检索结果-内蒙古大学图书馆

SARS—Cov M蛋白的真核表达及其免疫原性研究（摘要）

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世界感染杂志 2005年第1期5卷 65-65页

作者：童德妍汪晓华郑秀娟关庆东熊思东复旦大学上海医学院免疫学系教育部分子医学重点实验室上海基因免疫与疫苗研究中心，上海200032

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B7反义肽预处理脾细胞诱导异基因嵌合体形成及延长移植物存活

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中华医学杂志 2004年第2期84卷 138-141页

作者：陈晋张瑞华刘全胜储以微何球藻熊思东复旦大学上海医学院免疫学系教育部分子医学重点实验室上海基因免疫与疫苗研究中心上海200032

目的　尝试以B7 CD2 8/CTLA4为靶点 ,用B7反义肽 (B7AP)预处理供者的脾细胞 ,免疫受者后结合输注供者骨髓细胞 ,诱导受体形成异基因嵌合体。方法　每只用 5× 10 6/ 10 0 μlB7AP预处理的供者小鼠 (C5 7BL/ 6 )脾细胞免疫受者小鼠 (... 详细信息

目的　尝试以B7 CD2 8/CTLA4为靶点 ,用B7反义肽 (B7AP)预处理供者的脾细胞 ,免疫受者后结合输注供者骨髓细胞 ,诱导受体形成异基因嵌合体。方法　每只用 5× 10 6/ 10 0 μlB7AP预处理的供者小鼠 (C5 7BL/ 6 )脾细胞免疫受者小鼠 (BALB/c) ,诱导特异性同种低免疫应答反应 ;在此基础上每只受者小鼠输注供者骨髓细胞 2× 10 7/ 10 0 μl,诱导受者形成异基因嵌合体 ,以流式细胞术 (FACS)连续动态监测嵌合状态的维持情况并用小鼠心肌移植模型研究移植物存活的影响因素。结果　在受者体内成功诱导出了特异性同种低免疫应答反应 ,应答水平只有正常未免疫组的 4 3%(n =6 ,P <0 0 0 1) ;嵌合状态可以维持到 10 0d以上 (n =6 ) ,15 0d时嵌合率仍有 3.4 5 % ;嵌合小鼠进行同种异体小鼠心肌移植存活超过 10 0d(n =6 ) ,而对照组阿霉素组只能延长至 16d(n =6 )。结论　B7AP预处理小鼠脾细胞可诱导形成异基因嵌合体 ,并显著延长同种小鼠心肌移植存活的时间 ,为移植免疫的研究提供了一个简单易行的嵌合体平台技术 ,也为用B7AP在移植免疫中的应用进行了有益的尝试。

关键词： B7反义肽预处理脾细胞异基因嵌合体同种异体移植移植免疫学

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趋化因子受体CXCR4在人肺癌高转移细胞株的表达和意义

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中国免疫学杂志 2004年第9期20卷 603-606,616页

作者：苏丽萍张进平徐焕宾郑秀娟储以薇熊思东复旦大学上海医学院免疫学系教育部分子医学重点实验室上海基因免疫与疫苗研究中心上海200032

目的:以人肺癌高、低转移细胞株95D、95C为研究对象,研究趋化因子受体CXCR4的表达及其在肿瘤细胞体外转移潜能中的作用和意义.方法:采用RT-PCR检测95D、95C细胞CXCR4 mRNA的表达情况;以PMA活化肿瘤细胞,研究CXCR4 mRNA表达水平与细胞活... 详细信息

目的:以人肺癌高、低转移细胞株95D、95C为研究对象,研究趋化因子受体CXCR4的表达及其在肿瘤细胞体外转移潜能中的作用和意义.方法:采用RT-PCR检测95D、95C细胞CXCR4 mRNA的表达情况;以PMA活化肿瘤细胞,研究CXCR4 mRNA表达水平与细胞活性状态的关系;应用钙离子内流实验验证其表达是否具有功能;通过趋化实验观察CXCR4特异性配件SDF-1α和裸鼠组织匀浆液对95D细胞的趋化迁移作用;通过MTT法测定95D细胞对SDF-1α作用的增殖反应.结果:95D细胞功能性地高表达趋化因子受体CXCR4,且其表达水平与细胞活性状态有关;CXCR4特异性配件SDF-1α和裸鼠肺、淋巴结组织匀浆均可在体外趋化95D细胞的迁移,SDF-1α还可促进95D细胞的增殖.结论:95D细胞功能性高表达趋化因子受体CXCR4可能与人肺癌细胞株95D的体外高转移潜能有关.

关键词：趋化因子受体 CXCR4 人肺癌细胞转移

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肌萎缩蛋白参与淋巴细胞的活化及免疫突触的形成

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中国免疫学杂志 2004年第8期20卷 515-520,524页

作者：张进平苏丽萍徐焕宾乔滨熊凌云王缨熊思东复旦大学上海医学院免疫学系教育部国家分子医学重点实验室上海基因免疫与疫苗研究中心上海200032

目的:探讨在神经肌接头中发挥重要作用的膜表面糖化蛋白-肌萎缩蛋白是否参与免疫突触的形成,进而影响淋巴细胞的活化.方法:首先通过RT-PCR和FACS分别从mRNA水平和蛋白水平观察肌萎缩蛋白在各种免疫细胞中的表达,并经过共聚焦显微镜观察... 详细信息

目的:探讨在神经肌接头中发挥重要作用的膜表面糖化蛋白-肌萎缩蛋白是否参与免疫突触的形成,进而影响淋巴细胞的活化.方法:首先通过RT-PCR和FACS分别从mRNA水平和蛋白水平观察肌萎缩蛋白在各种免疫细胞中的表达,并经过共聚焦显微镜观察其是否参与免疫突触的形成,应用构建的反义质粒,研究其是否影响淋巴细胞的抗原特异性和非特异性活化.结果:肌萎缩蛋白广泛表达于T细胞、B细胞、不成熟DC、成熟DC及巨噬细胞中,且参与了免疫突触的形成.当淋巴细胞活化后其表达含量无明显上升,但其表达被下调后,不管是对特异抗原引起的淋巴细胞活化还是对非特异抗原引起的淋巴细胞活化都具有显著的抑制作用.结论:组成性表达于各种免疫细胞中的肌萎缩蛋白参与了免疫突触的形成,并影响了抗原特异性和抗原非特异性的淋巴细胞的活化.

关键词：肌萎缩蛋白反义cDNA 活化免疫突触

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牛血清中27 kDa蛋白的免疫学特性研究

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中国病毒学 2004年第1期19卷 6-9页

作者：邵先安沈燕徐薇王缨胡新美熊思东复旦大学上海医学院免疫学系教育部分子医学重点实验室上海基因免疫与疫苗研究中心上海200032

为探讨牛血清中存在的HBsAg样蛋白的性质,给HBV的发病机制、治疗、预防等研究提供依据,我们采集93份牛血清,以SDS-PAGE、Western Blot对血清中HBsAg样蛋白进行研究,发现其分子量约为27kDa;以SDS-PAGE分离牛血清中的HBsAg样蛋白,经皮下... 详细信息

为探讨牛血清中存在的HBsAg样蛋白的性质,给HBV的发病机制、治疗、预防等研究提供依据,我们采集93份牛血清,以SDS-PAGE、Western Blot对血清中HBsAg样蛋白进行研究,发现其分子量约为27kDa;以SDS-PAGE分离牛血清中的HBsAg样蛋白,经皮下多点免疫小鼠,可产生与人HBV编码蛋白HBsAg反应的抗体.表明该27kDa蛋白可能存在与HBsAg相似的免疫学特性.

关键词：牛血清鉴定 HBsAg Western Blot 抗原性

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Chitosan-pcDNA3-VP1 DNA疫苗预防病毒性心肌炎的实验研究

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现代免疫学 2004年第2期24卷 156-160页

作者：徐薇张进平陈瑞珍熊思东复旦大学上海医学院教育部分子医学重点实验室上海基因免疫与疫苗研究中心上海200032 复旦大学附属中山医院卫生部病毒性心脏病重点实验室上海200032

为研究新型chitosan-DNA疫苗预防CVB3病毒性心肌炎的效果,以天然生物多糖chitosan包裹含CVB3主要结构蛋白VP1编码基因的质粒pcDNA3-VP1,制备新型chitosan-pcDNA3-VP1疫苗.以含50μgDNA的该疫苗于0、7、14、21d滴鼻免疫小鼠4次,末次免疫... 详细信息

为研究新型chitosan-DNA疫苗预防CVB3病毒性心肌炎的效果,以天然生物多糖chitosan包裹含CVB3主要结构蛋白VP1编码基因的质粒pcDNA3-VP1,制备新型chitosan-pcDNA3-VP1疫苗.以含50μgDNA的该疫苗于0、7、14、21d滴鼻免疫小鼠4次,末次免疫后3周以3×LD50剂量CVB3经腹腔感染小鼠,称量小鼠体重、心脏重,并行心脏HE染色.结果:chitosan-pcDNA3-VP1疫苗滴鼻免疫诱生了高水平的血清特异IgG和肠粘膜IgA;同时诱生了较高强度的特异性CTL活性.以致病毒性心肌炎剂量CVB3感染小鼠7 d后发现:pcDNA3组小鼠100%出现病毒性心肌炎,其心室壁呈现严重灶性坏死和炎性浸润;而chitosan-pcDNA3-VP1组仅16.7%小鼠产生心肌炎,坏死灶少且程度轻.其它病毒性心肌炎体征显示:pcDNA3组体重降幅为4.50%;而chitosan-pcDNA3-VP1组类似正常小鼠,体重略增1.75%;pcDNA3免疫组体重/心脏重比为171.75;chitosan-pcDNA3-VP1免疫组为186.36.提示chitosan-pcDNA3-VP1疫苗滴鼻可诱生全身及粘膜特异免疫,并可有效预防病毒性心肌炎的发生,可能成为CVB3及病毒性心肌炎预防性候选疫苗.

关键词： chitosan CVB3 病毒性心肌炎滴鼻预防

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人ehCGβ+肿瘤小鼠模型的建立

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动物医学进展 2004年第1期25卷 76-79页

作者：王立新关庆东吴瑾王缨熊思东复旦大学上海医学院免疫学系教育部分子医学重点实验室上海基因免疫与疫苗研究中心上海200032

采用脂质体转染方法将含人ehCGβ编码基因的重组质粒pcDNA3-ehCGβ转染鼠SP2/0细胞,经G418选择培养和有限稀释培养获得抗性细胞克隆,FSCA检测显示:该抗性细胞的ehCGβ表达比例高达84.75%、平均荧光强度达22.12;采用相同方法获得转HBV-pr... 详细信息

采用脂质体转染方法将含人ehCGβ编码基因的重组质粒pcDNA3-ehCGβ转染鼠SP2/0细胞,经G418选择培养和有限稀释培养获得抗性细胞克隆,FSCA检测显示:该抗性细胞的ehCGβ表达比例高达84.75%、平均荧光强度达22.12;采用相同方法获得转HBV-preS2/S编码基因的Sp2/0-preS2/S细胞作为转染无关基因的对照细胞克隆,FACS检测发现该细胞表达preS2/S比例为72.60%、平均荧光强度为16.80.将不同数量的Sp2/0-ehCGβ细胞皮下接种BALB/c小鼠,结果表明,接种1×105及以上Sp2/0-ehCGβ细胞在小鼠体内能形成实体瘤,且实体瘤的大小与接种细胞数量呈正相关(R值为0.989).将相同数量(5×105个细胞)的Sp2/0、Sp2/0-ehCGβ和Sp2/0-preS2/S细胞接种同一只BALB/c小鼠不同部位,结果发现3种肿瘤细胞均在BALB/c小鼠皮下形成了实体瘤,比较三组的平均瘤重量无统计学差异(P>0.05),提示外源性ehCGβ基因的转染不影响Sp2/0细胞的致瘤特性.文章建立的人ehCGβ+肿瘤细胞的荷瘤小鼠模型,为研究ehCGβ+肿瘤细胞的生物学特征、ehCGβ+肿瘤细胞的生物治疗等提供实验基础.

关键词：人绒毛膜促性腺激素肿瘤小鼠模型

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ehCGβ肿瘤基因疫苗诱生的效应脾细胞过继免疫抗肿瘤作用的研究

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中国肿瘤生物治疗杂志 2004年第2期11卷 79-83页

作者：关庆东王立新张进平徐薇储以微王缨熊思东复旦大学上海医学院免疫学系教育部分子医学重点实验室上海基因免疫与疫苗研究中心上海200032

目的:探讨ehCGβ肿瘤基因疫苗诱生的效应脾细胞过继免疫在抗肿瘤中的作用.方法:通过转染建立稳定表达ehCGβ和HBV-preS2/S的细胞株Sp2/0-ehCGβ和Sp2/0-preS2/S.以TR421-hCGβ质粒实施基因免疫,免疫后检测小鼠脾细胞,特异性细胞毒活性;... 详细信息

目的:探讨ehCGβ肿瘤基因疫苗诱生的效应脾细胞过继免疫在抗肿瘤中的作用.方法:通过转染建立稳定表达ehCGβ和HBV-preS2/S的细胞株Sp2/0-ehCGβ和Sp2/0-preS2/S.以TR421-hCGβ质粒实施基因免疫,免疫后检测小鼠脾细胞,特异性细胞毒活性;同期将脾细胞过继免疫给正常小鼠,以过继TR421-hCGβ质粒免疫小鼠脾细胞为实验组、过继TR421质粒免疫小鼠脾细胞为对照组,检测脾细胞杀伤效应.结果:效应脾细胞对SP2/0-ehCGβ的杀伤率明显高于Sp2/0-preS2/S(P＜0.05).Sp2/0-ehCGβ在实验组小鼠仅2只形成实体瘤,TR421-hcGβ质粒基因免疫抗肿瘤任用有肿瘤特异性,两组有显著性差异(P＜0.05),而在对照组小鼠均形成实体瘤.Sp2/0-preS2/S在所有的小鼠均形成了实体瘤,其瘤重无显著性差异.结论:ehCGβ肿瘤基因疫苗诱生的效应细胞可特异性杀伤肿瘤,过继免疫效应细胞能使正常小鼠获得明显的特异性抗肿瘤能力.

关键词：异位人绒毛膜促性腺激素效应脾细胞肿瘤基因疫苗过继免疫

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CD100在B淋巴细胞发育中的作用

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生命的化学 2004年第3期24卷 188-190页

作者：关庆东熊思东复旦大学上海医学院免疫学系、教育部分子医学重点实验室、上海基因免疫与疫苗研究中心上海200032

CD100是第一个被确认的在免疫系统起重要作用的脑信号蛋白(semaphorin)家族成员.CD100在B淋巴细胞发育中起着重要作用,它通过封闭受体CD72的负调控信号而促进B细胞的活化,从而增强体液免疫应答.

关键词：脑信号蛋白(semaphorin) CD100 B淋巴细胞发育

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Chitosan-DNA疫苗诱导Th1型特异性免疫应答

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复旦学报(医学版) 2003年第5期30卷 451-454页

作者：徐薇吴蓉沈燕储以微熊思东复旦大学上海医学院免疫学系-教育部分子医学重点实验室-上海基因免疫与疫苗研究中心上海200032

目的在我们前期研究发现脱乙酰壳多糖(chitosan)包裹质粒DNA形成的chitosan-pcDNA3-VP1疫苗基因免疫诱生较高水平特异性免疫应答的基础上,探讨该疫苗诱导T辅助细胞(Th)应答的类型,为chitosan-DNA新型疫苗的分子设计奠定基础.方法以chito... 详细信息

目的在我们前期研究发现脱乙酰壳多糖(chitosan)包裹质粒DNA形成的chitosan-pcDNA3-VP1疫苗基因免疫诱生较高水平特异性免疫应答的基础上,探讨该疫苗诱导T辅助细胞(Th)应答的类型,为chitosan-DNA新型疫苗的分子设计奠定基础.方法以chitosan-pcDNA3-VP1、pcDNA3-VP1和pcDNA3分别滴鼻免疫BALB/c小鼠,以ELISA法检测VP1体外表达和IgG亚型;以3H-TdR掺入法检测淋巴细胞增殖反应;并通过RT-PCR检测了小鼠心肌内细胞因子表达情况.结果 chitosan-pcDNA3-VP1体外转染后VP1的表达水平与pcDNA3-VP1转染组无显著差异(P＞0.05),表明chitosan的加入不改变pcDNA3-VP1质粒在体外细胞内的表达;chitosan-pcDNA3-VP1组脾淋巴细胞和肠系膜淋巴细胞增殖指数分别达3.0和2.74,均显著高于pcDNA3-VP1组和pcDNA3组(P＜0.01);chitosan-pcDNA3-VP1免疫可显著增强IgG2a的生成,第6周和第12周IgG2a/IgG1比值分别为2.26和44.2,而pdDNA3-VP1组IgG2a表达稍高于IgG1、IgG2b和IgG3表达,IgG2a/IgG1比值为1.63(P＜0.05);细胞因子检测表明chitosan-pcDNA3-VP1组IFN-γ表达显著高于IL-4,相对定量后IFN-γ/IL-4比值为2.1;而pcDNA3-VP1、pcDNA3组分别为1.25和0.78.结论chitosan-pcDNA3-VP1基因疫苗经滴鼻免疫可诱导Th1型免疫应答.

关键词：脱乙酰壳多糖 DNA疫苗 B组3型柯萨奇病毒

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