检索结果-内蒙古大学图书馆

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2010年第5期28卷 359-363页

作者：李文姝谢自新陈庆新陈韶张丽芳温州医学院微生物学免疫学教研室温州325032

目的研究弓形虫棒状体蛋白2(ROP2)和膜表面蛋白1(SAG1)重组复合抗原(ROP2-SAG1)的核酸和蛋白两种疫苗的免疫效应。方法 60只雌性BALB/c小鼠随机均分为4组(每组15只),即rROP2-SAG1蛋白组、无菌生理盐水组、pcROP2-SAG1质粒组和pcDNA3.1... 详细信息

目的研究弓形虫棒状体蛋白2(ROP2)和膜表面蛋白1(SAG1)重组复合抗原(ROP2-SAG1)的核酸和蛋白两种疫苗的免疫效应。方法 60只雌性BALB/c小鼠随机均分为4组(每组15只),即rROP2-SAG1蛋白组、无菌生理盐水组、pcROP2-SAG1质粒组和pcDNA3.1质粒组,rROP2-SAG1组以2.5μgrROP2-SAG1重组蛋白与等体积佐剂乳化后,背部皮下多点免疫小鼠;无菌生理盐水组以等体积无菌生理盐水替代重组蛋白,首次免疫使用福氏完全佐剂,其余使用福氏不完全佐剂。pcROP2-SAG1组和pcDNA3.1组分别以pcROP2-SAG1和空质粒pcDNA3.1腿部肌肉注射免疫,剂量为100μg/次;以上各组小鼠共免疫3次,每次间隔2周。采用间接ELISA方法检测免疫后25、45和70d小鼠血清中特异性IgG抗体,及末次免疫后2周小鼠血清特异性IgG1和IgG2a抗体。用CCK-8细胞增殖法检测小鼠脾细胞增殖,间接ELISA法检测小鼠脾细胞培养上清液中γ干扰素(IFN-γ)和白介素2(IL-2)表达水平。结果 rROP2-SAG1组小鼠血清特异性IgG抗体水平随着免疫时间的延长持续升高,pcROP2-SAG1质粒组抗体则随着免疫时间的延长相对稳定。末次免疫后2周,rROP2-SAG1组小鼠血清IgG1抗体水平(1.538±0.183)显著高于IgG2a(0.618±0.122)(P<0.05),而pcROP2-SAG1组IgG1抗体水平(1.107±0.137)与IgG2a(0.830±0.185)间的差异无统计学意义(P>0.05)。以特异性抗原rROP2-SAG1为刺激物时,rROP2-SAG1组小鼠脾细胞受特异性抗原刺激的增殖效果(A450值=0.348±0.042)显著高于pcROP2-SAG1组(0.123±0.018)(P<0.05)。rROP2-SAG1组小鼠脾细胞培养上清液中IFN-γ含量[(149.37±30.51)pg/ml]、IL-2含量[38.58±9.10)pg/ml],分别与pcROP2-SAG1组IFN-γ[(138.58l±29.92)pg/ml]、IL-2[37.47l±9.26)pg/ml]比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 ROP2-SAG1重组复合蛋白诱导的抗体水平、脾细胞增值效应显著高于重组质粒pcROP2-SAG1。

关键词：刚地弓形虫棒状体蛋白2 速殖子主要表面蛋白1 疫苗

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AIDS合并鸟分枝杆菌感染的研究进展

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中国病原生物学杂志 2020年第10期15卷 1230-1233页

作者：陈越吴利先王国富大理大学基础医学院医学微生物与免疫学教研室云南大理671000

AIDS患者容易机会感染非结核分枝杆菌(Nontuberculous mycobacteria,NTM),其中鸟分枝杆菌(***,MAV)感染率最高。近年来,AIDS合并鸟分枝杆菌感染的趋势在全世界范围内不断上升,给人们带来的健康问题和经济负担不容忽视。因此有必要对AID... 详细信息

AIDS患者容易机会感染非结核分枝杆菌(Nontuberculous mycobacteria,NTM),其中鸟分枝杆菌(***,MAV)感染率最高。近年来,AIDS合并鸟分枝杆菌感染的趋势在全世界范围内不断上升,给人们带来的健康问题和经济负担不容忽视。因此有必要对AIDS合并鸟分枝杆菌感染的流行病学、致病机制、所致疾病、诊断方法作一综述。

关键词：艾滋病鸟结核分枝杆菌非结核分枝杆菌综述

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变性高效液相色谱法在α-血红蛋白稳定蛋白基因检测中的应用

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色谱 2011年第4期29卷 335-341页

作者：王志鹏暨南大学医学院微生物与免疫学教研室广东广州510632

建立了采用变性高效液相色谱（DHPLC）对α-血红蛋白稳定蛋白（AHSP）基因进行基因分型和突变筛查的新方法。将AHSP基因序列分成6个片段,因第一、二、四、六个片段均含有1~2个常见单核苷酸多态性（single nu-cleotide polymorphism,SNP... 详细信息

建立了采用变性高效液相色谱（DHPLC）对α-血红蛋白稳定蛋白（AHSP）基因进行基因分型和突变筛查的新方法。将AHSP基因序列分成6个片段,因第一、二、四、六个片段均含有1~2个常见单核苷酸多态性（single nu-cleotide polymorphism,SNP）位点,需单个标本分别进行检测;第三、五个片段不含有常见SNP位点,采用DHPLC结合DNA（脱氧核糖核酸）池的方法进行检测。以基因测序为金标准对所建立的AHSP基因检测方法进行方法学评价,结果显示：40个样品的DHPLC检测结果与测序结果之间完全吻合,说明所建立的检测方法能对AHSP基因6种常见SNP进行准确基因分型。应用DHPLC对365个样品的AHSP基因进行检测,发现2个罕见SNP（11 810G〉A和12 802C〉T）;同时还发现2个错义突变（AHSP D29V和AHSP V56G）,AHSP D29V突变为新突变,AH-SP V56G为罕见突变。结果表明采用DHPLC法可有效地对AHSP基因进行基因分型和突变筛查。

关键词：变性高效液相色谱 α-血红蛋白稳定蛋白基因基因分型突变筛查

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大理地区13株疑似非结核分枝杆菌临床分离株的鉴定

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中国病原生物学杂志 2019年第3期14卷 319-322页

作者：程睿儇王国富吴利先大理大学基础医学院微生物与免疫学教研室云南大理671000

目的对云南大理地区13株疑似非结核分枝杆菌(Non-Tuberculous mycobacteria,NTM)进行鉴定,了解其菌种构成。方法大理州疾控中心提供的疑似非结核分枝杆菌13株,经罗氏培养基(L-J)、噻吩-2-羧酸肼(TCH)和对硝基苯甲酸(PNB)鉴别培养基初步... 详细信息

目的对云南大理地区13株疑似非结核分枝杆菌(Non-Tuberculous mycobacteria,NTM)进行鉴定,了解其菌种构成。方法大理州疾控中心提供的疑似非结核分枝杆菌13株,经罗氏培养基(L-J)、噻吩-2-羧酸肼(TCH)和对硝基苯甲酸(PNB)鉴别培养基初步鉴别培养确定为NTM后分别通过16S rRNA、hsp65和rpoB基因片段测序进行菌种鉴定。结果 13株疑似NTM临床分离株经16S rRNA、rpoB和hsp65基因DNA测序分析鉴定为NTM 11株(84.62%),束村氏菌1株(7.69%),戈登氏菌1株(7.69%)。11株NTM中鸟分枝杆菌(***)9株,脓肿分支杆菌(***)2株。结论经抗酸染色筛查、L-J和PNB/TCH培养基初步鉴定为NTM的临床分离株通过3种不同基因测序分析鉴定为NTM、束村氏菌和戈登氏菌,以NTM中的鸟分枝杆菌占多数。

关键词：非结核分枝杆菌 16S rRNA rpoB hsp65 序列分析菌种鉴定

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鸟分枝杆菌PPE25-MAV蛋白的原核表达及其对巨噬细胞凋亡的影响

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中国病原生物学杂志 2020年第11期15卷 1257-1261页

作者：翟凯新刘丽婷陈晓文陈越高婧华吴利先大理大学基础医学院微生物与免疫学教研室云南大理671000

目的构建鸟分枝杆菌PPE25-MAV蛋白的重组质粒并诱导表达和纯化,观察其对Ana-1系巨噬细胞凋亡的影响。方法在GenBank中查找到鸟分枝杆菌编码PPE25-MAV蛋白的MAV-2928基因序列,合成全基因并构建质粒。将质粒亚克隆至表达载体pET-32a(+)上... 详细信息

目的构建鸟分枝杆菌PPE25-MAV蛋白的重组质粒并诱导表达和纯化,观察其对Ana-1系巨噬细胞凋亡的影响。方法在GenBank中查找到鸟分枝杆菌编码PPE25-MAV蛋白的MAV-2928基因序列,合成全基因并构建质粒。将质粒亚克隆至表达载体pET-32a(+)上,构建重组表达质粒pET-32a-ppe25,转入感受态细胞BL21(DE3)后,通过IPTG诱导表达融合蛋白PPE25-MAV。用Ni Resin FF纯化蛋白,并作用于巨噬系Ana-1细胞,流式细胞术(FCM)检测巨噬细胞凋亡率并且分析其变化。结果鸟分枝杆菌PPE25-MAV蛋白表达载体构建成功,转化至BL21(DE3)后经IPTG诱导表达约59ku的蛋白,与预期大小相符;Western blot检测该蛋白能被His抗体识别。用纯化的PPE25-MAV蛋白作用小鼠巨噬系Ana-1细胞,与空白对照组相比,作用2h后细胞的早期凋亡率差异无统计学意义(P>0.05),细胞的晚期凋亡率和总凋亡率在0.5μg/ml与1μg/ml时均低于空白组(P<0.05),2μg/ml与5μg/ml的凋亡率与对照组比较差异无统计学意义;作用10h细胞的早期凋亡率仅在5μg/ml时升高(P<0.05),0.5、1和2μg/ml剂量组差异无统计学意义(P>0.05),细胞晚期凋亡率和总凋亡率在2μg/ml和5μg/ml时显著降低(P<0.05),0.5μg/ml和1μg/ml组凋亡率差异无统计学意义(P>0.05)。结论重组质粒诱导表达的PPE25-MAV蛋白存在于上清和包涵体中,但主要以包涵体形式表达。纯化的PPE25-MAV蛋白对巨噬细胞凋亡有抑制作用,且主要作用于巨噬细胞的晚期凋亡阶段。

关键词：鸟分枝杆菌 PPE25-MAV蛋白 Ana-1巨噬细胞细胞凋亡

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EB病毒核蛋白-1 B细胞表位的预测及其同源性分析

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生物医学工程学杂志 2011年第2期28卷 371-375页

作者：李玲玲朱珊丽李文姝薛向阳张丽芳温州医学院微生物学与免疫学教研室温州325000

预测EB病毒核蛋白1(EBNA-1)的B细胞优势表位,并与人体组织抗原序列比对,以分析两者匹配情况。以EBV-1型NA-1的氨基酸序列为基础,采用SOPMA、GOR和HNN方法,结合跨膜区域、亲水性等参数综合预测EBNA-1的B细胞优势表位;进一步采用blastp方... 详细信息

预测EB病毒核蛋白1(EBNA-1)的B细胞优势表位,并与人体组织抗原序列比对,以分析两者匹配情况。以EBV-1型NA-1的氨基酸序列为基础,采用SOPMA、GOR和HNN方法,结合跨膜区域、亲水性等参数综合预测EBNA-1的B细胞优势表位;进一步采用blastp方法,比对分析预测的EBNA-1 B细胞表位与相关的人体组织抗原序列的匹配情况。结果提示:B细胞优势表位可能位于其N端16-23、35-78、332-337、340-357、398-404、419-432、620-637区域;其中部分表位的不同区域分别与小核糖核蛋白SmB、SmD,核蛋白SSA,不均一核糖核蛋白hnRNPA1、hnRNP G具有较高的匹配率。结果表明,用多参数预测可获得EBNA-1的B细胞优势表位,并可进一步分析其与人体组织抗原的相同或相似序列,为自身免疫性疾病的发病机制研究提供理论依据。

关键词： EB病毒核蛋白-1 B细胞表位预测自身免疫性疾病

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结核分枝杆菌异烟肼耐药基因与耐药机制研究进展

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中国人兽共患病学报 2009年第3期25卷 288-291页

作者：陈亮宝福凯昆明医学院基础医学院微生物学与免疫学教研室昆明650031

因耐药甚至耐多药的结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)的感染,使原来可治愈的结核病变成难以治疗的致死性疾病.据WHO估计全球有5000万人感染耐药结核杆菌,其中中国最多,占到11%~([1-2]),耐药性结核病的暴发流行已成为世界... 详细信息

因耐药甚至耐多药的结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)的感染,使原来可治愈的结核病变成难以治疗的致死性疾病.据WHO估计全球有5000万人感染耐药结核杆菌,其中中国最多,占到11%~([1-2]),耐药性结核病的暴发流行已成为世界范围内的严重的公共卫生问题.最新研究发现,抗结核的一线药物异烟肼(isoniazid,INH)如果长期使用(长期用药对多数结核病患者是难以避免的),可诱导细菌基因突变,使细菌对INH的耐药性大幅提高,这是INH明显不同于其他抗结核药物的地方~([3]).因此,作为联合化疗中常用的成分,INH面临着更为严重的耐药问题.在分子水平上,MTB对INH形成耐药的遗传学机制十分复杂,本文仅就此方面的研究现状作一综述.

关键词：结核分枝杆菌耐药机制耐药基因 tuberculosis 异烟肼耐药结核杆菌公共卫生问题耐药性结核病

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沙眼衣原体主要外膜蛋白T、B细胞多表位基因的表达及其鉴定

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中华微生物学和免疫学杂志 2007年第6期27卷 536-539页

作者：朱珊丽郑丹欧琴陈俊陈韶张丽芳温州医学院微生物学和免疫学教研室 325000

目的对沙眼衣原体（Ct）主要外膜蛋白（MOMP）细胞毒性T淋巴细胞（CTL）表位进行预测和选择，并进行Ct MOMP多表位基因克隆和多表位蛋白的原核表达及其抗原性分析，为研制多表位Ct疫苗提供基础资料。方法利用SYFPEITHI法和多项式方案... 详细信息

目的对沙眼衣原体（Ct）主要外膜蛋白（MOMP）细胞毒性T淋巴细胞（CTL）表位进行预测和选择，并进行Ct MOMP多表位基因克隆和多表位蛋白的原核表达及其抗原性分析，为研制多表位Ct疫苗提供基础资料。方法利用SYFPEITHI法和多项式方案结合预测HLA-A2限制性的0MOMP的CTL表位，选取含多个CTL表位的基因片段作为目的基因，兼顾目的基因上下游存在的TH和B细胞表位的基因，共同组成含CTL、TH和B细胞表位的多表位基因。多表位基因经密码子优化后进行全序列合成，克隆入原核表达载体pET-32a（＋），经IPTG诱导在大肠杆菌BL21（DE3）表达并纯化，经SDS-PAGE和Western blot分析鉴定表达产物。结果经预测筛选得到了多个MOMPHLA-A2限制性的CTL表位，成功克隆了含CTL、TH、B表位的MOMP多表位基因，并在大肠杆菌中获得了高效表达。表达产物的相对分子质量（Mr）约24×10^3，与预期肘，相符，并用Western blot方法初步证实多表位蛋白有抗原特异性。结论成功设计了Ct MOMP的T、B细胞多表位基因，并证实在原核表达系统中获得正确表达的多表位蛋白具有良好的抗原性。

关键词：沙眼衣原体主要外膜蛋白表位表达

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E血清型沙眼衣原体主要外膜蛋白B细胞表位的预测

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生物医学工程学杂志 2008年第6期25卷 1397-1400页

作者：朱珊丽石朝辉王鹏飞李文姝张丽芳温州医学院微生物学与免疫学教研室温州325000

基于E血清型沙眼衣原体（Chlamydia trachomatis，CT）主要外膜蛋白（Major outer membrane protein，MOMP）氨基酸序列，采用Hopp-Woods的亲水性方案、Emini表面可及性方案、Jameson-Wolf抗原指数方案和Janin可及性方案等，辅以对MOMP蛋白的二级结构中的柔性区域及跨膜区域的分析，预测CTMOMP蛋白的B细胞表位。推测最有可能的B细胞表位位于MOMP蛋白N端第73～81区段、217～225区段、第377～386区段、第261～270区段和第161～175区段内或它们的附近。用多参数预测CTMOMP蛋白的B细胞表位，为进一步研究蛋白特性及表位疫苗研制奠定了基础。

关键词：沙眼衣原体主要外膜蛋白 B细胞表位

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MicroRNAs在黏膜屏障及炎症反应中的作用

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中国免疫学杂志 2021年第19期37卷 2405-2410页

作者：谭仕廉郭乐申元英大理大学基础医学院医学微生物学与免疫学教研室大理671000

黏膜屏障是机体直接接触外源性异物的主要界面,同时也是病原体入侵机体的重要位点。因此,黏膜表面需要严格的调节以维持黏膜屏障功能或平衡黏膜炎症反应。近年来研究表明,MicroRNAs(miRNAs)在调节黏膜屏障功能和黏膜炎症反应过程中起到... 详细信息

黏膜屏障是机体直接接触外源性异物的主要界面,同时也是病原体入侵机体的重要位点。因此,黏膜表面需要严格的调节以维持黏膜屏障功能或平衡黏膜炎症反应。近年来研究表明,MicroRNAs(miRNAs)在调节黏膜屏障功能和黏膜炎症反应过程中起到重要的作用。本文综述了相关miRNAs与黏膜炎症的研究,进一步理解miRNAs参与黏膜生理和炎症过程中的作用,找到具有防治黏膜炎症的新作用靶点。

关键词： MicroRNAs 黏膜炎症屏障功能

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