检索结果-内蒙古大学图书馆

家畜生态学报 2017年第2期38卷 18-21页

作者：陈荣刘利林格明古丽·木哈台王永塔里木大学动物科学学院新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室新疆阿拉尔843300

为了研究拜城油鸡盲肠细菌物种多样性,本研究采用基于16SrDNA基因序列系统发育分析的免培养方法进行细菌物种多样性分析,以盲肠内容物样品总DNA为模板,利用细菌通用引物扩增16SrDNA基因,构建16SrDNA基因克隆文库,并对文库中的插入序列进... 详细信息

为了研究拜城油鸡盲肠细菌物种多样性,本研究采用基于16SrDNA基因序列系统发育分析的免培养方法进行细菌物种多样性分析,以盲肠内容物样品总DNA为模板,利用细菌通用引物扩增16SrDNA基因,构建16SrDNA基因克隆文库,并对文库中的插入序列进行RFLP分析。结果表明:随机挑选的252个克隆为阳性克隆,阳性率为65.7%,经过RFLP筛选出95个不同图谱的重组克隆并测序,比对分析后发现:拜城油鸡盲肠细菌分属于厚壁菌门(Firmicutes)(65.26%)、拟杆菌门(Bacteroidetes)27.37%)和变形菌门(Proteobacteria)(4.21%)。在纲水平有梭菌纲(Clostridia)、拟杆菌纲(Bacteroidia)和ε-变形菌纲(Epsilonproteobacteria)相对含量最多,分别占总菌的64.21%、26.32%和4.21。在科水平上以瘤胃菌科(Ruminococcaceae)(21.05%)、毛螺菌科(Lachnospiraceae)(20%)和理研菌科(Rikenellaceae)(12.63%)相对含量最多,为优势科。在属水平上仅有31.58%的序列可以鉴定到属,Lachnoclostridium的相对含量最多,占总菌的12.63%,其次为另枝菌属(Alistipes)和瘤胃梭菌属(Ruminiclostridium)。拜城油鸡盲肠内容物中的细菌组成具有丰富的多样性,并有新细菌分类单位的潜在资源,值得进一步进行开发研究。

关键词：拜城油鸡盲肠细菌 16SrDNA 多样性

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新疆南疆绵羊泰勒虫病分子流行病学调查

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中国病原生物学杂志 2017年第11期12卷 1102-1104,1111页

作者：齐萌赵爱云王海国宋显明张宽宽郑毛亮井波陶大勇塔里木大学动物科学学院新疆阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室塔里木大学生命科学学院

目的了解新疆南疆绵羊的泰勒虫感染情况及其种类分布特征。方法基于泰勒虫通用引物和种特异性引物,采用PCR法检测该区域绵羊血液标本中的泰勒虫,并进行序列分析。结果 637份血液标本PCR检测泰勒虫阳性400份,总感染率为62.79%。其中,莎... 详细信息

目的了解新疆南疆绵羊的泰勒虫感染情况及其种类分布特征。方法基于泰勒虫通用引物和种特异性引物,采用PCR法检测该区域绵羊血液标本中的泰勒虫,并进行序列分析。结果 637份血液标本PCR检测泰勒虫阳性400份,总感染率为62.79%。其中,莎车县、英吉沙县和泽普县绵羊的泰勒虫感染率均为100%,不同采样点绵羊的泰勒虫感染率比较差异有统计学意义(χ~2=220.87,P<0.01);散养和圈养绵羊的泰勒虫感染率分别为72.62%(358/493)和29.17%(42/144),差异有统计学意义(χ~2=90.06,P<0.01);夏季和冬季绵羊的泰勒虫感染率分别为44.01%(125/284)和77.90%(275/353),差异有统计学意义(χ~2=90.06,P<0.01)。经种特异性引物PCR扩增和序列比对,400个泰勒虫阳性样品中,399个为绵羊泰勒虫,1个为环形泰勒虫,未检出尤氏泰勒虫和吕氏泰勒虫。结论新疆南疆绵羊的泰勒虫病流行严重,感染虫种主要为绵羊泰勒虫,应加强对该地区泰勒病的防控。

关键词：泰勒虫病流行病学绵羊新疆南疆

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苦马豆素单克隆抗体的制备与鉴定

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中国畜牧兽医 2017年第7期44卷 2155-2159页

作者：贾琦珍陈根元王连群亚森.麦麦提王帅塔里木大学动物科学学院新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室阿拉尔843300

本试验采用苦马豆素(swainsonine,SW)人工抗原SW-OVA免疫接种BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术建立了1株能稳定分泌SW单克隆抗体的杂交瘤细胞1F10,杂交瘤细胞染色体数目为45~50对。经间接ELISA检测,该株细胞培养上清中抗体效价为1∶25 600,诱... 详细信息

本试验采用苦马豆素(swainsonine,SW)人工抗原SW-OVA免疫接种BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术建立了1株能稳定分泌SW单克隆抗体的杂交瘤细胞1F10,杂交瘤细胞染色体数目为45~50对。经间接ELISA检测,该株细胞培养上清中抗体效价为1∶25 600,诱生腹水效价为1∶80 000。单克隆抗体的亚型为IgG1,亲和力解离常数为1.14×1010,腹水抗体纯化后纯度可达98%,回收率80%,SDS-PAGE凝胶电泳可见单克隆抗体的轻链、重链分子质量分别为25和50ku,Western blotting检测抗体能特异性的识别SW。其线性检测范围为4~128μg/mL(R2=0.9969),与BSA、明胶、多聚赖氨酸、α-甘露糖苷等无交叉反应。本试验制备的SW单克隆抗体为免疫学检测SW和免疫学防制家畜疯草中毒奠定基础。

关键词：苦马豆素单克隆抗体杂交瘤细胞间接ElISA

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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp2基因的克隆及序列分析

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黑龙江畜牧兽医 2017年第7期 178-181页

作者：宋显明艾东旭张晶李玮李莲瑞塔里木大学生命科学学院新疆阿拉尔843300 新疆兵团塔里木畜牧科技重点实验室新疆阿拉尔843300 塔里木大学动物科学学院新疆阿拉尔843300

猪繁殖与呼吸综合征（porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS）又称“猪蓝耳病”，是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）引发的猪的一种高度传染性疾病。根据PRRS致病性的不同，可将其分为低致病性（经典）猪繁殖与呼吸综合征（IJP—PRRS）和高致病性猪繁殖与呼吸综合征（HP—PRRS）。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒高致病性序列分析克隆基因 virus 传染性疾病猪蓝耳病

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小花棘豆中毒对家兔睾丸生精细胞凋亡的影响

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西南农业学报 2017年第1期30卷 209-214页

作者：王帅贾琦珍陈根元王连群张玲塔里木大学动物科学学院新疆阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室新疆阿拉尔843300

研究小花棘豆中毒对家兔睾丸生精细胞凋亡的影响,进一步探讨小花棘豆的中毒机理。将24只雄性家兔随机分为对照组和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,试验组分别按照Ⅰ组15%(苦马豆素含量30 mg/kg)、Ⅱ组30%(苦马豆素含量60 mg/kg)、Ⅲ组45%(苦马豆素含... 详细信息

研究小花棘豆中毒对家兔睾丸生精细胞凋亡的影响,进一步探讨小花棘豆的中毒机理。将24只雄性家兔随机分为对照组和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,试验组分别按照Ⅰ组15%(苦马豆素含量30 mg/kg)、Ⅱ组30%(苦马豆素含量60 mg/kg)、Ⅲ组45%(苦马豆素含量90 mg/kg)的比例添加小花棘豆,对照组仅饲喂苜蓿干草,试验期70 d。分别于攻毒后第14、35、70天每次每组随机采集2只家兔的睾丸,通过TUNEL法定位,Hoechst 33258荧光染色细胞核,流式细胞仪测定细胞凋亡率和细胞周期。从第35天开始,试验组家兔生精细胞凋亡率均极显著升高(P﹤0.01),表现为细胞膜下陷,细胞器浓缩,细胞核碎裂等,并出现凋亡小体。试验组家兔睾丸单倍体细胞和二倍体细胞凋亡率均极显著升高(P﹤0.01),但四倍体细胞数量无显著变化。与对照组相比,中毒家兔睾丸生精细胞G0/G1期数量升高,S期细胞数量降低,而且G1期与S期细胞数量呈显著的负相关。小花棘豆中毒可导致家兔睾丸组织生精细胞凋亡,且与小花棘豆毒性成分呈现一定的时间-剂量效应。

关键词：小花棘豆苦马豆素生精细胞细胞凋亡细胞周期

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山羊痘病毒毒力因子KLP2的表达及多克隆抗体的制备

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中国畜牧兽医 2017年第10期44卷 2851-2857页

作者：李金娜宋书婷陈宏伟刘涛赵爱云李有文塔里木大学动物科学学院阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室阿拉尔843300

为了研究羊痘病毒(capripox virus),制备其毒力因子KLP2的多克隆抗体,试验采用基因同源重组的方法分别构建了羊痘病毒两个结构域(KLP2-1和KLP2-2)的原核表达载体并进行测序鉴定。提取质粒后转化大肠杆菌BL21感受态细胞并用IPTG诱导表达... 详细信息

为了研究羊痘病毒(capripox virus),制备其毒力因子KLP2的多克隆抗体,试验采用基因同源重组的方法分别构建了羊痘病毒两个结构域(KLP2-1和KLP2-2)的原核表达载体并进行测序鉴定。提取质粒后转化大肠杆菌BL21感受态细胞并用IPTG诱导表达,目的蛋白采用SDS-PAGE和Western blotting检测,并用KCl染色切胶纯化,纯化蛋白加弗氏佐剂免疫家兔,制备的抗体用Western blotting和ELISA检测评价。结果表明,试验成功构建了表达载体p ET42b-KLP2-1和p ET42b-KLP2-2,测序结果显示KLP2-1和KLP2-2基因大小分别为657和984 bp,分别表达了约27和38 ku的蛋白,与理论值相符。切胶纯化的蛋白浓度在1~2 mg/m L之间,制备的抗体用Western blotting检测发现,蛋白有明显的特异条带,ELISA检测抗体的效价均为1∶512。说明试验成功表达了KLP2-1、KLP2-2蛋白,制备了相应的多克隆抗体。

关键词：羊痘病毒 KLP2基因蛋白表达抗体制备

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病鸽肝脏中阪崎肠杆菌的分离培养与鉴定

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黑龙江畜牧兽医 2017年第8期 198-200,295,296页

作者：宋显明艾东旭李玮宋书婷李莲瑞塔里木大学生命科学学院新疆阿拉尔843300 塔里木大学动物科学学院新疆阿拉尔843300 塔里木大学畜牧科技兵团重点实验室新疆阿拉尔843000

阪崎肠杆菌（Enterobacter sakazaii）是肠杆菌属的一种条件致病菌。近年来,对食品加工厂原料、生产环境及家庭中阪崎肠杆菌污染状况的研究发现,阪崎肠杆菌在自然界中分布广泛。1980年,Farmer等人在进行肠杆菌基因杂交研究时发现,阴沟... 详细信息

阪崎肠杆菌（Enterobacter sakazaii）是肠杆菌属的一种条件致病菌。近年来,对食品加工厂原料、生产环境及家庭中阪崎肠杆菌污染状况的研究发现,阪崎肠杆菌在自然界中分布广泛。1980年,Farmer等人在进行肠杆菌基因杂交研究时发现,阴沟肠杆菌与阪崎肠杆菌的基因杂交后,其色素与生化反应均有较大差别,因此将其从阴沟肠杆菌的菌属中分离出来,命名为阪崎肠杆菌。

关键词：阪崎肠杆菌阴沟肠杆菌肠杆菌属分离培养条件致病菌生化反应食品加工厂甘露醇发酵试验 Enterobacter 甲基红试验

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病鸽肠道中蜡样芽孢杆菌的分离及鉴定

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黑龙江畜牧兽医 2017年第6期 200-202,298页

作者：艾东旭李玮张晶宋显明李莲瑞塔里木大学生命科学学院新疆阿拉尔843300 塔里木大学动物科学学院新疆阿拉尔843300 塔里木畜牧科技兵团重点实验室新疆阿拉尔843300

1974年出版的第8版《伯杰氏鉴定细菌学手册》中，蜡样芽孢杆菌属于芽孢杆菌属的第1群，该群共包含22个种，包括常见的巨大芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌等¨也J。蜡样芽孢杆菌分布广泛，常见于土壤、灰尘和污水中，在植物性食品和许多... 详细信息

1974年出版的第8版《伯杰氏鉴定细菌学手册》中，蜡样芽孢杆菌属于芽孢杆菌属的第1群，该群共包含22个种，包括常见的巨大芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌等¨也J。蜡样芽孢杆菌分布广泛，常见于土壤、灰尘和污水中，在植物性食品和许多生熟食品中也常见，是一种好氧性、在厌氧情况下也可很好生长的革兰氏阳性杆菌。

关键词：蜡样芽孢杆菌鉴定苏云金芽孢杆菌芽孢杆菌属分离肠道病鸽巨大芽孢杆菌

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塔里木马鹿鹿茸VEGF基因克隆及其在不同鹿茸组织中的表达研究

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中国畜牧兽医 2017年第5期44卷 1289-1294页

作者：刘俊峰王晓婷钟婷郭雪峰新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室阿拉尔843300 塔里木大学动物科学学院阿拉尔843300

试验旨在从塔里木马鹿鹿茸顶端组织中克隆血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的编码序列,分析其分子特性及其在鹿茸组织中的表达情况。本研究采用改良的Trizol法提取鹿茸顶端组织总RNA,以RT-PCR方法获得VEGF基... 详细信息

试验旨在从塔里木马鹿鹿茸顶端组织中克隆血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的编码序列,分析其分子特性及其在鹿茸组织中的表达情况。本研究采用改良的Trizol法提取鹿茸顶端组织总RNA,以RT-PCR方法获得VEGF基因,回收纯化后连接到pMD18-T载体,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞并鉴定,利用免疫组化法确定VEGF蛋白在塔里木马鹿鹿茸顶端组织茸皮层、间充质层和软骨层中的表达水平。结果显示,VEGF基因开放读码框(ORF)全长为648bp,编码216个氨基酸。通过其序列比对和进化分析发现,塔里木马鹿茸中VEGF与人、牛、羊、猪的VEGF核苷酸序列同源性分别为98.75%、96.55%、97.58%和97.56%,其中与人VEGF同源性较高。免疫组化试验表明,塔里木马鹿VEGF蛋白在间充质、茸皮层和软骨中均有表达,但无明显表达差异。说明塔里木马鹿鹿茸可能会是人类研究再生医学和血管相关疾病的理想模型,同时,本研究为不同发育期塔里木马鹿鹿茸再生干细胞比较蛋白质组学研究提供了基础试验数据。

关键词：塔里木马鹿茸血管内皮生长因子克隆免疫组化

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新疆多浪羊pcDNA3.1-IL-1β表达载体的构建及鉴定

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黑龙江畜牧兽医 2017年第1期 102-106页

作者：张晶宋显明李玮艾东旭李莲瑞塔里木大学生命科学学院新疆阿拉尔843300 塔里木大学动物科学学院新疆阿拉尔843300 塔里木畜牧科技兵团重点实验室新疆阿拉尔843300

为了构建新疆多浪羊真核表达载体pc DNA3.1-IL-1β,试验采用重组质粒p MD-18TIL-1βPCR和质粒pc DNA3.1双酶切的方法,获得目的基因白细胞介素-1β(IL-1β)和载体片段pc DNA3.1(+),通过连接、转化宿主菌大肠杆菌DH5α感受态细胞,挑取阳... 详细信息

为了构建新疆多浪羊真核表达载体pc DNA3.1-IL-1β,试验采用重组质粒p MD-18TIL-1βPCR和质粒pc DNA3.1双酶切的方法,获得目的基因白细胞介素-1β(IL-1β)和载体片段pc DNA3.1(+),通过连接、转化宿主菌大肠杆菌DH5α感受态细胞,挑取阳性克隆,再通过菌液PCR和双酶切来验证阳性克隆,并测序。结果表明:试验已成功构建真核表达载体pc DNA3.1-IL-1β,完成了pc DNA3.1-IL-1β的菌液PCR和酶切鉴定。通过对IL-1β功能的了解,以及熟悉质粒提取和质粒连接的方法,完成重组质粒pc DNA3.1-IL-1β的构建。

关键词：真核表达载体构建质粒酶切鉴定白细胞介素-1 β(IL-1 β) 多浪羊

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