裂解酶同源蛋白的生物信息学分析

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菌物学报 2018年第12期37卷 1608-1619页

作者：王莹鲍大鹏杨瑞恒陈洪雨高英女李燕茅文俊吴莹莹国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海201403

L-半胱氨酸亚砜裂解酶(L-cysteine sulfoxide lyase,C-S lyase)是香菇中含硫风味物质生物合成途径的关键酶之一。本文基于6个不同香菇菌株的全基因组测序数据,挖掘了24个潜在的香菇L-半胱氨酸亚砜裂解酶(LentinulaedodesC-Slyase,Lecsl... 详细信息

L-半胱氨酸亚砜裂解酶(L-cysteine sulfoxide lyase,C-S lyase)是香菇中含硫风味物质生物合成途径的关键酶之一。本文基于6个不同香菇菌株的全基因组测序数据,挖掘了24个潜在的香菇L-半胱氨酸亚砜裂解酶(LentinulaedodesC-Slyase,Lecsl)同源基因,对其编码蛋白的生理生化特性、信号肽、跨膜结构域、转录活性、分子进化、保守基序和蛋白三级结构等方面进行了分析。结果发现,这24个香菇Lecsl同源蛋白含有相同的蛋白结构域(IPR015424和IPR000192),都属于L-半胱氨酸脱巯基酶家族(PTHR43092:SF2),都不含信号肽和跨膜结构,但它们的蛋白稳定性有所不同。对24个Lecsl同源蛋白进行聚类分析发现,其中的11个组成了新的进化分支,这一分支的Lecsl同源蛋白在香菇的菌丝体或子实体中有转录活性,且含有蒜酶和L-半胱氨酸脱硫酶的保守基序19,推测这一分支的Lecsl同源蛋白在香菇中具有催化产生含硫风味物质和内源性甲醛的活性。进一步分析发现,这一分支又分为两个亚支,其中一支包含已发现的Lecsl/LE01_CSL1,并且在香菇的菌丝体和子实体阶段都有转录活性;另一个亚支上的C-Slyase同源蛋白仅在菌丝体中有转录活性,推测这两个亚支的L-半胱氨酸亚砜裂解酶分别在香菇生长发育的不同阶段发挥催化作用。通过三维结构的解析,阐明了Lecsl中保守基序19亦是使蒜酶产生催化活性的关键结构域,并且利用分子动力学模拟的方法,预测保守基序19中的Asn3、Gln5和Ser6是香菇C-S lyase产生催化活性的关键氨基酸残基。

关键词：香菇 L-半胱氨酸亚砜裂解酶生物信息学聚类分析关键氨基酸

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金针菇菌种中短期保藏因素的正交分析

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微生物学通报 2018年第6期45卷 1375-1383页

作者：张丹颜梦秋刘建雨宋春艳于海龙尚晓冬谭琦上海市农业科学院食用菌研究所国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403

【背景】金针菇(Flammulina velutipes)是我国一种重要的栽培食用菌,年产量超过250万t,规模已跃居世界首位。菌种保藏技术是金针菇栽培和新品种研发的基础,但相关研究十分薄弱,已成为制约我国金针菇产业进一步发展的瓶颈问题。【目的】... 详细信息

【背景】金针菇(Flammulina velutipes)是我国一种重要的栽培食用菌,年产量超过250万t,规模已跃居世界首位。菌种保藏技术是金针菇栽培和新品种研发的基础,但相关研究十分薄弱,已成为制约我国金针菇产业进一步发展的瓶颈问题。【目的】探索不同保藏因素对金针菇优良菌种中短期保藏的影响,为建立高效、低成本、易操作的保藏方法奠定基础。【方法】以温度、甘油、海藻糖、甘露醇以及保护剂体积5个因素进行正交试验。经12个月保藏,考察金针菇菌种在木屑培养基中的菌丝生长速度,通过极差分析和回归分析解析保藏因素的效应。【结果】温度、海藻糖、甘油和甘露醇对金针菇菌种的中短期保藏有极显著的影响,保护剂体积的影响不显著。温度是最重要的影响因子,与其它4个因素的互作效应均达到极显著水平。20°C是较好的短期保藏温度,-80°C为理想的中期保藏温度。渗透型与非渗透型保护剂间的互作效应对金针菇菌种的中短期保藏有极显著影响,海藻糖和甘露醇间的互作效应不显著。高浓度的海藻糖、甘油及甘露醇均不利于金针菇菌种的中短期保藏。保藏效果较佳的保护剂为10%甘油和0.3 mol/L甘露醇混合液。【结论】建立的菌种中短期保藏方法填补了金针菇产业发展的空白,研究结果可为其它大型真菌的中短期保藏提供重要参考。

关键词：食用菌菌种保藏正交试验设计菌丝生长速度

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蛹虫草液体发酵菌丝体和固体栽培子实体中活性成分的比较

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上海农业学报 2019年第4期35卷 57-62页

作者：朱丽娜高新华刘艳芳张红霞周帅张忠李传华唐庆九上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验上海201403 上海市农业科学院生态环境保护研究所上海201403

以蛹虫草菌株CM-H0810在麦粒固体培养基上培养获得的子实体和液体发酵培养获得的菌丝体为材料,对其中的多糖、核苷、游离糖醇和小分子糖类及氨基酸成分进行比较.单糖组成分析和HPSEC-MALLS-RI联用分析结果表明:固体培养子实体和液体发... 详细信息

以蛹虫草菌株CM-H0810在麦粒固体培养基上培养获得的子实体和液体发酵培养获得的菌丝体为材料,对其中的多糖、核苷、游离糖醇和小分子糖类及氨基酸成分进行比较.单糖组成分析和HPSEC-MALLS-RI联用分析结果表明:固体培养子实体和液体发酵菌丝体中多糖的单糖组成和HPSEC图谱有显著差别,固体培养的子实体中多糖的重均分子质量集中在1.702×106-4.092×107 g/mol,液体发酵菌丝体多糖的重均分子质量集中在1.105×105 g/***测定核苷类成分的结果表明:固体培养的子实体中主要核苷类成分为尿苷、鸟苷、腺苷、虫草素和N6-(2-羟乙基)腺苷,液体发酵菌丝体的主要核苷类成分为尿苷、鸟苷、腺苷和虫草素.HPAEC测定游离糖醇小分子糖类的结果表明:蛹虫草子实体存在游离的海藻糖、甘露醇和葡萄糖且海藻糖含量高达20.07%、而液体发酵菌丝体存在游离的甘露醇、阿糖醇和葡萄糖且甘露醇含量高于子实体中的.氨基酸组成分析表明:液体发酵培养菌丝体中必需氨基酸总量比固体培养子实体中高17.1%,且必需氨基酸与非必需氨基酸的比值、必需氨基酸与氨基酸总量的比值较为理想,分别为0.62和0.38.

关键词：子实体菌丝体多糖核苷糖醇氨基酸

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不同干燥方式对香菇含硫风味化合物的影响

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食用菌学报 2018年第4期25卷 71-79页

作者：李文杨焱陈万超张劲松于海龙沈学香上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术分中心上海201403

探讨热风干燥[(50±2)℃干燥24 h]、真空干燥[室温,室温平均温度(20±2)℃、真空度50 pa干燥24 h]、冷冻干燥(-80℃预冷4 h,真空度50 pa干燥48 h)和自然干燥[室外平均温度(20±2)℃晾晒干燥48 h]4种干制方式对香菇(Lentinul... 详细信息

探讨热风干燥[(50±2)℃干燥24 h]、真空干燥[室温,室温平均温度(20±2)℃、真空度50 pa干燥24 h]、冷冻干燥(-80℃预冷4 h,真空度50 pa干燥48 h)和自然干燥[室外平均温度(20±2)℃晾晒干燥48 h]4种干制方式对香菇(Lentinula edodes)子实体含硫风味化合物生成的影响。结果表明,热风干燥和自然干燥方式处理的香菇样品中,含硫化合物的总含量最高,且热风干燥方式处理的样品香气浓郁;冷冻干燥方式处理的香菇样品中,含硫化合物种类最多;香菇子实体中含硫化合物聚类分析结果表明,热风干燥和真空干燥两种干燥方式相关系数(0.994)较高;通过主成分分析发现9中含硫化合物对香菇子实体风味影响较大,其中1,2,3,5,6-五硫杂环庚烷是对香菇子实体风味贡献最大的含硫化合物;冷冻干燥处理的子实体复水效果明显优于其它干燥方式;4种干燥方式处理的子实体感官评价得分相近。

关键词：香菇干燥方式含硫化合物主成分分析

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