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中国畜牧杂志 2022年第6期58卷 149-154页

作者：张继虎隋志远李庆瑾张志帅邢凤塔里木大学动物科学学院新疆阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室新疆阿拉尔843300

本研究旨在克隆多浪羊GnRHR(Gonadotropin Releasing Hormone Receptor,GnRHR)基因编码区,并用得到的CDS序列进行生物信息学分析,同时测定与繁殖相关组织中GnRHR基因的表达情况。利用RT-PCR和TA克隆的方法获得多浪羊GnRHR基因的编码区域... 详细信息

本研究旨在克隆多浪羊GnRHR(Gonadotropin Releasing Hormone Receptor,GnRHR)基因编码区,并用得到的CDS序列进行生物信息学分析,同时测定与繁殖相关组织中GnRHR基因的表达情况。利用RT-PCR和TA克隆的方法获得多浪羊GnRHR基因的编码区域,采用实时荧光定量PCR方法检测GnRHR基因在多浪羊初情期前、初情期和初情期后下丘脑、垂体、子宫、卵巢和输卵管5种组织的表达情况。本研究成功克隆获得多浪羊GnRHR基因编码区域。多浪羊GnRHR基因CDS序列长987 bp,编码328个氨基酸,与绵羊的同源性最高;对该序列进行生物信息学分析显示该蛋白分子式为C_(1762)H_(2696)N_(432)O_(446)S_(20);理论等电点(pI)为9.39;不稳定指数为32.51,为稳定疏水性蛋白;具有7个跨膜区域;二级结构主要为α-螺旋及无规则卷曲。荧光定量PCR检测到多浪羊GnRHR基因在初情期及初情期前后3个时期5种组织均有表达,垂体和卵巢高表达;初情期时垂体相对表达量极显著高于初情期前及初情期后。本研究结果为进一步深入了解GnRHR基因在绵羊初情期启动过程中发挥的作用及其具体功能提供依据。

关键词：多浪羊 GnRHR 克隆组织表达生物信息学分析

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多浪羊和卡拉库尔羊卵巢促卵泡素受体的定位研究

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新疆农业科学 2014年第5期51卷 957-962页

作者：王惠娥汪澜王艳萍马奎塔里木大学动物科学学院新疆阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室新疆阿拉尔843300

【目的】探讨多浪羊和卡拉库尔羊卵巢组织中FSHR基因表达变化规律。【方法】采用免疫组织化学SP方法对两种绵羊卵巢组织上FSHR进行定位研究。【结果】FSHR阳性细胞主要表达在颗粒细胞上,在卵母细胞和膜细胞上也有少量表达,两地方品种绵... 详细信息

【目的】探讨多浪羊和卡拉库尔羊卵巢组织中FSHR基因表达变化规律。【方法】采用免疫组织化学SP方法对两种绵羊卵巢组织上FSHR进行定位研究。【结果】FSHR阳性细胞主要表达在颗粒细胞上,在卵母细胞和膜细胞上也有少量表达,两地方品种绵羊卵巢上原始卵泡和闭锁卵泡时期表达差异不显著(P>0.05),而在初级卵泡、次级卵泡时期和成熟卵泡上表达差异显著(P<0.05);对同种绵羊分析时又发现原始卵泡与其他卵泡之间FSHR阳性细胞表达差异显著(P<0.05),成熟卵泡时期阳性细胞表达显著(P<0.05)高于初级和次级卵泡。闭锁卵泡是阳性细胞率与其他各级卵泡差异极显著(P<0.01)。【结论】推测出多浪羊对FSH的敏感性高于卡拉库尔羊,表明FSHR含量越高繁殖率越高。FSHR可能也参与其他因子的调控。

关键词：多浪羊卡拉库尔羊促卵泡素受体免疫组织化学染色方法

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棉秆纤维素降解复合菌系的筛选及其分解特性研究

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新疆农业科学 2012年第1期49卷 185-189页

作者：吴书奇史卉玲席琳乔张玲马春晖塔里木大学动物科技学院新疆阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室新疆阿拉尔843300

【目的】从自然环境中筛选降解棉秆的纤维素分解复合菌系,以降解棉秆中的纤维素。【方法】采用PCS培养基,从牛粪、土壤、羊的瘤胃液和发酵粪中筛选纤维素分解复合菌系,通过连续继代培养,获得相对稳定的复合菌系,再获得粗酶液,测定三种酶... 详细信息

【目的】从自然环境中筛选降解棉秆的纤维素分解复合菌系,以降解棉秆中的纤维素。【方法】采用PCS培养基,从牛粪、土壤、羊的瘤胃液和发酵粪中筛选纤维素分解复合菌系,通过连续继代培养,获得相对稳定的复合菌系,再获得粗酶液,测定三种酶活(CMC、FPA、纤维二糖酶)和酶解效果。【结果】牛粪的降解纤维素复合系,酶活分别为CMC 11.95 U/mL、FPA 8.29 U/mL、纤维二糖酶11.03 U/mL,产酶动态变化在4～5 d酶活性比较高,确定发酵周期为5 d,pH值先上升后下降,在发酵的4～5 d,pH值相对较高,以后开始下降,维持稳定,呈现弱碱性。【结论】来自牛粪的纤维素降解菌降解能力最强,降解棉花秸秆效果较好,棉秆失重率为18%,糖化率为19.39%。

关键词：棉秆纤维素降解复合菌系酶活糖化作用

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体外法研究添加不同比例葡萄籽对多浪羊瘤胃发酵及底物降解的影响

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中国畜牧杂志 2020年第5期56卷 136-142页

作者：彭婉婉许贵善马忠杰张皙藤鸟鹏颖塔里木大学动物科学学院新疆阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室新疆阿拉尔843300

试验旨在研究添加不同比例葡萄籽对多浪羊瘤胃发酵指标和瘤胃饲料降解率的影响。在全价日粮中添加不同比例的葡萄籽(0%、4%、8%、12%、16%、20%、24%、28%),采用体外产气监测系统记录各比例饲料的48 h产气量,收集发酵液测定pH、氨态氮(N... 详细信息

试验旨在研究添加不同比例葡萄籽对多浪羊瘤胃发酵指标和瘤胃饲料降解率的影响。在全价日粮中添加不同比例的葡萄籽(0%、4%、8%、12%、16%、20%、24%、28%),采用体外产气监测系统记录各比例饲料的48 h产气量,收集发酵液测定pH、氨态氮(NH3-N)和菌体蛋白(MCP)浓度;运用体外尼龙袋法分析各比例饲料的营养物质降解率及发酵液pH、NH3-N浓度变化。结果表明:随着葡萄籽添加比例的增加,发酵液pH升高,产气量先增长后减少,16%添加组48 h潜在产气量高于0%添加组(P<0.05);0%、4%和8%添加组MCP浓度高于其余各组(P<0.05),16%添加组NH3-N浓度低于0%添加组(P<0.05);尼龙袋试验中,添加16%以上的葡萄籽降低了干物质和粗蛋白质的有效降解率(P<0.05);全价日粮中添加8%~16%的葡萄籽可以提高饲料的产气量,但16%以上的葡萄籽降低了营养物质降解率,使瘤胃pH升高。综上,绵羊日粮中葡萄籽的适宜添加范围为8%~12%。

关键词：体外产气葡萄籽单宁体外发酵降解率

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萨能奶山羊胎儿成纤维细胞miRNA文库的构建及生物信息学分析

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中国畜牧兽医 2020年第11期47卷 3436-3444页

作者：常卫华王娟红崔子龙塔里木大学动物科学学院阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室阿拉尔843300

本试验旨在丰富山羊miRNA文库,并探讨miRNAs在胎儿成纤维细胞生长调控中的作用。试验以萨能奶山羊胎儿成纤维细胞为研究对象,运用Illumina高通量测序和生物信息学技术分析山羊胎儿成纤维细胞miRNAs表达。成功构建了萨能奶山羊胎儿成纤... 详细信息

本试验旨在丰富山羊miRNA文库,并探讨miRNAs在胎儿成纤维细胞生长调控中的作用。试验以萨能奶山羊胎儿成纤维细胞为研究对象,运用Illumina高通量测序和生物信息学技术分析山羊胎儿成纤维细胞miRNAs表达。成功构建了萨能奶山羊胎儿成纤维细胞miRNAs的cDNA文库,获得16395039 total reads,去除冗余数据后获得16150181条clean reads,其中unique sRNAs 205857条。生物信息学分析获得候选新miRNAs 247条,候选miRNAs靶基因8401个,靶基因位点数10832个;同时分析发现候选miRNAs首位碱基对U和A具有偏向性。GO注释表明,69.6%的基因与细胞和细胞组分相关,超过54.1%的基因参与了细胞器相关活动,多达65.0%的基因与细胞及细胞过程相关联。KEGG通路分析显示,约10.5%的基因与代谢通路有关,是占比最多的一条通路,数据显示miRNAs对胎儿成纤维细胞具有重要调控作用。试验结果为胎儿成纤维细胞的生长调控及奶山羊乳腺生物反应器中供核体细胞miRNAs深入研究提供参考。

关键词：胎儿成纤维细胞 miRNA 高通量测序 GO注释 KEGG通路

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日粮能氮比对塔里木马鹿瘤胃体外发酵的影响

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中国畜牧兽医 2019年第6期46卷 1619-1627页

作者：贾存辉钱文熙吐尔逊阿依·赛买提古力皮叶木·阿布都克然木敖维平塔里木大学动物科学学院阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室阿拉尔843300

为了解塔里木马鹿对低质粗饲料的适应机理,试验探讨了RDN/DOM对其瘤胃发酵指标的影响,旨在科学有效地利用粗饲料,提高塔里木马鹿养殖经济效益。试验根据以瘤胃尼龙袋法对饲料原料降解特性(有机物和粗蛋白质的有效降解率)研究的结果,在... 详细信息

为了解塔里木马鹿对低质粗饲料的适应机理,试验探讨了RDN/DOM对其瘤胃发酵指标的影响,旨在科学有效地利用粗饲料,提高塔里木马鹿养殖经济效益。试验根据以瘤胃尼龙袋法对饲料原料降解特性(有机物和粗蛋白质的有效降解率)研究的结果,在相同营养水平下,设计了8个等距离能氮释放梯度不同(RDN/DOM为15~29)的试验日粮作为发酵底物,利用体外消化试验,检测各组发酵液pH、氨态氮(NH3-N)浓度、总挥发性脂肪酸(TVFA)含量和微生物蛋白质(MCP)含量。结果表明,以RDN/DOM=19的配合饲料作为培养底物进行体外产气试验时,12 h时,MCP含量显著高于其他时间点(P<0.05),因此最终培养时间确定为12 h;RDN/DOM=23时,体外培养液NH3-N浓度最低(8.34 mg/dL),MCP合成量(11.76 mg/dL)、TVFA含量(71.24 mmol/dL)和乙酸/丙酸(2.79)均最高。综上,在本试验条件下,塔里木马鹿最适宜RDN/DOM为23,这对后续研究塔里木马鹿日粮能氮释放同步性指数(SI)提供了重要依据,为进一步研究塔里木马鹿氮代谢规律提供了数据支撑。

关键词：塔里木马鹿体外产气法能氮比微生物蛋白(MCP) 瘤胃发酵

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小花棘豆中毒对家兔睾丸生精细胞凋亡的影响

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西南农业学报 2017年第1期30卷 209-214页

作者：王帅贾琦珍陈根元王连群张玲塔里木大学动物科学学院新疆阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室新疆阿拉尔843300

研究小花棘豆中毒对家兔睾丸生精细胞凋亡的影响,进一步探讨小花棘豆的中毒机理。将24只雄性家兔随机分为对照组和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,试验组分别按照Ⅰ组15%(苦马豆素含量30 mg/kg)、Ⅱ组30%(苦马豆素含量60 mg/kg)、Ⅲ组45%(苦马豆素含... 详细信息

研究小花棘豆中毒对家兔睾丸生精细胞凋亡的影响,进一步探讨小花棘豆的中毒机理。将24只雄性家兔随机分为对照组和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,试验组分别按照Ⅰ组15%(苦马豆素含量30 mg/kg)、Ⅱ组30%(苦马豆素含量60 mg/kg)、Ⅲ组45%(苦马豆素含量90 mg/kg)的比例添加小花棘豆,对照组仅饲喂苜蓿干草,试验期70 d。分别于攻毒后第14、35、70天每次每组随机采集2只家兔的睾丸,通过TUNEL法定位,Hoechst 33258荧光染色细胞核,流式细胞仪测定细胞凋亡率和细胞周期。从第35天开始,试验组家兔生精细胞凋亡率均极显著升高(P﹤0.01),表现为细胞膜下陷,细胞器浓缩,细胞核碎裂等,并出现凋亡小体。试验组家兔睾丸单倍体细胞和二倍体细胞凋亡率均极显著升高(P﹤0.01),但四倍体细胞数量无显著变化。与对照组相比,中毒家兔睾丸生精细胞G0/G1期数量升高,S期细胞数量降低,而且G1期与S期细胞数量呈显著的负相关。小花棘豆中毒可导致家兔睾丸组织生精细胞凋亡,且与小花棘豆毒性成分呈现一定的时间-剂量效应。

关键词：小花棘豆苦马豆素生精细胞细胞凋亡细胞周期

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甜高粱与苜蓿混合青贮对肉羊消化道组织形态的影响

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饲料工业 2021年第7期42卷 54-60页

作者：王娇杨宝钰阿依古丽·艾买尔张苏江新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室新疆阿拉尔843300 塔里木大学动物科学学院新疆阿拉尔843300

试验旨在研究不同比例甜高粱与苜蓿混合青贮对肉羊消化道组织形态的影响。选用体况良好,年龄、体重(25.95±1.37)kg相近的30只卡拉库尔羊作为试验动物,随机分为5组,每组6只羊。在基础饲粮一致的情况下,试验动物分别饲喂甜高粱与苜... 详细信息

试验旨在研究不同比例甜高粱与苜蓿混合青贮对肉羊消化道组织形态的影响。选用体况良好,年龄、体重(25.95±1.37)kg相近的30只卡拉库尔羊作为试验动物,随机分为5组,每组6只羊。在基础饲粮一致的情况下,试验动物分别饲喂甜高粱与苜蓿比为100.0(SS100),80.20(SS80),60.40(SS60),40.60(SS40),20.80(SS20)的混合青贮。3个月的饲养试验结束后进行屠宰,制作石蜡切片,测定卡拉库尔羊消化道的组织形态学指标。结果:(1)SS40组宰前活重及瘤胃重/复胃重显著高于SS80组和SS100组(P<0.05);各组间复胃指数无显著差异(P>0.05)。(2)随着混合青贮中苜蓿比例的增加,瘤胃黏膜下层厚及网胃肌层厚度呈先升高后降低的二次曲线趋势(P<0.05);网、瓣胃角质层厚度呈线性下降趋势(P<0.05),SS20组显著低于SS100组(P<0.05);瘤、网胃乳头高度、固有膜宽度、瓣胃肌层厚及皱胃黏膜厚、黏膜下层厚呈线性升高趋势(P<0.05)。(3)随着混合青贮中苜蓿比例的增加,小肠段的绒毛高度呈线性升高趋势(P<0.05),SS100组显著低于SS60、SS40组和SS20组(P<0.05);SS40组回肠V/C值显著高于SS80组和SS100组(P<0.05);小肠段的隐窝深度、黏膜厚度、肌层厚度在各组间无显著差异(P>0.05)。结果表明,甜高粱与苜蓿比为60.40,40.60及20.80的混合青贮,更有利于肉羊复胃及小肠的发育,可促进养分的吸收。

关键词：甜高粱苜蓿混合青贮消化道组织形态

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绵羊肺炎支原体核糖体蛋白30S rpsE基因的原核表达及多克隆抗体的制备

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畜牧与兽医 2024年第7期56卷 78-84页

作者：刘晓艳王永飞邓博文哈尔勒哈·阿曼太蔡江李有文塔里木大学动物科学与技术学院新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技兵团重点实验室新疆阿拉尔843300 新疆生产建设兵团南疆动物疫病诊断与防控工程实验室新疆阿拉尔843300

旨在了解绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae)30S rpsE蛋白的生物学特性及其蛋白免疫原性。用在线分析软件预测30S rpsE蛋白的理化性质、B细胞抗原表位、糖基化位点、二级结构及三级结构等;采用PCR方法从病羊鼻拭子样品中扩增得到... 详细信息

旨在了解绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae)30S rpsE蛋白的生物学特性及其蛋白免疫原性。用在线分析软件预测30S rpsE蛋白的理化性质、B细胞抗原表位、糖基化位点、二级结构及三级结构等;采用PCR方法从病羊鼻拭子样品中扩增得到30S rpsE基因片段,经NdeⅠ、XhoⅠ酶切纯化后,将其连接到pET-42b载体上,构建原核表达载体pET-42b-30S rpsE,使用不同浓度IPTG诱导蛋白在大肠杆菌BL21中表达;重组蛋白通过SDS-PAGE和Western blot进行鉴定,用镍层析法纯化蛋白后,与弗氏佐剂1∶1混合注射免疫家兔,然后采取全血,检测血清抗体效价及特异性。结果:经预测30S rpsE蛋白是亲水无信号肽的膜外蛋白,无跨膜结构域,有一个糖基化位点;成功构建了原核表达载体pET-42b-30S rpsE,表达的重组蛋白分子量约为25.9 ku,以包涵体和可溶性的形式存在;免疫家兔后血清抗体效价为1∶25 600,证实30S rpsE蛋白具有较好的免疫原性。

关键词：肺炎支原体 30S rpsE基因原核表达多克隆抗体

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肝片吸虫感染对绵羊细胞因子质量浓度及表达的影响

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西北农业学报 2015年第8期24卷 1-6页

作者：邢凤卢平萍孙小珊塔里木大学动物科学学院新疆阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室新疆阿拉尔843300

为揭示肝片吸虫感染对和田羊与中国美利奴羊细胞因子(IL-2、TNF-α、IFN-γ)质量浓度及其mRNA表达的影响。以和田羊和中国美利奴羊为研究对象,随机分为感染组(N=5)和对照组(N=3),感染组每组经口感染250个肝片吸虫囊蚴。在感染后第0、4、... 详细信息

为揭示肝片吸虫感染对和田羊与中国美利奴羊细胞因子(IL-2、TNF-α、IFN-γ)质量浓度及其mRNA表达的影响。以和田羊和中国美利奴羊为研究对象,随机分为感染组(N=5)和对照组(N=3),感染组每组经口感染250个肝片吸虫囊蚴。在感染后第0、4、7、16周测定血清细胞因子(IL-2、TNF-α、IFN-γ)的质量浓度,并检测感染16周后肝脏细胞因子(IL-2、TNF-α、IFN-γ)mRNA的表达量。结果表明,感染肝片吸虫7周后,和田羊和中国美利奴羊感染组血清IL-2、IFN-γ质量浓度均显著高于对照组(P<0.05);和田羊感染组血清TNF-α质量浓度显著高于对照组(P<0.05),而中国美利奴羊感染组与对照组差异不显著(P>0.05)。感染16周后,和田羊感染组血清TNF-α、IFN-γ质量浓度及其肝脏mRNA表达量均显著高于对照组(P<0.05);中国美利奴羊感染组血清TNF-α质量浓度及其肝脏mRNA表达量均显著高于对照组(P<0.05)。揭示和田羊与中国美利奴羊对肝片吸虫的细胞免疫反应存在一定差异。

关键词：和田羊肝片吸虫细胞因子干扰素-γ

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