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蚌埠医学院学报 2003年第3期28卷 191-193页

作者：李正红单立冬蚌埠医学院生理学教研室安徽蚌埠233003 苏州大学基础医学院神经生物学研究室江苏苏州215007

目的 :观察钙通道拮抗剂与内吗啡肽 1(endomorphin 1,EM 1)联合外周应用对大鼠的镇痛效应。方法 :痛阈测定选用电刺激鼠尾 -嘶叫法。脊髓蛛网膜下腔注射不同剂量的EM 1(12 .5 μg/kg ,2 5 μg/kg ,5 0 μg/kg)或维拉帕米 (verapamil,5... 详细信息

目的 :观察钙通道拮抗剂与内吗啡肽 1(endomorphin 1,EM 1)联合外周应用对大鼠的镇痛效应。方法 :痛阈测定选用电刺激鼠尾 -嘶叫法。脊髓蛛网膜下腔注射不同剂量的EM 1(12 .5 μg/kg ,2 5 μg/kg ,5 0 μg/kg)或维拉帕米 (verapamil,5 0 μg)加EM 1(12 .5 μg/kg ,2 5 μg/kg ,5 0 μg/kg)联合用药。注药 15min后测定痛阈。结果 :EM 1单独应用时 ,镇痛效应确切 ,在所试剂量范围内与剂量有关。维拉帕米与不同剂量EM 1联用 ,可显著增强EM 1的镇痛效应。预注受体阻断剂Cyprodime的试验表明 :维拉帕米增强EM 1的镇痛作用与阿片受体有关。结论 :钙通道拮抗剂可增强EM

关键词：钙通道拮抗剂内吗啡肽镇痛效应研究维拉帕米

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大鼠脑中催产素受体cDNA的克隆

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中国病理生理杂志 2003年第8期19卷 1109-1110,1128页

作者：王永久孙一辉宫珍卿崔瑞耀由振东何成青岛大学医学院病理生理教研室山东青岛266021 青岛市卫生学校生理学教研室山东青岛266021 即墨市妇幼保健院山东即墨266200 第二军医大学神经生物学研究室上海200433

目的 :克隆大鼠脑中催产素受体 (OTR)cDNA编码区全长。方法 :从分娩后SD大鼠脑组织中提取总RNA ,通过RT -PCR扩增出大鼠OTRcDNA ,与pMD18-T载体连接 ,构成重组质粒 ,进行测序并与子宫中OTRcDNA序列进行比较。结果 :获得OTRcDNA编码区全... 详细信息

目的 :克隆大鼠脑中催产素受体 (OTR)cDNA编码区全长。方法 :从分娩后SD大鼠脑组织中提取总RNA ,通过RT -PCR扩增出大鼠OTRcDNA ,与pMD18-T载体连接 ,构成重组质粒 ,进行测序并与子宫中OTRcDNA序列进行比较。结果 :获得OTRcDNA编码区全长 ,并且与Rozen等报道的子宫OTRcDNA序列完全一致。结论 :克隆了脑中催产素受体 (OTR)cDNA ,并且证明中枢神经系统内OTR与外周的OTR一样。

关键词：受体催产素脑基因

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胚胎大鼠神经干细胞的培养及鉴定

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郑州大学学报（医学版） 2003年第1期38卷 5-7页

作者：张清勇杨波赵新利宋来君李红伟冯祖荫王树凯何炜郑州大学第二附属医院胸外科郑州450003 郑州大学第一附属医院神经外科郑州450052 郑州大学基础医学院生理学教研室郑州450052

目的:探索胚胎大鼠神经干细胞培养、传代及鉴定方法。方法:从胚胎大鼠脑室下区(SVZ)组织分离得到神经干细胞,采用无血清培养技术进行培养,并诱导分化,采用SABC法对分化后的细胞进行神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸蛋白(GFAP)检... 详细信息

目的:探索胚胎大鼠神经干细胞培养、传代及鉴定方法。方法:从胚胎大鼠脑室下区(SVZ)组织分离得到神经干细胞,采用无血清培养技术进行培养,并诱导分化,采用SABC法对分化后的细胞进行神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸蛋白(GFAP)检测及姬姆萨染色进行细胞鉴定。结果:成功培养出了胚胎大鼠神经干细胞,培养出的细胞具有自我更新能力和增殖能力,可分化为神经元、神经胶质细胞及少突胶质细胞。结论:胚胎大鼠神经干细胞在体外适宜的培养条件下具有自我更新、增殖和多向分化潜能。

关键词：神经干细胞细胞培养碱性成纤维细胞生长因子无血清培养技术

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AT_1R基因A1166C多态性与汉、藏和彝族原发性高血压的遗传易感性

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中华医学遗传学杂志 2003年第3期20卷 220-224页

作者：刘英单广良崔超英侯淑琴卓玛次仁芩维浚才旦郑华清萧占森乌正赉周文郁邱长春中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室西藏医学院生理学教研室北京100005 西藏医学院生理学教研室北京市房山区第一医院检验科西藏自治区人民医院心血管内科

目的　研究血管紧张素 1型受体 ( angiotensin type 1receptor,AT1 R)基因 A116 6 C多态性是否与汉族、藏族和彝族原发性高血压 ( essential hypertension,EH)的遗传易感性相关联。方法　以74 8名受试者的基因组 DNA为模板 ,应用聚合... 详细信息

目的　研究血管紧张素 1型受体 ( angiotensin type 1receptor,AT1 R)基因 A116 6 C多态性是否与汉族、藏族和彝族原发性高血压 ( essential hypertension,EH)的遗传易感性相关联。方法　以74 8名受试者的基因组 DNA为模板 ,应用聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性方法检测 A116 6 C多态性。结果　在汉、藏、彝 3个民族正常人群中 ,A116 6等位基因的频率分别为 0 .979、0 .939和 0 .96 5 ;在藏族男性中 ,EH患者 A116 6等位基因的频率明显高于正常对照 ( P=0 .0 0 1) ,AA基因型 ( P=0 .0 0 34)是 EH的独立危险因素 ;在汉族和彝族人群中 ,EH患者和正常对照之间 A116 6 C基因型分布和等位基因频率的差异均无显著性。结论　在汉族、藏族和彝族人群中 ,AT1 R基因 A116 6是最常见的等位基因 ;A116 6 C多态性是藏族男性 EH的遗传易感因子 ,而不是汉族和彝族

关键词： ATlR基因 A1166C多态性汉族藏族彝族原发性高血压遗传易感性

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侧脑室注射6-OHDA对寒冷应激诱导的大鼠血浆ACTH含量的改变

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中国血液流变学杂志 2003年第4期13卷 331-333页

作者：朱永进龚珊蒋星红郭试瑜久光正苏州大学医学院生理教研室神经生物学研究室苏州215007 日本昭和大学医学部第一生理学教室

目的　观察侧脑室注射 6 OHDA对 4℃寒冷应激诱导的血浆ACTH含量的改变。方法　成年Wistar雄性大鼠 3 0只 ,随机分成 5组 (n =6) ,分别为空白对照组、寒冷应激组、6 羟基多巴胺 (6 OHDA)非应激组、6 OHDA +寒冷应激组、配药液 +寒冷应... 详细信息

目的　观察侧脑室注射 6 OHDA对 4℃寒冷应激诱导的血浆ACTH含量的改变。方法　成年Wistar雄性大鼠 3 0只 ,随机分成 5组 (n =6) ,分别为空白对照组、寒冷应激组、6 羟基多巴胺 (6 OHDA)非应激组、6 OHDA +寒冷应激组、配药液 +寒冷应激组。所有动物处理后立即取静脉血用放射免疫法测定其血浆ACTH含量。结果　 4℃寒冷应激 4h后血浆ACTH含量明显升高 ,与正常对照组相比有明显差异 (P <0 .0 1) :6 OHDA侧脑室注射后再寒冷应激 ,血浆ACTH含量不再明显升高。

关键词：侧脑室注射 6-OHDA 寒冷应激诱导大鼠血浆 ACTH 含量

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丹参注射液拮抗庆大霉素耳蜗毒性的实验研究

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锦州医学院学报 2003年第1期24卷 1-4页

作者：王爱梅汤浩姜恩魁高东明焦金菊周丰锦州医学院基础学院生理学教研室辽宁锦州121001 中国医科大学听力研究室辽宁沈阳110001

目的　探讨丹参注射液对庆大霉素 (GM)耳蜗毒性的防护作用。方法　选择白色豚鼠 4 0只 ,随机分成 4组 (n =10 ) :正常对照组、GM组、GM +丹参组和丹参组。GM组腹腔注射硫酸庆大霉素 10 0mg/kg/d ,丹参组腹腔注射丹参注射液 6 g/kg/d ,G... 详细信息

目的　探讨丹参注射液对庆大霉素 (GM)耳蜗毒性的防护作用。方法　选择白色豚鼠 4 0只 ,随机分成 4组 (n =10 ) :正常对照组、GM组、GM +丹参组和丹参组。GM组腹腔注射硫酸庆大霉素 10 0mg/kg/d ,丹参组腹腔注射丹参注射液 6 g/kg/d ,GM +丹参组同时注射硫酸庆大霉素和丹参注射液 ,正常对照组注射等量生理盐水。连续用药 10d后观察耳蜗的功能与形态。结果　GM +丹参组豚鼠听功能受损明显轻于GM组 ,听脑干反应ABR阈值两组比较有显著性差异 (P <0 0 1) ,且形态学改变与听阈变化相一致。结论　丹参注射液可有效拮抗GM对豚鼠的耳蜗毒性。

关键词：丹参注射液庆大霉素耳蜗豚鼠实验研究

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8-Br-cAMP与顺铂对Eca-109细胞DNA polβ,wtp53基因表达及多药耐受蛋白的影响

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郑州大学学报（医学版） 2003年第5期38卷 657-660页

作者：郑乃刚李士坤吴景兰董子明郑州大学基础医学院病理生理学教研室郑州450052 郑州大学第二附属医院消化疾病研究所郑州450003 郑州大学分子细胞生物学研究中心郑州450052

目的 :比较分化诱导剂 8 Br cAMP与基因毒性药物顺铂对Eca 10 9细胞DNApolβ及wtp5 3基因表达和多药耐受蛋白的影响。方法 :分别制备生物素和地高辛标记的polβ探针和生物素标记的野生型p5 3(wtp5 3)探针 ,并检测各探针灵敏度。将培养... 详细信息

目的 :比较分化诱导剂 8 Br cAMP与基因毒性药物顺铂对Eca 10 9细胞DNApolβ及wtp5 3基因表达和多药耐受蛋白的影响。方法 :分别制备生物素和地高辛标记的polβ探针和生物素标记的野生型p5 3(wtp5 3)探针 ,并检测各探针灵敏度。将培养的人食管癌Eca 10 9细胞分组如下 :① 8 Br cAMP组 (Br组 ) ;②不加 8 Br cAMP的对照组 (C1组 ) ,①②组同时培养 4 8h ;③顺铂组 (Pt组 ) ;④不加Pt的对照组 (C2组 ) ,③④组同时培养 2 4h。应用原位杂交技术显示各组细胞polβ基因的表达。对①②及③组细胞进行polβ及wtp5 3双信号原位杂交 ,并应用多药耐受蛋白 (MRP)的免疫组化方法检测耐药性。结果 :生物素标记的polβ探针的杂交信号呈兰紫色细颗粒 ,分布于胞质 ;Br组信号弱于C1组 ,P <0 .0 5。Pt组的信号比C2组强 ,P <0 .0 5。Br组的MRP IR弱于C1组 ,P <0 .0 5 ;Pt组的多药耐受蛋白免疫反应性 (MRP IR)强于C2组 ,P <0 .0 5。地高辛标记的polβ探针的杂交信号呈橙色细颗粒 ,生物素标记的wtp5 3探针的杂交信号呈蓝紫色细颗粒 ,均分布于胞质。在双杂交信号细胞内C1组的橙色强于蓝紫色信号 ;而Br组的蓝紫色信号较明显 ,Pt组的橙色信号较C1组更显著 ,3组相比P皆 <0 .0 5。结论 :8 Br cAMP可下调polβ基因表达及耐药性 ,上?

关键词： DNA聚合酶β 8-Br-cAMP 顺铂 wtp53 耐药性 Eca-109细胞食管癌

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同一细胞非放射性双原位杂交信号显示技术

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郑州大学学报（医学版） 2003年第5期38卷 661-662页

作者：郑乃刚王峰吴景兰李士坤张莹董子明郑州大学基础医学院病理生理学教研室郑州450052 郑州大学分子细胞生物学研究中心郑州450052 郑州大学第二附属医院消化疾病研究所郑州450003

目的 :探讨同一细胞内双原位杂交信号的显示技术。方法 :以地高辛标记的polβ探针加生物素标记的表皮生长因子受体 (EGFR)探针或生物素标记的wtp5 3探针对人食管癌Eca 10 9细胞同时进行原位杂交后 ,以anti Dig AP孵育 ,以AP Red为底物显... 详细信息

目的 :探讨同一细胞内双原位杂交信号的显示技术。方法 :以地高辛标记的polβ探针加生物素标记的表皮生长因子受体 (EGFR)探针或生物素标记的wtp5 3探针对人食管癌Eca 10 9细胞同时进行原位杂交后 ,以anti Dig AP孵育 ,以AP Red为底物显色 ,杂交信号呈桔红色或桔黄色细颗粒。继之以SA AP孵育后以NBT/BCIP底物显色 ,杂交信号呈蓝紫色颗粒。结果 :在同一细胞内可见桔黄色和蓝紫色颗粒双杂交信号。结论 :应用非放射性双杂交信号的原位杂交技术可观察单个细胞内

关键词：双杂交信号原位杂交技术非放射性地高辛标记食管癌

来源：评论

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8-Br-cAMP和槲皮素对Eca-109细胞DNApolβ基因及相关基因表达的影响

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郑州大学学报（医学版） 2003年第5期38卷 663-666页

作者：李士坤郑乃刚吴景兰白经修董子明郑州大学第二附属医院消化疾病研究所郑州450000 郑州大学基础医学院病理生理学教研室郑州450052 郑州大学分子细胞生物学研究中心郑州450052

目的 :探讨 8 Br cAMP及槲皮素等分化诱导剂对Eca 10 9细胞DNApolβ基因及相关基因表达的影响。方法 :将培养的Eca 10 9细胞分为 3组 :①加 8 Br cAMP组 (Br组 ) ;②加槲皮素组 (Q组 ) ;③不加任何药物对照组 (C组 )。同时培养 4 8h ,... 详细信息

目的 :探讨 8 Br cAMP及槲皮素等分化诱导剂对Eca 10 9细胞DNApolβ基因及相关基因表达的影响。方法 :将培养的Eca 10 9细胞分为 3组 :①加 8 Br cAMP组 (Br组 ) ;②加槲皮素组 (Q组 ) ;③不加任何药物对照组 (C组 )。同时培养 4 8h ,将野生型DNApolβ的cDNA ,EGFRcDNA ,野生型 (wt)p5 3cDNA及c myccDNA分别制备了生物素 /地高辛标记的探针进行原位杂交和RNA斑点印迹阵列。另进行POLB ,XRCC1,VEGF及PCNA的免疫组化染色及免疫斑点印迹阵列。结果 :Br组和Q组的DNApolβ ,EGFR ,c myc基因表达下调而wtp5 3基因表达上调。POLB ,XRCC1,PCNA及VEGF免疫斑点印迹减弱。 8 Br cAMP及槲皮素显著下调Eca 10 9细胞的DNApolβ基因表达及相关癌基因表达 ,同时上调抑癌基因的表达。作为POLB的异二聚体XRCC1及恶性细胞生物标志的PCNA及VEGF表达下调。结论 :分化诱导剂下调Eca 10 9细胞DNApolβ基因表达 ,提示Eca 10 9细胞的polβ基因是高表达的 ;功能调整后的polβ通过相关基因表达的改变尤其是wtp5

关键词： DNA聚合酶β 基因表达 Eca-109细胞 8-Br-cAMP 槲皮素食管鳞状上皮癌

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N-甲基-D-门冬氨酸受体重组肽抗血清对谷氨酸兴奋毒性导致神经元坏死和凋亡的保护作用

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中华神经科杂志 2003年第5期36卷 366-369页

作者：康晓楠孙长凯朱克范明丁爱石马清钧石成华赵杰韩大跃王耀山施广霞包礼平大连医科大学脑疾病研究所 116027 解放军总医院神经病学研究所军事医学科学院基础医学研究所军事医学科学院生物工程研究所解放军第210医院沈阳军区总医院神经科大连医科大学病理生理学教研室

目的　观察N 甲基 D 门冬氨酸受体 (NMDAR ,NR)主亚基 (NR1)M3M4环重组肽自身抗血清对不同浓度谷氨酸诱导的神经元死亡的保护作用。方法　用NR1M3M4环重组肽免疫Balb/C(H 2 d)小鼠制备抗血清 ,用锥虫蓝染色法和原位末端标记 (TUNEL)法... 详细信息

目的　观察N 甲基 D 门冬氨酸受体 (NMDAR ,NR)主亚基 (NR1)M3M4环重组肽自身抗血清对不同浓度谷氨酸诱导的神经元死亡的保护作用。方法　用NR1M3M4环重组肽免疫Balb/C(H 2 d)小鼠制备抗血清 ,用锥虫蓝染色法和原位末端标记 (TUNEL)法观察抗血清对原代培养海马神经元兴奋毒性坏死和凋亡的保护效应。结果　在高浓度谷氨酸 (5 0 0 μmol/L)条件下 ,阳性抗血清可以使神经元坏死减少 16 % ;在低浓度谷氨酸 (5 0 μmol/L)作用下 ,阳性抗血清保护可使神经元凋亡率减少 13%。结论　NMDAR重组肽自身免疫抗血清具有抗兴奋毒性作用 ,这一结论为免疫防治兴奋毒性脑损伤策略的建立提供了坚实的体外基础。

关键词： N-甲基-D-门冬氨酸受体基因重组谷氨酸兴奋毒性神经元脑损伤小鼠

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