检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物与感染 2020年第1期15卷 3-6页

作者：闻玉梅复旦大学上海医学院基础医学院教育部、卫健委、医科院医学分子病毒学重点实验室上海200032

近50年来,新的冠状病毒不断出现,引起人类及动物的各种疾病。近期,在武汉肺炎患者中分离到新的冠状病毒。世界卫生组织(World Health Organization,WHO)认为,中国在短期内即初步鉴定出新病原,且采取了有效管控措施,显示了科学家的科技... 详细信息

近50年来,新的冠状病毒不断出现,引起人类及动物的各种疾病。近期,在武汉肺炎患者中分离到新的冠状病毒。世界卫生组织(World Health Organization,WHO)认为,中国在短期内即初步鉴定出新病原,且采取了有效管控措施,显示了科学家的科技实力及政府对突发新现传染病的处置能力。本文简要介绍了近年来新出现的冠状病毒并提出防控建议。

关键词：新冠状病毒肺炎防控

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丙型肝炎病毒高水平复制细胞株的构建及其机制初步研究

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微生物与感染 2020年第5期15卷 285-292页

作者：宋武慧易志刚复旦大学上海医学院基础医学院病原生物系教育部、卫健委、医科院医学分子病毒学重点实验室上海200032

旨在探讨丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)cured细胞株的易感机制。本研究将体外转录的HCV RNA电转入肝癌细胞系Huh 7细胞,建立HCV复制子细胞株,用γ-干扰素(interferon,IFN)处理复制子细胞株,获得HCV cured Huh 7A和Huh 7B细胞株... 详细信息

旨在探讨丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)cured细胞株的易感机制。本研究将体外转录的HCV RNA电转入肝癌细胞系Huh 7细胞,建立HCV复制子细胞株,用γ-干扰素(interferon,IFN)处理复制子细胞株,获得HCV cured Huh 7A和Huh 7B细胞株。用插入报告基因的HCV毒株Jc1-G感染上述细胞株,分别进行荧光素酶活性测定、蛋白质印迹法和荧光定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)检测以验证其易感性。收集Huh 7、Huh 7.5、Huh 7A和Huh 7B细胞并利用IFN-α处理,之后用蛋白质印迹法及荧光定量PCR进行检测,验证细胞株中IFN诱生信号通路中关键因子内源性表达及抗病毒活性ISGs的激活水平。结果显示,在Huh 7A和Huh 7B细胞中检测不到病毒RNA,与Huh 7细胞一致。病毒感染实验中,与Huh 7细胞相比,Huh 7A和Huh 7B细胞株中荧光素酶活性增高百倍,病毒蛋白表达和RNA水平亦显著上调,与Huh 7.5细胞株中的表达水平接近。IFN信号通路实验中,与Huh 7细胞相比,Huh 7A和Huh 7B细胞株中RIG-I/MDA5/MAVS内源性蛋白表达和mRNA水平无明显差异;IFN-α处理细胞后IFN刺激基因isg56,mx1,mx2,oax1,oax2,viperin,cxcl10,ifitm1和ifitm3激活水平亦无显著变化。结果提示,本研究制备的Huh 7A和Huh 7B细胞株可支持HCV高水平复制,将为研究病毒复制机制提供有力的支持。

关键词：丙型肝炎病毒丙型肝炎病毒cured细胞株 γ-干扰素干扰素刺激基因

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单克隆抗体药物自主研发加速

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前沿科学 2020年第2期 77-81页

作者：王应丹傅琪情吴凡黄竞荷复旦大学上海医学院基础医学院教育部、卫健委、医科院医学分子病毒学重点实验室上海公共卫生临床中心

自2019年12月以来,由新型冠状病毒(SARS-CoV-2)引起的新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疫情给人类健康和全球公共卫生安全带来严峻挑战.目前全球的科研机构和制药企业都在全力研究和开发用于预防和治疗新型冠状病毒的抗病毒药物,中和抗体是...

自2019年12月以来,由新型冠状病毒(SARS-CoV-2)引起的新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疫情给人类健康和全球公共卫生安全带来严峻挑战.目前全球的科研机构和制药企业都在全力研究和开发用于预防和治疗新型冠状病毒的抗病毒药物,中和抗体是研究的主要热点之一.

关键词：

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葡萄球菌万古霉素耐药相关双组分系统VraSR研究进展

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中华微生物学和免疫学杂志 2019年第2期39卷 150-156页

作者：陈红玲孟媛媛武有聪白丽瞿涤大理大学基础医学院病原生物学综合实验室 671000 大理大学基础医学院医学微生物学及免疫学教研室 671000 复旦大学上海医学院医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室 200032

葡萄球菌万古霉素耐药相关(vancomycin-resistance associated sensor/regulator,VraSR)双组分系统能感应细胞壁的损伤,并将此信号传至胞内,调控下游相关基因的转录,以应对外界环境压力的变化。有研究表明,金黄色葡萄球菌VraSR通过调控... 详细信息

葡萄球菌万古霉素耐药相关(vancomycin-resistance associated sensor/regulator,VraSR)双组分系统能感应细胞壁的损伤,并将此信号传至胞内,调控下游相关基因的转录,以应对外界环境压力的变化。有研究表明,金黄色葡萄球菌VraSR通过调控一系列与肽聚糖合成相关基因的转录引起耐药性增加。表皮葡萄球菌中也存在类似的双组分系统,而且与金黄色葡萄球菌VraSR具有较高同源性,但是目前尚不清楚两者在耐药性及致病性上有什么异同。本文结合课题组研究工作,简要综述葡萄球菌VraSR双组分系统的调控机制。

关键词：双组分系统 VraSR 葡萄球菌

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一种有效敲低原代B细胞中目的基因表达以快速鉴定基因功能方法的建立

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微生物与感染 2020年第4期15卷 220-227页

作者：刘佳万思敏白露李建华复旦大学上海医学院基础医学院病原生物学系教育部、卫健委、医科院医学分子病毒学重点实验室上海200032

B细胞介导的抗病毒体液免疫应答过程涉及大量基因的上调表达,为快速鉴定这些基因的功能,需在体外建立一种有效敲低B细胞中目的基因表达以研究基因功能的方法,但目前已有的方法转导效率较低且很少将B细胞转移到小鼠体内以观察其增殖和分... 详细信息

B细胞介导的抗病毒体液免疫应答过程涉及大量基因的上调表达,为快速鉴定这些基因的功能,需在体外建立一种有效敲低B细胞中目的基因表达以研究基因功能的方法,但目前已有的方法转导效率较低且很少将B细胞转移到小鼠体内以观察其增殖和分化。本研究首先将Drosha酶特异性小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)与反转录病毒包装质粒共转染至病毒包装细胞中,大大提高了病毒的滴度;其次,在培养基中加入抗CD180抗体,构建了原代B细胞的体外培养体系,使B细胞在保持自身特性的同时具有较强的增殖能力;再次,增加离心感染(spin infection)次数,进一步提高了B细胞的转导效率;另外,通过小鼠预先感染,可收获更多增殖、分化的B细胞以供表型分析。通过上述改进措施,成功敲除了B细胞功能基因Bcl6的表达,验证了其抗凋亡功能。该方法的建立为研究病毒急、慢性感染中B细胞的增殖、分化与缺陷机制奠定了良好基础。

关键词： B细胞基因功能反转录病毒短发夹核糖核酸转导

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结构域B在鼠冠状病毒S蛋白的抗原性及膜融合中的作用

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微生物与感染 2020年第1期15卷 22-30页

作者：徐娅佳王玉燕叶荣复旦大学上海医学院基础医学院病原生物学系教育部、卫健委、医科院医学分子病毒学重点实验室上海200032

棘突(spike,S)蛋白是冠状病毒表面必不可少的跨膜糖蛋白,在病毒进入宿主细胞时具有结合受体和诱导膜融合的双重作用。大部分冠状病毒S蛋白的受体结合域位于S1-CTD(即相对应的结构域B),而经典的乙型冠状病毒模型鼠肝炎病毒(mouse hepatit... 详细信息

棘突(spike,S)蛋白是冠状病毒表面必不可少的跨膜糖蛋白,在病毒进入宿主细胞时具有结合受体和诱导膜融合的双重作用。大部分冠状病毒S蛋白的受体结合域位于S1-CTD(即相对应的结构域B),而经典的乙型冠状病毒模型鼠肝炎病毒(mouse hepatitis virus,MHV)的受体mCEACAM1a与S1-NTD(即相对应的结构域A)结合,其结构域B的作用仍未完全清楚。本研究通过构建结构域B和S2膜融合元件的缺失突变体,并使其在鼠神经母细胞瘤细胞系Neuro-2a内成功表达,证实了结构域B对病毒S蛋白导致的细胞-细胞间膜融合是必需的。用不同方法处理的病毒颗粒作为抗原免疫小鼠,所获得的多克隆抗体进一步显示,结构域B不但是S蛋白的主要抗原决定簇,而且能诱导中和抗体明显抑制病毒感染和S蛋白介导的膜融合作用。此结果为阐述不同冠状病毒的致病性与感染性差异提供了新思路。

关键词：鼠冠状病毒棘突蛋白结构域B 优势抗原膜融合

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从新型冠状病毒疫情看生物安全三级实验室的应急能力及内涵建设

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微生物与感染 2020年第4期15卷 233-240页

作者：蔡霞韩文东孙志平钱韵陈力谢幼华瞿涤复旦大学生物安全三级实验室上海200032 复旦大学上海医学院基础医学院教育部、卫健委、医科院医学分子病毒学重点实验室上海200032

面对突发疫情,生物安全三级(biosafety level 3,BSL-3)实验室是否能及时启动并稳定、安全运行,为科研攻关提供安全、可靠的技术平台,是对实验室应急能力的考验。针对2019冠状病毒病疫情,复旦大学BSL-3实验室紧急启动开展冠状病毒实验的... 详细信息

面对突发疫情,生物安全三级(biosafety level 3,BSL-3)实验室是否能及时启动并稳定、安全运行,为科研攻关提供安全、可靠的技术平台,是对实验室应急能力的考验。针对2019冠状病毒病疫情,复旦大学BSL-3实验室紧急启动开展冠状病毒实验的申请流程。经国家合格评定认可委员会(China National Accreditation Service for Conformity Assessment,CNAS)和国家卫生健康委员会批准,实验室在开展实验1周内即从来自上海患者标本中分离到新型冠状病毒毒株,体现了平时实验室内涵建设的重要性。BSL-3实验室的内涵建设包括实验室风险评估及管理、不同人员针对性培训、设施和设备管理等生物安全管理体系的建设。本文介绍复旦大学BSL-3实验室在应急能力及内涵建设方面的经验和体会,期望对BSL-3实验室的建设和管理提供参考。

关键词：新型冠状病毒生物安全三级实验室应急能力内涵建设实验室管理

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安全、便捷技术再生一次性医用口罩的实验研究

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微生物与感染 2020年第1期15卷 31-35页

作者：宋武慧潘滨阚海东徐燕意易志刚复旦大学上海医学院基础医学院教育部、卫健委、医科院医学分子病毒学重点实验室上海200032 复旦大学公共卫生学院环境卫生学教研室上海200032

在防控新型冠状病毒(2019 novel coronavirus,2019-nCoV)疫情中,为了减少病毒的传播,一次性医用口罩是普通民众必不可缺少的防护品。然而,随着2019-nCoV的蔓延,口罩短缺现象严重。本研究旨在探讨一次性医用外科口罩(口罩)的再生方法,以... 详细信息

在防控新型冠状病毒(2019 novel coronavirus,2019-nCoV)疫情中,为了减少病毒的传播,一次性医用口罩是普通民众必不可缺少的防护品。然而,随着2019-nCoV的蔓延,口罩短缺现象严重。本研究旨在探讨一次性医用外科口罩(口罩)的再生方法,以达到既有个人防护的效果又能节省资源。用流行性感冒病毒(简称流感)模拟2019-nCoV污染口罩,采用常用的恒温烘箱干烤及电吹风机热风处理2种方法,对表面污染有流感病毒的医用口罩进行病毒灭活,洗脱口罩上已灭活处理的病毒,感染Mardin-Darby狗肾细胞(Mardin-Darby canine kidney cell,MDCK细胞),观察细胞病变并定量检测病毒基因组拷贝数以评价病毒灭活效果。同时采用抽滤系统和PM 2.5监测仪对以2种相似热灭活方式处理过的口罩滤过截留PM 2.5的效果进行评价。结果显示电吹风机30 min热风处理后病毒基因组拷贝数降低至原来的1/1000000~1/10000000,接近未感染组,但烘箱56℃30 min干热处理仅灭活部分病毒。2种热灭活方式对口罩的PM 2.5滤过截留效果无显著影响。本研究提供了一个安全、便捷处理一次性医用外科口罩的方法,为个人防护用品口罩表面污染病毒的灭活及其再生利用提供了科学依据。然而,应注意的是在口罩匮乏的非常时期,普通人群可采用该简便技术再生口罩后再次使用,但该方法再生的口罩不适合密切接触患者的人群、医护人员及实验室工作人员使用。

关键词：热灭活医用口罩滤过截留流行性感冒病毒新型冠状病毒

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我国甲型肝炎疫苗的研制及应用历程

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国际流行病学传染病学杂志 2021年第4期48卷 334-338页

作者：宋洁玉王松梅汪萱怡复旦大学附属华山医院感染科上海200040 复旦大学生物医学研究院暨教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032 复旦大学基础医学院医学实验教学中心上海200032 上海市重大传染病和生物安全研究院 200032 复旦大学附属儿科医院上海201102

甲型肝炎是一种古老的疾病,主要通过粪-口途径传播,人群对其普遍易感。甲型肝炎在世界各地均有流行,我国曾属于甲型肝炎高度流行区。1988年,由于江苏吕泗港海域毛蚶被污染,导致上海甲型肝炎大流行,发病率超过4%,总临床病例数高达29.2万... 详细信息

甲型肝炎是一种古老的疾病,主要通过粪-口途径传播,人群对其普遍易感。甲型肝炎在世界各地均有流行,我国曾属于甲型肝炎高度流行区。1988年,由于江苏吕泗港海域毛蚶被污染,导致上海甲型肝炎大流行,发病率超过4%,总临床病例数高达29.2万,之后,在党和政府的大力支持和推动下,我国甲型肝炎疫苗的研制开始加速,并获得了成功,有效地控制了甲型肝炎在我国的流行。

关键词：甲型肝炎疫苗流行模式影响中国免疫消除

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血流感染碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌的耐药分析及同源性研究

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微生物与感染 2020年第6期15卷 354-359页

作者：杨思宇徐水宝陈重张文宏金嘉琳陈澍复旦大学附属华山医院感染科上海200040 复旦大学上海医学院基础医学院病原生物学系教育部、卫健委、医科院医学分子病毒学重点实验室上海200030

本研究旨在探讨血流感染碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumonia,CRKP)的耐药特点、分子分型特征和菌株同源性,为CRKP感染的临床诊治和预防控制提供理论参考。收集2015年4月至2018年3月期间就诊于上海... 详细信息

本研究旨在探讨血流感染碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumonia,CRKP)的耐药特点、分子分型特征和菌株同源性,为CRKP感染的临床诊治和预防控制提供理论参考。收集2015年4月至2018年3月期间就诊于上海市某三甲医院患者血标本分离的肺炎克雷伯菌(KP)非重复菌株,采用VITEK 2 Compact全自动细菌鉴定仪鉴定细菌并进行药物敏感性试验,共获得51株CRKP。对CRKP菌株使用纸片扩散法或琼脂稀释法进行15种抗菌药物的敏感性试验;采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测碳青霉烯酶基因型;通过脉冲场凝胶电泳和多位点序列分型(MLST)技术分析菌株同源性。结果显示,51株CRKP对检测的15种临床常用抗菌药物呈广泛耐药,对其中的哌拉西林、头孢唑啉、头孢吡肟、头孢噻肟、头孢呋辛、头孢他啶、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦和环丙沙星耐药率为100%;对阿米卡星、庆大霉素和复方新诺明的耐药率较高,分别为76.5%、90.2%和62.8%;对替加环素耐药率较低,为3.9%。51株CRKP均检测出bla KPC基因,经测序鉴定为bla KPC-2基因,提示产KPC-2是CRKP对碳青霉烯类耐药的主要机制。MLST检测到4种ST型别,以ST11型为主,共43株(84.3%),另有ST15型6株(11.8%),ST4845型1株及1株新分型。51株CRKP的PFGE图谱相似性系数在62.9%~100%,可分为19个簇(A-S簇),每簇分别包含1~12个菌株。其中A簇(13.7%)和G簇(23.5%)包含的菌株相对较多,且MLST分型均为ST11型,为优势簇。G簇包含7个型别,G4型为主要克隆菌株。ST11型为CRKP的主要型别,PFGE分析表明该院存在菌株的克隆传播,应规范抗菌药物使用,同时加强细菌耐药性监测和医院内感染的防控工作。

关键词：抗生素碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌血流感染脉冲场凝胶电泳多位点序列分型同源性

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