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α-ZAL、GST和17β E_2对去势食饵性大鼠HHCY所致血管内皮损伤的保护作用

中国药理学通报 2009年第7期25卷 891-894页

作者：洪霓段金虹张彦东吴云清甄攀攀蒋东桥戴顺龄王雯中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院北京100005 首都医科大学病理生理学教研室北京100069

目的复制去势(OVX)大鼠高同型半胱氨酸血症(HHCY)模型,比较植物雌激素α-玉米赤霉醇(α-ZAL)、染料木素(GST)和17β雌二醇(17βE2)对血管内皮的保护作用。方法实验分为6组:①正常对照组(Control);②假手术+2.5%蛋氨酸组(Sham);③切除卵... 详细信息

目的复制去势(OVX)大鼠高同型半胱氨酸血症(HHCY)模型,比较植物雌激素α-玉米赤霉醇(α-ZAL)、染料木素(GST)和17β雌二醇(17βE2)对血管内皮的保护作用。方法实验分为6组:①正常对照组(Control);②假手术+2.5%蛋氨酸组(Sham);③切除卵巢+2.5%蛋氨酸组(OVX);④OVX+2.5%蛋氨酸+α-ZAL组(OVX+α-ZAL);⑤OVX+2.5%蛋氨酸+GST组(OVX+GST);⑥OVX+2.5%蛋氨酸+17βE2组(OVX+17βE2)。α-ZAL、GST和17βE2分别隔日肌注250μg/0.25ml,共12wk。双抗夹心法测定HCY和ET-1浓度,RT-PCR法检测主动脉组织ET-1 mRNA表达;主动脉作病理制片。结果血浆HCY含量(μmol.L-1):Sham与Con组比较明显升高,P<0.05;OVX组与Sham组相比明显升高,P<0.05;而OVX+α-ZAL、OVX+GST和OVX+17βE2组与OVX组相比均降低,P<0.01。血浆ET-1(ng.L-1)含量:OVX组与Sham组相比较ET-1升高,P<0.01,而OVX+α-ZAL、OVX+GST和OVX+17βE2组与OVX组相比均降低,P<0.01。主动脉组织ET-1 mRNA的表达:OVX组与Sham组相比较升高,P<0.05,而OVX+α-ZAL、OVX+GST和OVX+17βE2组与OVX组相比均降低,P<0.05,其它各组ET-1 mRNA表达均无变化。病理:OVX组血管内皮明显损伤,Sham组、α-ZAL、GST和17βE2组血管内膜大致正常,内皮细胞基本完整,未见明显的炎性细胞浸润。结论α-ZAL、GST和17βE2均能通过降低HCY含量和减少ET-1分泌、表达而保护血管内皮,三者的内皮保护作用相似。

关键词： α-玉米赤霉醇染料木素 17β雌二醇高同型半胱氨酸血症内皮素

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断乳后慢性铝暴露对大鼠海马长时程增强及蛋白激酶A表达的影响

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中华行为医学与脑科学杂志 2009年第6期18卷 529-531页

作者：银杰南娟杨一鸣罗丹蔡葵时利德中国医科大学基础医学院生理学教研室沈阳110001 中国医科大学基础医学院发育生物学教研室沈阳110001 中国医科大学基础医学院神经生物学教研室沈阳110001

目的研究断乳后不同浓度慢性铝暴露对大鼠海马长时程增强及蛋白激酶A（PKA）表达的影响，进一步探讨铝损害学习与记忆的突触机制。方法断乳的健康Wistar大鼠60只，按体质量随机平均分为3组：对照组、0．2％-A1和0．4％-A1组。各组大鼠... 详细信息

目的研究断乳后不同浓度慢性铝暴露对大鼠海马长时程增强及蛋白激酶A（PKA）表达的影响，进一步探讨铝损害学习与记忆的突触机制。方法断乳的健康Wistar大鼠60只，按体质量随机平均分为3组：对照组、0．2％-A1和0．4％-A1组。各组大鼠分别自由饮用蒸馏水、Al^3＋浓度为15mmol·L^-1和30mmol·L^-1的A1C13水溶液；采用细胞外微电极记录法测定海马长时程增强，western-blot法测定大鼠海马内PKA蛋白表达。结果高频刺激（HFS）后，对照组大鼠海马长时程增强发生率为77．78％，0．2％-Al组为60％、0．4％-Al组为44．44％。对照组大鼠群体锋电位平均相对幅值达基线值（1414．69±29．91）％，0．2％-Al组为（113．57±16．47）％，0．4％-Al组为（103．91±19．96）％，0．4％-Al组与对照组相比，显著降低（P=0．033），但0．2％-Al组与对照组之间差异无显著性；对照组PKA含量为1．45±0．36；0．2％-Al组为1．024-0．22；0．4％，A1组为0．72±0．12。与对照组相比，2个铝暴露组大鼠海马内PKA蛋白表达显著减少（P=0．000），且2个铝暴露组间亦差异具有显著意义（P=0．000）。结论断乳后慢性铝暴露损害了海马长时程增强的表达，导致学习与记忆功能下降，可能与PKA表达的减少有关。

关键词：铝暴露长时程增强蛋白激酶A 断乳

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地塞米松快速抑制大鼠背根神经节细胞中ATP所致的钙升高

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第三军医大学学报 2009年第14期31卷 1329-1332页

作者：刘晓红曾俊伟肖智阮怀珍第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038 遵义医学院生理学教研室贵州遵义563003

目的通过观察地塞米松对大鼠背根节神经元中ATP所致的细胞内游离钙离子浓度(intracellular calciumcon centration,[Ca2+]i)升高的影响,了解糖皮质激素是否通过非基因组作用影响初级感觉神经元的兴奋性。方法分离、培养大鼠背根神经节细... 详细信息

目的通过观察地塞米松对大鼠背根节神经元中ATP所致的细胞内游离钙离子浓度(intracellular calciumcon centration,[Ca2+]i)升高的影响,了解糖皮质激素是否通过非基因组作用影响初级感觉神经元的兴奋性。方法分离、培养大鼠背根神经节细胞,采用激光共聚焦技术观察地塞米松对培养神经元ATP所致的[Ca2+]i升高的影响。结果ATP(100μmol/L)可导致背根节神经元[Ca2+]i升高,是由P2X受体介导细胞外Ca2+内流所致;地塞米松预孵育5 min可剂量依赖性地抑制背根节神经元ATP所致的[Ca2+]i升高,地塞米松的抑制作用可被糖皮质激素受体拮抗剂RU38486(10μmol/L)、蛋白激酶A抑制剂H-89(10μmol/L)所阻断。结论地塞米松通过糖皮质激素受体激活细胞内蛋白激酶A信号途径可显著抑制大鼠背根节神经元ATP所致的[Ca2+]i升高。糖皮质激素可通过非基因组作用影响初级感觉神经元的ATP/P2X受体功能而参与痛觉的调制。

关键词：地塞米松背根神经节 ATP 激光共聚焦技术

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短期丰富生存环境对中老年大鼠空间学习能力的作用及性别差异

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重庆医科大学学报 2009年第5期34卷 521-524页

作者：黄春霞杨俊卿卢伟杨姝李琛唐勇重庆医科大学基础医学院生理学教研室重庆医科大学基础医学院药理学教研室重庆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室重庆医科大学附属第一医院神经内科重庆400016

目的:探讨短期丰富生存环境对中老年大鼠空间学习能力的作用及性别差异。方法:将14月龄的Sprague-Dawle(ySD)大鼠分雌、雄性后再随机分为丰富生存环境组与空白对照组,前者在丰富生存环境条件下饲养,后者在普通环境下饲养,4个月后分别测... 详细信息

目的:探讨短期丰富生存环境对中老年大鼠空间学习能力的作用及性别差异。方法:将14月龄的Sprague-Dawle(ySD)大鼠分雌、雄性后再随机分为丰富生存环境组与空白对照组,前者在丰富生存环境条件下饲养,后者在普通环境下饲养,4个月后分别测试在Morris水迷宫中的成绩。结果:短期丰富生存环境下,雌性大鼠的空间学习能力显著强于空白对照组,而同样条件干预的雄性大鼠空间学习能力与空白对照组相比无显著性差异。另外,在普通环境中饲养4个月的雄性大鼠空间学习能力明显强于雌性大鼠,而丰富生存环境条件下雌、雄性大鼠空间学习能力相比无显著性差异。结论:中老年雄性大鼠空间学习能力强于雌性大鼠,但中老年雌性大鼠大脑功能的可塑性可能要强于雄性大鼠,短期丰富生存环境的干预对于中老年雌性大鼠空间学习能力有显著性影响。本研究结果为将来寻找延缓大脑衰老过程的行为学手段提供了重要的理论依据。

关键词：大鼠空间学习能力丰富生存环境性别差异 Morris水迷宫

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微丝相关蛋白HSPC300／hHBRK1与肌球蛋白Ⅵ相互作用的鉴定

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中国生物化学与分子生物学报 2009年第2期25卷 146-151页

作者：祝敏虞红珍王豫汪思应徐勤枝周平坤军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京100850 安徽医科大学基础医学院病理学与病理生理学教研室安徽合肥230032

为鉴定微丝相关蛋白HSPC300/hHBRK1在肝脏组织的功能,采用GSTpull-down结合质谱技术,检测该蛋白在肝脏中的结合蛋白,结果提示,肌球蛋白Ⅵ与HSPC300/hHBRK1共沉降,Western印迹杂交证实了质谱的结果.构建HSPC300/hHBRK1原核表达载体,诱导... 详细信息

为鉴定微丝相关蛋白HSPC300/hHBRK1在肝脏组织的功能,采用GSTpull-down结合质谱技术,检测该蛋白在肝脏中的结合蛋白,结果提示,肌球蛋白Ⅵ与HSPC300/hHBRK1共沉降,Western印迹杂交证实了质谱的结果.构建HSPC300/hHBRK1原核表达载体,诱导并获得了His-hHBRK1融合蛋白.利用免疫共沉淀证实hHBRK1与肌球蛋白Ⅵ存在相互作用,激光共聚焦检测显示hHBRK1与肌球蛋白Ⅵ在肺癌95D细胞的胞浆共定位,提示其相互作用可能是直接结合.肌球蛋白Ⅵ参与细胞迁移、高尔基分泌泡的运输和维持高尔基体稳定性等作用.hHBRK1与肌球蛋白Ⅵ相互作用,为微丝相关蛋白HSPC300/hHBRK1参与细胞迁移和胞内物质运输提供了进一步佐证.

关键词： BrK1/HSPC300 微丝肌球蛋白Ⅵ 蛋白质相互作用

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五味子提取物逆转K562/DOX细胞阿霉素耐药的实验研究

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中国实验诊断学 2009年第3期13卷 306-308页

作者：邱海洋郗昕张一帆梁铁张永和宋京郁孙连坤延边大学医学部病理学教研室吉林延吉133000 吉林大学基础医学院病理生理学教研室吉林大学第二临床医学院长春中医药大学临床药理研究室

目的探讨五味子提取物对阿霉素耐药细胞株K562/DOX的耐药逆转作用。方法MTT法检测单独应用阿霉素或阿霉素与五味子提取物联合作用的K562/DOX细胞的生存率;RT-PCR检测MDR1、MRP1 mRNA表达;Westernblotting检测MDR1蛋白的表达。结果与对... 详细信息

目的探讨五味子提取物对阿霉素耐药细胞株K562/DOX的耐药逆转作用。方法MTT法检测单独应用阿霉素或阿霉素与五味子提取物联合作用的K562/DOX细胞的生存率;RT-PCR检测MDR1、MRP1 mRNA表达;Westernblotting检测MDR1蛋白的表达。结果与对照组相比,单独应用阿霉素组细胞的生存率未见明显变化;而阿霉素与五味子提取物联合作用组细胞存活率显著降低,MDR1、MRP mRNA表达降低;MDR1蛋白表达下降。结论五味子提取物可能通过下调MDR1、MRP水平进而逆转K562/DOX细胞对阿霉素的耐药性,增加肿瘤耐药细胞对化疗药物的敏感性。

关键词：多药耐药多药耐药基因五味子提取物 K562/DOX细胞

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HeLa细胞系中核转录因子-κB与Bcl-2的表达

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郑州大学学报（医学版） 2009年第1期44卷 74-77页

作者：田卫红田芳许培荣刘红涛薛乐勋安阳市肿瘤医院妇科安阳455000 郑州大学基础医学院病理生理学教研室郑州450001 郑州大学细胞生物学研究室郑州450052

目的:分析宫颈鳞癌HeLa229细胞中核转录因子(NF-κB)的激活状态及其与抗凋亡基因Bcl-2表达的相关性。方法:采用免疫细胞化学法和Western Blot法检测宫颈鳞癌HeLa229细胞中NF-κB亚单位p50和p65及其下游调控基因Bcl-2的蛋白表达,RT-PCR... 详细信息

目的:分析宫颈鳞癌HeLa229细胞中核转录因子(NF-κB)的激活状态及其与抗凋亡基因Bcl-2表达的相关性。方法:采用免疫细胞化学法和Western Blot法检测宫颈鳞癌HeLa229细胞中NF-κB亚单位p50和p65及其下游调控基因Bcl-2的蛋白表达,RT-PCR法检测宫颈鳞癌HeLa229细胞中p50和p65 mRNA的表达。EMSA法检测HeLa229细胞核中NF-κB与DNA的结合活性。结果:宫颈鳞癌HeLa229细胞质中NF-κB的亚单位p50和p65均有表达,p50/p65在细胞核中具有较高的DNA结合活性。RT-PCR结果表明,p50和p65的mRNA在细胞质中也存在表达,并且在HeLa229细胞中也检测到Bcl-2蛋白的表达。结论:在宫颈鳞癌HeLa229细胞中存在有NF-κB及其下游基因Bcl-2的表达,提示激活的NF-κB信号通路可能在宫颈鳞癌发生发展及抗凋亡中起重要作用。

关键词： HeLa229细胞株核转录因子-κB Bcl-2

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顺铂激活的低分化鼻咽癌细胞氯电流

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中国病理生理杂志 2009年第4期25卷 666-669页

作者：阳小雅王立伟朱林燕杨林杰毛建文 Tim Jacob 陈丽新暨南大学医学院生理学教研室广东广州510632 广州医学院护理学院广东广州510182 暨南大学医学院药理学教研室广东广州510632 广东药学院基础医学研究所广东广州510006 Cardiff School of Biosciences Cardiff University

目的:研究抗癌药顺铂对低分化鼻咽癌细胞(CNE-2Z)氯通道的激活作用以及该电流的特性。方法:采用膜片钳技术记录顺铂激活的CNE-2Z细胞全细胞电流;离子置换法等方法分析通道的特性。结果:细胞外灌流5μmol/L的顺铂诱发CNE-2Z细胞产生一个... 详细信息

目的:研究抗癌药顺铂对低分化鼻咽癌细胞(CNE-2Z)氯通道的激活作用以及该电流的特性。方法:采用膜片钳技术记录顺铂激活的CNE-2Z细胞全细胞电流;离子置换法等方法分析通道的特性。结果:细胞外灌流5μmol/L的顺铂诱发CNE-2Z细胞产生一个有明显外向优势的电流,电流的翻转电位为(-6.69±0.51)mV,接近氯离子平衡电位(-0.9 mV)。该电流的激活依赖于细胞内ATP。顺铂激活的细胞膜氯通道对阴离子的通透性顺序为:I-≥Br->Cl->gluconate。氯通道阻断剂tamoxifen完全抑制该电流。结论:抗癌药顺铂可以激活一个电流特征与容积激活性氯通道相似的氯通道。

关键词：顺铂鼻咽肿瘤细胞凋亡氯化物通道

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L-精氨酸对大鼠尾核一氧化氮合酶基因表达的影响

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济宁医学院学报 2009年第1期32卷 6-8页

作者：刘玉红刘海青白波济宁医学院生理学教研室泰山医学院神经生物学研究室

目的研究尾核中一氧化氮在痛觉调制中的作用机制。方法大鼠尾核内微量注射L-精氨酸、Nω-硝基-L-精氨酸甲酯、生理盐水,应用逆转录-聚合酶链反应测定4,8,12,24和48 h大鼠尾核nNOS mRNA表达的变化;新生Wistar大鼠尾核神经元原代培养液中... 详细信息

目的研究尾核中一氧化氮在痛觉调制中的作用机制。方法大鼠尾核内微量注射L-精氨酸、Nω-硝基-L-精氨酸甲酯、生理盐水,应用逆转录-聚合酶链反应测定4,8,12,24和48 h大鼠尾核nNOS mRNA表达的变化;新生Wistar大鼠尾核神经元原代培养液中加入L-精氨酸、Nω-硝基-L-精氨酸甲酯、生理盐水,观察给药12 h尾核nNOS mRNA表达的变化。结果大鼠尾核给药24 h内L-精氨酸组nNOS mRNA表达较正常增强(P<0.05),而Nω-硝基-L-精氨酸甲酯组nNOS mRNA表达较正常减弱(P<0.05),48 h恢复正常。体外尾核原代神经元培养,nNOS mRNA表达的变化趋势和在体实验相一致。结论中枢神经系统尤其是尾核中NOS活性是一氧化氮作为神经递质或调质参与中枢痛觉调制的关键因素之一。

关键词：尾核 L-精氨酸一氧化氮合酶基因表达

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人参二醇组皂苷增强顺铂对人前列腺癌DU145细胞凋亡的效应

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中国男科学杂志 2009年第2期23卷 12-16页

作者：刘艳波赵丽娟郭亚雄韩向北李德龙董妍赵雪俭吉林大学前列腺疾病防治研究中心长春130021 北华大学基础医学院病理生理学教研室美国杜兰大学

目的探讨人参二醇组皂苷(panoxadiol saponin PDS)与顺铂(cisplatin,DDP)联合应用对DU145前列腺癌细胞增殖及凋亡的影响。方法采用MTT比色法检测PDS与DDP联合应用对DU145细胞增殖活力的影响;吖啶橙染色观察诱导细胞凋亡情况;流式细胞仪... 详细信息

目的探讨人参二醇组皂苷(panoxadiol saponin PDS)与顺铂(cisplatin,DDP)联合应用对DU145前列腺癌细胞增殖及凋亡的影响。方法采用MTT比色法检测PDS与DDP联合应用对DU145细胞增殖活力的影响;吖啶橙染色观察诱导细胞凋亡情况;流式细胞仪分析细胞周期及凋亡,并计算细胞平均凋亡率;免疫化学和Western blot技术观察细胞内激活的caspase3的表达。结果100mg/L PDS与0.2μmol/L DDP联合给药:(1)48h后可使单独应用0.2μmol/L DDP组其肿瘤细胞生长抑制率由16.35%提高到47.13%;(2)吖啶橙荧光染色可见细胞呈现明显凋亡形态,其凋亡率与2μmol/L DDP组相当;(3)流式细胞术结果显示,可使单独应用0.2μmol/L DDP组其诱导DU145细胞凋亡率从5.53%提高到19.39%,相当于其10倍剂量即2.0μmol/L DDP的诱导凋亡效应(21.05%),明显高于PDS单独应用的凋亡率;(4)免疫化学和Western blot结果显示,可使单独应用0.2μmol/L DDP组细胞内激活的caspase3阳性细胞率与2μmol/L DDP组相当。结论PDS能增强DDP对DU145前列腺癌细胞的致凋亡效应。

关键词：细胞凋亡人参二醇皂苷前列腺肿瘤细胞周期

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