检索结果-内蒙古大学图书馆

中草药 2022年第7期53卷 2031-2043页

作者：王力文黄德华田俊生高晓霞秦雪梅杜冠华周玉枝山西大学中医药现代研究中心山西太原030006 山西大学化学生物学与分子工程教育部重点实验室山西太原030006 地产中药功效物质研究与利用山西省重点实验室山西太原030006 中国医学科学院北京协和医学院药物研究所北京100050

目的通过转录组测序(RNAsequencing,RNA-seq)技术分析柴归颗粒对慢性不可预知温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)模型大鼠外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)的转录组学特征,并采用qRT-PCR法验证其作用机制。方法将大鼠随机分为对照组、模型组、盐酸文拉法辛(35 mg/kg)组和柴归颗粒低、中、高剂量(4.2、8.3、16.6 g/kg)组,造模同时给药,连续28 d。通过抑郁症传统药效学指标(体质量、旷场实验、糖水偏爱实验及强迫游泳实验)评价柴归颗粒的药效。采用RNA-seq技术对大鼠PBMCs进行转录组学分析,筛选差异基因,对其进行京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)分析;通过qRT-PCR法对筛选出的关键表达基因进行实验验证。结果行为学指标显示柴归颗粒能显著改善CUMS模型大鼠的抑郁行为。转录组学中KEGG通路富集分析表明抑郁发生时及柴归颗粒干预后,都显著富集到嘌呤代谢通路,因此针对嘌呤代谢相关代谢酶基因表达进行深入研究。qRT-PCR结果表明,与模型组比较,柴归颗粒组大鼠PBMCs中的胞外核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶3(ectonucleotide pyrophosphatase/phosphodiesterase 3,Enpp3)、胞质-5′-核苷酸酶IIIA(cytosolic-5′-nucleotidase IIIA,Nt5c3a)、嘌呤核苷磷酸化酶(purine nucleoside phosphorylase,Pnp)、腺苷酸脱氨酶(adenosine deaminase,Ada)m RNA表达水平显著升高(P<0.05、0.01、0.001),黄嘌呤脱氢酶/氧化酶(xanthine dehydrogenase/oxidase,Xdh)、嘌呤能受体P2X7(purinergic receptor P2X7,P2rX7)、白细胞介素1β(interleukin 1β,IL1β)m RNA表达水平显著降低(P<0.05、0.01)。结论柴归颗粒具有抗抑郁作用,其作用机制与调节嘌呤代谢途径上的基因及嘌呤能受体P2X7和炎症因子IL1βmRNA表达有关。

关键词：柴归颗粒慢性不可预知温和应激抑郁外周血单个核细胞转录组学嘌呤代谢

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基于靶向代谢组学分析黄芪苯丙烷代谢物对根腐病菌Fusarium solani侵染的响应

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药学学报 2023年第7期58卷 1859-1866页

作者：赵子青宋海清赵丽梅李震宇武瑞杰高芬山西锦烁生物科技有限公司山西晋中030600 山西大学中医药现代研究中心山西太原030006 山西大学化学生物学与分子工程教育部重点实验室山西太原030006 地产中药功效物质研究与利用山西省重点实验室山西太原030006 山西大学应用化学研究所山西太原030006

根腐病是制约黄芪产业可持续发展的重要因素。选育抗性品种作为防治病害最为经济有效且安全的措施,其关键在于抗病性状指标的获得。本研究采用基于LC-MS的靶向代谢组学与实时荧光定量PCR技术,分析苯丙烷途经代谢物响应根腐病菌腐皮镰刀... 详细信息

根腐病是制约黄芪产业可持续发展的重要因素。选育抗性品种作为防治病害最为经济有效且安全的措施,其关键在于抗病性状指标的获得。本研究采用基于LC-MS的靶向代谢组学与实时荧光定量PCR技术,分析苯丙烷途经代谢物响应根腐病菌腐皮镰刀菌(Fusarium solani,FS)侵染的动态变化,结合多元统计分析指认差异代谢物,以期精准挖掘抗病相关(resistance-related,RR)代谢物,为黄芪抗病性状指标的筛选提供依据。研究建立的LCMS测定方法灵敏度高,各组分在各自浓度范围内,线性关系良好(R2≥0.9689),回收率在70%~107%,相对标准偏差(n=6)在1.2%~9.9%。研究发现,FS侵染对目标代谢物变化造成了明显扰动,使其含量随时间序列与模拟接种组相比呈不同程度的上调或下调,指认的差异代谢物毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮和芒柄花素,都属于黄酮类化合物。前3种化合物与FS在黄芪根中的含量显著负相关(r≤-0.97,P<0.05),作为潜在RR代谢物,可为研究获得有实际应用前景的黄芪抗根腐病指标提供参考。

关键词：黄芪腐皮镰刀菌靶向代谢组苯丙烷代谢物响应

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基于核磁指纹图谱黄芪药材均一性评价研究

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中药材 2017年第9期40卷 2107-2111页

作者：李爱平陈佳佳李震宇秦雪梅山西大学中医药现代研究中心/地产中药功效物质研究与利用山西省重点实验室山西太原030006 山西大学数学科学学院山西太原030006

目的:建立基于黄芪次生代谢物的核磁指纹图谱,对其均一性进行评价。方法:以50%甲醇为提取溶剂,乙酸乙酯萃取进行核磁测定,获得不同黄芪的~1H-NMR指纹图谱,并进行重复性、精密度及稳定性考察。通过对照品对照,二维谱辅助解析获得黄芪次... 详细信息

目的:建立基于黄芪次生代谢物的核磁指纹图谱,对其均一性进行评价。方法:以50%甲醇为提取溶剂,乙酸乙酯萃取进行核磁测定,获得不同黄芪的~1H-NMR指纹图谱,并进行重复性、精密度及稳定性考察。通过对照品对照,二维谱辅助解析获得黄芪次级代谢物的特征峰共有模式,以各指标成分(皂苷类和黄酮类)的特征峰加和与各样品~1H-NMR谱峰的总面积比值,作为各指标成分的相对含量,利用Aitchison距离法分别对其均一性进行评价,并与传统指纹图谱相似度评价方法进行比较。结果:不同山西黄芪和甘肃黄芪中皂苷类成分的相似性较好,黄酮类成分差异相对较大;且山西黄芪黄酮类成分的变异较甘肃黄芪大。结论:该研究建立一种简单的中药材均一性评价方法,以期为基于次生代谢物中药的资源评价与合理利用提供研究依据。

关键词：核磁共振指纹图谱黄芪均一性质量评价

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基于植物代谢组学和靶标定量分析研究山西不同产地黄芩叶化学成分差异

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药学学报 2023年第7期58卷 1867-1879页

作者：程鹏飞王涛陈聪聪秦雪梅杜冠华周玉枝山西省药品检查中心(山西省疫苗检查中心) 山西太原030006 山西大学中医药现代研究中心山西太原030006 山西大学化学生物学与分子工程教育部重点实验室山西太原030006 地产中药功效物质研究与利用山西省重点实验室山西太原030006 中国医学科学院、北京协和医学院药物研究所北京1000

本研究整合植物代谢组学和靶标定量分析方法,系统分析山西不同产地间黄芩叶化学成分的差异,为合理有效利用黄芩叶资源提供理论依据。基于植物代谢组学的思路,采用UPLC-QTOF-MS对山西省8个不同产地共53批黄芩叶进行液质分析,并通过多元... 详细信息

本研究整合植物代谢组学和靶标定量分析方法,系统分析山西不同产地间黄芩叶化学成分的差异,为合理有效利用黄芩叶资源提供理论依据。基于植物代谢组学的思路,采用UPLC-QTOF-MS对山西省8个不同产地共53批黄芩叶进行液质分析,并通过多元统计分析方法,筛选山西不同产地间的差异化学成分。同时,优化并建立一种可以同时测定黄芩叶中7种黄酮类成分和3种有机酸类成分的含量测定方法,以定量分析山西不同产地黄芩叶化学成分差异。植物代谢组学结果显示,晋北(大同、忻州)、晋中(阳泉、吕梁)和晋南(长治、运城、晋城、临汾)三个区域的黄芩叶化学成分组成具有差异性:晋北和晋中地区间存在14个显著差异化学成分;晋南和晋中之间存在18个显著差异化学成分;晋北和晋南之间存在15个显著差异化学成分。其中,野黄芩苷和异红花素-7-O-葡萄糖醛酸苷是三个地区间的共有差异成分,野黄芩苷在晋南地区含量最高,在晋北地区含量最低;异红花素-7-O-葡萄糖醛酸苷在晋中地区含量最高,在晋北地区含量最低。定量分析结果进一步证实,晋北地区芹菜素、柚皮素和柠檬酸的平均含量最高,晋南地区野黄芩苷、咖啡酸、芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷、苹果酸和汉黄芩苷的平均含量最高,晋中地区汉黄芩素和黄芩苷的平均含量最高。该研究对于黄芩叶资源的质量控制具有重要意义,为合理有效利用黄芩叶资源提供理论依据。

关键词：植物代谢组学含量测定黄芩叶化学成分差异

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基于细胞代谢组学的柴胡皂苷b2对皮质酮诱导PC12细胞损伤的保护作用研究

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中国药理学与毒理学杂志 2024年第1期38卷 11-21页

作者：李萌施浩陈佳俊吕家乐秦雪梅杜冠华周玉枝山西大学中医药现代研究中心山西太原030006 山西大学化学生物学与分子工程教育部重点实验室山西太原030006 山西大学地产中药功效物质研究与利用山西省重点实验室山西太原030006 中国医学科学院药物研究所北京100050

目的研究柴胡皂苷b2(SSb2)对皮质酮(CORT)诱导PC12细胞损伤的保护作用及其机制。方法①将细胞分为细胞对照组(RPMI-1640培养基培养24 h),CORT(100~800μmol·L^(-1)孵育24 h)组和SSb2(1.5625,3.125,6.25,12.5,25,50和100μmol·L^(-1)孵育24 h)组,MTT法检测细胞存活率。②将细胞分为细胞对照组(RPMI-1640培养基培养24 h),模型组(CORT 400μmol·L^(-1)孵育24 h)和模型+SSb2组(SSb21.5625,3.125,6.25,12.5和25μmol·L^(-1)预处理3 h,去上清,然后加入CORT 400μmol·L^(-1)及对应浓度SSb2共孵育24 h)。MTT法检测细胞存活率,微板法检测PC12细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放率。③将细胞分为细胞对照组、模型组和模型+SSb212.5μmol·L^(-1)组,采用AnnexinV-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡;基于超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)的代谢组学技术检测PC12细胞代谢轮廓变化;比色法检测谷氨酸含量和谷氨酰胺酶活性。结果①与细胞对照组相比,当CORT浓度为400μmol·L^(-1)时,细胞存活率降低至(55±6)%(P<0.01);SSb2浓度>50μmol·L^(-1)时,对PC12细胞有显著的细胞毒性(P<0.01)。②与细胞对照组相比,模型组细胞存活率显著降低(P<0.01),LDH释放率显著升高(P<0.01);与模型组相比,模型+SSb2各浓度组细胞存活率显著升高(P<0.05,P<0.01),LDH释放率显著降低(P<0.01)。③与细胞对照组相比,模型组细胞凋亡率显著升高(P<0.01);与模型组相比,模型+SSb2组细胞凋亡率显著降低(P<0.05)。代谢组学结果表明,SSb2能显著回调谷氨酸、肌酸、N-乙酰天冬氨酸、L-酪氨酸、柠檬酸、L-异亮氨酸、乳酸、谷氨酰胺和胆碱9个差异代谢物。对SSb2调控的关键代谢物进一步富集分析表明,SSb2主要影响5条代谢通路,即D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢,苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸的生物合成,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,酪氨酸代谢和精氨酸生物合成。与细胞对照组相比,模型组谷氨酸含量和谷氨酰胺酶活性显著降低(P<0.01);与模型组相比,模型+SSb2组细胞谷氨酸含量(P<0.01)和谷氨酰胺酶活性显著升高(P<0.05)。结论SSb2对CORT诱导的PC12细胞损伤具有神经保护作用,其机制与抑制细胞凋亡和调节代谢紊乱有关。

关键词：柴胡皂苷b2 皮质酮 PC12细胞代谢组学

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黄芪活性多糖APS-Ⅱ酶解方法的建立及其降解寡糖的免疫活性研究

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药学学报 2021年第7期56卷 1936-1944页

作者：李科崔连杰李晓霞石丽霞李震宇秦雪梅杜昱光山西大学中医药现代研究中心山西太原030006 中国科学院过程工程研究所北京100190 山西大学化学生物学与分子工程教育部重点实验室山西太原030006 地产中药功效物质研究与利用山西省重点实验室山西太原030006 山西大学化学化工学院山西太原030006 山西省果业工作总站山西太原030001

黄芪多糖是黄芪中免疫调节活性主要物质,由于多糖结构难于精确测定,限制了黄芪多糖体内分子作用机制的深入研究。“多糖受体学说”认为免疫活性多糖分子中存在一种或多种寡糖片段“活性中心”,因此将黄芪多糖降解为寡糖,从寡糖水平研究... 详细信息

黄芪多糖是黄芪中免疫调节活性主要物质,由于多糖结构难于精确测定,限制了黄芪多糖体内分子作用机制的深入研究。“多糖受体学说”认为免疫活性多糖分子中存在一种或多种寡糖片段“活性中心”,因此将黄芪多糖降解为寡糖,从寡糖水平研究多糖的活性中心,为黄芪多糖结构及作用机制研究提供了新思路。本文采用内切α-1,4-葡聚糖酶酶解,通过单因素试验和正交试验确定最佳降解条件,将本课题组已制备的免疫活性多糖APS-Ⅱ(10 kDa组分)降解为不同聚合度寡糖组分,通过聚丙烯酰胺凝胶色谱制备及特异性和非特异性免疫细胞实验,对不同寡糖组分进行免疫活性筛选。动物福利和实验过程均遵循山西大学动物伦理委员会的规定。结果发现,与免疫活性多糖APS-Ⅱ相比,不同寡糖组分在不同免疫活性上有明显差异。本文通过寡糖水平研究黄芪多糖的不同免疫活性,为进一步阐明黄芪多糖结构与功能奠定了基础,丰富了多糖受体学说,也为黄芪多糖的开发提供了新思路。

关键词：黄芪多糖酶解免疫活性寡糖多糖受体学说

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整合动态PK-PD相关性分析在中药药效物质基础发现中的研究策略

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药物评价研究 2023年第6期46卷 1157-1167页

作者：王玉昆王鹏王威宇秦雪梅高晓霞山西大学中医药现代研究中心山西太原030006 山西大学化学生物学与分子工程教育部重点实验室山西太原030006 地产中药功效物质研究与利用山西省重点实验室山西太原030006 南方医科大学广东广州510515

中药药效物质基础研究是解释中医药作用机制的基石,然而中药复方作为一个复杂体系,作用机制与体内效应过程不明确等问题长期桎梏中医药事业的发展。药动学-药效学(PK-PD)相关性研究是动态表征和定量描述活性成分与药理作用之间相关性的... 详细信息

中药药效物质基础研究是解释中医药作用机制的基石,然而中药复方作为一个复杂体系,作用机制与体内效应过程不明确等问题长期桎梏中医药事业的发展。药动学-药效学(PK-PD)相关性研究是动态表征和定量描述活性成分与药理作用之间相关性的有效方法,将时间、浓度和效应结合起来,已经成为阐明中药药效物质基础的技术策略,但是目前研究大都集中在结构明确的化学药物,缺乏符合中医药发展模式的相关策略。因此,非常有必要深入挖掘新的研究策略,建立符合中医药特色的PK-PD模型,通过进行方法开发与技术重组,利用从化学物质基础、关键成分的筛选、整合PK-PD相关性的多维整合的研究思路,引入代谢组学等现代技术手段,全方位、及时灵敏地表征药效特点,评价药动学考察药物机制研究,旨在构建更易于发现药效物质的技术体系,为阐明中药复方的药效物质基础提供参考。

关键词：药动学药效学药动学-药效学相关血清药物化学代谢组学中药药效物质

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基于代谢组学的阿霉素肾病大鼠模型损伤程度评价

基于代谢组学的阿霉素肾病大鼠模型损伤程度评价

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第四届中荷代谢组学论坛

作者：张王宁李爱平刘少博李科秦雪梅地产中药功效物质研究与利用山西省重点实验室山西省科技创新重点团队山西太原030006

目的:对阿霉素肾病大鼠模型损伤程度进行量化分析. 方法:采用阿霉素大鼠模型,以24h尿蛋白含量与肾组织病理切片对其模型进行评价.应用1H NMR代谢组学技术,结合数理统计方法对不同给药剂量、给药次数的阿霉素肾病大鼠血清样本进行分析... 详细信息

目的:对阿霉素肾病大鼠模型损伤程度进行量化分析. 方法:采用阿霉素大鼠模型,以24h尿蛋白含量与肾组织病理切片对其模型进行评价.应用1H NMR代谢组学技术,结合数理统计方法对不同给药剂量、给药次数的阿霉素肾病大鼠血清样本进行分析,鉴定反映肾病进程的进展性标志物,并依据相关标志物的变化率对肾脏损伤程度进行评价. 结果:阿霉素模型大鼠24h尿蛋白量升高(P＜0.05),表明造模成功.对阿霉素肾病大鼠与空白组大鼠血清样本进行核磁图谱分析并结合SIMCA-p数据处理软件,最终得到9个潜在的病理标志物,分别为含氧异己酸、异亮氨酸、亮氨酸、缬氨酸、丙酮酸、3-羟基丁酸、柠檬酸、肌酸酐和肉毒碱;根据接收者操作特征曲线(ROC曲线)分析,筛选出对其贡献率大的代谢,得到含氧异己酸和肉毒碱存在一定的剂量依赖性,即阿霉素造模剂量越大,该内源性代谢物的变异越大,表明肾脏损伤越严重,可作为反映肾病进程的进展性标志物. 结论:这一研究为肾病诊断、治疗及预后提供研究基础,为研究其他进展性疾病的发病进程及早期诊断标志物的发现提供研究方法和思路.

关键词：肾病综合征损伤程度代谢组学生物标志物

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基于PBMCs多组学技术的抑郁症发病机制研究进展

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中药药理与临床 2022年第3期38卷 206-212页

作者：王力文黄德华秦雪梅杜冠华周玉枝山西大学中医药现代研究中心太原030006 山西大学化学生物学与分子工程教育部重点实验室太原030006 地产中药功效物质研究与利用山西省重点实验室太原030006 中国医学科学院北京协和医学院药物研究所北京100050

抑郁症是一种常见的情感障碍疾病,严重影响人类健康和社会发展。然而抑郁症发病机制复杂且尚未清楚。外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)作为一个新的研究对象在研究抑郁症的发病机制中扮演着重要的角色。随... 详细信息

抑郁症是一种常见的情感障碍疾病,严重影响人类健康和社会发展。然而抑郁症发病机制复杂且尚未清楚。外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)作为一个新的研究对象在研究抑郁症的发病机制中扮演着重要的角色。随着组学技术的兴起,基于PBMCs从不同角度和层次研究抑郁症潜在的生物标志物、代谢通路及发病机制上取得了巨大的进步。本文综述了多组学技术在PBMCs研究抑郁症中取得的最新成果和进展,为进一步探索抑郁症发病机制提供有价值的信息。

关键词：外周血单个核细胞抑郁症多组学技术生物标志物发病机制

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一测多评法在中药质量控制中的应用及研究进展

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世界科学技术-中医药现代化 2022年第6期24卷 2378-2387页

作者：闫艳杜晨晖山西大学中医药现代研究中心太原030006 山西大学化学生物学与分子工程教育部重点实验室太原030006 地产中药功效物质研究与利用山西省重点实验室太原030006 山西中医药大学中药与食品工程学院太原030619

一测多评法(quantitative analysis of multi-components by single marker,QAMS)已成熟应用于中药材、中药提取物及中成药领域等中药复杂体系的质量评价研究中,有效解决了因对照品缺乏而导致的多指标质控技术推广难问题。本文查阅近五... 详细信息

一测多评法(quantitative analysis of multi-components by single marker,QAMS)已成熟应用于中药材、中药提取物及中成药领域等中药复杂体系的质量评价研究中,有效解决了因对照品缺乏而导致的多指标质控技术推广难问题。本文查阅近五年的国内外研究文献,重点总结了高效液相色谱、气相色谱和质谱等技术在QAMS法中药质量控制中的应用。高效液相色谱联用紫外检测器(UV)技术应用最为广泛,最适合于中药QAMS法定量,结果稳定、准确;而高效液相色谱联用蒸发光检测器在中药QAMS法应用中,其测定准确性和适用性仍然需进一步探索和验证。液质联用技术虽然具有灵敏度高、线性范围宽等优点,但易受仪器参数、基质效应等的影响。进一步发展HPLC-UV技术在中成药制剂质量评价中的应用,是QAMS法多成分定量值得关注的方向;探索LC-MS和GC技术在中药QAMS质量评价中的稳定性和普适性是未来将面临的挑战。

关键词：一测多评法高效液相色谱气相色谱法液质联用质量控制

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