检索结果-内蒙古大学图书馆

Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2003年第7期35卷 661-665页

作者：张宇清李平侯敏王霞樊静谭理朱运松复旦大学上海医学院分子遗传学教研室教育部分子医学重点实验室上海200032 复旦大学上海医学院分子遗传学教研室

2型纤溶酶原激活物抑制剂 (plasminogenactivatorinhibitortype 2 ,PAI 2 )除了参与纤溶活性的调节、肿瘤的浸润和迁移外 ,在抑制细胞凋亡方面也发挥着重要作用。现已明确 ,PAI 2分子中的CD螺旋间区是PAI 2与其他蛋白质相互作用的结构... 详细信息

2型纤溶酶原激活物抑制剂 (plasminogenactivatorinhibitortype 2 ,PAI 2 )除了参与纤溶活性的调节、肿瘤的浸润和迁移外 ,在抑制细胞凋亡方面也发挥着重要作用。现已明确 ,PAI 2分子中的CD螺旋间区是PAI 2与其他蛋白质相互作用的结构域 ,该区的缺失将直接导致PAI 2丧失对TNF α诱导细胞凋亡的拮抗功能 ,但其作用机制不详。以PAI 2的CD螺旋间区为诱饵 ,利用Gal 4酵母双杂交系统筛选凋亡过程中的HeLa细胞cDNA文库 ,发现干扰素调节因子 3(interferonregulatoryfactor 3,IRF 3)C端的 98个氨基酸残基与PAI 2的CD螺旋间区之间存在相互作用。通过RT PCR获得IRF 3的全长cDNA。免疫共沉淀实验进一步证实PAI 2通过其CD螺旋间区与IRF 3在细胞内也存在特异性的相互作用。IRF 3是一种转录调节因子 ,在抗病毒感染、免疫调节、病毒诱导的细胞凋亡中发挥重要作用。因此证实PAI 2与IRF 3之间存在相互作用 ,为进一步研究PAI 2参与抗病毒感染或抗细胞凋亡等方面打下了基础

关键词： 2型纤溶酶原激活物抑制剂干扰素调节因子3 酵母双杂交免疫共沉淀

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卵黄蛋白原1(vtg1)启动子调控绿色荧光蛋白表达的转基因斑马鱼的构建

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生物化学与生物物理进展 2006年第10期33卷 965-970页

作者：陈浩杨健王跃祥蒋璆徐绘宋后燕复旦大学上海医学院分子遗传学教研室分子医学教育部重点实验室上海200032

环境雌激素严重危害人类的健康.为了简便直观地检测水环境中的雌激素污染,构建了一种转基因斑马鱼,在这种鱼的体内,利用卵黄蛋白原1(vitellogenin1,vtg1)的启动子调控报告基因绿色荧光蛋白(enhancedgreenfluorescentprotein,EGFP)的表达... 详细信息

环境雌激素严重危害人类的健康.为了简便直观地检测水环境中的雌激素污染,构建了一种转基因斑马鱼,在这种鱼的体内,利用卵黄蛋白原1(vitellogenin1,vtg1)的启动子调控报告基因绿色荧光蛋白(enhancedgreenfluorescentprotein,EGFP)的表达.用1ng/L的17!-炔雌醇(17'-ethynylestradiol,EE2)诱导4天后,仔鱼肝脏中出现绿色荧光.RT-PCR和整体原位杂交实验证实,仔鱼体内EGFP和vtg1的时空表达模式相同.通过在显微镜下观察转基因鱼的绿色荧光,可以直观判断水环境中是否含有雌激素活性物质.该研究为环境雌激素的监测提供了一种简便直观的新型工具.

关键词：转基因斑马鱼绿色荧光蛋白卵黄蛋白原启动子环境雌激素

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C/EBPα基因在大鼠肝星状细胞内的表达及意义

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中华肝脏病杂志 2004年第5期12卷 259-262页

作者：黄瑾张锦生黄光存汤其群陈晨张秀荣陈琦复旦大学上海医学院病理学系 200032 复旦大学上海医学院分子遗传学教研室 200032

目的初步探讨CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)在肝星状细胞(HSC)激活过程中的作用。方法采用免疫细胞化学、western blot及RT-PCR检测原代培养不同时间段HSC内C/EBPα蛋白和mRNA的表达,以及α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、结蛋白、基质... 详细信息

目的初步探讨CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)在肝星状细胞(HSC)激活过程中的作用。方法采用免疫细胞化学、western blot及RT-PCR检测原代培养不同时间段HSC内C/EBPα蛋白和mRNA的表达,以及α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、结蛋白、基质金属蛋白酶-2(MMP2)mRNA、Ⅰ型前胶原(α1)mRNA的表达;Lipofect AMINE2000介导的瞬时转染方法将pcDNA3.1(-)-C/EBPα真核表达质粒转染入激活的HSC内,采用免疫细胞化学方法鉴定转染成功及转染后HSC内增殖细胞核抗原(PCNA)的表达;在相差显微镜下观察HSC在原代培养过程中形态的改变。结果原代正常HSC中可以检测到C/EBPα mRNA和蛋白的表达,蛋白位于细胞质和细胞核内,但主要位于细胞质内,且除新鲜分离(0d)组以外,随着HSC培养至2、4、7、10d,C/EBPα蛋白和mRNA的表达呈逐步下降的趋势,而α-SMA、MMP2和Ⅰ型前胶原(α1)的表达则逐步增强;转染后24 h,目的基因转染组HSC内C/EBPα的表达明显强于空载体对照组,而PCNA的阳性细胞数较空载体对照组明显减少;转染后36 h,目的基因转染组细胞几乎全部死亡,残存的细胞形态变细,体积缩小,而空载体对照组细胞仍存活。结论 C/EBPα基因可能参与HSC的激活调控机制,且C/EBPα过表达对HSC的增殖存在抑制作用。

关键词：肝星状细胞 DNA结合蛋白 C/EBPα基因大鼠 HSC 免疫细胞化学调控机制增殖抑制

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TNF-α和IFN-γ刺激的人脐静脉内皮细胞上IgG受体的表达

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细胞与分子免疫学杂志 2005年第6期21卷 683-686页

作者：潘銮凤吴春根裴鹏朱运松复旦大学上海医学院分子生物学实验室上海200032 复旦大学上海医学院教育部分子医学重点实验室分子遗传学教研室上海200032

目的:检测IgG受体(FcγR)在炎症细胞因子刺激的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)上的表达。方法:采用ELISA、免疫组化染色法、免疫荧光法和RT-PCR等方法,检测FcγRII及其表达。结果:未经细胞因子刺激的正常HU-VEC可表达低水平的FcγRIIa;经2... 详细信息

目的:检测IgG受体(FcγR)在炎症细胞因子刺激的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)上的表达。方法:采用ELISA、免疫组化染色法、免疫荧光法和RT-PCR等方法,检测FcγRII及其表达。结果:未经细胞因子刺激的正常HU-VEC可表达低水平的FcγRIIa;经2×105U/L TNF-α和1×105U/L IFN-γ联合刺激3d后,FcγRIIa的表达提高16倍(P<0.01)。免疫荧光法检测显示,TNF-α和IFN-γ诱导的FcγRIIa表达于HUVEC表面。RT-PCR结果显示,FcγRIIamRNA表达量在TNF-α和IFN-γ刺激24h后有明显提高。结论:TNF-α和IFN-γ可通过调节FcγRIIa的转录和翻译,增强其在HUVEC上的表达。FcγRIIa的表达可能与血管炎条件下,免疫复合物在血管上的特异性定位有关。

关键词： IgG受体人脐静脉内皮细胞 TNF—α IFN-γ 表达

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重组葡激酶在大鼠静脉注射给药后的药代动力学

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复旦学报（医学版） 2002年第4期29卷 308-310页

作者：许长江刘骁李端黄阳滨于敏莫炜复旦大学药学院药理学教研室上海200032 复旦大学医学院分子遗传学研究室上海200032

目的　研究重组葡激酶 (r Sak)在大鼠静脉注射后的药代动力学。方法　大鼠静注r Sak 10 0、30 0与90 0 μg·kg-1,采用生物免疫发色底物法和牛奶板溶圈法测定活性 ,以单抗测定含量。结果　r Sak静注后 ,在大鼠体内过程符合二室模型... 详细信息

目的　研究重组葡激酶 (r Sak)在大鼠静脉注射后的药代动力学。方法　大鼠静注r Sak 10 0、30 0与90 0 μg·kg-1,采用生物免疫发色底物法和牛奶板溶圈法测定活性 ,以单抗测定含量。结果　r Sak静注后 ,在大鼠体内过程符合二室模型。测定活性表明 ,3种剂量r Sak的T1/2α分别为 (1.79± 0 .76 )、(1.99± 0 .6 0 )及(2 .2 2± 1.0 1)min ;T1/2 β分别为 (2 0 .2 4± 11.15 )、(2 5 .32± 9.2 6 )及 (2 6 .45± 11.6 4)min ;AUC0 T 分别为(182 .88± 6 4.0 7)、(376 .2 6± 71.14)及 (1311.4± 36 9.4)HI·min·mL-1;测定含量表明 ,3种剂量r Sak的T1/2α分别为 (1.5 8± 0 .86 )、(1.2 2± 0 .5 7)及 (1.49± 0 .47)min ;T1/2 β分别为 (16 .5 8± 6 .75 )、(12 .94± 3.13)及 (15 .5 4± 3.88)min ;AUC0 T分别为 (2 .0 5± 0 .75 )、(5 .6 5± 2 .5 3)及 (13.18± 5 .43) μg·min·mL-1。结论　r Sak在大鼠体内过程符合二室模型 ,经方差检验 ,各剂量间药代动力学参数均无显著性差异 (P >0 .0 5 )。

关键词：重组葡激酶大鼠静脉注射药代动力学

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Miyabenol C和Kobophenol A促MCF-7细胞生长作用途径

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复旦学报（医学版） 2002年第6期29卷 454-457页

作者：田春艳徐光胡昌奇宋后燕复旦大学医学院分子遗传学研究室复旦大学药学院天然药物化学教研室上海200032

目的　检测miyabenolC(MiyC)和kobophenolA(KobA)是否通过依赖雌激素受体 (ER)发挥促雌激素受体阳性细胞MCF 7生长的作用。方法　构建雌激素受体反义表达质粒 (pCASER) ,转染MCF 7细胞株 ,经G418筛选 ,PCR、Westernblot鉴定筛选出阳性... 详细信息

目的　检测miyabenolC(MiyC)和kobophenolA(KobA)是否通过依赖雌激素受体 (ER)发挥促雌激素受体阳性细胞MCF 7生长的作用。方法　构建雌激素受体反义表达质粒 (pCASER) ,转染MCF 7细胞株 ,经G418筛选 ,PCR、Westernblot鉴定筛选出阳性表达克隆 (MTASER)。运用MTT法检测药物对细胞生长状况的影响。运用放射竞争结合实验检测药物与ER的结合。结果　MiyC和KobA对MCF 7细胞的促生长作用大于对MTASER细胞的作用 ;MiyC和KobA均可竞争性抑制ER与 17β 雌二醇的结合。结论　在一定浓度范围内 ,MiyC和KobA依赖ER发挥促细胞生长的作用。

关键词： MiyabenolC KobophenolA 雌激素受体雌激素细胞生长

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人载脂蛋白H的分离、纯化和鉴定

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复旦学报（医学版） 2009年第1期36卷 61-64页

作者：王聪孙益红汪学非马端李希汤其群秦新裕复旦大学附属中山医院普外科上海200032 复旦大学上海医学院分子遗传学研究室上海200032 复旦大学生物医学研究院上海200032

目的探索一种相对简便而高效的方法,从人血浆中分离、纯化载脂蛋白H。方法用高氯酸预处理血浆,以离子交换色谱和亲和色谱相结合的方法进行蛋白质的分离和纯化。用SDS-聚丙烯凝胶电泳和Western blot对纯化产品进行鉴定。用BCA蛋白质定量... 详细信息

目的探索一种相对简便而高效的方法,从人血浆中分离、纯化载脂蛋白H。方法用高氯酸预处理血浆,以离子交换色谱和亲和色谱相结合的方法进行蛋白质的分离和纯化。用SDS-聚丙烯凝胶电泳和Western blot对纯化产品进行鉴定。用BCA蛋白质定量测定试剂盒测定获得载脂蛋白H的量。结果连续分离、纯化3次,每次获得的产品纯度均大于98%,且经Western blot分析均能与抗β2-GlycoproteinⅠ单克隆抗体呈阳性反应。3次纯化共获得apoH12.56 mg,平均21 mg/L。结论本方法重复性好、可靠性高,较传统方法更为简便和经济。

关键词：载脂蛋白H 分离纯化鉴定

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血小板活化因子受体在不同病理类型卵巢上皮性癌中的表达及意义

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中华妇产科杂志 2010年第12期45卷 931-934页

作者：姜伟张彭南谭理康玉程明军徐丛剑 Bin Ye 复旦大学附属妇产科医院妇科上海200011 复旦大学上海医学院分子遗传学教研室上海200011 Department of OB&GYN Brigham and Women's tlospital Harvard Medical School

卵巢上皮性癌（卵巢癌）是妇科常见的恶性肿瘤之一,病理类型复杂,包括卵巢浆液性腺癌、黏液性腺癌、子宫内膜样癌及透明细胞癌等.目前的治疗方式仍然是手术及术后辅以铂类和紫杉醇等药物为主的化疗,但效果不满意,5年生存率仍徘徊在40%左... 详细信息

卵巢上皮性癌（卵巢癌）是妇科常见的恶性肿瘤之一,病理类型复杂,包括卵巢浆液性腺癌、黏液性腺癌、子宫内膜样癌及透明细胞癌等.目前的治疗方式仍然是手术及术后辅以铂类和紫杉醇等药物为主的化疗,但效果不满意,5年生存率仍徘徊在40%左右[1].

关键词：卵巢上皮性癌血小板活化因子受体病理类型卵巢浆液性腺癌子宫内膜样癌透明细胞癌 5年生存率恶性肿瘤

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T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1的结构与功能

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生命的化学 2003年第4期23卷 247-249页

作者：谭理朱运松复旦大学上海医学院分子遗传学教研室上海200032

T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1(T-lymphoma invasion and metastasis inducing factor 1,Tiaml)是Ras相关的C3肉毒素底物1(Ras-Related C3 botulinum toxin substrate 1,Racl)的特异性鸟苷酸交换因子(guanine nucleotide ex-change factor,GEF)。在细胞外信号刺激下Tiaml可以促进Racl从无活性的GDP结合状态向有活性的GTP结合状态转换,有活性的Racl-GTP与不同的下游效应分子相互作用,从而影响多种细胞事件。

关键词： Tiam1 Rac1

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生长激素相关基因突变与原发闭经的关系

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华中科技大学学报（医学版） 2005年第4期34卷 472-474页

作者：刘学飞杨真荣王慧周波陈燕唐艳平复旦大学上海医学院分子医学教育部重点实验室上海200032 华中科技大学同济医学院遗传学教研室武汉430030

目的探讨生长激素相关基因突变与原发闭经的关系。方法对130例确诊为原发闭经的患者和30名健康女性个体进行核型分析,并采用单链构象多态性分析(SSCP)等方法,对原发闭经患者的生长激素释放激素受体基因(GHRHR)进行检测。结果有33例原发... 详细信息

目的探讨生长激素相关基因突变与原发闭经的关系。方法对130例确诊为原发闭经的患者和30名健康女性个体进行核型分析,并采用单链构象多态性分析(SSCP)等方法,对原发闭经患者的生长激素释放激素受体基因(GHRHR)进行检测。结果有33例原发闭经患者出现染色体核型异常,1例出现GHRHR基因点突变,且该突变位点在第7个外显子中。结论GHRHR基因第7个外显子的点突变可能是原发闭经的病因之一。

关键词：原发闭经单链构象多态性分析生长激素生长激素释放激素受体

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