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四川大学学报（医学版） 2007年第5期38卷 770-774页

作者：韩晓群李华张敬各姜怡邓彭克军王丽珍王树人四川大学华西基础医学与法医学院病理生理学教研室成都610041 泸州医学院病理生理学教研室

目的探讨肿瘤细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)浓度对肿瘤细胞药物敏感性及在肿瘤细胞耐药机制中的作用。方法以马来酸二乙酯(DEM)处理人乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADM和敏感细胞株MCF-7/S,以消耗细胞内GSH,MTT法检测DEM处理前后两种细胞存活率... 详细信息

目的探讨肿瘤细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)浓度对肿瘤细胞药物敏感性及在肿瘤细胞耐药机制中的作用。方法以马来酸二乙酯(DEM)处理人乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADM和敏感细胞株MCF-7/S,以消耗细胞内GSH,MTT法检测DEM处理前后两种细胞存活率的变化,并采用荧光分光光度法同步检测其细胞内GSH的消耗程度,分析细胞内GSH浓度的变化与MCF-7细胞对ADM敏感性变化间的相关关系。结果0.1μmol/L DEM使MCF-7/ADM细胞内GSH浓度减少37.4%(P<0.01),使MCF-7/S细胞内GSH浓度减少29.7%(P<0.01);ADM亦使细胞内GSH含量呈ADM浓度依赖性的下降;DEM与ADM合用时,GSH浓度显著下降,其下降程度大于DEM和ADM单独应用之和。随着细胞内GSH数量的减少,无论是MCF-7/ADM细胞,还是MCF-7/S细胞,细胞存活率均下降,即对ADM的敏感性均增强(P<0.01)。结论DEM耗竭细胞内GSH的作用与ADM有协同效应,耗竭细胞内GSH可增强人乳腺癌MCF-7/S细胞对ADM的敏感性,部分逆转MCF-7/ADM细胞对ADM的耐药性。

关键词：还原型谷胱甘肽马来酸二乙酯 MCF-7/ADM细胞株 MCF-7/S细胞株阿霉素

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同型半胱氨酸对人血管平滑肌细胞5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶基因启动子甲基化修饰及mRNA表达的影响

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卫生研究 2007年第3期36卷 291-294页

作者：王丽珍张敬各王树人四川大学华西基础医学与法医学院病理生理学教研室成都610041

目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)对人血管平滑肌细胞(HVSMCs)5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因启动子甲基化修饰及其mRNA表达的影响。方法正常人脐动脉血管平滑肌细胞体外培养,在培养基中加入临床高Hcy血症相关浓度及极高浓度的Hcy(0、3... 详细信息

目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)对人血管平滑肌细胞(HVSMCs)5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因启动子甲基化修饰及其mRNA表达的影响。方法正常人脐动脉血管平滑肌细胞体外培养,在培养基中加入临床高Hcy血症相关浓度及极高浓度的Hcy(0、30、100、200、500和1000μmol/L),并孵育72h,以MS-PCR分析MTHFR启动子区域甲基化状态,采用RT-PCR测定MTHFR mRNA的表达水平。结果不同浓度Hcy处理人血管平滑肌细胞后,其MTHFR基因启动子区域出现去甲基化,甲基化水平明显降低。RT-PCR结果显示MTHFR mRNA表达增加。结论Hcy可促进人血管平滑肌细胞MTHFR启动子区域去甲基化,并使MTHFR mRNA表达增加。

关键词：同型半胱氨酸 5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶 DNA甲基化

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lncRNA Miat通过miR-182/Nogo-A调控氧化应激所致心肌细胞凋亡的机制

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临床与实验病理学杂志 2023年第9期39卷 1084-1094页

作者：薄洪臣谢鲁寒刘赵放韩冰洁刘珊倪玮钰李连宏大连医科大学基础医学院病理学与法医学教研室大连116044

目的探究lncRNA Miat/miR-182/Nogo-A轴在心肌细胞因氧化应激发生凋亡或损伤过程中的调控机制。方法运用H_(2)O_(2)处理模拟心肌细胞氧化应激损伤,CCK-8实验检测细胞活力;si-Miat与miR-182共转染、miR-182 mimic与上调Nogo-A共转染;qR... 详细信息

目的探究lncRNA Miat/miR-182/Nogo-A轴在心肌细胞因氧化应激发生凋亡或损伤过程中的调控机制。方法运用H_(2)O_(2)处理模拟心肌细胞氧化应激损伤,CCK-8实验检测细胞活力;si-Miat与miR-182共转染、miR-182 mimic与上调Nogo-A共转染;qRT-PCR检测Miat、miR-182、Nogo-A mRNA的表达;Western blot检测Bax、Caspase-3、BCL-2、Nogo-A的表达;Hoechst凋亡染色检测凋亡率;生物预测软件RNAhybrid预测Miat与miR-182可能存在靶向结合关系,生物信息网站Targescan预测miR-182与Nogo-A之间的结合关系。结果 lncRNA Miat在H_(2)O_(2)处理后表达升高;抑制lncRNA Miat可减轻H_(2)O_(2)处理导致的细胞凋亡;生物预测软件RNAhybrid预测Miat与miR-182存在靶向结合位点;下调lncRNA Miat可以减轻下调miR-182在氧化应激过程中对心肌细胞凋亡的抑制作用;生物预测软件RNAhybrid预测Miat与miR-182存在靶向结合位点;上调miR-182可使Nogo-A表达下降进而抑制氧化应激导致的心肌细胞凋亡;上调miR-182可以减轻上调Nogo-A在氧化应激过程中对心肌细胞凋亡的促进作用。结论 lncRNA Miat可以通过miR-182/Nogo-A轴促进心肌细胞氧化应激所致的凋亡。Miat可作为氧化应激过程中心肌细胞凋亡或损伤的标志物。

关键词：心肌梗死氧化应激 lncRNA Miat Nogo-A

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乙醇对家兔脑基底动脉HSP70表达的影响

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现代预防医学 2011年第5期38卷 845-846+849页

作者：张奎廖志钢刘莉赵敏喻安孝余舰遵义医学院法医学系四川大学基础医学与法医学院法医病理学教研室

[目的]探讨不同血液乙醇浓度对家兔脑基底动脉内皮细胞热休克蛋白70(HSP70)表达的影响。[方法]通过灌胃的方法建立血液乙醇浓度梯度的家兔动物模型,用气相色谱仪测定各灌胃量组血液乙醇浓度;通过免疫组化的方法检测脑基底动脉内皮细胞HS... 详细信息

[目的]探讨不同血液乙醇浓度对家兔脑基底动脉内皮细胞热休克蛋白70(HSP70)表达的影响。[方法]通过灌胃的方法建立血液乙醇浓度梯度的家兔动物模型,用气相色谱仪测定各灌胃量组血液乙醇浓度;通过免疫组化的方法检测脑基底动脉内皮细胞HSP70的表达。[结果]家兔灌酒后血液乙醇浓度持续增高,灌胃后1.5～2h,血液乙醇浓度达到峰值;灌酒后血液乙醇浓度与灌酒量存在正相关关系。各酒精灌胃组脑基底动脉内皮细胞HSP70均有表达,且表达量随灌酒量的增加而增多,各组之间差异存在统计学意义(P﹤0.05)。[结论]家兔脑基底动脉内皮细胞的应激反应程度与血液乙醇浓度存在正相关关系(r=0.969,P﹤0.05)。

关键词：乙醇热休克蛋白70 应激反应

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血浆中游离还原型及氧化型谷胱甘肽的荧光测定法

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光谱学与光谱分析 2005年第11期25卷 1834-1838页

作者：王秋林王浩毅丁怡乔小蓉彭克军林霞王树人四川大学华西基础医学与法医学院病理生理学教研室四川大学分析测试中心四川成都610041 四川大学华西基础医学与法医学院法医病理教研室四川成都610041

文章建立了快速、可同时检测血浆中游离的还原型和氧化型谷胱甘肽(即GSH和GSSG)的方法,并评价了血浆中GSH/GSSG的氧化还原状态。利用二硫苏糖醇将GSSG还原成两分子的GSH,使GSH在pH8.0时与邻苯二甲醛(OPA)结合生成荧光产物GSH-OPA,用荧... 详细信息

文章建立了快速、可同时检测血浆中游离的还原型和氧化型谷胱甘肽(即GSH和GSSG)的方法,并评价了血浆中GSH/GSSG的氧化还原状态。利用二硫苏糖醇将GSSG还原成两分子的GSH,使GSH在pH8.0时与邻苯二甲醛(OPA)结合生成荧光产物GSH-OPA,用荧光分光光度仪测定其荧光值,从而对GSH和GSSG进行定量分析。并运用此方法测量青年健康志愿者静脉血中的游离GSH和GSSG。该法最低可检测出测定管中11.4 pmol.L-1GSH以及5.7 pmol.L-1GSSG。测量GSH批内和批间变异系数分别4.6%和3.9%,GSSG批内和批间变异系数分别为3.5%和4.1%,GSH,GSSG加标准品后的回收率分别为(99.77±5.70)%和(99.28±4.73)%。测定健康青年志愿者血浆中游离GSH,GSSG的含量分别为(16.5±2.4)***-1和(1.7±0.35)***-1。

关键词：血浆 GSH GSSG 荧光测定法

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Caspase-14在恶性黑素瘤中的表达及意义

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细胞与分子免疫学杂志 2014年第11期30卷 1180-1183,1189页

作者：王馨苑张霁承尧杜吉佩陈德高杨志梅王玉芳黄宁四川大学华西基础医学与法医学院病理生理学教研室四川成都610041 四川大学华西基础医学与法医学院法医物证学教研室四川成都610041

目的明确caspase-14在恶性黑素瘤细胞和组织中表达水平及其对肿瘤细胞耐药的影响。方法运用反转录PCR和Western blot技术检测人黑素细胞和恶性黑素瘤细胞内caspase-14的表达。恶性黑素瘤和皮内痣组织中caspase-14表达采用原位杂交和免... 详细信息

目的明确caspase-14在恶性黑素瘤细胞和组织中表达水平及其对肿瘤细胞耐药的影响。方法运用反转录PCR和Western blot技术检测人黑素细胞和恶性黑素瘤细胞内caspase-14的表达。恶性黑素瘤和皮内痣组织中caspase-14表达采用原位杂交和免疫组织化学方法检测。结果 Caspase-14在恶性黑素瘤细胞和黑素细胞中均有表达。T细胞识别的黑素瘤相关抗原1(MART-1)阳性肿瘤细胞中caspase-14表达高于MART-1阴性细胞。Caspase-14表达水平低的肿瘤细胞对化疗药物更敏感(P<0.01)。在临床样本中,caspase-14在皮内痣中阳性率为70%,恶性黑素瘤组织中阳性率为97%,差别有统计学意义(P<0.05)。结论 Caspase-14在恶性黑素瘤细胞和组织中均有表达。Caspase-14表达水平高的恶性黑素瘤细胞对化疗药物喜树碱和顺铂,以及放射治疗更加抵抗。

关键词：恶性黑素细胞瘤 caspase-14 化学疗法

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内质网分子蛋白在小鼠腹水型肝癌高、低淋巴道转移株中的表达及意义

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中国癌症杂志 2015年第2期25卷 95-98页

作者：张亚楠唐建武大连医科大学基础医学院病理学与法医学教研室辽宁大连116044 山东中医药大学基础医学院病理学教研室山东济南250355

背景与目的:内质网分子伴侣29(endoplasmic reticulum molecular chaperons 29,ERp29)是一种内质网应激蛋白,其高表达与肿瘤转移相关。本研究旨在探讨ERp29在小鼠腹水型肝癌高、低淋巴道转移株中的表达及与肝癌淋巴道转移的关系。方法:... 详细信息

背景与目的:内质网分子伴侣29(endoplasmic reticulum molecular chaperons 29,ERp29)是一种内质网应激蛋白,其高表达与肿瘤转移相关。本研究旨在探讨ERp29在小鼠腹水型肝癌高、低淋巴道转移株中的表达及与肝癌淋巴道转移的关系。方法:构建小鼠腹水型肝癌细胞株(高转移株Hca-F、低转移株Hca-P)淋巴道转移动物模型,通过免疫组织化学、蛋白质印迹法(Western blot)和流式细胞仪等方法检测ERp29在Hca-F、Hca-P细胞株中的表达情况。结果:免疫组织化学检测结果显示,ERp29在Hca-F、Hca-P中均呈阳性表达,定位于细胞质,部分细胞核也有表达。Western blot检测结果显示,ERp29在Hca-F、Hca-P中的表达吸光度值分别为0.97±0.03和1.17±0.03,ERp29在Hca-F细胞株中的表达(吸光度值)明显低于Hca-P,差异有统计学意义(P<0.01)。流式细胞仪检测结果显示,ERp29在Hca-F细胞株中的相对荧光强度值(375.27±47.33)显著低于Hca-P(623.91±46.80),差异有统计学意义(P<0.01)。结论:ERp29在小鼠腹水型肝癌细胞株Hca-F和Hca-P均有表达,且在Hca-F中表达较低,而在Hca-P中表达较高。ERp29可能与肝癌淋巴道转移密切相关。

关键词：内质网分子伴侣29 肝癌淋巴道转移

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电除颤后窦房结内纤维连接蛋白的表达

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解剖学杂志 2013年第2期36卷 156-158页

作者：张燕翔孟祥志汪浩王春武汉大学基础医学院法医学教研室武汉430071 长江大学医学院形态学部病理学教研室荆州434023

目的：观察电除颤后纤维连接蛋白在窦房结中的表达规律。方法：选取尸体解剖标本中接受过电除颤者设为电除颤组；仅施行人工心肺复苏术而未接受电除颤者设为复苏组；未实施人工心肺复苏术或电除颤者设为对照组。窦房结取材，分别行H-E... 详细信息

目的：观察电除颤后纤维连接蛋白在窦房结中的表达规律。方法：选取尸体解剖标本中接受过电除颤者设为电除颤组；仅施行人工心肺复苏术而未接受电除颤者设为复苏组；未实施人工心肺复苏术或电除颤者设为对照组。窦房结取材，分别行H-E及纤维连接蛋白（Fn）免疫组织化学显色，光镜观察并用图像分析系统检测窦房结中纤维连接蛋白平均光密度值。结果：电除颤组窦房结中纤维连接蛋白表达明显增加，与复苏组、对照组比较，差异有统计学意义；复苏组与对照组比较，差异无统计学意义。结论：电除颤后窦房结形态改变，纤维连接蛋白表达增加，电除颤对窦房结的形态和纤维连接蛋白表达均有影响，死因分析时应予以考虑。

关键词：法医病理学电除颤窦房结纤维连接蛋白

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氧化应激状态的评价

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中国病理生理杂志 2005年第10期21卷 2069-2074页

作者：王秋林王浩毅王树人四川大学华西基础医学与法医学院病理生理学教研室

机体代谢过程中活性氧不断地通过非酶促反应和酶促反应产生,每日约有1%-3%的摄入氧转变为超氧阴离子(superoxide anion,O2)及其活性衍生物,但在抗氧化酶以及外源性和内源性抗氧化剂的协同作用下被不断清除,在生理情况下, ROS的生成与... 详细信息

机体代谢过程中活性氧不断地通过非酶促反应和酶促反应产生,每日约有1%-3%的摄入氧转变为超氧阴离子(superoxide anion,O2)及其活性衍生物,但在抗氧化酶以及外源性和内源性抗氧化剂的协同作用下被不断清除,在生理情况下, ROS的生成与清除处于动态平衡, 活性氧可维持于有利无害的极低水平.由于内源性和(或)外源性刺激使机体代谢异常而骤然产生大量活性氧自由基,或机体抗氧化物质不足,使促氧化剂/抗氧化剂间平衡失常,则使机体处于氧化应激状态,可氧化损伤生物分子,并进一步引起细胞死亡和组织损伤,与很多病理过程相关.

关键词：应激氧化还原

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大鼠弥散性脑损伤hsp70mRNA表达的研究

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四川大学学报（医学版） 2004年第6期35卷 828-831页

作者：王晔潘洪富张夔鸣陈晓刚彭其毅王文东刘敏四川大学华西基础医学与法医学院法医病理学教研室成都610041 四川大学华西公共卫生学院

目的　寻找脑损伤早期诊断指标。方法　复制大鼠弥漫性脑损伤模型 ,用原位杂交和图象分析技术检测不同损伤时间的大鼠脑干、丘脑、大脑皮层等部位神经元和神经胶质细胞中 hsp70 m RNA表达情况。结果　发现不同损伤时间 ,hsp70 m RNA表... 详细信息

目的　寻找脑损伤早期诊断指标。方法　复制大鼠弥漫性脑损伤模型 ,用原位杂交和图象分析技术检测不同损伤时间的大鼠脑干、丘脑、大脑皮层等部位神经元和神经胶质细胞中 hsp70 m RNA表达情况。结果　发现不同损伤时间 ,hsp70 m RNA表达的强弱不同 ;在损伤 5 m in后即可在脑干、丘脑、皮质等部位检测到 hsp70 m R-NA,6 h达高峰 ,12 h后减弱。结论　 hsp70 m RNA可以作为早期脑弥散性损伤的指标 ,并可用于生前伤与死后伤的判定。

关键词：原位杂交 hsp70mRNA 弥散性脑损伤

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