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婴儿双歧杆菌介导的CD和UPRT联合5-FC基因疗法对黑色素瘤的体外治疗实验研究

四川大学学报（医学版） 2007年第1期38卷 27-30,63页

作者：安丽娜李华岳扬王树人郭志英彭克军四川大学华西基础医学与法医学院病理生理学教研室成都610041 泸州医学院病理生理学教研室北京武警总医院肝移植研究所

目的采用婴儿双歧杆菌为载体,探讨尿嘧啶磷酸核糖转移酶基因(UPRT)对胞嘧啶脱氨酶/5-氟胞嘧啶(CD/5-FC)自杀基因系统抗瘤作用的增强效应。方法构建原核表达质粒pGEX-UPRT,以电穿孔法将该质粒转化入婴儿双歧杆菌,筛选阳性重组菌并鉴定。... 详细信息

目的采用婴儿双歧杆菌为载体,探讨尿嘧啶磷酸核糖转移酶基因(UPRT)对胞嘧啶脱氨酶/5-氟胞嘧啶(CD/5-FC)自杀基因系统抗瘤作用的增强效应。方法构建原核表达质粒pGEX-UPRT,以电穿孔法将该质粒转化入婴儿双歧杆菌,筛选阳性重组菌并鉴定。采用M TT法检测表达的U PRT是否可以与CD产生抗瘤协同作用,并观察细胞形态学改变。结果重组婴儿双歧杆菌可以正确表达UPRT。体外M TT检测显示CD+UPRT组细胞存活率低于对照组(P<0.01),且可使B 16-F 10鼠黑色素瘤细胞对5-FC的杀伤敏感性(IC50=0.015μm o l/mL)提高,是CD组(IC50=0.127μm o l/mL)的8.5倍。形态学观察CD+UPRT组肿瘤细胞显示出明显的损伤性改变,细胞生长受到明显抑制,而UPRT组和CD组变化明显不如前者。结论婴儿双歧杆菌联合转导UPRT基因可明显增强CD/5-FC自杀基因系统对鼠黑色素瘤细胞B 16-F 10的杀伤作用。

关键词：婴儿双歧杆菌尿嘧啶磷酸核糖转移酶胞嘧啶脱氨酶基因治疗

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缓激肽对C6胶质瘤细胞IL-1β表达的影响

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中国药理学通报 2007年第9期23卷 1174-1176页

作者：王振华薛一雪中国医科大学基础医学院生理学教研室辽宁沈阳110001 中国医科大学基础医学院神经生物教研室辽宁沈阳110001

目的探讨缓激肽对大鼠C6胶质瘤细胞内白细胞介素-1β(IL-1β)表达水平的影响,为进一步研究缓激肽开放血肿瘤屏障的机制提供实验依据。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量技术和放射免疫法分别检测缓激肽作用C6胶质瘤细胞后,胶... 详细信息

目的探讨缓激肽对大鼠C6胶质瘤细胞内白细胞介素-1β(IL-1β)表达水平的影响,为进一步研究缓激肽开放血肿瘤屏障的机制提供实验依据。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量技术和放射免疫法分别检测缓激肽作用C6胶质瘤细胞后,胶质瘤细胞IL-1β mRNA及细胞培养液中IL-1β的含量。结果RT-PCR结果显示缓激肽作用15min后,IL-1β mRNA的表达水平较对照组升高(P<0.05),然后逐渐下降;放射免疫法结果亦证明了C6胶质瘤细胞在缓激肽作用15min后,其细胞培养液中IL-1β的含量最高。结论缓激肽可刺激大鼠C6胶质瘤细胞中IL-1β的分泌增强,IL-1β的表达上调可能在缓激肽增加血肿瘤屏障通透性的过程中发挥一定作用。

关键词：神经胶质瘤缓激肽白细胞介素-1β 血肿瘤屏障

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低氧预适应对大鼠缺血-再灌注性脑损伤中HSP-70、Survivin蛋白和学习记忆能力的影响

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南方医科大学学报 2007年第12期27卷 1856-1859,1862页

作者：卢娜李晓娟李成长李东亮崔鹏飞侯宇宁王寅琳新乡医学院生理学与神经生物学教研室河南新乡453003 新乡医学院基础医学院 2004级学生河南新乡453003

目的探讨低氧预适应减轻大鼠缺血-再灌注性脑损伤中学习记忆能力及HSP-70、存活素蛋白表达的变化。方法采用SD大鼠局灶性脑缺血再灌注模型(MCAO),将48只大鼠随机分为3组6个亚组:假手术组、缺血再灌注组(I/R)、低氧预适应组(HP+I/R),应... 详细信息

目的探讨低氧预适应减轻大鼠缺血-再灌注性脑损伤中学习记忆能力及HSP-70、存活素蛋白表达的变化。方法采用SD大鼠局灶性脑缺血再灌注模型(MCAO),将48只大鼠随机分为3组6个亚组:假手术组、缺血再灌注组(I/R)、低氧预适应组(HP+I/R),应用免疫组织化学法研究脑组织细胞凋亡相关蛋白存活素和应激蛋白HSP-70的表达情况;并通过Y-电迷宫测试缺血再灌注24h后大鼠学习、记忆能力。结果高倍视野下存活素和HSP-70蛋白阳性细胞数比较,HP+I/R组与I/R组及假手术组间差异具有统计学意义(P<0.05)。缺血3h再灌注24h后,Y-电迷宫测试大鼠学习记忆能力,HP+I/R组优于I/R组(P<0.05)。结论低氧预适应可减轻局灶性缺血再灌注脑损伤,提高动物学习记忆能力和损伤后神经功能恢复;上调神经细胞中存活素、HSP-70蛋白表达可能是其发挥保护作用的分子机制之一。

关键词：脑缺血再灌注损伤低氧预适应存活素热休克蛋白70 Y-电迷宫学习记忆

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OHAP-1对大鼠C6胶质瘤细胞bcl-2/bax基因表达和氧化应激的影响

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吉林大学学报（医学版） 2007年第4期33卷 667-670页

作者：朱战鹏康劲松孔晓霞罗毅男孙连坤吉林大学第一医院神经外科吉林长春130021 吉林大学基础医学院病理生理学教研室吉林长春130021

目的:探讨冲绳巴布蛇毒蛋白-1(OHAP-1)对大鼠C6胶质瘤细胞的增殖抑制作用及其机制。方法:MTT法检测2.5、5.0和10.0mg·L-1OHAP-1对C6胶质瘤细胞的增殖抑制作用;RT-PCR法检测OHAP-1对C6胶质瘤细胞bcl-2和bax基因表达的影响;分光光度... 详细信息

目的:探讨冲绳巴布蛇毒蛋白-1(OHAP-1)对大鼠C6胶质瘤细胞的增殖抑制作用及其机制。方法:MTT法检测2.5、5.0和10.0mg·L-1OHAP-1对C6胶质瘤细胞的增殖抑制作用;RT-PCR法检测OHAP-1对C6胶质瘤细胞bcl-2和bax基因表达的影响;分光光度法检测胶质瘤细胞中丙二醛(MDA)的含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活性。结果:2.5、5.0和10.0mg·L-1OHAP-1对C6胶质瘤细胞生长抑制率(49.77%、67.65%和76.42%)高于对照组(P<0.001)。随着OHAP-1剂量的增加,bcl-2 mRNA的表达逐渐下降,bax mRNA的表达逐渐升高,bcl-2/bax亦逐渐减小。2.5、5.0和10.0mg·L-1组MDA含量高于对照组(P<0.01),且SOD活性低于对照组(P<0.01);5.0和10.0mg·L-1组MDA含量高于2.5mg·L-1组和对照组(P<0.001),10.0mg·L-1组SOD活性低于2.5mg·L-1组和对照组(P<0.001);10.0mg·L-1组SOD活性低于5.0、2.5mg·L-1组和对照组(P<0.01)。结论:OHAP-1通过氧化应激使bcl-2/bax mRNA表达降低可能是抑制C6胶质瘤细胞增殖的重要原因之一。

关键词：冲绳巴布蛇毒蛋白-1 胶质瘤细胞凋亡相关基因氧化应激

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甲醛炎性痛增强大鼠海马NOS表达和NO生成

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中国应用生理学杂志 2007年第1期23卷 30-34,I0004页

作者：刘凌云吴迪李清君李文斌郭新华河北医科大学基础医学院病理生理学教研室河北石家庄050017 河北省人民医院神经内科河北石家庄050051

目的：观察甲醛炎性痛过程中大鼠痛行为、海马一氧化氮合酶（NOS）活性及一氧化氮（NO）含量的变化以及变化的时程及区域特征。方法：采用辐射热甩尾法测定大鼠痛阈变化；采用NADPH—d组织化学法和硝酸还原酶法分别测定大鼠海马NOS表达... 详细信息

目的：观察甲醛炎性痛过程中大鼠痛行为、海马一氧化氮合酶（NOS）活性及一氧化氮（NO）含量的变化以及变化的时程及区域特征。方法：采用辐射热甩尾法测定大鼠痛阈变化；采用NADPH—d组织化学法和硝酸还原酶法分别测定大鼠海马NOS表达和No含量。结果：皮下注射甲醛溶液后，大鼠出现伤害性感受反应及痛阈降低。注射甲醛后6h，海马CA1、CA2～3区及DG区NOS阳性细胞数目、阳性细胞染色深度均显著增加。海马NO含量亦显著增加；注射甲醛后12h时这些改变最为显著，48h时恢复至对照组水平。结论：甲醛炎性痛可诱导海马NOS活性增强及NO生成增多．这种改变可发生在海马各区．并具有一定的时程特征。

关键词：海马一氧化氮一氧化氮合酶痛觉过敏伤害性感受反应

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侧脑室注射吡咯喹啉醌对大鼠海马结构的影响

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神经解剖学杂志 2007年第5期23卷 559-563页

作者：熊顺华王燕唐微郧阳医学院生理学教研室十堰442000 郧阳医学院基础医学研究所十堰442000

观察吡咯喹啉醌(pyrroloquinoline quinone,PQQ)对大鼠海马神经细胞结构的影响。侧脑室注射PQQ,60d后行脑组织切片并进行HE和尼氏染色,观察大鼠海马组织的形态学变化。用免疫组化法观察胆碱乙酰基转移酶的表达情况。结果表明,与对照组相... 详细信息

观察吡咯喹啉醌(pyrroloquinoline quinone,PQQ)对大鼠海马神经细胞结构的影响。侧脑室注射PQQ,60d后行脑组织切片并进行HE和尼氏染色,观察大鼠海马组织的形态学变化。用免疫组化法观察胆碱乙酰基转移酶的表达情况。结果表明,与对照组相比,PQQ处理后,大鼠海马神经细胞胞体和核增大,神经细胞的密度增加,尼氏小体的光密度值增加,此变化呈剂量依赖性。大剂量的PQQ处理后,海马神经元的胞体和核变小,细胞的凋亡率增加。胆碱乙酰基转移酶的表达量随PQQ刺激而增加。此结果表明,PQQ能促进鼠海马神经细胞的生长发育,但过大剂量PQQ则具有神经毒性作用。

关键词：吡咯喹啉醌海马形态结构

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锌对氟致雄性大鼠生殖损伤的拮抗作用

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郑州大学学报（医学版） 2007年第1期42卷 75-78页

作者：李艳朱静媛庄东刚阎爱华马秀云程学敏崔留欣郑州大学公共卫生学院环境卫生学教研室郑州450001 郑州大学基础医学院癌前期研究室郑州450001 郑州大学基础医学院病理生理学教研室郑州450001

目的:探讨不同剂量的锌对高氟所致雄性大鼠生殖损伤的拮抗作用。方法:将50只雄性Wistar大鼠随机分为5组,即对照组(去离子水)、氟组(25mg/kg氟化钠)、氟加低锌组(25mg/kg氟化钠+4mg/kg硫酸锌)、氟加中锌组(25mg/kg氟化钠+20mg/kg硫酸锌)... 详细信息

目的:探讨不同剂量的锌对高氟所致雄性大鼠生殖损伤的拮抗作用。方法:将50只雄性Wistar大鼠随机分为5组,即对照组(去离子水)、氟组(25mg/kg氟化钠)、氟加低锌组(25mg/kg氟化钠+4mg/kg硫酸锌)、氟加中锌组(25mg/kg氟化钠+20mg/kg硫酸锌)、氟加高锌组(25mg/kg氟化钠+50mg/kg硫酸锌),每组10只,灌胃6周。观察氟、锌对精子数量、活动率和畸形率、血清性激素、睾丸生化标志酶及睾丸组织病理学切片的影响。结果:①精子计数、活动率:氟加中锌组大鼠精子计数、精子活动率均高于氟组、氟加低锌组和氟加高锌组,差异均有统计学意义(P<0.05);精子畸形率:氟加中锌组大鼠精子畸形率低于氟组、氟加低锌组和氟加高锌组,差异均有统计学意义(P<0.05)。②血清睾酮含量:氟加中锌组血清睾酮含量高于氟组和氟加高锌组,差异有统计学意义(P<0.05)。③睾丸乳酸脱氢酶活力:氟加中锌组高于氟加高锌组,差异有统计学意义(P<0.05)。睾丸氟含量:氟加中锌组低于氟组,差异有统计学意义(P<0.05)。④睾丸组织病理学检查结果:氟组、氟加高锌组与对照组比较,形态结构疏松;氟加低锌组、氟加中锌组与氟组比较,结构较完整。结论:中等剂量的锌可以拮抗高氟所致的雄性生殖毒性。

关键词：氟锌生殖损伤拮抗作用大鼠

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母体慢性铝暴露对子代鼠海马细胞内Ca^(2+)浓度及记忆行为的影响

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中国药理学通报 2007年第7期23卷 912-916页

作者：刘慧慧孙洁邢伟蔡葵蔡原赵卓唐秋实时利德中国医科大学基础医学院生理学教研室辽宁沈阳110001 中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室辽宁沈阳110001 中国医科大学基础医学院神经生物学教研室辽宁沈阳110001 中国医科大学公共卫生学院毒理学教研室辽宁沈阳110001

目的探讨母体于孕前、孕期和哺乳期不同浓度的铝暴露对子代大鼠实施LTP诱导后海马细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)和记忆行为的影响。方法从孕前30d始至子代断乳止,对照组(control)与低剂量(用0.2%-Al表示)和高剂量(用0.4%-Al表示)暴露组的... 详细信息

目的探讨母体于孕前、孕期和哺乳期不同浓度的铝暴露对子代大鼠实施LTP诱导后海马细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)和记忆行为的影响。方法从孕前30d始至子代断乳止,对照组(control)与低剂量(用0.2%-Al表示)和高剂量(用0.4%-Al表示)暴露组的母代大鼠分别饮用蒸馏水和浓度为0.015mol·L-1(2g·L-1)、0.03mol·L-1(4g·L-1)的三氯化铝(AlCl3)水溶液;采用原子吸收石墨炉法测定子代鼠的脑铝及血铝含量;以Fura-2/AM为荧光指示剂,测定实施LTP诱导后海马神经元的[Ca2+]i;采用跳台法(即步下试验)测试子代鼠的记忆能力。结果①两暴露组大鼠的血铝和脑铝平均含量明显高于对照组(P<0.05及P<0.01);②与对照组相比,两暴露组海马神经元的[Ca2+]i降低,但0.2%-Al组的差异无显著性(P>0.05),而0.4%-Al组差异有显著性(P<0.01),且0.2%-Al组与0.4%-Al组间的差异亦有显著性(P<0.05);③与对照组相比,两暴露组大鼠步下试验行为测试中跳下平台的潜伏期明显缩短(P<0.01),5min内错误次数明显增加(P<0.01),且两暴露组间的差异亦具有显著性意义(P<0.01)。结论母体不同浓度的慢性铝暴露可损害子代大鼠的记忆能力,其可能的损害机制之一是母体的铝暴露导致海马神经元[Ca2+]i的降低。

关键词：铝暴露细胞内钙步下试验学习记忆母体期

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出生前后铝暴露对大鼠学习记忆及海马NO、nNOS的影响

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中国药理学通报 2007年第9期23卷 1152-1155页

作者：南娟刘慧慧杜艳霞邢伟蔡葵蔡原刘鹏刘玉丽时利德中国医科大学基础医学院生理学教研室辽宁沈阳110001 中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室辽宁沈阳110001 中国医科大学基础医学院神经生物学教研室辽宁沈阳110001 中国医科大学公共卫生学院毒理学教研室辽宁沈阳110001

目的研究出生前后不同浓度慢性铝暴露后年轻大鼠海马NO含量和nNOS表达的变化,探讨铝损害学习记忆的突触机制。方法对照组、低剂量和高剂量组大鼠从孕期开始分别自由饮用蒸馏水15mmol.L-1和30mmol.L-1的A1C13水溶液;采用原子吸收石墨炉... 详细信息

目的研究出生前后不同浓度慢性铝暴露后年轻大鼠海马NO含量和nNOS表达的变化,探讨铝损害学习记忆的突触机制。方法对照组、低剂量和高剂量组大鼠从孕期开始分别自由饮用蒸馏水15mmol.L-1和30mmol.L-1的A1C13水溶液;采用原子吸收石墨炉法测定血铝和脑铝含量;跳台法测试学习记忆能力;硝酸还原酶法检测NO含量;免疫组化方法观察nNOS阳性细胞表达。结果与对照组相比,两铝暴露组大鼠血铝和脑铝含量明显升高,学习记忆能力明显下降,海马NO含量明显降低且nNOS阳性神经元表达明显减少。结论出生前后慢性铝暴露损害了大鼠的学习记忆行为,可能与海马NO含量减少及nNOS神经元表达降低有关。

关键词：铝暴露 NO nNOS 学习记忆出生前后

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大鼠背根神经节神经元瞬时外向钾电流与非洲爪蟾卵母细胞上表达的Kv4.2通道电流特性的比较

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华中科技大学学报（医学版） 2007年第2期36卷 157-161页

作者：聂辉张玉芹李享元余文静罗加烈胡霞敏李之望武汉科技大学医学院生理学教研室武汉430080 华中科技大学同济医学院基础医学院神经生物学系武汉科技大学医学院药理学教研室武汉430080

目的为最终揭示大鼠背根神经节神经元上天然瞬时外向钾通道的结构与功能调节提供依据。方法采用双极电压钳技术记录非洲爪蟾卵母细胞上表达的Kv4.2电流,用全细胞膜片钳技术记录大鼠背根神经节神经元上瞬间外向钾电流(IA),并对二者进行... 详细信息

目的为最终揭示大鼠背根神经节神经元上天然瞬时外向钾通道的结构与功能调节提供依据。方法采用双极电压钳技术记录非洲爪蟾卵母细胞上表达的Kv4.2电流,用全细胞膜片钳技术记录大鼠背根神经节神经元上瞬间外向钾电流(IA),并对二者进行动力学特征的比较。结果背根神经节神经元上IA和Kv4.2通道电流①均具有明显的A型电流特征;②半数最大激活电位分别为(-29.5±3.1)mV和(-3.9±1.0)mV;③半数最大失活电位分别为(-78.5±3.4)mV和(-48.5±0.6)mV;④失活后再激活恢复时间常数(τ)分别为(32.0±4.8)ms和(71.4±13.2)ms。结论Kv4.2通道电流可能是背根神经节神经元上IA电流的主要成分,但不是唯一成分。

关键词：非洲爪蟾卵母细胞钾通道 Kv4.2钾通道背根神经节神经元

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