检索结果-内蒙古大学图书馆

上海交通大学学报(医学版) 2025年第1期45卷 1-10页

作者： PANDIT Roshan 卢君瑶何立珩包玉洁季萍陈颖盈许洁王颖上海交通大学基础医学院免疫学与微生物学系上海市免疫学研究所上海200025 上海交通大学医学院附属第九人民医院感染科上海201999 上海交通大学医学院上海市病毒研究院上海200025

目的:筛选新型冠状病毒感染(coronavirus disease-2019,COVID-19)患者合并肾损伤(kidney injury,KI)的相关标志物,探讨新型冠状病毒蛋白通过影响肾脏细胞与巨噬细胞间相互作用参与肾损伤的相关机制。方法:回顾性分析2022年12月—2023年... 详细信息

目的:筛选新型冠状病毒感染(coronavirus disease-2019,COVID-19)患者合并肾损伤(kidney injury,KI)的相关标志物,探讨新型冠状病毒蛋白通过影响肾脏细胞与巨噬细胞间相互作用参与肾损伤的相关机制。方法:回顾性分析2022年12月—2023年2月上海交通大学医学院第九人民医院收治的COVID-19合并KI患者的临床特征,采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清中的炎症因子和趋化因子水平。体外用严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus-2,SARS-CoV-2)重组刺突蛋白S1亚基刺激人巨噬细胞系THP-1后,收集细胞和培养上清,通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)和ELISA检测炎症因子和趋化因子的水平。利用S1蛋白刺激THP-1的细胞培养上清制备条件培养基,体外刺激人肾上皮细胞系HK-2,并检测HK-2细胞分泌细胞因子的能力。采用抗体阻断实验分析条件培养基对HK-2细胞产生细胞因子的影响。结果:在39例COVID-19患者中,有8例(20.50%)血清肌酐水平高于正常参考范围,提示这些患者可能合并KI。ELISA结果显示COVID-19合并KI组患者外周肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平[(18.33±8.20)pg/mL]显著高于未合并KI组[(11.88±6.50)pg/mL](P=0.015)。体外实验结果显示S1蛋白可以刺激THP-1胞内TNF-α、白细胞介素-1β(interleukin1β,IL-1β)和C-X-C基序趋化因子配体10(chemokine C-X-C motif ligand 10,CXCL10)基因转录水平上升,同时刺激THP-1高表达TNF-α、IL-1β和CXCL10(P<0.001)。进一步研究发现,利用S1蛋白刺激THP-1的细胞培养上清制备的条件培养基能促进HK-2细胞表达TNF-α(P=0.005)。而采用抗TNF-α抗体(英夫利昔单抗,infliximab)阻断条件培养基中的TNF-α后,HK-2细胞表达TNF-α的水平显著降低(P<0.001)。结论:TNF-α在COVID-19合并KI患者中明显增高,提示TNF-α是COVID-19合并KI的重要炎症因子。细胞学实验证实新冠病毒S1蛋白可以诱导巨噬细胞分泌TNF-α,进而促进肾脏细胞炎症水平的增加,可能是COVID-19合并KI发生的主要原因。因此,靶向TNF-α有望成为降低COVID-19合并KI发生率的潜在新策略。

关键词：肿瘤坏死因子-α 新型冠状病毒感染肾损伤炎症反应干预靶点

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外周血CD4+T细胞各亚群比例在类风湿关节炎临床诊断中的应用价值分析

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中国免疫学杂志 2025年

作者：闫辉波秦盈盈李呈贞陈广洁钮晓音上海交通大学医学院上海市免疫学研究所上海市普陀区妇婴保健院上海市光华中西医结合医院

目的: 探讨外周血CD4+T细胞各亚群比例对类风湿关节炎（RA）的临床诊断价值。方法选取2023年11月至2024年3月在上海光华中西医结合医院关节内科的住院RA病人50例作为病例组，同时选取50例健康志愿者作为对照组，收集一般临床资料，采... 详细信息

目的: 探讨外周血CD4+T细胞各亚群比例对类风湿关节炎（RA）的临床诊断价值。方法选取2023年11月至2024年3月在上海光华中西医结合医院关节内科的住院RA病人50例作为病例组，同时选取50例健康志愿者作为对照组，收集一般临床资料，采用流式细胞术检测外周血CD4+T细胞各亚群比例，分析CD4+T细胞各亚群比例与临床疾病活动度（DAS）28评分的相关性。多因素Logistics回归分析CD4+T各亚群细胞比例对RA发生的影响。受试者工作特征曲线（ROC）分析CD4+T细胞各亚群比例在RA诊断中的应用价值。结果RA患者外周血辅助性T细胞（Th）17、Tfh比例明显高于对照组（P<0.05），调节性T细胞（Treg）、滤泡调节性T细胞（Tfr）细胞比例明显低于对照组（P<0.05），Th1、Th2细胞比例无明显差异（P>0.05）。Pearson相关性分析显示，Treg、Tfh、Tfr细胞比例与DAS28呈显著相关性（P<0.05）。Logistics回归分析结果显示，Th17、Tfh细胞比例与RA的发生呈正相关性，Treg、Tfr细胞比例与RA的发生呈负相关性。ROC曲线分析显示，Tfh、Tfr、Th17对RA诊断的AUC值分别为0.910、0.803、0.711，AUC均>0.7，Tfh细胞比例对RA诊断价值最高，其灵敏度、特异性、阳性预测值、阴性预测值等均优于其他CD4+T细胞各亚群比例。结论 RA患者外周血CD4+T细胞各亚群中Tfh细胞比例对RA的诊断价值最高，可作为临床协助诊断RA的一个重要指标。

关键词：类风湿关节炎 CD4 T细胞滤泡辅助性T细胞滤泡调节性T细胞

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嗜酸性粒细胞在肥胖及相关疾病中的作用

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现代免疫学 2025年第2期45卷 89-95页

作者：胡雅楠王克凡路丽明 Svetoslav Chakarov 上海交通大学医学院上海市免疫学研究所上海200025

近年来肥胖的患病率不断上升,人们对肥胖的精确细胞和分子机制仍知之甚少。肥胖过程中脂肪细胞过度聚集会引发一系列低丰度炎症,并对全身生理功能产生许多影响。该文聚焦于嗜酸性粒细胞在肥胖及相关代谢紊乱进展中的重要作用,嗜酸性粒... 详细信息

近年来肥胖的患病率不断上升,人们对肥胖的精确细胞和分子机制仍知之甚少。肥胖过程中脂肪细胞过度聚集会引发一系列低丰度炎症,并对全身生理功能产生许多影响。该文聚焦于嗜酸性粒细胞在肥胖及相关代谢紊乱进展中的重要作用,嗜酸性粒细胞的生成、发育和其在脂肪组织(adipose tissue,AT)中的募集,同时介绍AT微环境与嗜酸性粒细胞的相互作用。详细了解AT微环境中嗜酸性粒细胞的特性将有利于更好地挖掘和利用其治疗肥胖的潜力。

关键词：嗜酸性粒细胞脂肪组织肥胖免疫代谢

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免疫细胞治疗科技创新与产业发展态势

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生命科学 2025年第1期37卷 97-106页

作者：范月蕾李荣李斌张博文赵若春毛开云中国科学院上海生命科学信息中心中国科学院上海营养与健康研究所上海200031 上海交通大学医学院上海市免疫学研究所上海200025

免疫细胞治疗是全球生物医药领域具有潜力的新赛道之一。随着技术的成熟与产品的研发和临床应用,免疫细胞治疗已从探索期进入到全面产业化阶段。本文从基础研究、临床研究转化和产业化的角度梳理和分析了2024年免疫细胞治疗领域的科技... 详细信息

免疫细胞治疗是全球生物医药领域具有潜力的新赛道之一。随着技术的成熟与产品的研发和临床应用,免疫细胞治疗已从探索期进入到全面产业化阶段。本文从基础研究、临床研究转化和产业化的角度梳理和分析了2024年免疫细胞治疗领域的科技创新与产业发展态势,并对免疫细胞治疗未来的发展前景进行了展望。

关键词：细胞治疗免疫细胞发展态势

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流式细胞术检测新型冠状病毒抗原特异性T细胞的方法和操作规程专家共识

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中华医学杂志 2025年第4期105卷 261-270页

作者：中国免疫学会曹雪涛吴玉章钟南山刘书逊王忠芳李志清黄杰赵金存崔婷婷朱爱如张文新不详海军军医大学免疫学研究所暨免疫与炎症全国重点实验室上海200433 中国医学科学院免疫治疗研究中心北京100005 陆军军医大学基础医学院免疫学教研室重庆400038 广州医科大学呼吸疾病全国重点实验室广州国家实验室广州510120 中国食品药品检定研究院体外诊断试剂检定所广州医科大学呼吸疾病全国重点实验室广州医科大学附属第一医院广州国家实验室

抗原特异性T细胞是抗病毒免疫应答的重要组成部分,了解其数量、相对频数与功能状态对评估个体或群体抗原特异性免疫具有重要意义,然而抗原特异性T细胞相关的检测技术和操作流程目前尚缺乏一致性的指南或共识。在新型冠状病毒感染疫情期... 详细信息

抗原特异性T细胞是抗病毒免疫应答的重要组成部分,了解其数量、相对频数与功能状态对评估个体或群体抗原特异性免疫具有重要意义,然而抗原特异性T细胞相关的检测技术和操作流程目前尚缺乏一致性的指南或共识。在新型冠状病毒感染疫情期间和疫情后评估群体的新型冠状病毒特异性T细胞均有必要性。为规范新型冠状病毒特异性T细胞的检测方法和操作,中国免疫学会在新型冠状病毒特异性T细胞的检测方法、生物标志物组合方案、操作技术要点和注意事项、质量控制、数据分析和结果解读、人员培训等方面形成相关共识。本共识对建立新型冠状病毒特异性T细胞标准检测方法和操作流程具有指导意义,有利于提高不同中心检测结果的一致性和可比性,也为制订其他病原(如流感病毒)感染的抗原特异性T细胞检测规范提供参考。

关键词：冠状病毒属新型冠状病毒免疫应答抗原特异性T细胞流式细胞术

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多种代谢物调控蛋白质翻译后修饰的新机制研究和药物筛选策略

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中国科学:化学 2025年第4期55卷 986-996页

作者：杨思园朱泽文陈滢旭杨丰瑞吴鑫源王江李文洋杨巍维宋晓玉陆晓杰柳红蒋维雷晓光赵世民上海市代谢重塑与健康重点实验室代谢与整合生物学研究院复旦大学上海医学院基础医学院生物化学与分子生物学系代谢分子医学教育部重点实验室浙江省系统健康科学重点实验室国科大杭州高等研究院生命与健康科学学院中国科学技术大学合肥微尺度物质科学国家研究中心原创新药研究全国重点实验室中国科学院上海药物研究所中国科学院大学北京分子科学国家研究中心生物有机与分子工程教育部重点实验室北京大学化学与分子工程学院

代谢物是生物大分子修饰最主要的供体来源,环境或细胞内应激导致的代谢物改变信号也被整合到生命信号网络中.蛋白质磷酸化、乙酰化和甲基化等经典翻译后修饰(post-translational modification, PTM)以ATP、乙酰辅酶A和S-腺苷甲硫氨酸(S... 详细信息

代谢物是生物大分子修饰最主要的供体来源,环境或细胞内应激导致的代谢物改变信号也被整合到生命信号网络中.蛋白质磷酸化、乙酰化和甲基化等经典翻译后修饰(post-translational modification, PTM)以ATP、乙酰辅酶A和S-腺苷甲硫氨酸(SAM)等能量或物质表征代谢物为底物,传递共性代谢物信号;我们的研究发现,代谢物可以通过不同机制调控其作为供体外的其他PTM:巴豆酰辅酶A能作为酰基供体促进细胞周期依赖的EB1蛋白的巴豆酰化修饰,通过调控微管骨架的动态性维系基因组的稳定性; α-KIV和α-KG能够分别调控蛋白质磷酸化修饰和羟基化修饰,介导与自身代谢无关的TCR信号通路和Hedgehog信号通路;此外,天然植物的次生代谢物也能够促进AD相关蛋白的泛素化降解.这些发现为代谢物调控细胞生理病理的研究打开了新的角度和视野.基于代谢物调控翻译后修饰的新机制,我们以病理过程中的关键蛋白为例,高通量筛选了瞬时受体电位香草酸通道3蛋白(TRPV3)和菌源二肽基肽酶4 (DPP4)的小分子抑制剂,为创新药的研发和疾病的干预提供了新的思路.

关键词：生物大分子翻译后修饰代谢物调控细胞信号干预

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完全与不完全睡眠剥夺对小鼠免疫功能的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2010年第2期26卷 115-117页

作者：杨天阳黄燕华蔡昊旻余奇文上海交通大学基础医学院上海市免疫学研究所上海200025

目的:研究经完全与不完全睡眠剥夺以后小鼠免疫功能的变化。方法:通过光照模拟全白天生活、黑箱模拟全黑夜生活,连续2周干扰小鼠睡眠;通过转轮24 h和72 h短期全剥夺小鼠睡眠;实验小鼠实施睡眠干扰前以BSA免疫一次。采用称重脾脏;流式细... 详细信息

目的:研究经完全与不完全睡眠剥夺以后小鼠免疫功能的变化。方法:通过光照模拟全白天生活、黑箱模拟全黑夜生活,连续2周干扰小鼠睡眠;通过转轮24 h和72 h短期全剥夺小鼠睡眠;实验小鼠实施睡眠干扰前以BSA免疫一次。采用称重脾脏;流式细胞术(FCM)检测小鼠外周血CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞数量及其比例;以ELISA方法检测血清中IL-2、IL-10以及抗BSA特异性抗体含量。结果:与正常睡眠小鼠相比:全日组脾重没有显著变化,其余各组脾重明显减轻(P<0.05);24 h转轮组CD4+T细胞数明显降低(P<0.05),其他各组没有明显变化(P>0.05);所有实验组CD8+T细胞数均明显降低,CD4/CD8比例显著增大(P<0.01);所有实验组IL-2下降(P<0.01);除全日组IL-10含量升高以外(P>0.05),其他实验组IL-10含量均呈下降趋势(P<0.05);转轮组小鼠抗BSA抗体效价含量显著降低(P<0.01),全日光组与全夜组无统计学意义。结论:完全与不完全睡眠剥夺可不同程度地引起实验小鼠CD8+T细胞数减少、脾重减轻、特异性抗体分泌减少以及细胞因子分泌格局的变化,进而影响机体免疫功能。

关键词：睡眠剥夺 T淋巴细胞亚群特异性抗体细胞因子IL-2与IL-10

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抗体基因点突变、插入和缺失体外检测方法的建立及应用

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上海交通大学学报（医学版） 2022年第4期42卷 518-527页

作者：罗思敏叶菱秀郝茜上海交通大学基础医学院免疫学与微生物学系上海市免疫学研究所上海200025

目的·建立由激活诱导胞苷脱氨酶(activation-induced cytidine deaminase,AID)引起的体细胞高频突变过程中,快速检测抗体基因可变(variable,V)、多样(diversity,D)、连接(joining,J)区发生突变(包括点突变、插入和缺失事件)的体外... 详细信息

目的·建立由激活诱导胞苷脱氨酶(activation-induced cytidine deaminase,AID)引起的体细胞高频突变过程中,快速检测抗体基因可变(variable,V)、多样(diversity,D)、连接(joining,J)区发生突变(包括点突变、插入和缺失事件)的体外方法。应用该方法检测经2种DNA聚合酶β(polymeraseβ,Polβ)抑制剂处理的细胞中抗体基因VDJ片段的突变情况。方法·用慢病毒感染法处理CH12F3细胞(即处理组),感染前的CH12F3细胞为对照组。采用蛋白质印迹法(Western blotting)检测2组细胞中AID的表达水平。构建高通量测序文库,应用生物信息学的方法分析处理组和对照组细胞中抗体基因VDJ片段的点突变、插入及缺失频率。采用不同浓度的Polβ抑制剂[扎西他滨(2’,3’-dideoxycytidine,DDC)、5-甲氧基黄铜(5-methoxyflavone,5-MF)]处理CH12F3细胞,并采用台盼蓝拒染法测定该2种抑制剂对细胞增殖的影响。分别以筛选得到的DDC浓度、5-MF浓度处理CH12F3细胞(即实验组),以0.9%NaCl处理的细胞及DMSO处理的细胞依次记为上述实验组的对照组,使用上述已建立的方法进行处理,最终行高通量测序,分析该2种抑制剂对抗体基因VDJ片段中点突变、插入及缺失频率的影响。结果·Western blotting结果显示,和CH12F3细胞对照组相比,CH12F3细胞处理组中AID表达较高;且高通量测序结果显示,该组在抗体基因VDJ片段上存在大量的点突变,且插入和缺失的频率均较高(均P=0.000)。台盼蓝拒染法检测显示,处理CH12F3细胞最适宜的DDC浓度为100μmol/L、5-MF浓度为25μmol/L。最终的高通量测序结果显示,和0.9%NaCl对照组相比,经100μmol/L DDC处理的细胞在抗体基因VDJ片段的点突变频率较低(P=0.000),长度为1 bp的缺失频率亦较低(P=0.009);和DMSO对照组相比,经25μmol/L 5-MF处理的细胞在抗体基因VDJ片段的点突变频率较低(P=0.000),长度大于1 bp的插入和缺失频率亦有所下降(均P=0.000)。结论·该研究建立的体外检测方法可用于分析AID引起的抗体基因VDJ片段的突变事件。Polβ抑制剂DDC和5-MF对由AID引起的抗体基因VDJ片段的突变事件具有抑制作用。

关键词：激活诱导胞苷脱氨酶点突变插入缺失

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靶向髓源性抑制细胞的叶酸循环增强肿瘤免疫治疗效果研究

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上海交通大学学报（医学版） 2024年第8期44卷 1011-1022页

作者：何蕊颜克鹏王静上海交通大学基础医学院免疫学与微生物学系上海市免疫学研究所上海200025

目的·探究叶酸循环代谢对髓源性抑制细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)免疫抑制作用的调控机制。方法·在C57BL/6小鼠骨髓细胞的培养体系中加入细胞因子粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating factor... 详细信息

目的·探究叶酸循环代谢对髓源性抑制细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)免疫抑制作用的调控机制。方法·在C57BL/6小鼠骨髓细胞的培养体系中加入细胞因子粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating factor,G-CSF)、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony-stimulating factor, GM-CSF)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6),体外诱导MDSCs。利用流式细胞仪检测诱导MDSCs的程序性死亡受体配体1 (programmed deathligand 1,PD-L1)表达水平和活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生水平。采用磁珠分选出小鼠脾脏CD8^(+)T细胞并用Celltrace violet或CFSE标记,再与MDSCs共培养,72 h后用流式细胞术检测CD8^(+)T细胞增殖情况。通过实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qPCR)检测MDSCs中叶酸循环相关代谢酶的表达水平。采用叶酸循环代谢酶亚甲基四氢叶酸脱氢酶2 (methylenetetrahydrofolate dehydrogenase 2,MTHFD2)抑制剂DS18561882(DS18)和叶酸拮抗剂培美曲塞(Pemetrexed)处理MDSCs,并用流式分析检测MDSCs产生ROS和线粒体ROS的水平。将DS18或培美曲塞处理后的MDSCs与磁珠分选出来并用Celltrace violet或CFSE标记的CD8^(+)T细胞共培养,72 h后用流式细胞术检测CD8^(+)T细胞增殖情况。利用RNA测序(RNA-seq)检测DS18和培美曲塞处理后MDSCs在转录组水平的变化。建立小鼠结肠癌(mouse colon cancer cells,MC38)和Lewis肺癌(Lewis lung carcinoma,LLC)皮下瘤模型。造模后第10天开始,采用Isotype抗体、抗CD8单抗(1 mg/kg,清除CD8^(+)T细胞)、培美曲塞以及抗CD8单抗联合培美曲塞处理MC38荷瘤小鼠;利用Isotype抗体、抗Gr1单抗(1.25 mg/kg,清除MDSCs)、培美曲塞以及抗Gr1单抗联合培美曲塞处理MC38荷瘤小鼠;分别给予MC38和LLC荷瘤小鼠培美曲塞(50 mg/kg)、抗PD-1单克隆抗体(250μg/kg)以及培美曲塞联用抗PD-1单克隆抗体治疗;第14天收集小鼠肿瘤组织,记录肿瘤大小,绘制肿瘤生长曲线。结果·流式结果显示诱导后的骨髓细胞PD-L1的表达升高,ROS的产生也增加,且明显抑制CD8^(+)T细胞的增殖。qPCR结果显示MDSCs中叶酸循环相关代谢酶MTHFD2等表达升高。给予DS18和培美曲塞处理MDSCs会影响MDSCs的累积,抑制MDSCs的ROS产生,并解除对CD8 T细胞的免疫抑制。RNA-seq结果表明2种叶酸循环抑制剂处理后,与MDSCs分化相关基因S100钙结合蛋白a8 (S100 calcium binding protein a8,S100a8)等下调,与MDSCs抑制功能相关基因如与ROS产生有关的基因细胞色素b-245β链(cytochrome b-245beta chain,Cybb)等也有所下调。与对照组相比,培美曲塞处理组的小鼠肿瘤生长明显受到抑制。与培美曲塞处理组相比,抗CD8单抗联合培美曲塞处理组肿瘤进展加剧;与抗CD8单抗处理组相比,抗CD8单抗联合培美曲塞处理组肿瘤进展受到限制。清除MDSCs能显著抑制肿瘤生长,然而在清除MDSCs的荷瘤小鼠中,培美曲塞的抗肿瘤作用显著低于培美曲塞单独处理的小鼠。与抗PD-1抗体单独治疗相比,培美曲塞联用抗PD-1抗体治疗组的肿瘤生长限制更为显著。结论·培美曲塞依赖CD8^(+)T细胞发挥抗肿瘤作用,并通过重编程MDSCs为抗肿瘤表型,进一步阻碍肿瘤生长。通过调控MDSCs叶酸循环阻断其免疫抑制能力,可增强免疫检查点阻断剂治疗肿瘤效果。

关键词：髓源性抑制细胞叶酸循环亚甲基四氢叶酸脱氢酶2 培美曲塞肿瘤免疫治疗

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轻链单个氨基酸改变可增强新冠病毒嵌合抗体的中和能力

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上海交通大学学报（医学版） 2023年第6期43卷 718-727页

作者：殷姿廉朝阳高波田莹郝茜叶菱秀上海交通大学基础医学院免疫学与微生物学系上海市免疫学研究所上海200025

目的·筛选对新冠病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)具有中和能力的人鼠嵌合抗体,并分析其轻链上的关键氨基酸位点变化。方法·以SARS-CoV-2刺突蛋白作为免疫原,免疫抗体重链基因人源化的小鼠... 详细信息

目的·筛选对新冠病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)具有中和能力的人鼠嵌合抗体,并分析其轻链上的关键氨基酸位点变化。方法·以SARS-CoV-2刺突蛋白作为免疫原,免疫抗体重链基因人源化的小鼠,通过酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和假病毒中和实验检测小鼠血清抗体水平,应用流式细胞术分选小鼠脾脏和淋巴结中的浆细胞和生发中心(germinal center,GC)B细胞并分析各类B细胞比例。提取细胞的RNA构建鼠源抗体轻链基因文库,与固定的人源抗体重链基因配对表达抗体,并采用ELISA筛选高亲和力嵌合抗体。与鼠源胚系抗体轻链基因比对,分析高亲和力嵌合抗体轻链的氨基酸变化位点。分别构建并表达轻链单个氨基酸位点改变的嵌合抗体,通过ELISA和假病毒中和实验检测其亲和力及中和能力;比较上述位点改变前后嵌合抗体的亲和力及中和能力,并分析具有关键作用的氨基酸位点变化。结果·与未免疫小鼠相比,免疫后小鼠血清中针对SARS-CoV-2的特异性抗体的滴度增加,脾脏和淋巴结中的浆细胞和GC B细胞的比例亦有增加。ELISA的结果显示,从小鼠脾脏的GC B细胞中筛选到具有高亲和力的嵌合抗体。该抗体轻链的第76位苏氨酸替换成了异亮氨酸,且第98位苯丙氨酸发生缺失。随后,ELISA结果显示,该嵌合抗体具有较强的亲和力,轻链氨基酸没有变化的抗体和轻链仅携带第98位氨基酸缺失的抗体的亲和力较弱,而轻链仅携带第76位氨基酸替换的抗体的亲和力介于嵌合抗体和轻链氨基酸没有变化的抗体之间。假病毒中和实验的结果显示,该嵌合抗体的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))为0.995 ng/μL;轻链仅携带第76位氨基酸替换的抗体的IC_(50)为1.724 ng/μL,中和能力有所减弱;轻链仅携带第98位氨基酸缺失的抗体的IC_(50)为71.05 ng/μL,轻链氨基酸没有变化的抗体的IC_(50)为42.06 ng/μL,中和能力均较弱。结论·成功筛选得到对SARS-CoV-2具有中和能力的人鼠嵌合抗体,且该抗体轻链上第76位苏氨酸替换为异亮氨酸是决定其中和能力的关键。

关键词：嵌合抗体中和抗体新冠病毒轻链体细胞高频突变

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