检索结果-内蒙古大学图书馆

中国中药杂志 2004年第9期29卷 882-886页

作者：陈恬贾文祥杨发龙谢轶杨维青曾蔚张再容李晖蒋思萍央珍陈金瑞四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室四川成都610041 西藏高原生物研究所西藏拉萨850002

目的 :探讨紫金标抗单纯疱疹Ⅰ型病毒 (HSV 1)的作用及机理 ,为进一步开发该药提供理论依据。方法 :采用不同剂量的紫金标作用于适量HSV 1感染的Vero细胞 ,以 5 0 %组织细胞感染量 (TCID50 ) ,细胞病变效应(CPE) ,MTT法和核酸分子杂交... 详细信息

目的 :探讨紫金标抗单纯疱疹Ⅰ型病毒 (HSV 1)的作用及机理 ,为进一步开发该药提供理论依据。方法 :采用不同剂量的紫金标作用于适量HSV 1感染的Vero细胞 ,以 5 0 %组织细胞感染量 (TCID50 ) ,细胞病变效应(CPE) ,MTT法和核酸分子杂交作为评价指标。结果 :MTT法测得紫金标的 5 0 %抑制浓度 (IC50 )为 2 9.4 6mg·L-1,5 0 %中毒浓度 (TC50 )为 10 77mg·L-1,治疗指数 (TI)为 36 .5 6 ,结果表明紫金标有明显抑制HSV 1的作用 ,其作用强度和有效时间与药物浓度成正比。紫金标无直接灭活HSV 1的作用 ,也不能影响病毒的释放 ;但可干扰HSV 1对宿主细胞的吸附。不同浓度的紫金标能明显抑制HSV 1gD基因复制和mRNA表达。结论 :紫金标具有显著的抗HSV 1的作用 ,能抑制HSV 1对宿主细胞的吸附以及抑制HSV

关键词： HSV-1 MTT法藏药感染宿主细胞抑制作用强度浓度适量作用机理

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博尔纳病病毒自然感染状况及其核苷酸序列

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中国公共卫生 2004年第4期20卷 408-410页

作者：马培林张凤民李桂梅杨爱英李懿宏谷鸿喜生田和良哈尔滨医科大学基础医学院微生物学教研室哈尔滨150086 日本大阪大学微生物病研究所

目的　探讨中国黑龙江地区正常人和马博尔纳病病毒 (BornaDiseaseVirus ,BDV)自然感染状况 ,进而比较分析中国自然感染的BDV与国外精神分裂症患者和患病马的BDV分离株及标准株He/80在种系发生中的关系。方法　用巢式RT -PCR方法检测中... 详细信息

目的　探讨中国黑龙江地区正常人和马博尔纳病病毒 (BornaDiseaseVirus ,BDV)自然感染状况 ,进而比较分析中国自然感染的BDV与国外精神分裂症患者和患病马的BDV分离株及标准株He/80在种系发生中的关系。方法　用巢式RT -PCR方法检测中国黑龙江地区正常人和马匹单个核细胞 (peripheralbloodmononuclearcells ,PBM Cs)中BDV - p2 4基因片段 ,分别随机选取每种样本部分阳性扩增产物进行克隆测序 ,测序结果与国外精神分裂症患者和患病马的BDV分离株以及标准株He/80进行序列比较。结果　 76例正常人、34匹马的标本中BDV - p2 4基因的阳性检出率分别为 9 2 % (7/76 )和 2 3 5 % (8/34)。序列分析结果表明 ,中国黑龙江地区正常人和马感染的BDV的核苷酸序列除与一个新亚型株No/98差别较大 (大于 15 % )外 ,与其他国外精神分裂症患者和马源BDV分离株同源性均大于 94 % ,与标准株He/80同源性达到 98%以上。结论　证实黑龙江地区正常人和马中存在BDV的自然感染。该地区感染的BDV与标准株He/80存在高度的同源性。

关键词：博尔纳病病毒巢式RT-PCR 人马精神分裂症

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抗人CD25分子单链抗体基因的构建、表达及初步鉴定

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细胞与分子免疫学杂志 2007年第3期23卷 264-266页

作者：沈弢张爱华闭兰史良如温州医学院基础医学院微生物学与免疫学教研室浙江温州325035 武汉生物制品研究所卫生部单克隆抗体中试实验室湖北武汉430060

目的:构建和表达抗人CD25分子单链抗体(scFv)蛋白,并测定其生物学活性。方法:用RT-PCR方法从能分泌特异性抗CD25单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞中分离纯化抗体VH和VL基因。用重叠延伸PCR方法将VH和VL拼接在一起,构建抗CD25分子scFv的基因... 详细信息

目的:构建和表达抗人CD25分子单链抗体(scFv)蛋白,并测定其生物学活性。方法:用RT-PCR方法从能分泌特异性抗CD25单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞中分离纯化抗体VH和VL基因。用重叠延伸PCR方法将VH和VL拼接在一起,构建抗CD25分子scFv的基因。将scFv基因克隆至pMD18T,用限制性内切酶切以及测序鉴定。将scFv基因连接到pBAD/gⅢA表达载体,转化Top10表达菌。阳性克隆用左旋阿拉伯糖诱导4 h,SDS-PAGE电泳检测蛋白纯度,竞争抑制ELISA实验检测其活性。结果:scFv基因长度约为700 bp。通过DNA序列测定和分析,构建出VL-(GGGGS)3-VH(但其中349位G突变为A,使Linker其中一位Gly→Ser)。其VH隶属于小鼠Ig重链可变区Ⅲ(C)亚类,全长351 bp,可编码117个氨基酸;其VL隶属于小鼠Igκ轻链可变区Ⅳ亚类,全长318 bp,可编码106个氨基酸。TOP10中表达的scFv抗体加上同时融合表达的两个标签6×His和C-mycMr约为31 000,结果符合scFv的Mr。竞争抑制细胞ELISA实验显示表达的scFv具有活性。结论:此scFv基因的表达产物具有一定的特异结合活性。为抗CD25 scFv的临床应用打下了基础。

关键词： CD25 scFv 蛋白表达 ELISA

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利用重组痘苗病毒表达人 CD2 0基因

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免疫学杂志 2000年第5期16卷 325-327页

作者：洪海燕郭燕翔舒翠玲戚中田沈倍奋第二军医大学微生物学教研室上海200433 军事医学科学院基础医学研究所北京100850

目的获得重组人 CD2 0分子并研究编码人 CD2 0的基因在痘苗病毒中的表达。方法从 p GEM- T- EASY/ CD2 0载体上酶切下编码人 CD2 0分子的 c DNA,亚克隆到 p JSA1175载体上 ,重组质粒与野生痘苗病毒共转染 TK- 143细胞。结果APAAP检测到... 详细信息

目的获得重组人 CD2 0分子并研究编码人 CD2 0的基因在痘苗病毒中的表达。方法从 p GEM- T- EASY/ CD2 0载体上酶切下编码人 CD2 0分子的 c DNA,亚克隆到 p JSA1175载体上 ,重组质粒与野生痘苗病毒共转染 TK- 143细胞。结果APAAP检测到重组病毒感染的细胞表面有 CD2 0分子表达 ,富集后病毒滴度约为 1× 10 9pfu/ ml。结论人 CD2 0基因在痘苗病毒中表达。

关键词：人CD20基因重组痘苗病毒基因表达

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环境条件对猪链球菌2型电转化效率的影响

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中国人兽共患病学报 2007年第8期23卷 760-763页

作者：李明胡福泉王长军郑峰董亚青潘秀珍唐家琪第三军医大学基础医学部微生物学教研室南京军区军事医学研究所南京军区军事医学研究所南京210002

目的探讨环境条件对猪链球菌2型强毒株05ZYH33电转化效率的影响。方法采用电穿孔的方法对05ZYH33强毒株进行外源DNA的转化,通过调整参数,对影响电转化效率的主要因素进行探索。结果电穿孔法可以成功地转化猪链球菌2型强毒株05ZYH33,转... 详细信息

目的探讨环境条件对猪链球菌2型强毒株05ZYH33电转化效率的影响。方法采用电穿孔的方法对05ZYH33强毒株进行外源DNA的转化,通过调整参数,对影响电转化效率的主要因素进行探索。结果电穿孔法可以成功地转化猪链球菌2型强毒株05ZYH33,转化效率最高可达107/μg质粒DNA。结论猪链球菌2型强毒株05ZYH33高效电转化方法的建立,为深入研究该病原菌的功能基因组学奠定了基础。

关键词：猪链球菌2型电转化转化效率

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柱层析法纯化人用地鼠肾细胞狂犬病毒灭活疫苗的研究

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中国人兽共患病杂志 2000年第5期16卷 55-58页

作者：郑庆纹李书津徐永革吴强卓金荣赵宇毕伟民姚刚姚彩霞毛秀珍贾文祥成都卫生部成都生物制品研究所 610063 华西医科大学基础医学院微生物教研室

目的改进和提高现行人用地鼠肾细胞狂犬病灭活疫苗的纯度和保护效价。方法　将原代地鼠肾细胞 (PHKC)培养并收获的aG株狂犬病毒原液超滤浓缩 40～ 5 0倍 ,再经Sepharose 6FastFlow分子筛柱层析 ,收集完整的病毒颗粒 ,除菌、灭活、添加Al... 详细信息

目的改进和提高现行人用地鼠肾细胞狂犬病灭活疫苗的纯度和保护效价。方法　将原代地鼠肾细胞 (PHKC)培养并收获的aG株狂犬病毒原液超滤浓缩 40～ 5 0倍 ,再经Sepharose 6FastFlow分子筛柱层析 ,收集完整的病毒颗粒 ,除菌、灭活、添加Al (OH) 3 佐剂制成纯化地鼠肾细胞狂犬病毒疫苗。结果　浓缩狂犬病毒经过柱层析纯化 ,抗原比活性较纯化前平均提高 2 9 5 4倍 ,纯化效果平均达到 96 1% ,疫苗效力平均达到 2 98IU/ml,其余检测结果均符合现行有关规程。结论　凝胶分子筛柱层析技术。

关键词：狂犬病毒柱层析纯化疫苗

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EV71型病毒驯化与手足口病动物模型的研究进展

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免疫学杂志 2011年第3期27卷 259-262页

作者：窦建琳安静兰州大学基础医学院病原生物学研究所 73000 首都医科大学基础医学院微生物学教研室 10006

手足口病好发于幼儿,通常是自限性的发热、出疹性疾病,但是肠道病毒71型(EV71)感染引起的手足口病易于出现伴有神经症状的严重病例。EV71的免疫学发病机制较为复杂,从而妨碍了疫苗的研发。建立良好的手足口病动物模型有助于研究其发病机... 详细信息

手足口病好发于幼儿,通常是自限性的发热、出疹性疾病,但是肠道病毒71型(EV71)感染引起的手足口病易于出现伴有神经症状的严重病例。EV71的免疫学发病机制较为复杂,从而妨碍了疫苗的研发。建立良好的手足口病动物模型有助于研究其发病机制,而建立动物模型的关键是通过病毒驯化获得EV71的神经细胞适应毒株。本文简要综述EV71的病毒驯化及手足口病动物模型的最新进展,以期推动相关研究。

关键词：手足口病 EV71病毒病毒驯化动物模型

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ERK在LPS诱导大鼠雪旺氏细胞TNF-α表达中的作用

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中华微生物学和免疫学杂志 2007年第6期27卷 485-489页

作者：邵晓轶秦永伟王海波高永静程纯沈爱国江苏省南通大学神经再生重点实验室 226001 南通大学医学院微生物和免疫学教研室南通大学航海医学研究所

目的研究细胞外信号调节激酶(ERK)对脂多糖(IPS)诱导的大鼠雪旺氏细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的作用。方法采用Western blot检测细胞中ERK激酶的活性;用ERK的特异性抑制剂(PD98059)预处理细胞后,ELISA检测细胞中TNF-α水平;RT-PCR... 详细信息

目的研究细胞外信号调节激酶(ERK)对脂多糖(IPS)诱导的大鼠雪旺氏细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的作用。方法采用Western blot检测细胞中ERK激酶的活性;用ERK的特异性抑制剂(PD98059)预处理细胞后,ELISA检测细胞中TNF-α水平;RT-PCR检测细胞中TNF-αmRNA的表达;用免疫荧光双标法检测ERK的表达定位。结果LPS可显著激活雪旺氏细胞中的ERK信号通路,其激活高峰在LPS刺激后30～45 min,60 min后ERK磷酸化水平开始逐渐下降;用PD98059预处理细胞后,可显著抑制细胞TNF-α以及TNF-αmRNA的产生;LPS刺激细胞后引起ERK磷酸化,PD98059可抑制该过程。结论ERK信号通路的激活可能是LPS诱导TNF-α表达的前提。通过阻断细胞内信号转导通路来减少TNF-α及其他细胞因子的产生,为抑制周围神经损伤后的炎症以及免疫反应发生提供了一条新的思路。

关键词：细胞外信号调节激酶脂多糖雪旺氏细胞肿瘤坏死因子-α(TMF-α)

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口腔念珠菌基因多态性检测

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中国微生态学杂志 2011年第5期23卷 435-437页

作者：郑剑玲齐贺张中林王美慧耿薇张伟辽宁省基础医学研究所免疫微生物教研室辽宁沈阳110101

目的检测正常人群口腔念珠菌基因型,以了解口腔念珠菌基因多态性。方法采集162例正常人群口腔样本,用念珠菌显色培养基(CHROM agar)进行菌种分离培养鉴定,用玉米Tween80培养基进行真菌孢子形态学检查鉴定,随机抽取45个菌株样本进行内含... 详细信息

目的检测正常人群口腔念珠菌基因型,以了解口腔念珠菌基因多态性。方法采集162例正常人群口腔样本,用念珠菌显色培养基(CHROM agar)进行菌种分离培养鉴定,用玉米Tween80培养基进行真菌孢子形态学检查鉴定,随机抽取45个菌株样本进行内含子转录间隔区(internal transcribed spacer region,ITS)序列检测,并比对同源性,建立进化树,观察菌株进化分支情况。结果分离培养出念珠菌菌株57株(57/162,35.2%),其中白色念珠菌(Candida albicans)36株(36/57,63.1%)。进行ITS序列检测的45个菌株申请GenBank序列注册号为FJ697166-GQ280292。结论正常人群口腔念珠菌基因具有多态性。

关键词：念珠菌基因多态性内含子转录间隔区

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有机锗对机体免疫功能影响的动物实验研究

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中国医科大学学报 1993年第1期22卷 14-16页

作者：周正任杨晓临梁再赋程颖宋玉立宋聚忠王捷彭涛谢怀江马鸣超中国医科大学基础医学部微生物教研室沈阳军区军事医学研究所

用NK活性、Mφ吞噬活性,抗体产生能力、Ⅱ—2产生能力为指标,对受试动物在有机锗作用下免疫功能的变化做了系统观察。结果表明:有机锗可提高正常机体整体免疫功能,上述各项免疫指标均有大幅度升高,且出现了剂量效应依赖关系。

关键词：有机锗免疫动物实验

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