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Acta Genetica Sinica 2005年第1期32卷 46-51页

作者：林子清董玉贞张晓东王彤孙开来牛文友中国刑事警察学院法医学系沈阳110035 解放军第202医院妇产科沈阳110001 沈阳医学院生化和分子生物学教研室沈阳110042 中国医科大学医学遗传学教研室沈阳110001

为了解在皮肤损伤修复过程中白细胞介素 6 (Interlukin 6 ,IL 6 )对其他炎症因子基因表达的影响 ,以及对皮肤损伤修复过程的影响 ,用免疫组织化学染色法和RT PCR法 ,检查了IL 6基因敲除鼠 (IL 6 / 鼠 )和正常野生型鼠(IL 6 + / + 鼠 ... 详细信息

为了解在皮肤损伤修复过程中白细胞介素 6 (Interlukin 6 ,IL 6 )对其他炎症因子基因表达的影响 ,以及对皮肤损伤修复过程的影响 ,用免疫组织化学染色法和RT PCR法 ,检查了IL 6基因敲除鼠 (IL 6 / 鼠 )和正常野生型鼠(IL 6 + / + 鼠 )皮肤损伤后损伤区组织内不同时间的白细胞介素 1α(Interlukin 1α,IL 1α)、白细胞介素 1β(Interlukin 1β ,IL 1β)、角质细胞诱导因子 (Keratinocytechemoattractant,KC)、单核细胞诱导蛋白 1α (Macrophageinflammatoryprotein 1α ,MIP 1α)以及单核细胞诱导蛋白 2 (Macrophageinflammatoryprotein 2 ,MIP 2 )这 5种炎症因子的基因表达的变化。结果发现 :不论是IL 6 / 鼠还是IL 6 + / + 鼠 ,其被检因子的基因表达都以第 3d为高峰 ,第 6d则明显下降 ;同时 ,在损伤后的第 3d和第 6d ,IL 6 / 鼠的 5种因子的基因表达水平显著低于IL 6 + / + 鼠 ,而在损伤后的第 1d ,只有MIP 1α和KC的水平低于IL 6 + / + 鼠 ,而且 ,IL 6 / 鼠的皮肤损伤修复过程也稍迟于IL 6 + / + 鼠 ,但皮肤的损伤仍可完全修复。上述结果显示 ,IL 6在小鼠皮肤损伤过程中诱导其他 5种被检因子的产生 ,从而促进皮肤损伤的修复 ,但IL

关键词：白细胞介素-6 基因敲除鼠炎症因子皮肤损伤基因表达

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良性家族性婴儿惊厥和阵发性运动障碍综合征基因位点异质性:5个家系的研究(英文)

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中国临床康复 2005年第7期9卷 238-240页

作者：周军卫李晓文黄希顺陈辉宋国英魏建科卢宏郑州大学医学院细胞生物学医学遗传学教研室河南省郑州市450052 郑州大学第一附属医院神经内科河南省郑州市450052

背景:良性家族性婴儿惊厥(benignfamilialinfantileconvulsion,BFIC)疾病基因定位研究主要在西方国家进行,尽管现在已经报道了3个染色体位点与疾病基因连锁,但直到目前疾病基因仍未被找到和证实。要最终克隆BFIC疾病基因首先要对BFIC疾... 详细信息

背景:良性家族性婴儿惊厥(benignfamilialinfantileconvulsion,BFIC)疾病基因定位研究主要在西方国家进行,尽管现在已经报道了3个染色体位点与疾病基因连锁,但直到目前疾病基因仍未被找到和证实。要最终克隆BFIC疾病基因首先要对BFIC疾病基因进行定位和位点异质性研究。目的:研究BFIC家系的疾病基因与BFIC位点的连锁关系并检测是否存在疾病基因位点异质性。设计:以5个BFIC家系成员的基因型为研究对象,回顾性观察对比研究。单位:一所大学的细胞生物学与医学遗传学研究室。对象:本研究于2001-07月/2003-07在郑州大学医学院细胞生物学与医学遗传学教研室完成。共采集5个BFIC家系(图1-5),分别来自河南省新乡、南阳、周口、鹤璧四地区,受试者共70例,其中BFIC患者28例,非BFIC患者42例。纳入标准:①符合国际抗癫痫联盟颁布的癫痫发作分类的标准确诊者;排除标准:脑电图、脑CT、磁共振检测结果有异常以及有中毒、脑外伤病史者。方法:应用聚合酶链反应(PCR)、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染技术得到家系成员的基因型。从BFIC家系成员外周血中抽提DNA,选择D19S245,D19S250,D16S3131,D16S3133,D2S399和D2S2330等6个基因短片段重复序列(STR)作为DNA标记,检测家系成员的基因型。将基因型信息输入计算机由LINKAGE软件包?

关键词：惊厥连锁(遗传学) 遗传标记基因型

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纳米粒子载体携带反义转化生长因子-β1基因的局部定位转染对大鼠自体移植静脉内膜增生的影响

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中华实验外科杂志 2005年第6期22卷 654-656,i001页

作者：孙达欣张强郎晓讴宗志红陈玉祥中国医科大学第一临床学院血管外科沈阳110001 中国医科大学基础医学院生化教研室中南大学医学遗传学国家重点实验室

目的探讨纳米粒子携带反义转化生长因子(TGF-)β1局部定位转染对大鼠自体移植静脉内膜增生的影响。方法45只大鼠制成自体静脉移植模型后,分成纳米粒子DNA组、纳米粒子空载体组和生理盐水对照组,进行局部定位转染,2周后观察移植静脉内膜... 详细信息

目的探讨纳米粒子携带反义转化生长因子(TGF-)β1局部定位转染对大鼠自体移植静脉内膜增生的影响。方法45只大鼠制成自体静脉移植模型后,分成纳米粒子DNA组、纳米粒子空载体组和生理盐水对照组,进行局部定位转染,2周后观察移植静脉内膜的变化,应用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)、Westernblot以及免疫组织化学等方法检测反义基因对内源性TG-Fβ1表达的影响。结果基因转染后两周,内膜厚度为(20.5±4.7)μm,明显小于两个对照组(P<0.01)。RTPCR和Westernblot结果表明,基因转染组的TGF-β1mRNA和蛋白的表达明显低于空载体组及生理盐水对照组。结论纳米粒子可有效地作为基因的转移载体;纳米粒子携带反义TGF-β1可以减少内源性TGF-β1基因的表达,抑制细胞外基质(ECM)的合成,从而达到抑制内膜增生的目的。

关键词：纳米粒子载体反义转化生长因子-β1 基因转染大鼠血管内膜增生静脉移植

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PTD-BCR/ABL-OD融合癌蛋白的表达和跨膜转运

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中华血液学杂志 2005年第6期26卷 373-374页

作者：梁英民叶盛开贾洪霞林媛蒋姗姗吴绒丽周鹏杨曦张萍李军锋李军林韩骅第四军医大学唐都医院血液科西安710038 第四军医大学口腔医学院牙体病科第四军医大学医学遗传学与发育生物学教研室

寡聚化结构域(oligomerization domain,OD)是BCR/ABL融合蛋白N端的一个重要结构域,是2个单体通过N末端螺旋易位,然后在C末端螺旋间形成反向卷曲折叠形成二聚体,进而互相叠套形成四聚体.在几种不同类型的Ph染色体阳性的慢性粒细胞白血病(... 详细信息

寡聚化结构域(oligomerization domain,OD)是BCR/ABL融合蛋白N端的一个重要结构域,是2个单体通过N末端螺旋易位,然后在C末端螺旋间形成反向卷曲折叠形成二聚体,进而互相叠套形成四聚体.在几种不同类型的Ph染色体阳性的慢性粒细胞白血病(CML)患者中可以观察到这种四聚体的形成,它能介导BCR/ABL融合蛋白多聚体的形成,进而使无活性的ABL蛋白的酪氨酸激酶活化[1,2].因此,如果能够利用外源性的OD结构域蛋白干预内源性蛋白的聚合,从而达到抑制BCR/ABL蛋白激酶活化的作用.我们在以前工作的基础上,采用PCR扩增OD区基因片段,并在其N端融合蛋白转导结构域(PTD)基因后,构建原核表达载体,然后在大肠杆菌中进行表达.纯化表达的融合蛋白,并加入到培养的K562细胞中,对OD结构域蛋白在细胞中的作用进行了初步探讨。

关键词： PTD—BCR ABL—OD 癌蛋白表达跨膜转运

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中国宁夏回族人群15个人类短串联重复序列位点的遗传多态性研究

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检验医学 2005年第6期20卷 562-564页

作者：邓文国何蕴韶高建中杨宝珍马瑞霞金仁晶江梅华王一鸣曾瑞萍中山大学医学遗传学教研室广东广州510089 中山大学达安基因诊断中心广东广州510089 宁夏医学院附属医院耳鼻喉科宁夏银川750004

目的研究宁夏回族人群15个人类短串联重复序列位点(STR) D3S1358、THO1、D21S11、D18S51、vWA、CSF1PO、D8S1179、TPOX、FGA、D5S818、D13S317、D7S820、D16S539、D19S433、D2S1338的遗传多态性.方法通过STR复合扩增、基因扫描、基因分型调查了102名回族无关个体15个STR位点等位基因分布情况.结果 15个STR位点均符合Hardy-Weinberg平衡,共检出150个STR等位基因,其频率分布在0.004 9～0.553 9之间,杂合度(H)为0.625 5～0.865 4,个体识别力(DP)为0.834 7～0.960 6,非父排除率(EPP)为0.381 2～0.720 4,多态信息含量(PIC)为0.572 2～0.845 6.结论此研究为进一步研究中国回族STR遗传结构奠定了基础,在人类学、法医学等领域也有重要的应用价值.

关键词：短串联重复序列位点遗传多态性基因扫描

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吲哚乙酸与辣根过氧化物酶对BXPC-3细胞凋亡的影响

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第四军医大学学报 2005年第15期26卷 1378-1381页

作者：刘利英宋土生黄辰杨玲罗禹倪磊司履生西安交通大学医学院生物暨医学遗传学教研室陕西西安710061 西安交通大学医学院环境与疾病相关基因教育部重点实验室陕西西安710061 西安交通大学医学院生命科学与技术学院免疫病理实验室陕西西安710061

目的:探讨吲哚乙酸(IAA)联合辣根过氧化物酶(HRP)对BXPC3细胞凋亡及自由基表达的影响.方法:台盼蓝(曲利本兰)排斥试验,研究IAA/HRP对BXPC3细胞死亡率的影响;原位细胞凋亡检测法检测细胞凋亡;生化法检测细胞内SOD,MDA的含量;激光共聚焦... 详细信息

目的:探讨吲哚乙酸(IAA)联合辣根过氧化物酶(HRP)对BXPC3细胞凋亡及自由基表达的影响.方法:台盼蓝(曲利本兰)排斥试验,研究IAA/HRP对BXPC3细胞死亡率的影响;原位细胞凋亡检测法检测细胞凋亡;生化法检测细胞内SOD,MDA的含量;激光共聚焦显微镜检测细胞内的自由基含量.结果:与对照组相比,IAA/HRP组的细胞凋亡数增加,而且随着IAA浓度的增大,细胞凋亡数存在上升的趋势;SOD活性和MDA含量在IAA/HRP组中均明显升高;对照组的自由基含量比IAA/HRP组明显降低,且自由基的含量具有浓度和时间依赖性.结论:IAA联合HRP诱导自由基产生是诱发人胰腺癌BXPC3细胞凋亡的可能机制之一.

关键词：吲哚乙酸辣根过氧化物酶 BXPC-3 细胞自由基凋亡

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EGFR基因重组T7噬菌体疫苗抗Lewis肺癌的实验研究

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实验生物学报 2005年第6期38卷 481-489页

作者：曾宪卓刘岽唐亮周彩存谈立松蔡新华李晓文周军年张培德张尚权郑州大学医学院细胞生物学与医学遗传学教研室郑州450052 上海市肺科医院肺癌免疫研究室上海200433 复旦大学生命科学学院生物化学系上海200433 中国科学院上海生物化学与细胞生物学研究所上海200031

本研究中制备了表达表皮生长因子受体(EGFR)部分肽段的基因重组T7噬菌体疫苗,并开展了诱导小鼠产生内源性抗EGFR抗体的实验性抗肿瘤作用研究。由T7噬菌体展示系统将7个经筛选的异种属(人源、鸡源)EGFR膜外区片段展示在其壳体次要头蛋白(... 详细信息

本研究中制备了表达表皮生长因子受体(EGFR)部分肽段的基因重组T7噬菌体疫苗,并开展了诱导小鼠产生内源性抗EGFR抗体的实验性抗肿瘤作用研究。由T7噬菌体展示系统将7个经筛选的异种属(人源、鸡源)EGFR膜外区片段展示在其壳体次要头蛋白(P10B)上,用所制备的基因重组噬茵体疫苗免疫小鼠,免疫4W后皮下接种Lewis肺癌细胞,10d后分离瘤体并称重,观察各实验组的抗肿瘤效果。Western Blot检测重组的融合壳蛋白均有EGFR抗原性:高表达EGFR的A431 细胞与免疫3W的小鼠抗血清结合并被荧光二抗标记,流式细胞仪检测法确认有抗EGFR抗体产生;各实验组肿瘤均重统计结果显示,P-CL1-670组、P-cp1-130组、P-cp2-136组、P-cp3-145组、 P-cp4-142组与空白噬菌体组差异性显著。说明表达EGFR的基因重组噬菌体疫苗诱导产生的内源性抗体．在一定程度上抑制了EGFR阳性肿瘤的生长．为诱导型内源性抗EGFR抗体的肿瘤靶向治疗研究开辟了新的途径。

关键词：表皮生长因子受体噬菌体疫苗肿瘤治疗

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人唾液腺肿瘤PLAG1转基因小鼠模型建立及其基因表达研究

人唾液腺肿瘤PLAG1转基因小鼠模型建立及其基因表达研究

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第四届中国国际暨第七次全国口腔颌面外科学术会议

作者：杨雯君赵旭东张陈平王铸钢附属第九人民医院口腔颌面外科上海交通大学医学院医学遗传学教研室附属第九人民医院口腔颌面外科上海交通大学医学院医学遗传学教研室

目的克隆人PLAGI 基因,构建PLAG1组织非特异性和特异性表达载体,并建立PLAG1转基因小鼠模型,研究PLAG1基因的高表达与唾液腺肿瘤发生的关系。材料与方法取PLAG1高表达的瘤组织或正常胎盘组织,提取总RNA,RT-PCR 扩增获得PLAG1 cDNA 全部... 详细信息

目的克隆人PLAGI 基因,构建PLAG1组织非特异性和特异性表达载体,并建立PLAG1转基因小鼠模型,研究PLAG1基因的高表达与唾液腺肿瘤发生的关系。材料与方法取PLAG1高表达的瘤组织或正常胎盘组织,提取总RNA,RT-PCR 扩增获得PLAG1 cDNA 全部编码框序列。将PLAG1分别克隆至pCMV-EGFP 和pMMTV-EGFR-stop 载体获得pCMV-EGFP/PLAG1和pMMTV-PLAG1表达载体。用pCMV-EGFP/PLAG1瞬时转染NIH3T3细胞以观察融合基因的表达及PLAG1 的细胞内定位。经显微注射分别获得pCMV-EGFP/PLAG1和pMMTV-PLAG1转基因小鼠。结果从不同组织来源的RNA 克隆的PLAG1 cDNA 经测序后发现与GenBank 中的PLAG1基因（GenBank No.U65002）比较有一多态性位点,相应氨基酸由苏氨酸变为脯氨酸。构建的组织非特异性表达载体pCMV-EGFP/PLAG1 和组织特异性表达载体pMMTV-PLAG1经酶切和测序鉴定,证实PLAG1序列及插入方向正确。用pCMV-EGFP/PLAG1转染NIH3T3细胞,在细胞水平证明PLAG1的表达及其在细胞核的定位。两种表达载体分别经显薇注射,获得了多个转基因阳性小鼠（Founders,G代）,经交配繁育,建立了相应的转基因小鼠模型。转基因的表达分别经RT-PCR 和Northern 杂交证实。表型观察发现pMMTV-PLAG1转基因小鼠系M42在出生后3个月内,100%的阳性小鼠发生唾液腺肿瘤。结论从多个肿瘤标本及正常胎盘组织克隆的PLAG1基因在同一位置与GenBank 中的相应序列相比,发现相同的核苷酸变异,说明这种核苷酸的变异并非由肿瘤组织内的基因突变或PCR 错配所致。可能是一个单核苷酸多态性（SNP）位点。PLAG1在细胞内定位于细胞核,符合转录因子的细胞核分布规律。PLAG1转基因小鼠的表型提示该基因的高表达与唾液腺肿瘤的发生密切相关。

关键词：多形性腺瘤基因1(PLAG1) 转基因小鼠唾液腺肿瘤

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Mahoganoid基因的研究进展

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国外医学（计划生育分册） 2005年第6期24卷 277-280页

作者：朱元熊承良沈士亮华中科技大学同济医学院计划生育研究所 430030 美国斯坦福大学医学遗传学教研室 94305

近年来,常染色体隐性基因Mahoganoid已成为科学家的研究热点之一。该基因编码蛋白Md具有特征的C3HC4RING结构域,基于这一结构,认为该蛋白可能是作为一种E3泛肽连接酶起作用。Mahoganoid基因在生物体内广泛分布,并具有多个等位基因,在色... 详细信息

近年来,常染色体隐性基因Mahoganoid已成为科学家的研究热点之一。该基因编码蛋白Md具有特征的C3HC4RING结构域,基于这一结构,认为该蛋白可能是作为一种E3泛肽连接酶起作用。Mahoganoid基因在生物体内广泛分布,并具有多个等位基因,在色素形成,体质量控制,神经系统退行性变及生殖系统方面都发挥重要的生理和病理作用。介绍Mahoganoid基因特点、基因表达、基因功能及分子作用机理。为以后的课题研究提供方向。

关键词： Mahoganoid(Md)基因功能基因突变发生机制 id基因基因编码蛋白分子作用机理隐性基因常染色体生物体内

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半定量RT-PCR检测人唾液腺肿瘤PLAG1表达水平

半定量RT-PCR检测人唾液腺肿瘤PLAG1表达水平

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第四届中国国际暨第七次全国口腔颌面外科学术会议

作者：杨雯君赵旭东张陈平王铸钢上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔颌面外科上海交通大学医学院医学遗传学教研室上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔颌面外科上海交通大学医学院医学遗传学教研室

目的通过半定量RT-PCR 方法,定量检测PLAGI 基因在人唾液腺肿瘤及相应的肿瘤旁正常唾液腺组织中的表达水平,了解PLAG1基因与人唾液腺肿瘤尤其是良性肿瘤的关系。材料和方法1.收集术中新鲜唾液腺肿瘤及瘤旁正常唾液腺组织标本共40对为实... 详细信息

目的通过半定量RT-PCR 方法,定量检测PLAGI 基因在人唾液腺肿瘤及相应的肿瘤旁正常唾液腺组织中的表达水平,了解PLAG1基因与人唾液腺肿瘤尤其是良性肿瘤的关系。材料和方法1.收集术中新鲜唾液腺肿瘤及瘤旁正常唾液腺组织标本共40对为实验组;舌癌及其癌旁正常组织1对,胎盘及脐带组织1对,共2对,作为对照组。分别取800ng 总RNA,35个循环,行RT-PCR。将GAPDH 持家基因作为内参照;***-PCR 法扩增人PLAGI cDNA 序列,克隆人pGEM-T easy 载体,酶切鉴定正确后用双链四色荧光标记法测序。结果1.应用半定量RT-PCR 方法,检测了在不同的组织中PLAG1表达情况。研究表明:唾液腺肿瘤PLAG1表达率为70%。其中,良性唾液腺肿瘤PLAG1表达率为84.38%(27/32),多形性腺瘤更是高达89.2%(25/28);而恶性唾液腺肿瘤PLAG1表达率仅为12.5%(1/8)。每个唾液腺肿瘤的瘤旁正常腺体组织均未检及PLAC1表达。1例胎盘组织表达PLAG1,而舌癌组织未及表达;2.对6例中国汉族人标本中PLAG1 cDNA测序发现:PLAG1编码序列1372bp 处发生A→C 点突变。结论1.半定量RT-PCR 方法对不同的唾液腺肿瘤及瘤旁正常腺体组织中PLAG1表达情况检测结果进一步提示:PLAG1的激活和表达与唾液腺肿瘤尤其是良性唾液腺肿瘤的发生有一定的相关性;2.发生于PLAG1编码序列1372bp 处A→C 点突变可能为中国汉族人PLAG1 的一个多态性位点。

关键词： PLAG1 唾液腺肿瘤半定量RT-PCR

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