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中国畜牧兽医 2023年第3期50卷 1048-1058页

作者：张永杰隋志远张志帅王晨光李孝君邢凤塔里木大学动物科学与技术学院阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室阿拉尔843300

【目的】试验旨在克隆多浪羊神经元正五聚体蛋白1(neuronal pentraxin 1,NPTX1)基因CDS序列,利用生物信息学分析NPTX1蛋白的结构和功能,并研究其在多浪羊初情期启动过程中性腺轴不同组织中的表达规律。【方法】采集初情期前、初情期、... 详细信息

【目的】试验旨在克隆多浪羊神经元正五聚体蛋白1(neuronal pentraxin 1,NPTX1)基因CDS序列,利用生物信息学分析NPTX1蛋白的结构和功能,并研究其在多浪羊初情期启动过程中性腺轴不同组织中的表达规律。【方法】采集初情期前、初情期、初情期后健康雌性多浪羊的下丘脑、垂体、输卵管、卵巢、子宫组织,提取总RNA并反转录成cDNA,以初情期前下丘脑cDNA为模板,PCR扩增多浪羊NPTX 1基因并克隆测序,对其进行生物信息学分析;采用实时荧光定量PCR分析NPTX 1基因在多浪羊下丘脑、垂体、卵巢、子宫、输卵管5个组织中的表达水平。【结果】克隆得到NPTX 1基因长1576 bp,其中CDS区序列为1299 bp,与GenBank上预测的绵羊mRNA序列(登录号:XM_005683183.3)相似性达99.85%。系统进化树分析得出,多浪羊NPTX 1基因与绵羊的遗传距离最近,与鸡的遗传距离最远。生物信息学分析发现,NPTX1蛋白为不稳定的亲水性酸性蛋白,具有1个信号肽,属于分泌蛋白;二级结构中α-螺旋和无规则卷曲占比分别为41.90%和40.73%,与三级结构预测结果一致。实时荧光定量PCR结果显示,NPTX 1基因在多浪羊3个时期5个不同性腺组织中均有表达,在初情期下丘脑中表达量最高,显著高于初情期前和初情期后(P<0.05)。【结论】试验成功克隆了多浪羊NPTX 1基因CDS全长序列,并揭示了NPTX 1基因在多浪羊初情期不同阶段性腺轴组织中的表达差异性,为进一步探究NPTX 1基因在多浪羊初情期启动过程中的调控机制提供依据。

关键词：多浪羊 NPTX 1基因克隆初情期组织表达

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多浪羊BMP7基因克隆、生物信息学分析及其在不同初情期阶段组织表达分析

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中国畜牧兽医 2023年第7期50卷 2629-2638页

作者：王晨光隋志远张永杰张志帅李孝君邢凤塔里木大学动物科学与技术学院阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室阿拉尔843300

【目的】对多浪羊骨形态发生蛋白-7(bone morphogenetic protein-7,BMP7)基因序列进行克隆和生物信息学分析,并检测多浪羊在初情期3个阶段5个组织中的表达规律,为探究BMP 7基因在多浪羊初情期中的生物学功能提供参考。【方法】采用PCR... 详细信息

【目的】对多浪羊骨形态发生蛋白-7(bone morphogenetic protein-7,BMP7)基因序列进行克隆和生物信息学分析,并检测多浪羊在初情期3个阶段5个组织中的表达规律,为探究BMP 7基因在多浪羊初情期中的生物学功能提供参考。【方法】采用PCR扩增多浪羊BMP 7基因序列并克隆测序,利用Mega 7.0软件构建系统发育树,利用生物信息学软件分析BMP7蛋白的理化性质和结构功能;采用实时荧光定量PCR检测BMP 7基因在初情期前、初情期、初情期后多浪羊下丘脑、垂体、卵巢、输卵管、子宫5个组织中的表达量。【结果】试验成功获得多浪羊BMP 7基因序列长1334 bp,其中编码区长1296 bp,编码431个氨基酸,与绵羊和牛的亲缘关系最近,其次是人、猴、马,与小鼠和犬的亲缘关系最远。生物信息学分析显示,BMP7蛋白分子式为C_(2200)H_(3374)N_(632)O_(628)S_(17),理论等电点(pI)为8.17,原子总数为6851个,不稳定指数为53.18,脂溶性系数76.96,总平均亲水性为―0.419,为不稳定亲水碱性蛋白;二级结构主要以α-螺旋及无规则卷曲为主,三级结构预测结果与二级结构一致。实时荧光定量PCR检测显示,BMP 7基因在多浪羊初情期前、初情期、初情期后均有表达,其中在下丘脑中表达量显著高于其他组织(P<0.05);在初情期前到初情期的下丘脑和子宫中BMP 7基因表达量显著上升(P<0.05),初情期到初情期后BMP 7基因表达量显著下降(P<0.05)。【结论】试验成功克隆了多浪羊BMP 7基因序列,该基因在多浪羊初情期前后3个不同阶段的5个组织中均有表达,结果为探究BMP 7基因在多浪羊初情期中的作用提供了参考。

关键词：多浪羊 BMP 7基因克隆初情期

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替米考星对胞内金黄色葡萄球菌的抗菌活性

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中国兽医杂志 2023年第12期59卷 71-76页

作者：鞠牧洁刘金环蒋永涛冷楠楠罗万和新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室新疆阿拉尔843300 塔里木大学动物科学与技术学院新疆阿拉尔843300

为探究大环内酯类药物替米考星对胞内金黄色葡萄球菌的抗菌活性,本试验以金黄色葡萄球菌ATCC 29213为靶细菌,以小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7)为载体细胞,构建金黄色葡萄球菌胞内感染体系,绘制胞内金黄色葡萄球菌的生长曲线,测定替米考星... 详细信息

为探究大环内酯类药物替米考星对胞内金黄色葡萄球菌的抗菌活性,本试验以金黄色葡萄球菌ATCC 29213为靶细菌,以小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7)为载体细胞,构建金黄色葡萄球菌胞内感染体系,绘制胞内金黄色葡萄球菌的生长曲线,测定替米考星对胞内金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度、最低杀菌浓度、防突变浓度、耐药突变选择窗、抗菌后效应和杀菌曲线。结果显示,胞内金黄色葡萄球菌在0~4、4~18、18~24和24~48 h分别处于迟缓期、对数期、稳定期和衰亡期。最低抑菌浓度、最低杀菌浓度、防突变浓度和耐药突变选择窗分别为4、8、12.8和4~12.8μg/mL。抗菌后效应和杀菌曲线结果显示,替米考星对胞内金黄色葡萄球菌的杀菌特点表现出明显的时间依赖性。结果表明,替米考星对胞内金黄色葡萄球菌表现出较强的抗菌活性,可为治疗由胞内金黄色葡萄球菌引起的奶牛乳腺炎制定合理给药方案提供参考依据。

关键词：替米考星奶牛乳房炎胞内金黄色葡萄球菌抗菌活性 RAW264.7细胞

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槲皮素-替米考星混合物纳米粒的制备及对金黄色葡萄球菌小菌落变异株抗菌活性研究

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中国畜牧兽医 2022年第4期49卷 1470-1478页

作者：刘金环张珊玲宋玮罗万和陈伟塔里木大学动物科学与技术学院新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木盆地生物资源保护利用重点实验室阿拉尔843300

【目的】制备一种适用于治疗由金黄色葡萄球菌小菌落变异株(Staphylococcus aureus small colony variants,SASCVs)引起奶牛乳腺炎感染的槲皮素-替米考星混合物纳米粒,评价其对SASCVs菌株的抗菌活性。【方法】通过对槲皮素(0.05、0.10、... 详细信息

【目的】制备一种适用于治疗由金黄色葡萄球菌小菌落变异株(Staphylococcus aureus small colony variants,SASCVs)引起奶牛乳腺炎感染的槲皮素-替米考星混合物纳米粒,评价其对SASCVs菌株的抗菌活性。【方法】通过对槲皮素(0.05、0.10、0.15和0.20 g)和替米考星原料药用量(0.2、0.3、0.4和0.5 g)及转速(500、1000、1500 r/min)、反应时间(0.5、1.0、2.0 h)、反应温度(25、50、75℃)、溶剂浓度(5.0%、7.5%、10.0%)进行考察,以外观性状为指标,筛选槲皮素-替米考星混合物纳米粒最优配方和制备条件;以微观形态、沉降体积比、再分散性、粒径和Zeta电位为指标,对制备的槲皮素-替米考星混合物纳米粒表征;通过琼脂扩散法、微量肉汤稀释法和体外杀菌曲线,对比槲皮素-替米考星混合物纳米粒和市售替米考星溶液对SASCVs菌株的抗菌活性,评价槲皮素-替米考星混合物纳米粒的优势。【结果】当替米考星为0.4 g、槲皮素为0.1 g、溶剂为20 mL 7.5%的聚乙二醇溶液,在转速为1000 r/min、反应时间为1 h、反应温度为50℃时,所制备的槲皮素-替米考星混合物纳米粒最优,其溶液外观性状显示颜色清亮,无沉淀和絮状物;微观形态显示该混合物纳米粒分布均匀,颗粒大小一致;沉降体积比为1,再分散性良好,平均粒径为741.9 nm,Zeta电位为-7.69 mV。替米考星标准品、槲皮素-替米考星混合物纳米粒和市售替米考星溶液对SASCVs菌株的抑菌圈直径分别为2.54、1.51和1.38 cm,对SASCVs菌株的最低抑菌浓度分别为1、1和2μg/mL;体外杀菌曲线表明,槲皮素-替米考星混合物纳米粒对SASCVs菌株表现出明显的浓度依赖性。【结论】本研究所制备的槲皮素-替米考星混合物纳米粒对SASCVs菌株具有较强杀菌能力,可为治疗由SASCVs菌株引起的奶牛乳腺炎提供基础研究资料。

关键词：槲皮素替米考星混合物纳米粒金黄色葡萄球菌小菌落变异株抗菌活性

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策勒黑羊和多浪羊FecB基因多态性及其与产羔数的相关性研究

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黑龙江畜牧兽医 2020年第1期 7-10页

作者：柏雪梅薛亚欣邢凤周磊塔里木大学动物科学学院新疆阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室新疆阿拉尔843300

为了探讨策勒黑羊和多浪羊FecB基因多态性及其与产羔数的相关性,为新疆南疆绵羊多胎品系的选育提供参考,试验以策勒黑羊、多浪羊为研究对象,利用PCR-RFLP技术对这两品种绵羊FecB基因单核苷酸多态性进行检测,同时研究该基因对这两品种绵... 详细信息

为了探讨策勒黑羊和多浪羊FecB基因多态性及其与产羔数的相关性,为新疆南疆绵羊多胎品系的选育提供参考,试验以策勒黑羊、多浪羊为研究对象,利用PCR-RFLP技术对这两品种绵羊FecB基因单核苷酸多态性进行检测,同时研究该基因对这两品种绵羊产羔数的影响。结果表明:策勒黑羊FecB基因检测到3种基因型,即BB、B+、++,基因型频率分别为0.14,0.44,0.42,B、+基因频率分别为0.35,0.65;多浪羊FecB基因检测到2种基因型,即B+、++,基因型频率分别为0.52,0.48,B、+基因频率分别为0.26,0.74。基因型为BB型的策勒黑羊平均产羔数为2.87只/胎,显著高于++型(P<0.05);基因型为B+型的多浪羊平均产羔数为2.55只/胎,显著高于++型(P<0.05)。说明策勒黑羊和多浪羊FecB基因具有多态性,其中BB型、 B+型可用于南疆绵羊多胎品系的分子辅助育种。

关键词：策勒黑羊多浪羊产羔数基因频率 FecB基因多态性

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奶牛子宫内膜炎病原菌分离鉴定及药敏试验

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畜牧与兽医 2011年第1期43卷 16-19页

作者：李有文刘孝杰陶大勇塔里木大学动物科学学院新疆阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室新疆阿拉尔843300

按照临床型奶牛子宫内膜炎的诊断标准,选取阿克苏地区某奶牛场子宫内膜炎病牛20头,采取子宫分泌物,对其病原菌进行菌落计数、细菌分离纯化,并使用全自动微生物鉴定仪(VITEK32)及药敏分析仪进行生化鉴定及药敏试验。结果分离鉴定到大肠... 详细信息

按照临床型奶牛子宫内膜炎的诊断标准,选取阿克苏地区某奶牛场子宫内膜炎病牛20头,采取子宫分泌物,对其病原菌进行菌落计数、细菌分离纯化,并使用全自动微生物鉴定仪(VITEK32)及药敏分析仪进行生化鉴定及药敏试验。结果分离鉴定到大肠埃希菌、柠檬酸杆菌、科氏葡萄球菌、溶血葡萄球菌、干燥棒状杆菌、亚利桑那沙门菌、鲁氏不动杆菌。药敏试验的结果表明:庆大霉素和妥布霉素对本次分离病原菌普遍有较好的抑制作用,可作为该场治疗奶牛子宫内膜炎的较理想的药物。

关键词：奶牛子宫内膜炎病原菌鉴定药敏试验

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兽用抗菌药物的肺部药动学研究进展

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西北农业学报 2017年第9期26卷 1267-1272页

作者：李先强塔里木大学动物科学学院新疆阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木畜禽科技重点实验室新疆阿拉尔843300

肺部药动学是基于肺部药物浓度来描述或预测药物在肺部随时间变化规律的一项新兴研究手段,也是临床防治呼吸道疾病药物制定合理给药方案的重要依据。近年来,国内外关于动物的肺部采样手段以及药物分析技术日趋成熟,使得兽用抗菌药物的... 详细信息

肺部药动学是基于肺部药物浓度来描述或预测药物在肺部随时间变化规律的一项新兴研究手段,也是临床防治呼吸道疾病药物制定合理给药方案的重要依据。近年来,国内外关于动物的肺部采样手段以及药物分析技术日趋成熟,使得兽用抗菌药物的肺部药动学研究正成为兽医药理学中的研究热点。论文综述了目前兽药肺部药动学研究中的肺部采样手段、动物麻醉方法、药物提取手段以及肺泡液中药物分析技术等研究概况,旨在使兽用抗菌药物的肺部药动学研究技术能更好的应用于如药动学—药效学结合模型、折点分析及制定给药方案等兽药研究领域中。

关键词：兽药肺部采样药物分析肺部药动学给药方案

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南疆地区小花棘豆的营养成分分析

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草业科学 2010年第5期27卷 136-139页

作者：王帅胡建军阿力木别克马春晖新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室新疆阿拉尔843300 塔里木大学动物科学学院新疆阿拉尔843300

对新疆南疆地区小花棘豆Oxytropis glabra风干样的常规营养成分、主要矿物质元素及氨基酸含量进行测定,结果表明:小花棘豆干物质含量为94.49%、粗蛋白含量为14.97%、粗脂肪含量为3.11%、总能值为14 234 J/g、粗灰分含量为9.32%、中性洗... 详细信息

对新疆南疆地区小花棘豆Oxytropis glabra风干样的常规营养成分、主要矿物质元素及氨基酸含量进行测定,结果表明:小花棘豆干物质含量为94.49%、粗蛋白含量为14.97%、粗脂肪含量为3.11%、总能值为14 234 J/g、粗灰分含量为9.32%、中性洗涤纤维为36.70%、酸性洗涤纤维为28.06%、木质素为3.98%、纤维素为24.06%、钙0.98%、磷0.15%。小花棘豆中含有常见的17种氨基酸,其中包括9种必需氨基酸,氨基酸总量(占干质量)为13.42%,必需氨基酸总量为12.68%;微量元素含量与紫花苜蓿Medicago sativa的含量接近,是潜在的牧草资源。

关键词：小花棘豆常规养分矿物质成分氨基酸含量

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枯草芽孢杆菌与黑曲霉对甜高粱秸秆发酵效果的影响

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中国畜牧杂志 2024年第2期60卷 323-328页

作者：董宇蔡宏宇马艳王娇陈凤柏梁耀孙禹张苏江塔里木大学动物科学与技术学院新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室塔里木大学塔里木盆地生物资源保护利用兵团重点实验室新疆阿拉尔843300

试验旨在探究枯草芽孢杆菌与黑曲霉对甜高粱秸秆发酵品质的影响。以切短至1~2 cm甜高粱秸秆为原料,采用单因素设计,分为4个试验组,分别为对照组、枯草芽孢杆菌组、黑曲霉组、菌+霉组(枯草芽孢杆菌:黑曲霉为1:1),添加量为2 mL/100 g,菌... 详细信息

试验旨在探究枯草芽孢杆菌与黑曲霉对甜高粱秸秆发酵品质的影响。以切短至1~2 cm甜高粱秸秆为原料,采用单因素设计,分为4个试验组,分别为对照组、枯草芽孢杆菌组、黑曲霉组、菌+霉组(枯草芽孢杆菌:黑曲霉为1:1),添加量为2 mL/100 g,菌液浓度控制在1×10^(8)个细菌/mL,每组3个重复。分别在15、30、45d取样,通过感官评定、营养价值、发酵品质、有氧稳定性等指标进行综合分析。结果表明:试验组对甜高粱秸秆的感官品质均起到改善作用;在15、30、45 d时试验组粗蛋白质含量高于对照组(P<0.05),在30、45 d时中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维含量低于对照组(P<0.05);在30、45 d时黑曲霉组、菌+霉组pH低于对照组、枯草芽孢杆菌组(P<0.05),在45d时枯草芽孢杆菌组、黑曲霉组、菌+霉组氨态氮/总氮低于对照组(P<0.05),在15、30、45 d时菌+霉组乳酸与乙酸含量高于对照组、枯草芽孢杆菌组、黑曲霉组(P<0.05);随着有氧暴露时间的延长,对照组、枯草芽孢杆菌组、黑曲霉组、菌+霉组pH呈上升趋势(P<0.05),干物质含量呈先上升再下降趋势(P<0.05),枯草芽孢杆菌组、黑曲霉组、菌+霉组pH和干物质含量低于对照组(P<0.05)。可见,在发酵第45天,菌+霉组能显著改善甜高粱秸秆感官品质、提高营养价值与发酵品质、延长其有氧稳定性时间。

关键词：甜高粱秸秆枯草芽孢杆菌黑曲霉发酵品质

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奶牛精子RNA提取

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中国畜牧兽医 2011年第3期38卷 80-84页

作者：王惠娥孙献莹高庆华韩春梅沈波武延风塔里木大学动物科学学院新疆阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木大学畜牧科技重点实验室新疆阿拉尔843300

优选3头公牛细管冻精,采用上游法获得纯化精子,以含体细胞污染的精子作对照,应用离心层析柱方法和Trizol一步法相结合提取总RNA,紫外分光光度计检测总RNA的D260/280值和产量,并对总RNA进行RT-PCR和凝胶电泳。结果显示,纯化的牛精子中不... 详细信息

优选3头公牛细管冻精,采用上游法获得纯化精子,以含体细胞污染的精子作对照,应用离心层析柱方法和Trizol一步法相结合提取总RNA,紫外分光光度计检测总RNA的D260/280值和产量,并对总RNA进行RT-PCR和凝胶电泳。结果显示,纯化的牛精子中不含体细胞,奶牛细管精液总RNA在2 h内完成提取,D260/280值为1.80,大于200 bp的总RNA产量为0.92μg/107个精子,精子总RNA进行RT-PCR,电泳后可得到清晰的SRY、LEP和RPS23基因3条带,不含18S rRNA基因条带。结果表明,离心层析柱法和Trizol一步法相结合可获得高质量的奶牛精子总RNA,且纯度和完整度高,可满足分子生物学研究的要求。

关键词：奶牛精子总RNA RT-PCR

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