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上海交通大学学报（医学版） 2019年第8期39卷 861-865页

作者：李莹莹罗亚平傅国辉陈诗慧上海交通大学基础医学院病理中心细胞分化与凋亡教育部重点实验室上海200025 上海交通大学附属第一人民医院病理中心上海200080

目的·探究胃泌素对白介素1β(interleukin-1β,IL-1β)诱导的大鼠关节软骨细胞的保护作用及其机制。方法·原代培养并鉴定新生大鼠膝关节软骨细胞,MTT法测定胃泌素对细胞活力的影响。10 ng/mL的IL-1β诱导软骨细胞2 d后,胃泌素... 详细信息

目的·探究胃泌素对白介素1β(interleukin-1β,IL-1β)诱导的大鼠关节软骨细胞的保护作用及其机制。方法·原代培养并鉴定新生大鼠膝关节软骨细胞,MTT法测定胃泌素对细胞活力的影响。10 ng/mL的IL-1β诱导软骨细胞2 d后,胃泌素(1×10^-7 mol/L)处理3 d,实时荧光定量PCR检测软骨细胞分解代谢基因基质金属蛋白酶3(matrix metalloproteinase 3,MMP3)和MMP13的表达;Western blotting检测胃泌素信号通路中关键蛋白胆囊收缩素B受体(cholecystokinin B receptor,CCKBR)、细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)、磷酸化ERK(phospho-ERK,p-ERK)、P65的表达;另设正常对照组和IL-1β诱导组。结果·1×10^-7 mol/L浓度的胃泌素无细胞毒性作用,并能明显抑制IL-1β诱导的软骨细胞分解代谢基因MMP3和MMP13的高表达。与正常对照组比较,IL-1β诱导组及胃泌素处理组CCKBR的表达均显著升高,且胃泌素处理能显著增加p-ERK的表达,抑制P65的表达。结论·胃泌素能激活CCKBR,诱导ERK磷酸化,抑制P65的活性,从而拮抗IL-1β诱导引起的MMP3和MMP13 mRNA表达升高,进而可能抑制大鼠软骨细胞分解代谢活动。

关键词：胃泌素软骨细胞分解代谢分子机制

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血小板源生长因子BB可促进骨骼肌成肌细胞增殖、分化与迁移

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中国组织工程研究 2021年第7期25卷 1050-1055页

作者：李偲赵婷谭戈郑雨林张若男吴艳唐俊明湖北医药学院胚胎干细胞研究湖北省重点实验室湖北省十堰市442000 湖北医药学院基础医学院生理学教研室湖北省十堰市442000

背景:骨骼肌损伤后,骨骼肌成肌细胞分化融合形成多核肌管和肌纤维完成肌损伤修复,但该过程修复缓慢且不完全。血小板源生长因子BB可以刺激多种组织细胞增殖、分化及迁移,在各种损伤后组织修复过程中发挥了重要作用。目的:探讨不同浓度... 详细信息

背景:骨骼肌损伤后,骨骼肌成肌细胞分化融合形成多核肌管和肌纤维完成肌损伤修复,但该过程修复缓慢且不完全。血小板源生长因子BB可以刺激多种组织细胞增殖、分化及迁移,在各种损伤后组织修复过程中发挥了重要作用。目的:探讨不同浓度血小板源生长因子BB对骨骼肌成肌细胞增殖、分化及迁移的影响及作用机制。方法:培养小鼠骨骼肌成肌细胞(C2C12细胞),分别给予血小板源生长因子BB 0,5,10,20,40μg/L及血小板源生长因子受体抑制剂伊马替尼处理。采用免疫细胞化学法及Western-blot法检测C2C12细胞中血小板源生长因子受体表达情况;分别培养1,2,3,4,5 d后,采用CCK8法检测细胞增殖情况;给予诱导分化培养4 d,采用光学显微镜观察各组肌管的形成情况,通过免疫荧光化学法和Western-blot法观察各组肌管中肌球蛋白重链及MyoG基因的表达情况;培养48 h后,采用Transwell法检测细胞迁移情况。结果与结论:①免疫荧光化学及Western-blot均提示C2C12细胞中可检测到血小板源生长因子受体表达,半定量后统计学分析显示不同血小板源生长因子BB质量浓度组间血小板源生长因子受体表达量差异无显著性意义(P>0.05);②CCK8检测结果显示,与对照组(血小板源生长因子BB 0μg/L组)比较,不同质量浓度血小板源生长因子BB组C2C12细胞增殖无明显改变;③免疫荧光化学法检测结果显示,与对照组相比,血小板源生长因子BB处理组肌球蛋白重链阳性细胞数增多,计数平均每个显微镜视野下肌管形成数目提示血小板源生长因子BB质量浓度为40μg/L时成熟肌管形成数目最多,达(27.00±0.76)个/视野,且该组中MyoG表达数量增多最为明显,与对照组相比差异有显著性意义(P<0.05);④Transwell结果显示,与对照组相比较,不同质量浓度血小板源生长因子BB组C2C12细胞的迁移数量均增加,其中以40μg/L组迁移数目最高达144.00±13.03(P<0.05);⑤提示血小板源生长因子BB能够促进C2C12细胞迁移、分化及其肌管形成,且促分化机制与其增强与血小板源生长因子受体结合、从而提高分化相关基因MyoG的表达有关。

关键词：骨骼肌成肌细胞血小板源生长因子BB 细胞增殖细胞分化细胞迁移蛋白肌球蛋白重链

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金银花内生叶斑病菌拮抗菌分离鉴定及生防效果测定

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南方农业学报 2023年第10期54卷 2958-2968页

作者：吴小云何朋杰罗喜燕崔文艳贵州中医药大学基础医学院贵州贵阳550025 贵州大学绿色农药与农业生物工程教育部重点实验室贵州贵阳550025

【目的】从金银花叶片中筛选获得对金银花叶斑病病原菌具有良好拮抗效果的生防菌株,旨在为金银花叶斑病的生物防治提供合适的菌种资源,为金银花产业的高质量发展打下基础。【方法】以金银花叶片为材料,利用梯度稀释涂板法分离并纯化内... 详细信息

【目的】从金银花叶片中筛选获得对金银花叶斑病病原菌具有良好拮抗效果的生防菌株,旨在为金银花叶斑病的生物防治提供合适的菌种资源,为金银花产业的高质量发展打下基础。【方法】以金银花叶片为材料,利用梯度稀释涂板法分离并纯化内生芽孢杆菌;采用牛津杯平板对峙试验筛选对金银花叶斑病病原菌具有拮抗作用的菌株;通过离心管温浴试验评估拮抗菌株对叶斑病菌形态的影响;通过牛津杯平板对峙试验检测拮抗菌株脂肽类抗生素粗提液对叶斑病菌菌丝生长的抑制作用;通过温室盆栽试验评估拮抗菌株对金银花叶斑病的防治效果;结合形态学、生理生化和分子生物学特征对拮抗菌株进行鉴定;利用平板对峙法测定拮抗菌株的抑菌谱。【结果】从金银花叶片中共分离得到120株内生芽孢杆菌,通过平板对峙法筛选获得4株对金银花叶斑病病原菌具有较好抑制效果的拮抗菌株,4株菌株对金银花叶斑病菌的拮抗效果无显著差异(P>0.05),随机选取菌株HC-14开展后续研究。平板对峙试验结果,菌株HC-14对金银花叶斑病菌具有良好的拮抗效果,其抑菌率为49.38%。离心管温浴试验结果,菌株HC-14的上清液对金银花叶斑病菌具有较强的抑制效果。牛津杯平板对峙试验结果,菌株HC-14的脂肽类抗生素粗提液对金银花叶斑病菌具有一定的抑制效果,其抑菌率为11.44%。盆栽试验结果,喷施接种菌株HC-14发酵液后第21 d,预防组、治疗组和保护组的病情指数分别仅为6.94、6.35和4.21,防治效果依次为76.62%、78.59%和85.79%。结合菌落形态、生理生化及分子生物学鉴定结果,将菌株HC-14鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。菌株HC-14抑菌谱测定结果,菌株HC-14除对青枯劳尔氏菌无抑菌效果外,对10种常见的致病菌均有不同程度的抑制作用。【结论】枯草芽孢杆菌菌株HC-14的抑菌谱较广,具有开发为金银花叶斑病生防菌剂的潜力。

关键词：金银花叶斑病链格孢菌枯草芽孢杆菌共培养生物防治

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甲状腺功能减退症对成年期SD大鼠肾脏超微结构的影响及L-T_4替代治疗的效果

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安徽医科大学学报 2018年第2期53卷 221-225页

作者：刘翔王芬桂丽朱德发安徽医科大学第一附属医院老年内分泌科合肥230022 马鞍山中心医院内分泌科马鞍山243000 安徽医科大学基础医学院综合实验室合肥230032

目的观察甲状腺功能减退症(简称甲减)对成年期SD大鼠肾脏超微结构的影响及左旋甲状腺素(L-T_4)替代治疗的效果。方法将30只健康3月龄雄性SD大鼠适应性喂养1周,随机均分为对照组、甲减组和L-T_4治疗组。通过丙基硫氧嘧啶饮水法建立甲减模... 详细信息

目的观察甲状腺功能减退症(简称甲减)对成年期SD大鼠肾脏超微结构的影响及左旋甲状腺素(L-T_4)替代治疗的效果。方法将30只健康3月龄雄性SD大鼠适应性喂养1周,随机均分为对照组、甲减组和L-T_4治疗组。通过丙基硫氧嘧啶饮水法建立甲减模型,共6周。从第5周开始,L-T_4治疗组大鼠给每日予L-T_4腹腔注射(剂量按体质量6μg/100 g计算);对照组及甲减组每日予同等剂量生理盐水腹腔注射。造模结束后对所有大鼠进行称重,之后使用放射免疫法检测三组大鼠甲状腺功能,同时使用透射电镜完成肾脏超微结构观察。结果造模前,三组大鼠体质量水平比较差异无统计学意义;造模结束后,对照组、甲减组和L-T_4治疗组三组大鼠体质量较造模前各增加了48.14%、22.18%、34.90%。造模后三组间体质量比较显示:甲减组、L-T_4治疗组大鼠体质量显著低于对照组(P<0.05);与对照组相比,甲减组大鼠血清甲状腺激素(T3、T_4)水平明显降低,促甲状腺素水平显著升高(P<0.01),L-T_4治疗组血清甲状腺激素及促甲状腺素水平与对照组相比差异无统计学意义;电镜下观察显示对照组大鼠肾小球足细胞结构完整,足突排列清晰,线粒体发达、内部嵴结构清晰;甲减组大鼠肾小球基底膜结构不规则,足细胞明显肿胀、融合,内部细胞器结构不清晰,线粒体明显空泡变性,内部嵴断裂消失,粗面内质网有脱颗粒现象,间质水肿;L-T_4治疗组以上超微结构改变明显改善。结论甲减可致成年期SD大鼠肾脏超微结构发生病理学损害,L-T_4替代治疗有利于上述损伤的恢复。

关键词：甲状腺功能减退症大鼠肾脏超微结构左旋甲状腺素

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肾素-血管紧张素系统在胎儿宫内生长迟缓发生中的作用机制及防治靶标研究进展

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中国药理学与毒理学杂志 2023年第3期37卷 207-216页

作者：张皓南肖浩陈雅文敖英汪晖武汉大学中南医院关节与运动医学科湖北武汉430071 武汉大学基础医学院药理学系湖北武汉430071 发育源性疾病湖北省重点实验室湖北武汉430071

成人疾病具有胎儿起源,且与孕期不良环境导致的胎儿宫内生长迟缓(IUGR)有关。肾素-血管紧张素系统(RAS)作为机体重要的内分泌系统,在胎儿多器官发育及其功能稳态调节中起着至关重要的作用。研究发现,IUGR胎儿的多器官局部RAS功能存在明... 详细信息

成人疾病具有胎儿起源,且与孕期不良环境导致的胎儿宫内生长迟缓(IUGR)有关。肾素-血管紧张素系统(RAS)作为机体重要的内分泌系统,在胎儿多器官发育及其功能稳态调节中起着至关重要的作用。研究发现,IUGR胎儿的多器官局部RAS功能存在明显改变。结合国内外最新临床和动物研究进展,本文综述RAS功能异常介导IUGR胎儿多器官(如胎盘、肾、心血管和骨)发育不良,阐明IUGR胎儿多器官RAS成分改变的表观遗传调控机制包括DNA甲基化、组蛋白修饰和非编码RNA等,并提出血管紧张素转换酶、血管紧张素Ⅱ受体为IUGR胎儿成年后疾病易感的早期防治靶标。本综述为阐明多器官局部RAS功能改变在IUGR发生中的重要作用及揭示IUGR相关胎源性疾病的早期防治靶标提供了理论和实验依据。

关键词：肾素-血管紧张素系统宫内生长迟缓胎儿发育毒性

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探究式教学在综合设计性实验中的应用——以《医学微生物学》中综合设计性实验的开发为例

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价值工程 2014年第8期33卷 262-263页

作者：邓毛子孙剑刚梁莹万滋衡包永芬湖北科技学院基础医学院医学微生物学教研室咸宁437100 湖北科技学院基础医学院病原学实验室咸宁437100

针对传统实验教学模式的不足,采用探究式教学模式进行综合设计性实验的开发,创建新的教学内容及模式,提高教学质量。

关键词：探究式教学综合设计性实验应用开发

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羟基氯喹对小鼠结直肠癌细胞增殖、凋亡、迁移、超微结构及相关炎性因子表达的影响

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华中科技大学学报（医学版） 2019年第3期48卷 287-291页

作者：苏红张晨光王俐勇陕西省宝鸡职业技术学院医学院宝鸡721013 首都医科大学基础医学院北京100069 首都医科大学中心实验室北京100069

目的探究羟基氯喹对小鼠结直肠癌细胞增殖、凋亡、迁移、超微结构及相关炎性因子表达的影响。方法建立AOM/DSS诱导的小鼠结直肠癌模型,采用苏木精-伊红(HE)染色观察正常组、结直肠癌模型组、羟基氯喹干预组小鼠结直肠组织病理学变化。... 详细信息

目的探究羟基氯喹对小鼠结直肠癌细胞增殖、凋亡、迁移、超微结构及相关炎性因子表达的影响。方法建立AOM/DSS诱导的小鼠结直肠癌模型,采用苏木精-伊红(HE)染色观察正常组、结直肠癌模型组、羟基氯喹干预组小鼠结直肠组织病理学变化。原代分离各组结直肠细胞,CCK8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期与凋亡,电镜观察细胞超微结构,Oris TM 细胞接种限位法检测细胞迁移,ELISA方法检测炎性因子Toll样受体4(TLR4)、白细胞介素(IL)-1β、IL-18、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、β干扰素(INF-β)表达。结果成功构建AOM/DSS诱导的小鼠结直肠癌模型,相对结直肠癌模型组肠腺体结构不规则、杯状细胞减少、溃疡形成等病理学表现,羟基氯喹明显改善模型小鼠肠道组织病理情况。细胞实验结果表明:羟基氯喹干预可以显著抑制肿瘤细胞增殖活力,且通过发生S期阻滞,DNA合成受阻影响细胞周期;促进肿瘤细胞凋亡,降低肿瘤细胞迁移能力,在一定程度上改善结直肠肿瘤细胞超微结构,显著降低TLR4、IL-1β、IL-18、TNF-α、INF-β等炎性因子的表达。结论羟基氯喹可以通过抗肿瘤和抗炎双重作用对小鼠结直肠癌起治疗作用,为将来临床靶向治疗提供了新的思路和理论依据。

关键词：羟基氯喹小鼠结直肠癌增殖凋亡迁移细胞超微结构炎性因子

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乳小鼠培养肝细胞蛋白质双向电泳技术的建立

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泸州医学院学报 2004年第4期27卷 285-288页

作者：宋杰何涛谢华福李娟杨文理甘淋段承刚刘晓燕泸州医学院基础医学院分子生物学实验室四川泸州646000 泸州医学院基础医学院生物化学教研室四川泸州646000

目的 :建立培养乳小鼠肝细胞蛋白质的双向电泳技术。方法 :取乳小鼠肝脏组织 ,进行肝细胞原代培养 ,提取肝细胞蛋白 ,以固相pH梯度 (IPG)等点聚焦为第一向 ,垂直SDS -PAGE为第二向进行双向电泳 ,并对样品处理方式、蛋白上样量、IPG等电... 详细信息

目的 :建立培养乳小鼠肝细胞蛋白质的双向电泳技术。方法 :取乳小鼠肝脏组织 ,进行肝细胞原代培养 ,提取肝细胞蛋白 ,以固相pH梯度 (IPG)等点聚焦为第一向 ,垂直SDS -PAGE为第二向进行双向电泳 ,并对样品处理方式、蛋白上样量、IPG等电聚焦和SDS -PAGE电泳参数设置、凝胶浓度等关键因素和环节进行了比较研究。结果 :通过实验条件的筛选和优化获得了较满意的双向电泳图谱。结论 :本文建立乳小鼠双向电泳分离技术 ,具有较高的分辨率和重复性。

关键词：乳小鼠肝细胞蛋白质组双向电泳技术细胞培养

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益生菌对肠道健康的功效及其作用机制的研究进展

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沈阳医学院学报 2018年第4期20卷 347-349,360页

作者：孙冶李新鸣王蔺孙福玉金海燕肖纯凌沈阳医学院基础医学院病原生物学教研室辽宁沈阳110034 沈阳医学院辽宁省环境污染与微生态重点实验室沈阳医学院基础医学院

益生菌是指定植于宿主肠道或生殖系统内,能够改善宿主菌群平衡,产生确切健康功效,发挥有益作用的活性微生物,具有改善肠道微生态菌群平衡、促进有益菌生长、抑制病原菌生长、增强免疫力等作用。目前,我国肠道疾病发病率的趋势正逐年上升... 详细信息

益生菌是指定植于宿主肠道或生殖系统内,能够改善宿主菌群平衡,产生确切健康功效,发挥有益作用的活性微生物,具有改善肠道微生态菌群平衡、促进有益菌生长、抑制病原菌生长、增强免疫力等作用。目前,我国肠道疾病发病率的趋势正逐年上升,益生菌治疗肠道疾病具有广阔的前景。本文对益生菌和肠道疾病之间的关系及相关机制进行了综述。

关键词：益生菌肠道疾病消化系统免疫系统

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掺硼纳米TiO_2的制备及光催化性能研究

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影像科学与光化学 2010年第4期28卷 287-295页

作者：汪应灵谢友海袁建梅周庆祥刘国光新乡医学院基础医学院河南新乡453003 河南师范大学化学与环境科学学院黄淮水环境与污染防治省部共建教育部重点实验室河南新乡453007 广东工业大学环境科学与工程学院广东广州510006

采用改进的Sol-gel方法,制备了单分散椭球形微孔结构的掺B纳米Ti O2光催化剂,并用TG-DTA、XRD、XPS、UV-Vis、TEM、BET等手段进行表征.以难生化降解的染料罗丹明B为目标降解物,采用HPLC检测,通过不同光照时间下染料降解率考察了产物的... 详细信息

采用改进的Sol-gel方法,制备了单分散椭球形微孔结构的掺B纳米Ti O2光催化剂,并用TG-DTA、XRD、XPS、UV-Vis、TEM、BET等手段进行表征.以难生化降解的染料罗丹明B为目标降解物,采用HPLC检测,通过不同光照时间下染料降解率考察了产物的光催化活性.结果表明,改进的Sol-gel法制得的光催化剂具有明显的孔结构,而且比表面积大、孔径分布窄、粒径小、分散性好;适量B的掺杂能够有效促进Ti O2纳米粒子的光催化活性.最佳催化剂制备条件:B掺杂的摩尔分数为20%、450℃煅烧2 h,此时所制得的B-Ti O2光催化剂活性比纯Ti O2有显著提高.

关键词： TiO2 硼掺杂溶胶-凝胶法光催化活性

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