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新疆巴州地区某奶牛场隐性乳房炎源金黄色葡萄球菌的分子分型、耐药特征和毒力基因检测

中国兽医杂志 2025年第2期 10-17页

作者：蔡依龙吴自豪池昊明刘士哲陈伟塔里木大学动物科学与技术学院新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室

为调查新疆维吾尔自治区巴州地区奶牛隐性乳房炎源金黄色葡萄球菌的分子流行特征，本试验于2020年5月从巴州某奶牛场采集40份隐性乳房炎奶牛乳样进行细菌分离鉴定，对分离株进行多位点序列分型（MLST）和葡萄球菌A蛋白（spa）分型，同... 详细信息

为调查新疆维吾尔自治区巴州地区奶牛隐性乳房炎源金黄色葡萄球菌的分子流行特征，本试验于2020年5月从巴州某奶牛场采集40份隐性乳房炎奶牛乳样进行细菌分离鉴定，对分离株进行多位点序列分型（MLST）和葡萄球菌A蛋白（spa）分型，同时检测其药物敏感性、毒力基因携带情况和生物被膜形成能力。结果显示，从40份乳样中得到34株金黄色葡萄球菌，MLST分型共18种，spa分型共7种，其主要流行克隆为ST5405-t189和ST5406-t705。34株金黄色葡萄球菌分离株对红霉素的耐药率最高（50.0%,17/34），并检测到4株（11.8%）耐甲氧西林金黄色葡萄球菌，6株（17.6%）金黄色葡萄球菌具有多重耐药表型；34株金黄色葡萄球菌携带14种毒力基因，其中，clfB(94.1%,32/34)、clfA(88.2%,30/34)、hlb(85.3%,29/34)、cna(79.4%,27/34)和hla(67.6%,23/34)的检出率较高；23株（67.6%）金黄色葡萄球菌具有生物被膜形成能力。结果表明，本试验分离到的34株金黄色葡萄球菌分子分型多样，部分菌株具有多重耐药性和生物被膜形成能力，并携带多种毒力基因，提示应加强对奶牛隐性乳房炎源金黄色葡萄球菌的检测和监管。

关键词：金黄色葡萄球菌分子分型耐药性生物被膜毒力基因

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槲皮素-替米考星混合物纳米粒的制备及对金黄色葡萄球菌小菌落变异株抗菌活性研究

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中国畜牧兽医 2022年第4期49卷 1470-1478页

作者：刘金环张珊玲宋玮罗万和陈伟塔里木大学动物科学与技术学院新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木盆地生物资源保护利用重点实验室阿拉尔843300

【目的】制备一种适用于治疗由金黄色葡萄球菌小菌落变异株(Staphylococcus aureus small colony variants,SASCVs)引起奶牛乳腺炎感染的槲皮素-替米考星混合物纳米粒,评价其对SASCVs菌株的抗菌活性。【方法】通过对槲皮素(0.05、0.10、... 详细信息

【目的】制备一种适用于治疗由金黄色葡萄球菌小菌落变异株(Staphylococcus aureus small colony variants,SASCVs)引起奶牛乳腺炎感染的槲皮素-替米考星混合物纳米粒,评价其对SASCVs菌株的抗菌活性。【方法】通过对槲皮素(0.05、0.10、0.15和0.20 g)和替米考星原料药用量(0.2、0.3、0.4和0.5 g)及转速(500、1000、1500 r/min)、反应时间(0.5、1.0、2.0 h)、反应温度(25、50、75℃)、溶剂浓度(5.0%、7.5%、10.0%)进行考察,以外观性状为指标,筛选槲皮素-替米考星混合物纳米粒最优配方和制备条件;以微观形态、沉降体积比、再分散性、粒径和Zeta电位为指标,对制备的槲皮素-替米考星混合物纳米粒表征;通过琼脂扩散法、微量肉汤稀释法和体外杀菌曲线,对比槲皮素-替米考星混合物纳米粒和市售替米考星溶液对SASCVs菌株的抗菌活性,评价槲皮素-替米考星混合物纳米粒的优势。【结果】当替米考星为0.4 g、槲皮素为0.1 g、溶剂为20 mL 7.5%的聚乙二醇溶液,在转速为1000 r/min、反应时间为1 h、反应温度为50℃时,所制备的槲皮素-替米考星混合物纳米粒最优,其溶液外观性状显示颜色清亮,无沉淀和絮状物;微观形态显示该混合物纳米粒分布均匀,颗粒大小一致;沉降体积比为1,再分散性良好,平均粒径为741.9 nm,Zeta电位为-7.69 mV。替米考星标准品、槲皮素-替米考星混合物纳米粒和市售替米考星溶液对SASCVs菌株的抑菌圈直径分别为2.54、1.51和1.38 cm,对SASCVs菌株的最低抑菌浓度分别为1、1和2μg/mL;体外杀菌曲线表明,槲皮素-替米考星混合物纳米粒对SASCVs菌株表现出明显的浓度依赖性。【结论】本研究所制备的槲皮素-替米考星混合物纳米粒对SASCVs菌株具有较强杀菌能力,可为治疗由SASCVs菌株引起的奶牛乳腺炎提供基础研究资料。

关键词：槲皮素替米考星混合物纳米粒金黄色葡萄球菌小菌落变异株抗菌活性

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额敏县1株羊粪源金黄色葡萄球菌的分离鉴定及其耐药性与致病性研究

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畜牧与饲料科学 2024年第4期45卷 103-109页

作者：苏政于月通朱婷婷陀海欣李静吴静刘鹏彭健齐萌新疆生产建设兵团第九师农业科学研究所(畜牧科学研究所) 新疆额敏834601 塔里木大学动物科学与技术学院/新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室新疆阿拉尔843300

[目的]对羔羊腹泻粪便样本中的金黄色葡萄球菌进行分离鉴定,了解其耐药性和致病性特征。[方法]从新疆维吾尔自治区塔城地区额敏县某养羊场采集腹泻羔羊肛拭子样本4份,使用高盐甘露醇培养基(MSA)选择性分离金黄色葡萄球菌;通过形态学观察... 详细信息

[目的]对羔羊腹泻粪便样本中的金黄色葡萄球菌进行分离鉴定,了解其耐药性和致病性特征。[方法]从新疆维吾尔自治区塔城地区额敏县某养羊场采集腹泻羔羊肛拭子样本4份,使用高盐甘露醇培养基(MSA)选择性分离金黄色葡萄球菌;通过形态学观察和16S rDNA序列分析对分离菌株进行种属鉴定;采用纸片扩散法分析分离菌株对9类11种抗菌药物的敏感性;利用PCR法检测分离菌株毒力基因携带情况;建立昆明系小白鼠腹腔感染模型,开展分离菌株的致病性试验。[结果]从4份羔羊腹泻样本中分离到1株疑似金黄色葡萄球菌,该菌株在MSA培养基上形成有光泽、中度隆起、金黄色或柠檬色的菌落;革兰染色镜检可见分离菌株为革兰阳性,呈葡萄串状排列;16S rDNA序列分析显示,分离菌株的序列与我国湖南省长沙市猪肺源金黄色葡萄球菌分离株序列的相似性为100%;结合形态学观察和16S rDNA序列比对结果,鉴定该菌株为金黄色葡萄球菌。分离菌株对青霉素、克林霉素、头孢噻吩、利福平和红霉素耐药,对庆大霉素、阿奇霉素、氯霉素、诺氟沙星、头孢西丁和复方新诺明敏感。在检测的8类20种毒力基因中,该菌株携带sea、seg、sei、eta、clfA和clfB基因。该菌株对小鼠的半数致死量(LD_(50))为2.24×10^(8)CFU/mL,死亡小鼠脏器病理变化明显。[结论]从额敏县某养羊场羔羊腹泻样本中分离鉴定到1株金黄色葡萄球菌,该菌株具有多重耐药表型,携带多种毒力基因,具有一定致病性。研究结果为该地区羊金黄色葡萄球菌病的合理用药提供了参考。

关键词：羊金黄色葡萄球菌分离鉴定耐药性致病性

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新疆地区某猪场猪嗜血支原体病的检测与分析

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现代畜牧兽医 2024年第9期 1-5页

作者：刘淑华李超群梁樊鑫陈鑫候梦哲李莲瑞塔里木大学动物科学与技术学院新疆阿拉尔843300 塔里木畜牧科技兵团重点实验室新疆阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室新疆阿拉尔843300

为了解新疆地区某猪场猪嗜血支原体的感染情况,试验采集新疆地区某猪场保育仔猪的抗凝血200份,采用血液压片、血涂片瑞氏染色镜检和普通PCR方法检测猪嗜血支原体,并利用猪嗜血支原体16SrRNA基因引物,以血液DNA为模板,扩增、克隆、鉴定... 详细信息

为了解新疆地区某猪场猪嗜血支原体的感染情况,试验采集新疆地区某猪场保育仔猪的抗凝血200份,采用血液压片、血涂片瑞氏染色镜检和普通PCR方法检测猪嗜血支原体,并利用猪嗜血支原体16SrRNA基因引物,以血液DNA为模板,扩增、克隆、鉴定后送测序,进行同源性比对与遗传进化分析。结果显示,经血液压片、血液涂片及PCR检测共检出58份猪嗜血支原体阳性样本;以猪嗜血支原体16SrRNA基因引物、血液DNA为模板成功克隆猪嗜血支原体基因,命名为XJP1(已被Genbank收录,登录号:PP526316)。同源性比对与遗传进化分析结果显示,XJP1与猪嗜血支原体(登录号:KC907396)、猪嗜血支原体(登录号:HQ259257)为同一分支,亲缘关系较近,同源性为96.9%~99.6%。研究表明,该猪场保育猪感染了猪嗜血支原体,试验结果将为该猪场防控猪嗜血支原体感染以及该病的深入研究提供基础数据。

关键词：猪嗜血支原体 16SrRNA序列新疆地区

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和田部分地区和田黑鸡3种球虫分子检测与鉴定

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动物医学进展 2022年第7期43卷 134-138页

作者：宋显明信璐瑶侯旻昱邓金华方晨李泽宇赵永旭齐萌新疆农业职业技术学院新疆昌吉831199 塔里木大学动物科学学院/新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室新疆阿拉尔843300

为了解和田地区和田黑鸡致病性较强的柔嫩艾美耳球虫、毒害艾美耳球虫和布氏艾美耳球虫的感染情况,收集和田地区11户规模化养殖条件下的和田黑鸡粪便样本449份,基于3种球虫ITS基因位点特异性引物,采用PCR进行检测和种类鉴定。结果发现,... 详细信息

为了解和田地区和田黑鸡致病性较强的柔嫩艾美耳球虫、毒害艾美耳球虫和布氏艾美耳球虫的感染情况,收集和田地区11户规模化养殖条件下的和田黑鸡粪便样本449份,基于3种球虫ITS基因位点特异性引物,采用PCR进行检测和种类鉴定。结果发现,和田黑鸡3种球虫总感染率为16.5%(74/449),以布氏艾美耳球虫为优势感染种类,感染率为12.0%(54/449),柔嫩艾美耳球虫和毒害艾美耳球虫感染率分别为6.0%(27/449)和2.4%(11/449),球虫混合感染率为4.9%(22/449);以40日龄~80日龄和田黑鸡球虫感染率最高,感染率为20.4%(58/284);不同采样点和不同日龄和田黑鸡球虫感染率差异显著(P<0.05)。种系发育分析显示,柔嫩艾美耳球虫和毒害艾美耳球虫序列形成一个亚群,布氏艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫和早熟艾美耳球虫序列形成一个亚群,堆型艾美耳球虫单独形成一个亚群。研究结果提示,和田部分地区和田黑鸡致病性球虫种类感染较常见,应进一步加强药物防治和耐药性检测研究。

关键词：艾美耳球虫鉴定种类感染鸡

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基于ORF7基因的猪繁殖与呼吸综合征病毒RT-RAA检测方法的建立

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动物医学进展 2024年第8期45卷 117-119页

作者：于娜马佳镁张紫薇黄春媛范悦轩郑佳馨张艳刘光亮曹宗喜海南省农业科学院畜牧兽医研究所、海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室海南海口571100 塔里木大学动物科学与技术学院、新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室新疆阿拉尔843300 新疆农业大学动物医学学院新疆乌鲁木齐830000 苏州天隆生物科技有限公司江苏苏州215021

根据GenBank公布的ORF7基因保守序列设计了特异性引物,建立了PRRSVORF7基因反转录-重组酶介导等温扩增(RT-RAA)荧光法快速检测方法。结果表明,RT-RAA荧光法在42℃、20min内即可检测到PRRSV特异性扩增曲线,最低检测浓度为9.9×10^(6)... 详细信息

根据GenBank公布的ORF7基因保守序列设计了特异性引物,建立了PRRSVORF7基因反转录-重组酶介导等温扩增(RT-RAA)荧光法快速检测方法。结果表明,RT-RAA荧光法在42℃、20min内即可检测到PRRSV特异性扩增曲线,最低检测浓度为9.9×10^(6)copies/μL;与PRVBartha-K61、PCV、CSFV、PRRSVGD、PRRSVXH-GD、PRRSVGM2、PRRSVCH-1a病毒均无交叉反应。分别对157份样品进行荧光RT-RAA法与PCR方法的检测进行比对,结果显示,荧光RT-RAA法敏感性为94.0%,特异性为100%。建立的PRRSV荧光RT-RAA法操作简便,特异性强,灵敏度高。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF7基因反转录-重组酶介导等温扩增特异性灵敏度

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羊痘病毒063载体构建及蛋白纯化

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现代畜牧科技 2023年第7期 33-36页

作者：宁可齐潇寒张惠文李有文塔里木大学动物科学与技术学院新疆阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室新疆阿拉尔843300

为研究羊痘病毒宿主范围因子063基因的特征及其生物学功能,采用PCR方法扩增063基因,通过双酶切和基因同源重组的方法与PGEX-KG载体连接构建成融合表达GST标签的原核表达载体,经酶切和测序鉴定正确的克隆转化大肠杆菌BL21,用IPTG诱导表达... 详细信息

为研究羊痘病毒宿主范围因子063基因的特征及其生物学功能,采用PCR方法扩增063基因,通过双酶切和基因同源重组的方法与PGEX-KG载体连接构建成融合表达GST标签的原核表达载体,经酶切和测序鉴定正确的克隆转化大肠杆菌BL21,用IPTG诱导表达063蛋白,产物经SDS-PAGE电泳检测和Western Blot鉴定,大量诱导表达063蛋白,通过谷胱苷肽琼脂糖亲合层析法,得到063纯化蛋白。

关键词：羊痘病毒 063基因原核表达蛋白纯化

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新疆维吾尔自治区和田地区规模化羊场腹泻羔羊源大肠杆菌的分离鉴定及毒力基因和耐药基因分析

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畜牧与饲料科学 2023年第6期44卷 116-122页

作者：董贵于月通马志远王尧盛光玉陶大勇齐萌塔里木大学动物科学与技术学院/新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室新疆阿拉尔843300 塔城职业技术学院新疆塔城834700

[目的]了解新疆维吾尔自治区和田地区规模化羊场腹泻羔羊源大肠杆菌的毒力基因和耐药基因携带情况。[方法]从和田地区3个规模化羊场收集70份腹泻羔羊肛拭子,采用传统的细菌分离培养、染色镜检、生化鉴定以及细菌16S rDNA序列PCR扩增、... 详细信息

[目的]了解新疆维吾尔自治区和田地区规模化羊场腹泻羔羊源大肠杆菌的毒力基因和耐药基因携带情况。[方法]从和田地区3个规模化羊场收集70份腹泻羔羊肛拭子,采用传统的细菌分离培养、染色镜检、生化鉴定以及细菌16S rDNA序列PCR扩增、测序等方法对样本进行大肠杆菌的分离鉴定,利用PCR法对分离菌株进行大肠杆菌系统发育群分型以及毒力基因、耐药基因检测。[结果]经形态学观察、生化鉴定、16S rDNA序列分析,从70份腹泻羔羊肛拭子中分离鉴定出38株大肠杆菌,分离率为54.3%(38/70)。系统发育群分型鉴定分析显示,分离菌株以B1群为优势群(68.4%,26/38),其次是A群(26.3%,10/38)和D群(5.3%,2/38),未检测出B2群。毒力基因检测结果显示,在8种大肠杆菌毒力基因中检测出4种,携带fimC基因的菌株比例最高,为92.1%(35/38);其次是irp2基因47.4%(18/38)、hlyF基因36.8%(14/38)和fyuA基因34.2%(13/38),未检测出eaeA、ST、LT和Stx1基因。耐药基因检测结果显示,在8种大肠杆菌耐药基因中检测到6种,以磺胺类耐药基因sul2基因携带率最高,为42.1%(16/38),未检出氨基糖苷类耐药基因。[结论]和田地区腹泻羔羊源大肠杆菌携带毒力基因和耐药基因,应加强对该地区羊源致病性大肠杆菌流行情况的监测。

关键词：大肠杆菌鉴定毒力耐药性腹泻羔羊

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新疆南部地区绵羊无形体流行情况调查

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现代畜牧兽医 2023年第3期 65-69页

作者：李思昂李正张柳宋浩楠武军元塔里木大学动物科学与技术学院新疆阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室新疆阿拉尔843300

试验旨在确定新疆南部地区绵羊中绵羊无形体基因型种类,共采集240份绵羊血液样本,其中成羊和羔羊各120份样本。样本进行DNA提取,并应用绵羊无形体msp4基因种特异性引物对总DNA进行PCR扩增。测序结果应用DNAstar软件进行核苷酸序列和氨... 详细信息

试验旨在确定新疆南部地区绵羊中绵羊无形体基因型种类,共采集240份绵羊血液样本,其中成羊和羔羊各120份样本。样本进行DNA提取,并应用绵羊无形体msp4基因种特异性引物对总DNA进行PCR扩增。测序结果应用DNAstar软件进行核苷酸序列和氨基酸序列比对,并应用MEGA 7.0构建系统进化树。结果显示,绵羊无形体在绵羊中总检出率为22.5%(54/240),其中成年雌性绵羊和羔羊无形体的检出率分别为37.5%(45/120)和7.5%(9/120)。所得序列经比对发现,其同源性为99.7%~100.0%,存在多个核苷酸位点发生改变,并获得3种基因型,分别为基因型Ⅱ型、Ⅲ型、GB3型,各基因型在绵羊中总流行率为5.4%(13/240)、15.0%(36/240)、2.1%(5/240)。研究表明,我国新疆南部地区绵羊中存在3种绵羊无形体基因型,其中基因Ⅲ型是新疆南部地区绵羊中普遍存在的基因型。

关键词：新疆南部地区绵羊绵羊无形体 msp4基因序列分析

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蒙新区人畜重要蜱传疾病及病原体研究概述

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中国动物保健 2023年第2期25卷 1-3页

作者：张柳李思昂李正宋浩楠武军元塔里木大学动物科学与技术学院新疆阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室新疆阿拉尔843300

蒙新地区(一般指内蒙古、新疆和甘肃)凭借独特的地理成为我国重要的牧区,但同时蒙新区的蜱传疾病流行情况相对于其他省市来说较为严峻。目前还未有针对蒙新区内内蒙古、新疆、甘肃的蜱传疾病的综合报道。本文将对这地重要蜱传疾病进行... 详细信息

蒙新地区(一般指内蒙古、新疆和甘肃)凭借独特的地理成为我国重要的牧区,但同时蒙新区的蜱传疾病流行情况相对于其他省市来说较为严峻。目前还未有针对蒙新区内内蒙古、新疆、甘肃的蜱传疾病的综合报道。本文将对这地重要蜱传疾病进行概述。

关键词：蒙新区蜱蜱传疾病蜱传病原

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