检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2005年第5期26卷 509-514页

作者：朱勇飞朱江波周宏元张天宝第二军医大学基础医学部卫生毒理学教研室上海200433

目的研究小分子热休克蛋白基因(sHsps)在小鼠胚胎前肢正常和异常发育过程中的表达情况。方法在GD10(查到阴栓之日为GD0)经口一次分别给予实验组孕鼠80mg/kg的视黄酸,对照组孕鼠给予等体积的植物油,并分别于GD11～GD18取两组胎鼠的前肢,... 详细信息

目的研究小分子热休克蛋白基因(sHsps)在小鼠胚胎前肢正常和异常发育过程中的表达情况。方法在GD10(查到阴栓之日为GD0)经口一次分别给予实验组孕鼠80mg/kg的视黄酸,对照组孕鼠给予等体积的植物油,并分别于GD11～GD18取两组胎鼠的前肢,利用RT PCR方法半定量检测15种Hsps的表达丰度。结果正常肢除Hspb4在GD12才开始表达外,其余在GD11～GD18均有表达;Hsp10、Hsp20、Hspb2、Hspb3表达丰度基本恒定;Hsp22、Hsp30随胚龄的增加而表达增高;Hsp25起初表达较高,以后下降并恒定在较低的水平;Hspb4在GD15、Hspb9在GD11和GD14出现高峰。多数基因在GD11～GD18的表达丰度实验组明显高于对照组。某些基因在正常和异常肢发育过程中表达明显不同,如Hsp25在实验肢和对照肢除表达趋势不同外,GD11～GD12对照肢表达丰度高于实验肢,而GD14～GD18则实验肢的表达丰度高于对照肢;实验肢Hspb7在GD11～GD12不表达,GD13开始表达,GD15后逐渐下降;实验肢Hspb10仅在GD12～GD16表达,其余胚龄不表达。结论不同Hsps的表达特点有所不同,多数Hsps在短肢异常发育中表达比正常肢明显升高,部分Hsps与正常肢发育表达模式明显不同。

关键词：热休克蛋白基因视黄酸胚胎肢发育

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重组人可溶性血管内皮细胞生长抑制因子的抗肿瘤活性

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第二军医大学学报 2001年第7期22卷 639-641页

作者：肖扬焦炳华朱玉平娄永华王路第二军医大学基础医学部卫生毒理学教研室上海200433 基础医学部微生物学教研室

目的 :检测重组人可溶性血管内皮细胞生长抑制因子 (VEGI)的抗肿瘤活性。方法 :检测重组人可溶性 VEGI对建株人脐静脉内皮细胞 (ECV 30 4)、新生牛主动脉内皮细胞 (BAEC)增殖抑制的活性以及对荷 S180肉瘤小鼠的疗效。结果 :重组人可溶... 详细信息

目的 :检测重组人可溶性血管内皮细胞生长抑制因子 (VEGI)的抗肿瘤活性。方法 :检测重组人可溶性 VEGI对建株人脐静脉内皮细胞 (ECV 30 4)、新生牛主动脉内皮细胞 (BAEC)增殖抑制的活性以及对荷 S180肉瘤小鼠的疗效。结果 :重组人可溶性 VEGI可以直接抑制 ECV30 4、BAEC的增殖 ,强烈抑制 S180肉瘤生长并延长 S180腹水瘤小鼠的寿命。结论 :重组人可溶性 VEGI可通过抑制新生血管形成用于肿瘤治疗。

关键词：血管内皮细胞生长抑制因子内皮新生血管生长抑制物抗肿瘤药 VEGI

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基因芯片及其在医学研究中的意义

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第二军医大学学报 2000年第1期21卷 91-94,98页

作者：张天宝第二军医大学基础医学部卫生毒理学教研室上海200433

基因芯片技术是90年代兴起的一项前沿生物技术,它可以将生物学中许多不连续的分析过程,移植到固相的介质芯片上,并使其连续化和微型化.

关键词：基因芯片基因表达 DNA 测序

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废气煤烟颗粒提取物诱发DNA氧化损伤的实验研究

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第二军医大学学报 2000年第9期21卷 874-876页

作者：仲伟鉴印木泉第二军医大学基础医学部卫生毒理学教研室上海200433

目的 :观察煤烟颗粒诱发 DNA氧化损伤及其可能机制。方法 :应用 ESR波谱技术分析测定研究煤烟颗粒的自由基性质结构信息 ;应用 udenfriend反应体系研究其对 DNA氧化损伤作用。结果 :ESR分析显示煤烟颗粒的 g值为 2 .0 0 16 ,近似半醌... 详细信息

目的 :观察煤烟颗粒诱发 DNA氧化损伤及其可能机制。方法 :应用 ESR波谱技术分析测定研究煤烟颗粒的自由基性质结构信息 ;应用 udenfriend反应体系研究其对 DNA氧化损伤作用。结果 :ESR分析显示煤烟颗粒的 g值为 2 .0 0 16 ,近似半醌自由基 QH·性质 ;可诱发脱氧核糖 (d R)或脱氧腺苷 (d A)羟化降解 ,羟自由基清除剂 DMSO和甘露醇能抑制这种效应。燃油烟颗粒的 g值为 2 .10 0 8,宽谱 ,类似大气中飘尘自由基性质 ;不能诱发 d R和 d A的羟化降解作用。结论 :煤烟颗粒可诱发 DNA氧化损伤 ,其可能机制是煤烟颗粒中 QH·自氧化途径 (非酶反应 )。

关键词：煤烟颗粒脱氧核糖羟化降解 DNA氧化损伤

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基于荧光素酶报告基因的MCF7细胞雌激素样物质检测方法的建立

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第二军医大学学报 2005年第9期26卷 1022-1025页

作者：赵海涛张天宝朱江波朱玉平万旭英王征马玺里第二军医大学基础医学部卫生毒理学教研室上海200433

目的:建立基于报告基因的MCF7细胞体外雌激素样物质检测方法,并研究2,2-双(对氯苯基)-1,1,1-三氯乙烷(2,4-DDT)和甲氧氯(METH)的雌激素样作用。方法:合成人雌激素反应元件(ERE)核心片段并将其插入pGL3-promoter载体的多克隆位点,构建成... 详细信息

目的:建立基于报告基因的MCF7细胞体外雌激素样物质检测方法,并研究2,2-双(对氯苯基)-1,1,1-三氯乙烷(2,4-DDT)和甲氧氯(METH)的雌激素样作用。方法:合成人雌激素反应元件(ERE)核心片段并将其插入pGL3-promoter载体的多克隆位点,构建成雌激素反应元件ERE调控的报告质粒pERE-Luc,用脂质体转染法将pERE-Luc及内对照质粒phRL-SV40瞬时转染MCF7细胞,用17β-雌二醇(E2)及受体拮抗剂三苯氧胺(TAM)等处理后检测报告基因荧光素酶的表达,并用雌激素样物质2,4-DDT和METH对方法的有效性进行验证。结果:构建了ERE调控的报告质粒pERE-Luc,转染pERE-Luc的MCF7细胞报告基因的表达与E2呈明显的剂量反应关系,1×10-11mol/L E2可引起报告基因表达,至1×10-9mol/L可达到最大表达值,而未转染pERE-Luc时与E2无明显反应,TAM可以显著抑制E2引起的报告基因的表达。验证结果表明,2,4-DDT浓度>1×10-7mol/L及METH浓度>1×10-6mol/L时可产生雌激素样活性,2,4-DDT的雌激素样活性强于METH。结论:建立的基于荧光素酶报告基因的体外雌激素样物质检测方法有效可靠,以此方法检测2,4-DDT和METH显示有明显的雌激素样活性作用。

关键词：雌激素样活性基因报告荧光素酶

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可溶性血管内皮细胞生长抑制因子基因的克隆与表达

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第二军医大学学报 2000年第5期21卷 416-419页

作者：肖扬娄永华王路朱玉平焦炳华第二军医大学基础医学部卫生毒理学教研室上海200433

目的 :对可溶性人血管内皮细胞生长抑制因子 (vascular endothelial growth inhibitor,VEGI)基因进行克隆和表达 ,检测表达产物对血管内皮细胞增殖的抑制活性。方法 :将可溶性人 VEGI基因克隆入载体 p U C19后测序 ;再将正确的 VEGI基... 详细信息

目的 :对可溶性人血管内皮细胞生长抑制因子 (vascular endothelial growth inhibitor,VEGI)基因进行克隆和表达 ,检测表达产物对血管内皮细胞增殖的抑制活性。方法 :将可溶性人 VEGI基因克隆入载体 p U C19后测序 ;再将正确的 VEGI基因亚克隆入表达载体 p PROEXHTb,IPTG诱导表达 ;初步纯化表达产物 ,检测对新生牛主动脉内皮细胞增殖抑制活性。结果 :可溶性人 VEGI可以直接抑制新生牛主动脉内皮细胞的增殖。结论 :VEGI是一种新的内皮细胞生长抑制因子 ,通过抑制新生血管形成可用于肿瘤治疗。

关键词：血管内皮细胞生长抑制因子基因克隆基因表达

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化学物质诱发的小鼠肢体畸形动物模型的建立

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第二军医大学学报 2003年第6期24卷 658-660页

作者：陈蓉芳张天宝印木泉朱江波郭苗莉第二军医大学基础医学部卫生毒理学教研室上海200433

目的 :建立发生率稳定、畸形类型特异和易于获得的化学物质所致小鼠肢体畸形动物模型。方法 :采用致突变性致畸物 N-甲基 - N'-硝基 - N-甲基亚硝基胍 (N- m ethyl- N'- nitro- N- nitrosoguanidine,MNNG)作为受试物 ,观察不... 详细信息

目的 :建立发生率稳定、畸形类型特异和易于获得的化学物质所致小鼠肢体畸形动物模型。方法 :采用致突变性致畸物 N-甲基 - N'-硝基 - N-甲基亚硝基胍 (N- m ethyl- N'- nitro- N- nitrosoguanidine,MNNG)作为受试物 ,观察不同剂量和不同给药时间的胎鼠畸形率、畸形类型及特征。结果 :孕期第 12天一次给予 MNNG4 0 m g/ kg时 ,胎鼠畸形类型主要为肢体畸形 ,肢体畸形率以活胎计为 33.7% (31/ 92 ) ,以窝计为 81.8% (9/ 11) ,肢体畸形占畸形胎鼠的构成比为 10 0 %。畸形类型以短指 (趾 )和缺指 (趾 )最常见。四肢畸形的发生率和严重程度存在不对称性 ,依次为左后 >左前 >右后 >右前。掌跖骨缺失和骨化不全发生率较高 ,此外还有胫腓骨的缺失和骨化不全 ,特别是大体形态所见短肢是胫腓骨缺失所致。结论 :成功建立了小鼠肢体畸形动物模型。

关键词：肢体畸形动物模型化学物质诱发分子机制发育

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甲基N-硝基亚硝基胍和视黄酸致ICR小鼠腭裂发育模型的建立

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第二军医大学学报 2005年第1期26卷 58-60页

作者：朱江波印木泉陈蓉芳郭苗莉张天宝第二军医大学基础医学部卫生毒理学教研室上海200433

目的:建立发生率较高、畸形类型明确、易于获得并可用于不同类型化学物致腭裂发生机制研究的动物模型。方法:采用致突变性化合物甲基N 硝基亚硝基胍(MNNG)和非致突变性致畸物视黄酸(RA)作用于ICR小鼠(对照组采用溶剂),观察不同剂量和不... 详细信息

目的:建立发生率较高、畸形类型明确、易于获得并可用于不同类型化学物致腭裂发生机制研究的动物模型。方法:采用致突变性化合物甲基N 硝基亚硝基胍(MNNG)和非致突变性致畸物视黄酸(RA)作用于ICR小鼠(对照组采用溶剂),观察不同剂量和不同给药时间的胚鼠腭裂畸形发生率,确定诱导腭裂发生的最佳作用条件,并通过光镜、电镜等手段对其畸形特征作进一步分析。结果:孕10 d一次给予40 mg/kg MNNG所致腭裂的发生率为55.2%,一次给予80 mg/kg RA腭裂发生率几乎达100%;光镜结果显示这2种化学物诱导的腭裂均为小腭;电镜结果表明孕16 d对照组腭中嵴上皮细胞表面有大量的丝状伪足而实验组中则无。结论:成功建立了可供两类不同腭裂发生分子机制研究的动物模型,为进一步研究腭裂畸形的分子机制奠定了基础。

关键词：腭裂动物模型甲基N-硝基亚硝基胍视黄酸发育

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人支气管上皮细胞c-Ha-ras^(V12G)基因转染细胞系促癌剂检测模型的建立

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第二军医大学学报 2002年第1期23卷 54-56页

作者：吴涛印木泉第二军医大学基础医学部卫生毒理学教研室上海200433

目的 :建立一个新的促癌剂检测模型。方法 :采用电穿孔法 ,将人类突变的 c- Ha- ras V1 2 G基因转入人支气管上皮细胞BEAS- 2 B中 ,将获得的 G418抗性 (G418r)单克隆细胞株用佛波醇酯 (PMA)处理 ,并选用克隆形成率、锚着独立性生长及... 详细信息

目的 :建立一个新的促癌剂检测模型。方法 :采用电穿孔法 ,将人类突变的 c- Ha- ras V1 2 G基因转入人支气管上皮细胞BEAS- 2 B中 ,将获得的 G418抗性 (G418r)单克隆细胞株用佛波醇酯 (PMA)处理 ,并选用克隆形成率、锚着独立性生长及血清抗性等表型改变对受试细胞进行了恶性程度检测。结果 :(1)在促癌剂 PMA作用下 ,BEAS- 2 B基因转染细胞发生了恶性转化 ;(2 )表达突变 ras基因的上皮细胞 ,在大剂量 PMA(>1μmol)的急性刺激 (2 4h)下 ,可诱导细胞死亡 ;(3)随着细胞恶性程度的增加 ,某些促癌剂的促细胞分化作用将减弱 ,并有生长刺激作用。结论 :该模型可用于促癌剂的检测及促癌作用机制研究。

关键词：基因转染细胞佛波醇酯促癌剂支气管上皮细胞

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重组人可溶性凋亡素-2配体在Pichia系统中的表达

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第二军医大学学报 2001年第3期22卷 248-251页

作者：王梁华朱玉平娄永华彭燕冯煜焦炳华第二军医大学基础医学部卫生毒理学教研室上海200433

目的 :在甲醇营养型酵母 (Pichia)表达系统中表达重组人可溶性肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体 (TRAIL ,凋亡素 - 2配体 )分子。方法 :人可溶性 TRAIL编码基因片段插入 p IC 3.5酵母表达载体 ,氯化锂转化酵母 GS115株 ,甲醇诱导表达 5 ... 详细信息

目的 :在甲醇营养型酵母 (Pichia)表达系统中表达重组人可溶性肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体 (TRAIL ,凋亡素 - 2配体 )分子。方法 :人可溶性 TRAIL编码基因片段插入 p IC 3.5酵母表达载体 ,氯化锂转化酵母 GS115株 ,甲醇诱导表达 5 d,SDS- PAGE和 Western- blotting确认表达 ,L 92 9细胞鉴定活性。结果 :发现在酵母细胞中重组表达的 TRAIL在 SDS-PAGE上占总蛋白的 5 0 %以上 ,用抗人 TRAIL多抗可以确认表达了 TRAIL重组分子 ,杀伤肿瘤细胞的比活性较原核表达后复性的 TRAIL有明显提高 ,并能诱导几株肿瘤细胞 DNA片段化 ,说明 TRAIL可能已正确折叠并形成活性必需的高级结构。结论 :在 Pichia系统中正确表达了人可溶性 TRAIL分子。

关键词：重组人可溶性凋亡素-2 Pichia表达系统细胞毒甲醇营养型酵母

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