检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2005年第4期27卷 317-319页

作者：黄正根刘昕高玉梅蔡瑜娇由莉越罗勇军第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室重庆400038

目的　探讨细菌 16SrDNA检测芯片杂交前的样本处理优化方法。方法　设计针对细菌 16SrDNA基因全长的通用引物 ,通过PCR时掺入一定比例的dUTP替代dTTP ,扩增长度为 1 5kb的片段 ,用尿嘧啶 DNA糖基化酶 (UDG)消化处理掺入到双链上的dUTP... 详细信息

目的　探讨细菌 16SrDNA检测芯片杂交前的样本处理优化方法。方法　设计针对细菌 16SrDNA基因全长的通用引物 ,通过PCR时掺入一定比例的dUTP替代dTTP ,扩增长度为 1 5kb的片段 ,用尿嘧啶 DNA糖基化酶 (UDG)消化处理掺入到双链上的dUTP后 ,再经浓氨水特异性断开DNA双链上原dUTP处的磷酸二酯键 ,然后用聚丙烯酰胺凝受胶电泳 (PAGE)和琼脂糖电泳确认片段化的效果。结果　本实验选用的基因当dUTP与dTTP的比例在 3∶7～ 1∶1时 ,都能够获得比较理想的片段化结果。结论　通过控制一定的dUTP掺入比例再经UDG及氨水处理能够得到稳定的片段化结果。

关键词：尿嘧啶-DNA糖基化酶 16S rDNA 片段化 PCR dUTP dITP

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革兰阴性杆菌耐药与产AmpC酶的检测及其与耐药的关系分析

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第三军医大学学报 2005年第4期27卷 353-355页

作者：蔡瑜娇刘岚刘昌林刘昕黄正根高玉梅袁科第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室重庆400038 重医儿童医院检验科细菌室重庆400014

目的　了解 2 74株革兰阴性杆菌的耐药现状及产AmpC酶与耐药的关系分析。方法　采用microscanwalkaway 4 0鉴定 2 74株革兰阴性杆菌的药敏情况 ,并用酶粗提物头孢西丁三维实验检测AmpC酶。结果　 3 2株细菌产AmpC酶 (占 11 7% ) ,其中... 详细信息

目的　了解 2 74株革兰阴性杆菌的耐药现状及产AmpC酶与耐药的关系分析。方法　采用microscanwalkaway 4 0鉴定 2 74株革兰阴性杆菌的药敏情况 ,并用酶粗提物头孢西丁三维实验检测AmpC酶。结果　 3 2株细菌产AmpC酶 (占 11 7% ) ,其中阴沟肠杆菌 13株 (占 3 0 2 % )、产气肠杆菌 2株 (占 2 2 2 % )、不动杆菌 6株 (占 2 1 4% )。 2 74株菌对IPM、AK、CIP、FEP、CN、SXT、CAZ、ATM、CRO、PIP的药物敏感率从高到低依次为 :89 4%、78 8%、 69 3 %、 5 5 5 %、45 9%、3 9 1%、3 6 9%、3 1 4%、3 0 3 %、18 2 %。结论　革兰阴性杆菌的耐药状况严重 ,检测AmpC酶有助于临床抗菌药物的选用。

关键词：耐药性 AmpC酶革兰阴性杆菌

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野生型及突变型survivin基因重组逆转录病毒的构建及表达研究

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第三军医大学学报 2005年第8期27卷 691-693页

作者：杨晓亚宋建勋白云第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所重庆400038

目的　构建含绿色荧光蛋白和野生型及第3 4位氨基酸突变型survivin基因的双顺反子逆转录病毒载体,并进行真核细胞表达。方法　用PCR的方法由含survivin基因的真核表达载体扩增所需目的片段,然后将该片段插入逆转录病毒载体pMIG。酶切鉴... 详细信息

目的　构建含绿色荧光蛋白和野生型及第3 4位氨基酸突变型survivin基因的双顺反子逆转录病毒载体,并进行真核细胞表达。方法　用PCR的方法由含survivin基因的真核表达载体扩增所需目的片段,然后将该片段插入逆转录病毒载体pMIG。酶切鉴定重组子,脂质体介导下转染包装细胞PhoenixE ,病毒上清感染NIH3T3细胞,RT PCR检测外源基因mRNA的表达、流式细胞仪检测GFP的表达从而确认外源基因的转录。结果　经琼脂糖凝胶电泳鉴定,目的片段成功的连接到pMIG载体上。载体转染NIH3T3细胞,RT PCR显示目的片段mRNA能够表达,流式细胞仪检测GFP获良好的表达。结论　成功构建了人survivin基因野生型及突变型逆转录病毒,并在NIH3T3细胞进行了表达,为下一步的研究工作提供了有效的分子工具,并且为将来能在体内应用抑制survivin基因表达的肿瘤治疗奠定基础。

关键词： survivin基因野生型突变型逆转录病毒载体

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导入hLIGHT-Fc基因对人乳腺癌细胞体外增值的影响

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第三军医大学学报 2005年第24期27卷 2422-2424页

作者：熊刚吴蔚杨康白云第三军医大学西南医院胸心外科第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室重庆400038

目的探讨hLIGHTFc基因对人乳腺癌细胞的体外抑制效应。方法以DOTAP脂质体介导hLIGHTFc基因转染人乳腺癌细胞株MCF7,通过绘制细胞生长曲线、MTT比色法以及流式细胞仪检测观察hLIGHTFc转染对MCF7细胞生长的影响。结果hLIGHTFc基因的表达... 详细信息

目的探讨hLIGHTFc基因对人乳腺癌细胞的体外抑制效应。方法以DOTAP脂质体介导hLIGHTFc基因转染人乳腺癌细胞株MCF7,通过绘制细胞生长曲线、MTT比色法以及流式细胞仪检测观察hLIGHTFc转染对MCF7细胞生长的影响。结果hLIGHTFc基因的表达可以抑制MCF7细胞的体外生长。在5%血清培养时,MCF7/LIGHT细胞的生长曲线较对照组明显降低;MTT比色显示MCF7/LIGHT的细胞活力与对照组相比有显著性差异(P<0.05);流式细胞检测显示,在IFNγ协同下基因转染使瘤细胞的生长滞留在G0+G1期,S期细胞明显减少,并观察到部分瘤细胞的凋亡。结论hLIGHTFc基因转染对MCF7细胞具有体外抑制作用,但全面评价有待进一步的研究。

关键词： hLIGHT-Fc 转染 MCF-7细胞基因治疗

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草麻黄中补体抑制成分抑制大鼠异种心脏移植超急性排斥反应的实验研究

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第三军医大学学报 2005年第17期27卷 1773-1775页

作者：李军杨康白云吴蔚熊刚第三军医大学西南医院胸心外科重庆400038 第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室重庆400038

目的初步探讨草麻黄中补体抑制成分(comp lem ent inh ib iting component,C IC)对异种心脏移植超急性排斥反应的作用。方法按是否给予C IC灌胃处理,将动物模型分为对照组和实验组,观察对照组和实验组术后供心存活时间,在术后早期及供... 详细信息

目的初步探讨草麻黄中补体抑制成分(comp lem ent inh ib iting component,C IC)对异种心脏移植超急性排斥反应的作用。方法按是否给予C IC灌胃处理,将动物模型分为对照组和实验组,观察对照组和实验组术后供心存活时间,在术后早期及供心失活时取两组心脏组织行光镜、电镜病理检查,并在术后固定时间分别抽鼠血行血清学检查,用微量法测定CH50、APH50,用透射比浊法测定C3。结果实验组移植心脏存活时间为(51.00±3.46)m in,与对照组(30.30±3.46)m in比较差异极显著(P<0.01)。结论豚鼠至大鼠异种心脏移植后,补体的经典途径和替代途径均被激活。C IC能明显抑制补体活性,延缓超急性排斥反应的发生,从而使移植心脏的存活时间延长。

关键词：异种心脏移植超急性排斥反应补体补体抑制剂草麻黄

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小鼠peroxiredoxin基因家族的生物信息学分析

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第三军医大学学报 2005年第9期27卷 847-849页

作者：章波向渝梅白云许雪青王燕第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室重庆400038 第三军医大学科研部重庆400038

目的　分析小鼠peroxiredoxin基因家族的基因组结构和进化。方法　利用已经公布的小鼠基因组数据库,采用BLAST程序检索该基因家族各成员的编码基因和假基因,并利用ClusterW软件进行序列联配,绘制其分子进化树。结果　分析表明该家族半... 详细信息

目的　分析小鼠peroxiredoxin基因家族的基因组结构和进化。方法　利用已经公布的小鼠基因组数据库,采用BLAST程序检索该基因家族各成员的编码基因和假基因,并利用ClusterW软件进行序列联配,绘制其分子进化树。结果　分析表明该家族半数成员具有多个假基因序列,为返转座类型假基因。这些假基因的形成时间有先后,所具有返转座假基因的典型结构也各不相同。分析该家族的进化表明PrxⅠ Ⅳ有共同的祖先,归为一个亚类,而PrxⅤ和Ⅵ与前者的相似性较差,归为另一个亚类。结论　该家族每个成员长期进化所形成的多样性提示其功能具有独特性。

关键词： pemxiredoxin 基因家族进化生物信息学

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核酸疫苗pcDNA3cC1小鼠体内表达的血清学分析

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第二军医大学学报 2005年第8期26卷 957-958页

作者：章亚南何晓文王芳姜磊任丁李德安孙树汉第二军医大学基础医学部医学生物技术和分子遗传研究所医学遗传学教研室上海200433

抗原cC1是从猪囊尾蚴cDNA文库中以囊虫病患者、病猪血清为探针筛选出的抗原蛋白．经免疫学检测证实为具有较高特异性的诊断用抗原。在前期的研究中，我们将全长cC1 cDNA插入真核表达质粒载体pcDNA3，构建了重组质粒pcDNA3-cC1。该DNA疫... 详细信息

抗原cC1是从猪囊尾蚴cDNA文库中以囊虫病患者、病猪血清为探针筛选出的抗原蛋白．经免疫学检测证实为具有较高特异性的诊断用抗原。在前期的研究中，我们将全长cC1 cDNA插入真核表达质粒载体pcDNA3，构建了重组质粒pcDNA3-cC1。该DNA疫苗免疫仔猪后，能有效诱导仔猪的免疫保护效应。本研究选择该DNA疫苗为分析对象，旨在建立一种早期预测DNA疫苗免疫效果的方法。

关键词：疫苗,DNA pcDNA3 cC1 cC1循环抗原

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T细胞表达CD137L分子介导对血管内皮细胞的活化刺激效应

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第三军医大学学报 2005年第16期27卷 1671-1673页

作者：张利永傅晓岚肖宇宏黄钢张立群白云第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室重庆400038 第三军医大学高原军事医学系中心实验室重庆400038

目的探讨活化T细胞表面表达的CD137L分子对内皮细胞功能的影响。方法将活化的T细胞与内皮细胞共培养,ELISA检测共培养上清中IL-1、IL-8的含量;流式细胞仪检测内皮细胞表面粘附分子ICAM-1的表达变化,并观察用融合蛋白CD137-Fc阻断CD137-C... 详细信息

目的探讨活化T细胞表面表达的CD137L分子对内皮细胞功能的影响。方法将活化的T细胞与内皮细胞共培养,ELISA检测共培养上清中IL-1、IL-8的含量;流式细胞仪检测内皮细胞表面粘附分子ICAM-1的表达变化,并观察用融合蛋白CD137-Fc阻断CD137-CD137L共刺激通路后内皮细胞分泌细胞因子的变化。结果活化的T细胞刺激了内皮细胞活化,诱导了内皮细胞合成和分泌细胞因子IL-1、IL-8以及粘附分子ICAM-1的表达;可溶性融合蛋白CD137-Fc成功地阻断了CD137-CD137L的相互作用,内皮细胞合成和分泌细胞因子的能力降低。结论证明CD137-CD137L的相互作用在内皮细胞与T细胞的相互作用中发挥了重要的作用,提示CD137与其配体交联具有刺激内皮细胞活化的生物学功能。

关键词： CD137 CD137L CD137-Fc 共刺激分子

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内皮细胞表达CD137分子介导对T细胞的抑制效应

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第三军医大学学报 2005年第15期27卷 1541-1543页

作者：张利永黄钢傅晓岚肖宇宏张立群白云第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室重庆400038 第三军医大学高原军事医学系中心实验室重庆400038

目的研究内皮细胞表达的CD137分子与活化的T细胞表达的CD137L交联后对T细胞的刺激效应。方法将活化的内皮细胞与活化的T细胞共培养,ELISA检测共培养上清中IL-2、IL-10和IFN-γ的含量;流式细胞仪检测内皮细胞表面标志分子CD25、CD69的表... 详细信息

目的研究内皮细胞表达的CD137分子与活化的T细胞表达的CD137L交联后对T细胞的刺激效应。方法将活化的内皮细胞与活化的T细胞共培养,ELISA检测共培养上清中IL-2、IL-10和IFN-γ的含量;流式细胞仪检测内皮细胞表面标志分子CD25、CD69的表达变化;CCK-8试剂盒检测T细胞存活率,并观察用融合蛋白抗-CD137阻断CD137-CD137L共刺激通路后T细胞分泌细胞因子的变化。结果采用细胞共培养后,T细胞分泌IL-2、IL-10和IFN-γ的水平下降,而且CD25、CD69的表达水平降低,T细胞存活率下降,应用抗-CD137单克隆抗体阻断CD137-CD137L相互作用后,IL-2、IL-10和IFN-γ的分泌水平升高,CD25、CD69的表达上调,T细胞存活率上升。结论活化的内皮细胞诱导表达CD137蛋白分子与活化的T细胞上诱导表达的CD137L相互作用,通过CD137L向T细胞内传递抑制信号,抑制了T细胞合成和分泌细胞因子的功能。表明CD137-CD137L信号通路在内皮细胞与T细胞的信号作用中有着重要的地位。

关键词： CD137 CD137L 共刺激分子

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强直性脊柱炎易感基因的研究进展

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Acta Genetica Sinica 2005年第10期32卷 1108-1114页

作者：陈蕊雯王勇孙树汉段世伟第二军医大学医学生物技术与分子遗传研究所基础医学部医学遗传学教研室上海200433 上海交通大学Bio-X生命科学研究中心上海200031

强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)是一种常见的高度遗传的风湿类疾病。至20世纪70年代以来,越来越多的证据表明HLA-B27是AS最主要的易感基因。然而,全基因组扫描和关联分析等研究发现在HLA以外的区域仍存在AS的易感区域,大量的... 详细信息

强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)是一种常见的高度遗传的风湿类疾病。至20世纪70年代以来,越来越多的证据表明HLA-B27是AS最主要的易感基因。然而,全基因组扫描和关联分析等研究发现在HLA以外的区域仍存在AS的易感区域,大量的证据显示在HLA区内外有许多基因与AS的发病有关。文章主要综述了与AS相关的易感基因以及它们的研究现状。

关键词：强直性脊柱炎易感性全基因组扫描关联分析连锁分析

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