检索结果-内蒙古大学图书馆

畜牧与兽医 2017年第5期49卷 98-102页

作者：赵爱云齐萌江春雨井波塔里木大学动物科学学院新疆阿拉尔843300 兵团塔里木畜牧科技重点实验室新疆阿拉尔843300

为研究斯氏艾美耳球虫(Eimeria stiedai)的入侵及免疫机制,从基于Gateway技术构建的孢子化卵囊c DNA原核表达文库中扩增出了微线蛋白5(MIC5)部分基因序列,融合表达、纯化了相应的GST-MIC5蛋白多肽,并对该融合蛋白进行了生物信息学分析... 详细信息

为研究斯氏艾美耳球虫(Eimeria stiedai)的入侵及免疫机制,从基于Gateway技术构建的孢子化卵囊c DNA原核表达文库中扩增出了微线蛋白5(MIC5)部分基因序列,融合表达、纯化了相应的GST-MIC5蛋白多肽,并对该融合蛋白进行了生物信息学分析。结果显示,获得的MIC5基因部分序列长552 bp,与参考序列的同源性高达99%;经原核表达、纯化,获得大小约46 ku的融合蛋白,与预测相符;生物信息学分析发现,目的蛋白含3个由半胱氨酸序列构成的Apple结构域,揭示其与虫体黏附和入侵宿主细胞相关;诱导表达并纯化了与虫体黏附和入侵宿主细胞相关的MIC5部分蛋白。本研究为深入探讨斯氏艾美耳球虫MIC5蛋白的功能奠定了理论基础。

关键词：斯氏艾美耳球虫微线蛋白5 表达生物信息学

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苦马豆素单克隆抗体的制备与鉴定

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中国畜牧兽医 2017年第7期44卷 2155-2159页

作者：贾琦珍陈根元王连群亚森.麦麦提王帅塔里木大学动物科学学院新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室阿拉尔843300

本试验采用苦马豆素(swainsonine,SW)人工抗原SW-OVA免疫接种BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术建立了1株能稳定分泌SW单克隆抗体的杂交瘤细胞1F10,杂交瘤细胞染色体数目为45~50对。经间接ELISA检测,该株细胞培养上清中抗体效价为1∶25 600,诱... 详细信息

本试验采用苦马豆素(swainsonine,SW)人工抗原SW-OVA免疫接种BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术建立了1株能稳定分泌SW单克隆抗体的杂交瘤细胞1F10,杂交瘤细胞染色体数目为45~50对。经间接ELISA检测,该株细胞培养上清中抗体效价为1∶25 600,诱生腹水效价为1∶80 000。单克隆抗体的亚型为IgG1,亲和力解离常数为1.14×1010,腹水抗体纯化后纯度可达98%,回收率80%,SDS-PAGE凝胶电泳可见单克隆抗体的轻链、重链分子质量分别为25和50ku,Western blotting检测抗体能特异性的识别SW。其线性检测范围为4~128μg/mL(R2=0.9969),与BSA、明胶、多聚赖氨酸、α-甘露糖苷等无交叉反应。本试验制备的SW单克隆抗体为免疫学检测SW和免疫学防制家畜疯草中毒奠定基础。

关键词：苦马豆素单克隆抗体杂交瘤细胞间接ElISA

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苦马豆素对家兔睾丸生精细胞周期的影响

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江苏农业科学 2017年第9期45卷 138-140页

作者：程勇任道全陈根元矫继峰王帅塔里木大学动物科学学院/新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室新疆阿拉尔843300

为研究苦马豆素对家兔睾丸生精细胞周期的影响,进一步探讨疯草的中毒机理,将24只雄性家兔随机分为对照组和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,试验组分别按照Ⅰ组15%(苦马豆素含量30 mg/kg)、Ⅱ组30%(苦马豆素含量60 mg/kg)、Ⅲ组45%(苦马豆素含量90 mg/... 详细信息

为研究苦马豆素对家兔睾丸生精细胞周期的影响,进一步探讨疯草的中毒机理,将24只雄性家兔随机分为对照组和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,试验组分别按照Ⅰ组15%(苦马豆素含量30 mg/kg)、Ⅱ组30%(苦马豆素含量60 mg/kg)、Ⅲ组45%(苦马豆素含量90 mg/kg)的比例添加疯草小花棘豆,对照组仅饲喂苜蓿干草,试验期70 d。分别于攻毒后第14、第35、第70天每次每组随机采集2只家兔的睾丸,通过流式细胞仪测定生精细胞凋亡率和细胞周期的变化。结果显示,从第35天开始,试验组家兔生精细胞凋亡率均极显著升高(P<0.01),其中单倍体细胞和二倍体细胞凋亡率均极显著升高(P<0.01),但四倍体细胞数量无显著变化。与对照组相比,中毒家兔睾丸生精细胞数量在G0/G1期升高,在S期降低,而且G1期与S期细胞数量呈显著负相关。说明苦马豆素可导致家兔睾丸组织生精细胞凋亡,且呈现出一定的时间-剂量效应。

关键词：苦马豆素家兔生精细胞细胞凋亡细胞周期时间-剂量效应

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新疆南疆绵羊泰勒虫病分子流行病学调查

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中国病原生物学杂志 2017年第11期12卷 1102-1104,1111页

作者：齐萌赵爱云王海国宋显明张宽宽郑毛亮井波陶大勇塔里木大学动物科学学院新疆阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室塔里木大学生命科学学院

目的了解新疆南疆绵羊的泰勒虫感染情况及其种类分布特征。方法基于泰勒虫通用引物和种特异性引物,采用PCR法检测该区域绵羊血液标本中的泰勒虫,并进行序列分析。结果 637份血液标本PCR检测泰勒虫阳性400份,总感染率为62.79%。其中,莎... 详细信息

目的了解新疆南疆绵羊的泰勒虫感染情况及其种类分布特征。方法基于泰勒虫通用引物和种特异性引物,采用PCR法检测该区域绵羊血液标本中的泰勒虫,并进行序列分析。结果 637份血液标本PCR检测泰勒虫阳性400份,总感染率为62.79%。其中,莎车县、英吉沙县和泽普县绵羊的泰勒虫感染率均为100%,不同采样点绵羊的泰勒虫感染率比较差异有统计学意义(χ~2=220.87,P<0.01);散养和圈养绵羊的泰勒虫感染率分别为72.62%(358/493)和29.17%(42/144),差异有统计学意义(χ~2=90.06,P<0.01);夏季和冬季绵羊的泰勒虫感染率分别为44.01%(125/284)和77.90%(275/353),差异有统计学意义(χ~2=90.06,P<0.01)。经种特异性引物PCR扩增和序列比对,400个泰勒虫阳性样品中,399个为绵羊泰勒虫,1个为环形泰勒虫,未检出尤氏泰勒虫和吕氏泰勒虫。结论新疆南疆绵羊的泰勒虫病流行严重,感染虫种主要为绵羊泰勒虫,应加强对该地区泰勒病的防控。

关键词：泰勒虫病流行病学绵羊新疆南疆

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我国小反刍兽疫病毒H基因序列分析

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江苏农业科学 2017年第7期45卷 149-152,158页

作者：李飞李岳洋张路瑶马海璐张保军蒋秀梅马世强赵丽刘永宏塔里木大学动物科学学院/新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室新疆阿拉尔843300

为了分析我国小反刍兽疫疫情的特点,从GenBank下载我国和其他国家小反刍兽疫病毒(PPRV)毒株H基因全序列,应用分子生物学软件DNAStar进行序列分析。结果显示,始于2007年的我国首次PPR疫情中,我国西藏地区PPRV各毒株间H基因核苷酸同源性介... 详细信息

为了分析我国小反刍兽疫疫情的特点,从GenBank下载我国和其他国家小反刍兽疫病毒(PPRV)毒株H基因全序列,应用分子生物学软件DNAStar进行序列分析。结果显示,始于2007年的我国首次PPR疫情中,我国西藏地区PPRV各毒株间H基因核苷酸同源性介于99.6%~100.0%之间,我国西藏与其他国家PPRV毒株核苷酸同源性介于86.7%~98.3%之间;我国西藏地区PPRV毒株间氨基酸序列同源性介于99.7%~100.0%之间,我国西藏与其他国家PPRV毒株氨基酸序列同源性介于89.3%~98.4%之间。始于2013年年底的我国又一次PPR疫情中,我国PPRV毒株间核苷酸同源性介于99.7%~99.8%之间,我国与其他国家PPRV毒株核苷酸同源性介于87.2%~97.5%之间;我国PPRV毒株间氨基酸序列同源性介于99.2%~99.8%之间,我国与其他国家PPRV毒株氨基酸序列同源性介于89.0%~98.4%之间。H基因进化树分析结果显示,我国的9株PPRV划分为基因Ⅳ系。我国PPRV毒株与印度毒株及土耳其毒株同源性最高,可能由这2个国家传入我国。

关键词：小反刍兽疫 H基因序列分析核苷酸同源性氨基酸同源性

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牛源隐孢子虫新疆南疆分离株巢式PCR鉴定

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黑龙江畜牧兽医（下半月） 2017年第12期 108-110,296页

作者：王娜胡建军武军元新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室/塔里木大学动物科学学院新疆阿拉尔843300

为了解新疆南疆牛隐孢子虫病的感染情况,从而为该病的防控提供理论依据,以新疆南疆某牛场牛粪中的隐孢子虫卵囊DNA为模板,根据隐孢子虫18S rRNA序列设计引物,采用巢式PCR方法鉴定了自然感染的新疆南疆牛源隐孢子虫,并对扩增出的目的片... 详细信息

为了解新疆南疆牛隐孢子虫病的感染情况,从而为该病的防控提供理论依据,以新疆南疆某牛场牛粪中的隐孢子虫卵囊DNA为模板,根据隐孢子虫18S rRNA序列设计引物,采用巢式PCR方法鉴定了自然感染的新疆南疆牛源隐孢子虫,并对扩增出的目的片段进行了测序、同源性分析,并运用MEGA 5.0软件构建系统发育进化树。结果表明:检测材料能够扩增出目的片段;新疆南疆牛源隐孢子虫分离株的18S rRNA与广州微小隐孢子虫的同源性达100%,种系发育亲缘关系最近,处于同一分支,与宁夏、河南、黑龙江等地微小隐孢子虫的同源性达99%。说明新疆南疆牛源隐孢子虫分离株在种属上为微小隐孢子虫。

关键词：新疆牛源隐孢子虫巢式PCR 种系发育

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和田羊睾丸支持细胞的体外培养与分离鉴定

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西南农业学报 2017年第8期30卷 1918-1922页

作者：王帅贾琦珍张玲王连群陈根元塔里木大学动物科学学院/新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室新疆阿拉尔843300

【目的】研究和田羊睾丸支持细胞的体外培养特性。【方法】取新生和田羊睾丸组织,利用两步酶消化后,采用差速贴壁法纯化细胞进行体外培养,并通过形态学观察、HE染色、AKP染色、油红O染色、吖啶橙染色、罗丹明123染色、免疫组化染色、RT... 详细信息

【目的】研究和田羊睾丸支持细胞的体外培养特性。【方法】取新生和田羊睾丸组织,利用两步酶消化后,采用差速贴壁法纯化细胞进行体外培养,并通过形态学观察、HE染色、AKP染色、油红O染色、吖啶橙染色、罗丹明123染色、免疫组化染色、RTPCR和MTT法检测细胞活性及纯度。【结果】培养基中加入2.00%血清浓度的DMEM/F-12可提高支持细胞纯度,在体外培养传至20代的和田羊睾丸支持细胞形态和核型均为正常;所培养的细胞内波形蛋白表达及标志基因SCF和GDNF的表达均为阳性。【结论】本试验成功建立了和田羊睾丸支持细胞体外培养模型。

关键词：和田羊睾丸支持细胞体外培养鉴定

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16SrDNA克隆文库法分析拜城油鸡盲肠细菌多样性研究

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家畜生态学报 2017年第2期38卷 18-21页

作者：陈荣刘利林格明古丽·木哈台王永塔里木大学动物科学学院新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室新疆阿拉尔843300

为了研究拜城油鸡盲肠细菌物种多样性,本研究采用基于16SrDNA基因序列系统发育分析的免培养方法进行细菌物种多样性分析,以盲肠内容物样品总DNA为模板,利用细菌通用引物扩增16SrDNA基因,构建16SrDNA基因克隆文库,并对文库中的插入序列进... 详细信息

为了研究拜城油鸡盲肠细菌物种多样性,本研究采用基于16SrDNA基因序列系统发育分析的免培养方法进行细菌物种多样性分析,以盲肠内容物样品总DNA为模板,利用细菌通用引物扩增16SrDNA基因,构建16SrDNA基因克隆文库,并对文库中的插入序列进行RFLP分析。结果表明:随机挑选的252个克隆为阳性克隆,阳性率为65.7%,经过RFLP筛选出95个不同图谱的重组克隆并测序,比对分析后发现:拜城油鸡盲肠细菌分属于厚壁菌门(Firmicutes)(65.26%)、拟杆菌门(Bacteroidetes)27.37%)和变形菌门(Proteobacteria)(4.21%)。在纲水平有梭菌纲(Clostridia)、拟杆菌纲(Bacteroidia)和ε-变形菌纲(Epsilonproteobacteria)相对含量最多,分别占总菌的64.21%、26.32%和4.21。在科水平上以瘤胃菌科(Ruminococcaceae)(21.05%)、毛螺菌科(Lachnospiraceae)(20%)和理研菌科(Rikenellaceae)(12.63%)相对含量最多,为优势科。在属水平上仅有31.58%的序列可以鉴定到属,Lachnoclostridium的相对含量最多,占总菌的12.63%,其次为另枝菌属(Alistipes)和瘤胃梭菌属(Ruminiclostridium)。拜城油鸡盲肠内容物中的细菌组成具有丰富的多样性,并有新细菌分类单位的潜在资源,值得进一步进行开发研究。

关键词：拜城油鸡盲肠细菌 16SrDNA 多样性

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不同因素对新疆多浪羊卵母细胞体外成熟的影响

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黑龙江畜牧兽医 2017年第6期 101-103,294页

作者：陈宏伟王娟红贺建忠郑毛亮常卫华塔里木大学动物科学学院新疆阿拉尔843300 新疆兵团塔里木畜牧科技重点实验室新疆阿拉尔843300

为了探索多浪羊卵母细胞体外成熟的影响因素,提高体外受精率,为多浪羊繁殖潜能的发挥提供基础,试验以屠宰场多浪羊卵巢为材料,采用不同运输条件及不同卵母细胞收集方法,研究运输条件及采集方式对卵母细胞体外成熟的影响。结果表明:温度... 详细信息

为了探索多浪羊卵母细胞体外成熟的影响因素,提高体外受精率,为多浪羊繁殖潜能的发挥提供基础,试验以屠宰场多浪羊卵巢为材料,采用不同运输条件及不同卵母细胞收集方法,研究运输条件及采集方式对卵母细胞体外成熟的影响。结果表明:温度为25~30℃时卵母细胞成熟率(49.4%)与20~25℃(52.9%)相比差异不显著(P>0.05),与30~38℃(23.2%)及4~10℃(35.7%)相比差异显著(P<0.05)。保存时间1~2 h的成熟率(49.1%)与保存时间2~3 h的成熟率(50.3%)相比差异不显著(P>0.05),保存时间6~8 h的成熟率(26.0%)显著低于保存时间1~2 h和2~3 h的成熟率(P<0.05)。切割法收集的卵母细胞数及体外成熟率均显著高于抽吸法(P<0.05)。卵巢在20~30℃条件下、1~3 h内运回畜牧科技重点实验室卵母细胞体外成熟率最高,而且切割法优于抽吸法。

关键词：多浪羊卵母细胞切割法抽吸法体外成熟率

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山羊痘病毒毒力因子KLP2的表达及多克隆抗体的制备

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中国畜牧兽医 2017年第10期44卷 2851-2857页

作者：李金娜宋书婷陈宏伟刘涛赵爱云李有文塔里木大学动物科学学院阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室阿拉尔843300

为了研究羊痘病毒(capripox virus),制备其毒力因子KLP2的多克隆抗体,试验采用基因同源重组的方法分别构建了羊痘病毒两个结构域(KLP2-1和KLP2-2)的原核表达载体并进行测序鉴定。提取质粒后转化大肠杆菌BL21感受态细胞并用IPTG诱导表达... 详细信息

为了研究羊痘病毒(capripox virus),制备其毒力因子KLP2的多克隆抗体,试验采用基因同源重组的方法分别构建了羊痘病毒两个结构域(KLP2-1和KLP2-2)的原核表达载体并进行测序鉴定。提取质粒后转化大肠杆菌BL21感受态细胞并用IPTG诱导表达,目的蛋白采用SDS-PAGE和Western blotting检测,并用KCl染色切胶纯化,纯化蛋白加弗氏佐剂免疫家兔,制备的抗体用Western blotting和ELISA检测评价。结果表明,试验成功构建了表达载体p ET42b-KLP2-1和p ET42b-KLP2-2,测序结果显示KLP2-1和KLP2-2基因大小分别为657和984 bp,分别表达了约27和38 ku的蛋白,与理论值相符。切胶纯化的蛋白浓度在1~2 mg/m L之间,制备的抗体用Western blotting检测发现,蛋白有明显的特异条带,ELISA检测抗体的效价均为1∶512。说明试验成功表达了KLP2-1、KLP2-2蛋白,制备了相应的多克隆抗体。

关键词：羊痘病毒 KLP2基因蛋白表达抗体制备

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