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嘌呤核苷酸补偿对海洛因依赖大鼠脑组织中5-HT及5-HIAA含量的影响及其机制

吉林大学学报（医学版） 2009年第6期35卷 1024-1028,I0011页

作者：李鸿梅何海涛李昆刘剑凯洪敏吉林大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室吉林长春130021

目的:研究嘌呤核苷酸补偿对海洛因依赖大鼠的戒断症状及脑组织中5-羟色胺(5-HT)及5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)含量的影响及其作用机制。方法:剂量递增腹腔注射海洛因,建立海洛因依赖大鼠模型,110只正常雄性Wistar大鼠随机分为对照组(C)、海洛... 详细信息

目的:研究嘌呤核苷酸补偿对海洛因依赖大鼠的戒断症状及脑组织中5-羟色胺(5-HT)及5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)含量的影响及其作用机制。方法:剂量递增腹腔注射海洛因,建立海洛因依赖大鼠模型,110只正常雄性Wistar大鼠随机分为对照组(C)、海洛因组(H)、海洛因补偿AMP+GMP组(HAG)、海洛因补偿AMP组(HA)、海洛因补偿GMP组(HG),每组22只。应用荧光分光光度法测定大鼠脑组织中5-HT和5-HIAA的含量,ELISA法测定大鼠脑组织中色氨酸羟化酶(TPH)的含量,免疫组化法检测脑组织中TPH蛋白的表达,每组中有8只鼠于第10天第1次给药后4h观察戒断症状,每组中有4只鼠用于免疫组化。结果:与H组比较,HAG、HA及HG组大鼠的咀嚼、齿颤及睑下垂次数均明显减少(P<0.05)。与C组比较,H组大鼠脑组织中5-HT和5-HIAA含量显著下降(P<0.05);与H组比较,HAG、HA和HG组大鼠脑组织中5-HT和5-HIAA含量均有所升高(P<0.05)。与C组比较,H组大鼠脑组织中TPH含量显著下降(P<0.05);与H组比较,HAG、HA和HG组大鼠脑组织中TPH含量均有所升高(P<0.05)。与C组比较,H组大鼠脑组织中THP表达的阳性细胞计数明显减少(P<0.05);与H组比较,HAG、HA及HG组大鼠脑组织中THP表达的阳性细胞计数有所升高(P<0.05)。结论:嘌呤核苷酸补偿能够减轻海洛因依赖大鼠的戒断症状,并能增加大鼠脑组织中5-HT和TPH的含量。

关键词：嘌呤核苷酸海洛因 5-羟色胺 5-羟吲哚乙酸色氨酸羟化酶

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MUC1/Y胞外段在大肠杆菌中的表达和鉴定

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中国免疫学杂志 2006年第9期22卷 805-807,811页

作者：孙琳吴秀丽许艳于永利王丽颖吉林大学基础医学院分子生物学教研室长春130021

目的:获得MUC1/Y胞外段重组蛋白,研究其生物学功能,为肿瘤治疗提供实验依据。方法:利用RT-PCR从MCF7细胞中获得MUC1/Y胞外段编码基因,将其克隆到原核表达载体pET-32a中,并在BL21(DE3)大肠杆菌中进行表达;以亲和层析法对MUC1/Y重组蛋白... 详细信息

目的:获得MUC1/Y胞外段重组蛋白,研究其生物学功能,为肿瘤治疗提供实验依据。方法:利用RT-PCR从MCF7细胞中获得MUC1/Y胞外段编码基因,将其克隆到原核表达载体pET-32a中,并在BL21(DE3)大肠杆菌中进行表达;以亲和层析法对MUC1/Y重组蛋白进行纯化;利用纯化的MUC1/Y蛋白免疫家兔制备MUC1/Y多克隆抗体,然后对乳腺癌组织进行组化染色。结果:在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达了分子量为30000的Trx-MUC1/Y融合蛋白,经镍亲和层析一步纯化所获得的蛋白质纯度>90%,用Trx-MUC1/Y融合蛋白免疫家兔获得的抗血清对乳腺癌组织的初步组化检测证明MUC1/Y融合蛋白具有很好的生物学活性。结论:成功表达并纯化了具有生物学活性的MUC1/Y胞外段重组蛋白。

关键词： MUC1/Y胞外段表达鉴定

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肿瘤细胞裂解物联合化脓性链球菌裂解物的抗肿瘤作用

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中国免疫学杂志 2014年第9期30卷 1204-1207,1212页

作者：卫红飞吴秀丽王丽颖房明丽吉林大学基础医学院分子生物学教研室长春130021

目的:研究化脓性链球菌裂解物与肿瘤细胞裂解物联用,抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长。方法:自行制备了化脓性链球菌裂解物制剂,通过体外及动物实验测定其抗肿瘤效应。以BALB/c小鼠EMT6乳腺癌为模型,观察了链球菌制剂联合肿瘤细胞裂解物对荷瘤... 详细信息

目的:研究化脓性链球菌裂解物与肿瘤细胞裂解物联用,抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长。方法:自行制备了化脓性链球菌裂解物制剂,通过体外及动物实验测定其抗肿瘤效应。以BALB/c小鼠EMT6乳腺癌为模型,观察了链球菌制剂联合肿瘤细胞裂解物对荷瘤小鼠肿瘤生长的影响。结果:自行制备的化脓性链球菌在体外可以刺激小鼠脾细胞的增殖,且能抑制多种肿瘤细胞(EMT6、B16、A549)的增殖,二者联用对每只荷瘤小鼠的肿瘤体积都有较强的抑制作用(P<0.05)。结论:化脓性链球菌裂解物与肿瘤细胞裂解物联用可以抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长。

关键词：化脓性链球菌肿瘤细胞裂解物抗肿瘤

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生物化学与分子生物学微信教学公众号:现状与建议

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中国生物化学与分子生物学报 2021年第6期37卷 830-836页

作者：谢彩凤涂硕杨晓红黄春洪南昌大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室南昌310006

在教育信息化2.0时代背景下,微信公众号因其免费、开放、个性、交互、实时等特色和优势,被很多机构和教师采纳,用于教学服务。生物化学与分子生物学的知识复杂、抽象,理论和技术发展快,是公认的难教难学课程。而微信公众号可通过图文、... 详细信息

在教育信息化2.0时代背景下,微信公众号因其免费、开放、个性、交互、实时等特色和优势,被很多机构和教师采纳,用于教学服务。生物化学与分子生物学的知识复杂、抽象,理论和技术发展快,是公认的难教难学课程。而微信公众号可通过图文、动画、视频、聊天及对接第3方软件等方式,将生物化学的知识难点简单化、生动化,并以微课学习、图文学习、微测试、微实验等开展移动教学。2015年至今,我国共创建生物化学与分子生物学的教学公众号约50个,微信公众号已经成为生物化学教学圈的新潮流。本文主要介绍了“我爱生化”、“医学生化与分子”、“漫画生物化学”等10个公众号的特色资源和目录架构,展示了基于公众号的多元化教学和服务方式。另外,本文还梳理归纳了公众号管理的经验,提出要“以学生为中心”、围绕学习全过程开展教学服务,坚持原创和目录管理等,为优化公众号的资源与服务提供建议。本文旨在通过对我国生物化学与分子生物学教学公众号的介绍和建议,促进生化教学圈的资源共享、互学、交流和建设,推动教学理念更新、教学方法改进和教学质量提升。

关键词：微信公众号生物化学与分子生物学交流与资源共享优化建议

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T-2毒素免疫毒性分子机制的研究进展

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中国免疫学杂志 2022年第19期38卷 2430-2432,F0003页

作者：王弘瑞赵丽娟房明丽杨明(指导) 吉林大学基础医学院分子生物学教研室长春130021

T-2毒素是由镰刀菌代谢产生的一种毒性很强的霉菌毒素,是单端孢霉稀族类毒素的一种。T-2毒素具有典型的免疫毒性特征,目前已证实了T-2毒素诱导的免疫毒性与氧化应激、炎症反应、凋亡及自噬等分子机制有关,涉及多条信号通路,调节与免疫... 详细信息

T-2毒素是由镰刀菌代谢产生的一种毒性很强的霉菌毒素,是单端孢霉稀族类毒素的一种。T-2毒素具有典型的免疫毒性特征,目前已证实了T-2毒素诱导的免疫毒性与氧化应激、炎症反应、凋亡及自噬等分子机制有关,涉及多条信号通路,调节与免疫应答和细胞凋亡/存活相关的信号分子表达。氧化应激是T-2毒素诱导DNA断裂和凋亡的关键毒性机制,细胞凋亡通路维持毒素免疫调控的动态平衡,而自噬可促进T-2毒素诱导的免疫抑制,在免疫调控中发挥着关键而复杂的作用。此外,T-2毒素免疫调控中也存在类似“免疫逃逸”的机制。本综述对T-2毒素的免疫毒性及其毒性作用的分子机制进行了详细阐述,为T-2毒素的毒性机制及防控研究提供参考。

关键词： T-2毒素免疫毒性氧化应激细胞凋亡自噬

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人Epsilon干扰素在CHO细胞中的表达及生物学活性的研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2006年第3期26卷 279-284页

作者：马丽丽盛伟华谢宇锋缪竞诚王金志庄文卓李丽娥杨吉成苏州大学医学院细胞与分子生物学教研室 215007

目的为了研究新发现的人epsilon干扰素(hIFNε)的生物学活性,我们通过RTPCR克隆了hIFNε基因,并构建pcDNA3.1mychis()AhIFNε(以下简称pcDNA3.1AhIFNε)的真核表达载体,在CHO细胞中表达,并研究真核细胞重组表达的rhIFNε的生物学活性。... 详细信息

目的为了研究新发现的人epsilon干扰素(hIFNε)的生物学活性,我们通过RTPCR克隆了hIFNε基因,并构建pcDNA3.1mychis()AhIFNε(以下简称pcDNA3.1AhIFNε)的真核表达载体,在CHO细胞中表达,并研究真核细胞重组表达的rhIFNε的生物学活性。方法用TNFα刺激人宫颈癌HeLa细胞,抽提总RNA,经RTPCR获得全长cDNA,与pcDNA3.1mychis()A真核表达载体连接,构建重组体pcDNA3.1AhIFNε,并在CHO细胞中进行表达,采用微量细胞病变抑制试验研究表达产物中的rhIFNε对多种病毒的抗病毒活性;MTT法检测其对A375、HeLa和A549细胞的生长影响,并通过在Wish、HeLa、A375细胞中诱导MxA抗病毒蛋白的产生研究hIFNε的抗病毒机制。结果经PCR和限制性酶切鉴定以及DNA测序,结果表明已经成功构建了重组体pcDNA3.1AhIFNε,并在CHO细胞中稳定表达了rhIFNε蛋白,该蛋白具有抗HSVⅠ、PolioV、Ad3和VSV病毒的作用,能够抑制HeLa、A375、A549细胞的生长,刺激Wish、HeLa、A375细胞产生MxA蛋白。结论本研究成功地构建了pcDNA3.1AhIFNε真核表达载体并在CHO细胞中获得稳定表达,证明了rhIFNε蛋白具有抗病毒和抗增殖活性,其抗病毒效应的分子机理可能与诱导细胞产生MxA抗病毒蛋白有关,为今后研究rhIFNε的生物学功能和基因重组药物研制及其开展基因治疗奠定了基础。

关键词： pcDNA3.1A-hIFN-ε CHO细胞抗病毒抗增殖 MxA

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科研导向型教学模式在医学细胞生物学实验课程中的应用

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中国细胞生物学学报 2025年第5期 1110-1116页

作者：张仁宇刘泽昆边惠洁空军军医大学国家分子医学转化中心&基础医学院细胞生物学教研室

医学细胞生物学实验是医学细胞生物学课程中的重要组成部分,能够助力医学生培养动手实践能力和科研创新能力。目前医学细胞生物学实验课程仍存在教学内容落后、教学方法陈旧、考核模式简单等问题。该研究以“光学显微镜的使用”课程为例... 详细信息

医学细胞生物学实验是医学细胞生物学课程中的重要组成部分,能够助力医学生培养动手实践能力和科研创新能力。目前医学细胞生物学实验课程仍存在教学内容落后、教学方法陈旧、考核模式简单等问题。该研究以“光学显微镜的使用”课程为例,充分展示科研导向型教学模式在医学细胞生物学实验课程中的应用,以期为推动医学细胞生物学课程的教学发展和改革、培养创新型和应用型医学人才提供参考。

关键词：医学细胞生物学科研导向型教学模式教学改革显微镜

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一种基于植物瞬时表达研制新冠病毒重组蛋白疫苗的方法

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中国免疫学杂志 2022年第20期38卷 2512-2516页

作者：王弘瑞赵丽娟房明丽杨明吉林大学基础医学院分子生物学教研室长春130021

目的:探究一种以植物烟草为瞬时表达载体快速且高效研制和表达SARS-CoV-2重组蛋白疫苗的方法。方法:培育植物烟草,当烟草生长到第6周时,叶片生长到接近手掌大小,可用于下一步的农杆菌渗透。构建包含SARS-CoV-2 S重组质粒的农杆菌。培养... 详细信息

目的:探究一种以植物烟草为瞬时表达载体快速且高效研制和表达SARS-CoV-2重组蛋白疫苗的方法。方法:培育植物烟草,当烟草生长到第6周时,叶片生长到接近手掌大小,可用于下一步的农杆菌渗透。构建包含SARS-CoV-2 S重组质粒的农杆菌。培养含目的基因的农杆菌,来获得农杆菌渗透液。选择待渗透的目标叶片,用针头轻轻在叶片上刺穿一个小孔,然后将制备好的农杆菌渗透液注入叶片,使其慢慢吸收渗透液。需要从渗透后的烟叶中提取和纯化SARS-CoV-2 S重组蛋白,并进行初步鉴定。对SARS-CoV-2 S重组蛋白进行纯化与鉴定,并对纯化的SARS-CoV-2 S重组蛋白进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果:采用植物烟草成功地表达SARS-CoV-2 S重组蛋白,其分子量约为53.2 kD,Western blot结果显示His-tag抗体可以识别SARS-CoV-2 S重组蛋白。结论:基于植物的瞬时表达系统可作为SARS-CoV-2重组蛋白疫苗的快速研制方法。

关键词： COVID-19 植物生产疫苗瞬时表达系统本氏烟草农杆菌渗透法

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蛋白激酶Pkmyt1对小鼠1-细胞期受精卵发育的抑制作用

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吉林大学学报（医学版） 2015年第1期41卷 16-20,I0001页

作者：刘超孟智超任丽莉刘乙蒙郭淼孙弋雅肖建英辽宁医学院基础医学院发育生物学教研室辽宁锦州121001 辽宁医学院基础医学院生物化学与分子生物学教研室辽宁锦州121001

目的:通过在小鼠1-细胞期受精卵内过表达Pkmyt1-wild type(WT)(野生型)mRNAs,研究蛋白激酶Pkmyt1对小鼠受精卵早期发育的影响,为进一步阐明Pkmyt1对哺乳动物受精卵早期发育调控的机制奠定基础。方法:构建pcDNA3.1/myc-Pkmyt1-WT质粒。... 详细信息

目的:通过在小鼠1-细胞期受精卵内过表达Pkmyt1-wild type(WT)(野生型)mRNAs,研究蛋白激酶Pkmyt1对小鼠受精卵早期发育的影响,为进一步阐明Pkmyt1对哺乳动物受精卵早期发育调控的机制奠定基础。方法:构建pcDNA3.1/myc-Pkmyt1-WT质粒。超排卵方法获得小鼠1-细胞期受精卵,实验分为未注射组、TE缓冲液注射组和Pkmyt1-WT mRNAs注射组,收集各组卵细胞后采用Western blotting法检测Pkmyt1蛋白表达和Cdc2-pTyr15磷酸化状态;相差显微镜观察受精卵的形态变化并计数卵裂率。结果:pcDNA3.1/myc-Pkmyt1-WT质粒构建成功。与未注射组(0.414±0.016)和TE缓冲液注射组(0.441±0.013)比较,受精卵显微注射Pkmyt1-WT mRNAs 4h后,Pkmyt1蛋白表达水平(1.112±0.025)增高(P<0.01)。与未注射组(60.81%±3.27%)和TE缓冲液注射组(61.79%±4.08%)比较,Pkmyt1-WT-mRNA注射组卵裂率(34.2%±3.25%)显著降低(P<0.01)。Pkmyt1-WT mRNA注射组在注射hCG后29.0h检测到微弱的磷酸化信号,29.5h检测不到任何磷酸化信号。结论:Pkmyt1过表达后磷酸化Cdc2-pTyr15可抑制小鼠1-细胞期受精卵的卵裂率,提示Pkmyt1负调控小鼠受精卵有丝分裂的进程。

关键词：蛋白激酶Pkmyt1 蛋白激酶Wee1 有丝分裂小鼠受精卵

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不同修饰的反义寡核苷酸体外抗乙型肝炎病毒效果的比较

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中华肝脏病杂志 2013年第6期21卷 475-476页

作者：朱晓莹王燕菲右江民族医学院生物化学与分子生物学教研室 533000 广州医学院生物化学与分子生物学教研室

为研究应用锁核酸（10ckednucleicacid，LNA）抗HBV的作用，我们设计针对HBVS基因的反义寡核苷酸，分别经过LNA、硫代反义寡核苷酸（phosphorothioateantisenseoligodeoxynucleotide，PS-ODN）修饰，以阳离子脂质体为载体介导转染HepG2... 详细信息

关键词：肝炎病毒乙型寡核苷酸类反义锁核酸

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