检索结果-内蒙古大学图书馆

塔里木大学学报 2025年第2期37卷 1-7页

作者：刘淑华刘祥杰陈鑫梁樊鑫候梦哲高瑞环姚彬李莲瑞塔里木大学动物科学与技术学院/塔里木畜牧科技兵团重点实验室/新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室新疆阿拉尔843300

猪伪狂犬病是由伪狂犬病病毒(PRV)引起的一种高度接触性猪传染病,该病能引起仔猪死亡和怀孕母猪流产等,给养殖业带来巨大的经济损失。除了典型的临床症状,PRV还可以引起猪群免疫抑制,导致继发感染,增加治疗费用,同时使猪只摄食量与饲料... 详细信息

猪伪狂犬病是由伪狂犬病病毒(PRV)引起的一种高度接触性猪传染病,该病能引起仔猪死亡和怀孕母猪流产等,给养殖业带来巨大的经济损失。除了典型的临床症状,PRV还可以引起猪群免疫抑制,导致继发感染,增加治疗费用,同时使猪只摄食量与饲料报酬下降,饲料损耗增加,上市延迟。为了减少新疆地区养猪业的损失,本试验围绕猪伪狂犬病毒的检测开展研究,为猪伪狂犬病的防控提供基础数据。采集新疆地区某猪场病死哺乳仔猪和保育仔猪的脑、肺脏、淋巴结等组织病料,提取总DNA,参考国家标准GB/T 18641—2018《伪狂犬病诊断方法》,设计扩增猪伪狂犬gE基因的引物,采用gE的国标引物对病料中伪狂犬的gE基因进行鉴定,扩增产物大小为368 bp,克隆鉴定后测序,序列分析表明该PRV-gE基因序列与国外的PRV-gE基因序列的同源性为97.7%~97.9%,与国内的PRV-gE基因序列的同源性为99.4%~99.9%,说明该PRV-gE基因序列的伪狂犬毒株为中国流行毒株,本研究为伪狂犬病的净化和疫苗的选择提供参考。

关键词：伪狂犬 gE 基因序列分析

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一株猪链球菌的分离鉴定与毒力和耐药基因分析

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北京农学院学报 2025年第1期40卷 48-53页

作者：张振陈鑫刘淑华梁樊鑫马佰贺侯梦哲郭美亮李莲瑞塔里木大学动物科学与技术学院新疆阿拉尔843300 塔里木畜牧科技兵团重点实验室新疆阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室新疆阿拉尔843300

【目的】为确定新疆阿克苏地区某规模化猪场产房仔猪出现运动失调、抽搐、昏迷、关节肿胀、疼痛和淋巴结化脓的发病原因,从疑似链球菌感染的病死仔猪的脑组织中进行猪链球菌的分离和鉴定。【方法】对该猪场病死仔猪脑组织进行无菌采样... 详细信息

【目的】为确定新疆阿克苏地区某规模化猪场产房仔猪出现运动失调、抽搐、昏迷、关节肿胀、疼痛和淋巴结化脓的发病原因,从疑似链球菌感染的病死仔猪的脑组织中进行猪链球菌的分离和鉴定。【方法】对该猪场病死仔猪脑组织进行无菌采样及细菌分离鉴定,使用16S rRNA基因的细菌通用引物进行PCR扩增及测序分析,并进行药敏试验、毒力基因和耐药基因检测。【结果】从疑似患病仔猪猪脑组织中分离出1株猪链球菌。该菌株在BHI固体培养基上显现出了针尖般大小、呈现灰白色且略带透明的菌落,在光学显微镜下可观察到菌体成双或呈长短不一的链状排列。通过PCR方法扩增出16S rRNA 1 500 bp的条带;16S rRNA测序结果与猪链球菌参考菌株相似性位于99.64%~100%之间;药敏结果显示,该菌株对青霉素、氨苄西林、大观霉素等抗生素敏感,对链霉素等抗生素中介,对红霉素、庆大霉素、新霉素等抗生素耐药,毒力基因结果显示该菌株携带了purD、mrp,2种毒力基因;耐药基因结果显示该菌株携带了氨基糖苷类aph(3')Ia基因和大环内酯类ermb、mefA基因。【结论】从疑似患病猪猪脑组织中分离出1株猪链球菌,通过毒力基因和耐药基因的检测分析其致病力和耐药性。以期为该猪场提供科学合理的治疗方案。临床建议减少选用氨基糖苷类和大环内酯类药物治疗。为阿克苏及周边地区猪链球菌的防控和耐药机理研究提供了理论依据。

关键词：猪链球菌 PCR 毒力基因耐药基因

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绵羊肺炎支原体核糖体蛋白30S rpsE基因的原核表达及多克隆抗体的制备

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畜牧与兽医 2024年第7期56卷 78-84页

作者：刘晓艳王永飞邓博文哈尔勒哈·阿曼太蔡江李有文塔里木大学动物科学与技术学院新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技兵团重点实验室新疆阿拉尔843300 新疆生产建设兵团南疆动物疫病诊断与防控工程实验室新疆阿拉尔843300

旨在了解绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae)30S rpsE蛋白的生物学特性及其蛋白免疫原性。用在线分析软件预测30S rpsE蛋白的理化性质、B细胞抗原表位、糖基化位点、二级结构及三级结构等;采用PCR方法从病羊鼻拭子样品中扩增得到... 详细信息

旨在了解绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae)30S rpsE蛋白的生物学特性及其蛋白免疫原性。用在线分析软件预测30S rpsE蛋白的理化性质、B细胞抗原表位、糖基化位点、二级结构及三级结构等;采用PCR方法从病羊鼻拭子样品中扩增得到30S rpsE基因片段,经NdeⅠ、XhoⅠ酶切纯化后,将其连接到pET-42b载体上,构建原核表达载体pET-42b-30S rpsE,使用不同浓度IPTG诱导蛋白在大肠杆菌BL21中表达;重组蛋白通过SDS-PAGE和Western blot进行鉴定,用镍层析法纯化蛋白后,与弗氏佐剂1∶1混合注射免疫家兔,然后采取全血,检测血清抗体效价及特异性。结果:经预测30S rpsE蛋白是亲水无信号肽的膜外蛋白,无跨膜结构域,有一个糖基化位点;成功构建了原核表达载体pET-42b-30S rpsE,表达的重组蛋白分子量约为25.9 ku,以包涵体和可溶性的形式存在;免疫家兔后血清抗体效价为1∶25 600,证实30S rpsE蛋白具有较好的免疫原性。

关键词：肺炎支原体 30S rpsE基因原核表达多克隆抗体

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新疆阿克苏地区鸭源鸡杆菌的分离鉴定和生物学特性分析

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中国兽医杂志 2024年第2期60卷 46-53页

作者：郝斌张家浩黎双李雪娇陈鑫刘淑华梁樊鑫侯梦哲李莲瑞塔里木大学动物科学与技术学院新疆阿拉尔843300 塔里木畜牧科技兵团重点实验室新疆阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室新疆阿拉尔843300

为确定引起新疆维吾尔自治区阿克苏地区某鸡场蛋鸡产蛋量下降和死亡的原因,本试验对采集自该鸡场病鸡的组织进行细菌分离和培养,对分离菌株进行形态学观察、生化鉴定和16S rRNA序列鉴定,并进行药敏试验和动物回归试验。结果显示,从病鸡... 详细信息

为确定引起新疆维吾尔自治区阿克苏地区某鸡场蛋鸡产蛋量下降和死亡的原因,本试验对采集自该鸡场病鸡的组织进行细菌分离和培养,对分离菌株进行形态学观察、生化鉴定和16S rRNA序列鉴定,并进行药敏试验和动物回归试验。结果显示,从病鸡病料中分离获得1株革兰阴性杆菌;生化试验结果显示,该分离菌株能分解乳糖和果糖等,过氧化氢酶、甘露醇和氧化酶等反应呈阳性;16S rRNA基因核苷酸序列系统进化树分析显示,该分离菌株与鸭源鸡杆菌同源性>99.9%;药敏试验结果显示,该分离菌株对四环素、氯霉素和环丙沙星等10种抗菌药耐药;动物回归试验结果显示,23周龄开产母鸡经生殖道接种分离菌株后采食量减少、产蛋量下降,剖检主要表现为输卵管炎、卵泡充血和变形等生殖道病变,与自然发病鸡一致;同居雏鸡与人工感染雏鸡分别在同居第2天和人工感染后第4天,可从上颚裂中分离出鸭源鸡杆菌,注射高浓度分离菌株可致雏鸡死亡。结果表明,引起该鸡场蛋鸡产蛋量下降和死亡的病原为鸭源鸡杆菌。本试验结果为治疗和防控鸭源鸡杆菌提供借鉴,为鸭源鸡杆菌的进一步研究提供了参考材料。

关键词：鸭源鸡杆菌分离与鉴定 16S rRNA 耐药性分析

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绵羊肺炎支原体EF-Tu蛋白的原核表达及多克隆抗体制备

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中国畜牧兽医 2024年第2期51卷 689-699页

作者：王永飞邓博文刘晓艳哈尔勒哈·阿曼太郭嘉栋周正国蔡江李有文塔里木大学动物科学与技术学院新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技兵团重点实验室阿拉尔843300 新疆生产建设兵团南疆动物疫病诊断与防控工程实验室阿拉尔843300 阿克苏职业技术学院阿克苏843000

[目的]克隆绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,Mo)EF-Tu基因,原核表达获得EF-Tu蛋白,制备抗EF-Tu蛋白的兔源多克隆抗体,为研究肺炎支原体EF-Tu蛋白的结构和功能奠定基础。[方法]采用重叠延伸PCR方法将pET-28a-EF-Tu质粒中EF-Tu... 详细信息

[目的]克隆绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,Mo)EF-Tu基因,原核表达获得EF-Tu蛋白,制备抗EF-Tu蛋白的兔源多克隆抗体,为研究肺炎支原体EF-Tu蛋白的结构和功能奠定基础。[方法]采用重叠延伸PCR方法将pET-28a-EF-Tu质粒中EF-Tu基因中间的TGA密码子突变为TGG,并对测序结果与其他支原体参考株进行相似性比对和遗传进化分析,利用在线软件对其推测的蛋白序列进行生物信息学分析。将突变后的重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞进行原核表达,经SDS-PAGE和Western blotting鉴定,利用镍柱亲和层析法纯化,以纯化的EF-Tu融合蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,采用间接ELISA和Western blotting检测多克隆抗体效价及免疫反应性。[结果]试验成功突变了EF-Tu基因中TGA位点,并构建了融合表达His标签pET-28a-EF-Tu′原核表达载体。生物信息学分析表明,克隆的EF-Tu基因与绵羊肺炎支原体MoGH3-3菌株相似性最高,亲缘关系最近;编码387个氨基酸,无N-糖基化位点和跨膜区域,存在10个丝氨酸、20个苏氨酸、4个酪氨酸磷酸化位点,二级结构由无规则卷曲(35.14%)、α-螺旋(26.87%)、延伸链(26.87%)及β-转角(11.11%)构成。SDS-PAGE和Western blotting结果显示,目的蛋白大小约为43 ku,蛋白纯化浓度为0.615 g/L。ELISA和Western blotting结果显示,制备的多克隆抗体效价可达1∶128 000,能够特异性识别EF-Tu融合蛋白,具有良好的免疫反应性。[结论]本研究成功突变了EF-Tu基因的TGA密码子,原核表达并纯化获得EF-Tu融合蛋白,制备其多克隆抗体效价为1∶128 000,为后续研究肺炎支原体EF-Tu蛋白结构和生物学功能及其疫苗研发提供了试验基础。

关键词：绵羊肺炎支原体重叠延伸PCR EF-Tu基因多克隆抗体

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阿克苏地区异常生鲜乳中芽胞杆菌的分离鉴定

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中国乳品工业 2023年第9期51卷 27-31页

作者：张家浩李莲瑞刘祥杰刑潇月李虎杨睿智塔里木大学动物科学与技术学院新疆阿拉尔843300 塔里木畜牧科技兵团重点实验室新疆阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室新疆阿拉尔843300

新疆南疆某乳品企业生产的生鲜乳偶尔会出现风味发酸、涨袋和产品货架期变短等问题,为了解该生鲜乳中是否存在芽孢杆菌感染及微生物数量超标,通过实验室常规纯培养方法对采集自该乳品企业两个奶牛场的8份异常生鲜乳样进行微生物指标检... 详细信息

新疆南疆某乳品企业生产的生鲜乳偶尔会出现风味发酸、涨袋和产品货架期变短等问题,为了解该生鲜乳中是否存在芽孢杆菌感染及微生物数量超标,通过实验室常规纯培养方法对采集自该乳品企业两个奶牛场的8份异常生鲜乳样进行微生物指标检测和芽孢杆菌的分离纯化。将预处理后的奶样分别接种于PCA(37℃)、DTA(55℃)、MPC(37℃)琼脂培养基培养(48±2)h、MPC(37℃)琼脂培养基培养10 d,分别计算菌落、芽孢、嗜冷菌和耐热芽孢菌总数,并对不同形态单菌落进行分离纯化。经16S rDNA序列鉴定,从8份生鲜乳中分离出2株郭霍氏芽孢杆菌、1株枯草芽孢杆菌、1株类芽孢杆菌;8份生鲜乳中嗜冷菌总数均超过食品安全国家标准。该试验结果有助于企业分析污染源,建立科学、精确的防控微生物污染体系,为保证产品质量奠定基础。

关键词：微生物指标芽孢杆菌 16S rDNA 分离与鉴定

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槲皮素-替米考星混合物纳米粒的制备及对金黄色葡萄球菌小菌落变异株抗菌活性研究

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中国畜牧兽医 2022年第4期49卷 1470-1478页

作者：刘金环张珊玲宋玮罗万和陈伟塔里木大学动物科学与技术学院新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木盆地生物资源保护利用重点实验室阿拉尔843300

【目的】制备一种适用于治疗由金黄色葡萄球菌小菌落变异株(Staphylococcus aureus small colony variants,SASCVs)引起奶牛乳腺炎感染的槲皮素-替米考星混合物纳米粒,评价其对SASCVs菌株的抗菌活性。【方法】通过对槲皮素(0.05、0.10、... 详细信息

【目的】制备一种适用于治疗由金黄色葡萄球菌小菌落变异株(Staphylococcus aureus small colony variants,SASCVs)引起奶牛乳腺炎感染的槲皮素-替米考星混合物纳米粒,评价其对SASCVs菌株的抗菌活性。【方法】通过对槲皮素(0.05、0.10、0.15和0.20 g)和替米考星原料药用量(0.2、0.3、0.4和0.5 g)及转速(500、1000、1500 r/min)、反应时间(0.5、1.0、2.0 h)、反应温度(25、50、75℃)、溶剂浓度(5.0%、7.5%、10.0%)进行考察,以外观性状为指标,筛选槲皮素-替米考星混合物纳米粒最优配方和制备条件;以微观形态、沉降体积比、再分散性、粒径和Zeta电位为指标,对制备的槲皮素-替米考星混合物纳米粒表征;通过琼脂扩散法、微量肉汤稀释法和体外杀菌曲线,对比槲皮素-替米考星混合物纳米粒和市售替米考星溶液对SASCVs菌株的抗菌活性,评价槲皮素-替米考星混合物纳米粒的优势。【结果】当替米考星为0.4 g、槲皮素为0.1 g、溶剂为20 mL 7.5%的聚乙二醇溶液,在转速为1000 r/min、反应时间为1 h、反应温度为50℃时,所制备的槲皮素-替米考星混合物纳米粒最优,其溶液外观性状显示颜色清亮,无沉淀和絮状物;微观形态显示该混合物纳米粒分布均匀,颗粒大小一致;沉降体积比为1,再分散性良好,平均粒径为741.9 nm,Zeta电位为-7.69 mV。替米考星标准品、槲皮素-替米考星混合物纳米粒和市售替米考星溶液对SASCVs菌株的抑菌圈直径分别为2.54、1.51和1.38 cm,对SASCVs菌株的最低抑菌浓度分别为1、1和2μg/mL;体外杀菌曲线表明,槲皮素-替米考星混合物纳米粒对SASCVs菌株表现出明显的浓度依赖性。【结论】本研究所制备的槲皮素-替米考星混合物纳米粒对SASCVs菌株具有较强杀菌能力,可为治疗由SASCVs菌株引起的奶牛乳腺炎提供基础研究资料。

关键词：槲皮素替米考星混合物纳米粒金黄色葡萄球菌小菌落变异株抗菌活性

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新疆南疆地区表皮葡萄球菌对氟苯尼考注射液的药物敏感性研究

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黑龙江畜牧兽医 2023年第17期 122-127,133,141页

作者：冷楠楠任强陈伟罗万和塔里木大学动物科学与技术学院/新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室新疆阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木盆地生物资源保护利用重点实验室新疆阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室新疆阿拉尔843300

为了探索新疆南疆地区表皮葡萄球菌对氟苯尼考注射液的敏感性,试验采用微量肉汤稀释法测定了氟苯尼考注射液对表皮葡萄球菌ATCC 35984和临床分离株的最低抑菌浓度(MIC)、最低杀菌浓度(MBC),对表皮葡萄球菌生长、生物被膜形成的抑制作用... 详细信息

为了探索新疆南疆地区表皮葡萄球菌对氟苯尼考注射液的敏感性,试验采用微量肉汤稀释法测定了氟苯尼考注射液对表皮葡萄球菌ATCC 35984和临床分离株的最低抑菌浓度(MIC)、最低杀菌浓度(MBC),对表皮葡萄球菌生长、生物被膜形成的抑制作用及表面疏水性的影响,测定了氟苯尼考注射液的体外抑菌效果及其对表皮葡萄球菌细胞膜完整性的影响。结果表明:氟苯尼考注射液对表皮葡萄球菌ATCC 35984和临床分离株的MIC值分别为4,2μg/mL,MBC值分别为16,8μg/mL。与未加氟苯尼考注射液的菌液相比,0.5μg/mL氟苯尼考注射液可显著抑制表皮葡萄球菌生长,0.25μg/mL氟苯尼考可显著抑制其生物被膜的形成(P<0.05),浓度>2μg/mL时抑制效果极显著(P<0.01),呈浓度依赖性;氟苯尼考注射液可降低表皮葡萄球菌细胞表面疏水性,呈浓度依赖性。当氟苯尼考注射液浓度为1/2 MIC时,可在体外显著抑制表皮葡萄球菌ATCC 35984生长(P<0.05);当浓度高于1 MIC时,可极显著抑制表皮葡萄球菌ATCC 35984和临床分离株生长(P<0.01)。当氟苯尼考注射液浓度>1/2 MIC时,其可损伤表皮葡萄球菌的细胞膜完整性。说明新疆南疆地区表皮葡萄球菌对氟苯尼考注射液的药物敏感性较好,氟苯尼考可能是通过降低表皮葡萄球菌细胞表面疏水性和损伤表皮葡萄球菌的细胞膜完整性来发挥抑菌和杀菌作用的。

关键词：新疆南疆地区表皮葡萄球菌氟苯尼考注射液药物敏感性抗菌活性生物被膜

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猪丹毒丝菌的分离鉴定和耐药性分析

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中国兽医杂志 2024年第8期60卷 62-68页

作者：刘淑华王岚张家浩杨睿智刘祥杰李虎邢潇月李莲瑞塔里木大学动物科学与技术学院新疆阿拉尔843300 塔里木畜牧科技兵团重点实验室新疆阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室新疆阿拉尔843300 塔里木大学生命科学与技术学院新疆阿拉尔843300

新疆维吾尔自治区阿克苏地区某规模化猪场猪只发生急性死亡,临床症状为关节炎和败血症等。为了解引起猪发病的致病菌及其耐药性,本试验通过实验室常规纯培养方法对采集自该猪场的病猪脏器进行细菌的分离纯化;通过革兰染色镜检和电子显... 详细信息

新疆维吾尔自治区阿克苏地区某规模化猪场猪只发生急性死亡,临床症状为关节炎和败血症等。为了解引起猪发病的致病菌及其耐药性,本试验通过实验室常规纯培养方法对采集自该猪场的病猪脏器进行细菌的分离纯化;通过革兰染色镜检和电子显微镜观察进行形态学鉴定,生化试验进行生化鉴定,并进行16S rDNA基因PCR扩增和序列分析;通过药敏试验检测分离菌株的耐药性。结果显示,分离菌株为革兰阳性菌,形态为长直、微弯曲状;生化鉴定结果显示,触酶反应、尿素、氧化酶和吲哚呈阴性,乳糖、果糖、硫化氢和葡萄糖呈阳性;结合16S rDNA基因序列比对确定分离菌株为猪丹毒丝菌。药敏试验结果显示,分离菌株对β-内酰胺类、硝基呋喃类、磺胺类和2种氨基糖苷类药物敏感。本试验结果为该规模化猪场治疗和防控猪丹毒以及进一步研究提供了科学依据。

关键词：猪丹毒丝菌分离与鉴定耐药性分析 16S rDNA

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鸡源人葡萄球菌的分离鉴定及生物学特性分析

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中国家禽 2023年第3期45卷 52-58页

作者：张家浩邢潇月李虎刘祥杰杨睿智李莲瑞塔里木大学动物科学与技术学院新疆阿拉尔843300 塔里木畜牧科技兵团重点实验室新疆阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室新疆阿拉尔843300 塔里木大学生命科学与技术学院新疆阿拉尔843300

为确定新疆阿克苏地区某鸡场鸡精神不振、采食量减少和死亡的原因,试验对采集自该鸡场病死鸡内脏器官进行病原的分离鉴定,并进行动物致病性试验和药物敏感性试验,分析其致病力和耐药性。结果显示,从发病鸡内脏器官中分离到一株革兰氏阳... 详细信息

为确定新疆阿克苏地区某鸡场鸡精神不振、采食量减少和死亡的原因,试验对采集自该鸡场病死鸡内脏器官进行病原的分离鉴定,并进行动物致病性试验和药物敏感性试验,分析其致病力和耐药性。结果显示,从发病鸡内脏器官中分离到一株革兰氏阳性球菌,分离菌对复方新诺明、麦迪霉素、红霉素、诺氟沙星、环丙沙星、阿莫西林、青霉素、克林霉素、氨苄西林等药物表现为耐药,对部分头孢类、四环素类、氨基糖苷类、氯霉素类和多肽类药物表现为不同程度敏感;通过对分离菌进行形态学观察、生化试验、16S rRNA基因测序和同源性分析,确定该分离菌为人葡萄球菌。该分离菌可引起小鼠和雏鸡死亡,死亡雏鸡以肝脏肿大出血、胃黏膜出血等内脏器官出血为主要病理变化,与自然发病一致。研究首次在鸡上分离出人葡萄球菌,为鸡的人葡萄球菌病防治和合理用药提供依据。

关键词：人葡萄球菌耐药性分析分离与鉴定 16S rRNA 鸡源

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