检索结果-内蒙古大学图书馆

法医学杂志 2005年第2期21卷 115-117页

作者：陈新沈忆文顾云菊刘志萍孙淑惠赵子琴上海市刑事科学技术研究所上海200083 复旦大学上海医学院法医学系上海200032 复旦大学上海医学院卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

目的研究人死后各器官组织细胞DNA降解变化规律,探讨其在推断死亡时间方面的应用价值,为推断死亡时间提供科学依据。方法已知死亡时间人尸体的心、肝、脾、肾,按死后6,12,24和48h四个时间段取材,制成石蜡切片,经Feulgen染色并图像分析;... 详细信息

目的研究人死后各器官组织细胞DNA降解变化规律,探讨其在推断死亡时间方面的应用价值,为推断死亡时间提供科学依据。方法已知死亡时间人尸体的心、肝、脾、肾,按死后6,12,24和48h四个时间段取材,制成石蜡切片,经Feulgen染色并图像分析;同时将各器官组织按不同时间段取材,制成单细胞悬液,应用流式细胞仪检测DNA含量。结果(1)人体各器官组织细胞经FCM检测,脾细胞核DNA随死亡时间延长呈现较好的下降梯度,而心、肝、肾,则由于自溶较快,死后6h细胞核DNA含量已很低,其变化情况与死亡时间的相关性不佳;(2)各器官组织细胞核DNA染色强度指数均随死亡时间的延长而下降。结论(1)机体死亡后,各器官组织细胞核DNA含量随死亡时间延长逐渐减少,具有一定的变化规律,其中以脾细胞核DNA含量的变化趋势与死亡时间最具相关性,肝、肾次之,而心最差;(2)方法学分析,图像分析技术(IAT)与流式细胞术(FCM)两种检测方法在研究组织细胞DNA含量变化方面,各有利弊,可互补不足。

关键词：组织细胞DNA 死亡时间含量变化相关性研究细胞核DNA含量流式细胞术(FCM) Feulgen染色流式细胞仪检测图像分析技术变化规律时间延长器官组织 DNA降解单细胞悬液 FCM检测 DNA染色方法学分析应用价值科学依据

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志贺菌属致病的研究进展

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国外医学（微生物学分册） 2004年第6期27卷 22-24页

作者：唐传玲瞿涤复旦大学上海医学院教育部医学分子病毒学实验室复旦大学上海医学院卫生部医学分子病毒学实验室

致病岛是指细菌染色体上具有典型结构特征的基因片段,主要编码细菌毒力及代谢相关产物.志贺菌属基因组中已发现了多个致病岛,并广泛存在于该菌属的各群细菌中,与致病性和耐药性等密切相关.对志贺菌属致病岛的研究为进一步深入理解其致... 详细信息

致病岛是指细菌染色体上具有典型结构特征的基因片段,主要编码细菌毒力及代谢相关产物.志贺菌属基因组中已发现了多个致病岛,并广泛存在于该菌属的各群细菌中,与致病性和耐药性等密切相关.对志贺菌属致病岛的研究为进一步深入理解其致病机制、开发防治细菌性痢疾的新策略提供了理论依据.

关键词：志贺菌属致病机制细菌染色体研究进展细菌性痢疾耐药性基因片段毒力致病性代谢

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分枝杆菌经宿主GPR84促进感染诱导的脂滴生成并加速传染进程

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现代免疫学 2025年第1期45卷 7-13页

作者：周静热孜亚·吾买尔陈紫涵刘建新王德成晏博三峡大学基础医学院肿瘤微环境与免疫治疗湖北省重点实验室宜昌443002 三峡大学基础医学院宜昌市感染与炎症损伤研究所宜昌443002 上海市复旦大学附属公共卫生临床中心结核病研究中心上海201508 复旦大学基础医学院医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室上海200032 西藏民族大学医学部生命科学高校重点实验室咸阳712082

为探讨G蛋白偶联受体84(G-protein-coupled receptor 84,GPR84)基因在分枝杆菌感染中的作用,研究首先构建GPR84基因突变型斑马鱼,观察海分枝杆菌(Mycobacterium marinum)感染后斑马鱼体内细菌的增殖情况及宿主生存期表型,机制上首先采... 详细信息

为探讨G蛋白偶联受体84(G-protein-coupled receptor 84,GPR84)基因在分枝杆菌感染中的作用,研究首先构建GPR84基因突变型斑马鱼,观察海分枝杆菌(Mycobacterium marinum)感染后斑马鱼体内细菌的增殖情况及宿主生存期表型,机制上首先采用中性红染色及苏丹黑染色分别排除了GPR84对巨噬细胞和中性粒细胞发育的影响,并通过斑马鱼切尾实验评估GPR84缺失对中性粒细胞募集的影响。进一步通过油红O染色评估了染菌斑马鱼体内脂滴生成情况,并通过qRT-PCR检测感染后斑马鱼脂质代谢相关基因及炎性因子基因的转录水平。以上实验结果显示,斑马鱼瞬时敲除GPR84后能抑制体内分枝杆菌的增殖,延长宿主生存期,但GPR84缺失不影响巨噬细胞和中性粒细胞的发育,且不影响中性粒细胞的募集;GPR84突变型斑马鱼在分枝杆菌感染后脂滴生成减少,并且伴随着胆固醇的外排泵ATP结合盒转运蛋白G1(ATP-binding cassette transporter G1,ABCG1)基因表达下调,而炎性因子的mRNA表达上调。该研究提示分枝杆菌可能通过宿主GPR84诱导脂滴生成以抑制分枝杆菌感染过程中宿主炎性因子的表达,最终促进细菌传染进程。

关键词：分枝杆菌 G蛋白偶联受体84 脂滴斑马鱼

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疫苗免疫持久性评价

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中华预防医学杂志 2022年第2期56卷 212-217页

作者：陈颖周弘璐赵玉良汪萱怡河北省疾病预防控制中心疫苗临床研究所石家庄050021 复旦大学上海医学院生物医学研究院上海200032 复旦大学上海医学院医学分子病毒学教育部国家卫生健康委重点实验室上海200032 复旦大学附属儿科医院上海201102

疫苗的免疫持久性评价方法包括直接评价、间接评价以及模型预测、Meta分析等方法。直接评价通过评价疫苗对所预防疾病发病和(或)感染的保护作用来评价疫苗的免疫持久性,是疫苗的免疫持久性评价的金标准。通过免疫学替代指标间接评价疫... 详细信息

疫苗的免疫持久性评价方法包括直接评价、间接评价以及模型预测、Meta分析等方法。直接评价通过评价疫苗对所预防疾病发病和(或)感染的保护作用来评价疫苗的免疫持久性,是疫苗的免疫持久性评价的金标准。通过免疫学替代指标间接评价疫苗的免疫持久性,在实践中应用更为广泛。此外,数学模型、Meta分析等方法也可用于疫苗的免疫持久性评价。结合具体情况选择恰当的评价方法分析疫苗的免疫持久性,对完善疫苗免疫策略具有重要意义。

关键词：疫苗评价研究免疫持久性

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NEDDylation参与乙型肝炎病毒前基因组RNA的包装

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中华实验和临床病毒学杂志 2018年第5期32卷 458-462页

作者：李程张境王勇翔复旦大学基础医学院病原生物学系医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室上海200032

目的探讨类泛素化修饰NEDDylation对乙型肝炎病毒（hapetitis B virus，HBV）生活史的影响。方法利用不同浓度的NEDD8活化酶（NEDD8 activating enzyme，NAE）抑制剂MLN4924处理HepAD38细胞，阻断细胞内相关底物的活化过程，同时用HBV... 详细信息

目的探讨类泛素化修饰NEDDylation对乙型肝炎病毒（hapetitis B virus，HBV）生活史的影响。方法利用不同浓度的NEDD8活化酶（NEDD8 activating enzyme，NAE）抑制剂MLN4924处理HepAD38细胞，阻断细胞内相关底物的活化过程，同时用HBV聚合酶抑制剂拉米夫定（lamivudine，LAM）作对照，检测HBVDNA的复制、蛋白的表达、核衣壳的形成。利用聚合酶失活的HBV表达质粒转染Huh-7细胞，然后用0．1μmol／L的MLN4924处理细胞，并用0．1％的DMSO作对照，检测核衣壳和其中的pgRNA。结果HBV DNA复制随着MLN4924浓度增高而逐渐减弱。MLN4924浓度为0．1μmol／L时，细胞内核衣壳的量无明显变化，而其中HBV前基因组RNA（pregenomic RNA，pgRNA）下降了约47％。结论NEDDylation参与HBV pgRNA的包装。

关键词：肝炎病毒乙型 NEDDylation 复制 pgRNA包装

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开展多学科双向性转化型研究

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微生物与感染 2009年第1期4卷 3-3,12页

作者：闻玉梅复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室

虽然转化型研究已被提出数年,但一般强调的是基础理论研究联系临床医学或预防医学的问题并在一定程度上予以解决.

关键词：转化型多学科双向性预防医学临床医学环境卫生基础理论基础医学

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新的动物模型给肠道病毒71型疫苗研发带来新希望

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微生物与感染 2010年第4期5卷 199-199,217页

作者：王宾复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室

近年来手足口病病例增多,逐渐成为人们担忧的公共卫生问题,研制出相应疫苗成为关注的焦点.但此项疫苗的开发并不如人们想象中的那样简单.其中一个重要原因是,没有一个合适的动物模型来对研发后的疫苗进行免疫效果和安全性评价.本期刊登... 详细信息

近年来手足口病病例增多,逐渐成为人们担忧的公共卫生问题,研制出相应疫苗成为关注的焦点.但此项疫苗的开发并不如人们想象中的那样简单.其中一个重要原因是,没有一个合适的动物模型来对研发后的疫苗进行免疫效果和安全性评价.本期刊登了关于"肠道病毒71型灭活疫苗免疫恒河猴在攻毒实验中的感染动力学"的论文,就前期工作基础上研制的EV71灭活疫苗在成年恒河猴模型中进行了免疫保护效果的评价.

关键词：动物模型肠道病毒71型疫苗发带公共卫生问题安全性评价免疫效果

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从DNA疫苗到耐受疫苗:全新的适应症和抑炎前景

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生命的化学 2014年第1期34卷 23-28页

作者：耿爽钟一维王宾复旦大学上海医学院教育部和卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

DNA疫苗技术从1990年代发现到至今,已经创造成功了4个临床兽用疫苗或产品,并仍然有数十个产品正在临床验证的不同阶段。通过不断提高DNA质粒进入体细胞的效率,DNA疫苗将具有更强的免疫应答效率,从而使得DNA疫苗走向更多和更广泛的临床... 详细信息

DNA疫苗技术从1990年代发现到至今,已经创造成功了4个临床兽用疫苗或产品,并仍然有数十个产品正在临床验证的不同阶段。通过不断提高DNA质粒进入体细胞的效率,DNA疫苗将具有更强的免疫应答效率,从而使得DNA疫苗走向更多和更广泛的临床应用。DNA疫苗不仅可以增强机体免疫系统的应答反应,利用其与蛋白质疫苗共免疫的方式也可以产生特异性的免疫耐受反应用于抑制免疫反应。基于DNA疫苗的诱导免疫耐受的疫苗技术开辟了全新的过敏性疾病和自主免疫疾病的干预领域,具有重要的临床潜力和应用前景。

关键词： DNA疫苗耐受疫苗共免疫佐剂过敏性疾病自主免疫疾病

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一种高效的葡萄球菌基因敲除方法的建立与应用

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中国人兽共患病学报 2015年第12期31卷 1098-1102页

作者：朱涛段芹李朝品瞿涤皖南医学院医学寄生虫学教研室芜湖241002 皖南医学院口腔医学院芜湖241002 复旦大学教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

目的建立一种高效构建葡萄球菌基因敲除突变株的方法。方法通过融合PCR将vraSR操纵子上、下游同源片段连接起来;通过基于位点特异性重组的Gateway克隆技术将融合PCR产物连接入温度敏感型穿梭质粒pKOR1,转化修饰缺陷型大肠杆菌DC10B,获... 详细信息

目的建立一种高效构建葡萄球菌基因敲除突变株的方法。方法通过融合PCR将vraSR操纵子上、下游同源片段连接起来;通过基于位点特异性重组的Gateway克隆技术将融合PCR产物连接入温度敏感型穿梭质粒pKOR1,转化修饰缺陷型大肠杆菌DC10B,获得同源重组质粒pKOR1-vraSR;电转化表皮葡萄球菌RP62A株;在高温和氯霉素双重选择压力下,质粒通过第1次同源重组整合到表皮葡萄球菌染色体上;转移到无抗生素的培养基中继续培养,发生第2次同源重组;将菌液涂布于含1μg/mL脱水四环素的培养基上进行反向筛选,那些未发生重组的整合菌株因表达必需基因secY的反义RNA而无法生存,最后,挑取菌落通过PCR进行鉴定。结果成功构建了难以转化的表皮葡萄球菌RP62A株的vraSR基因敲除突变株。结论利用大肠杆菌DC10B和穿梭质粒pKOR1对葡萄球菌进行基因敲除的方法简便高效,适用的范围更广泛。

关键词：基因敲除葡萄球菌反向选择限制修饰系统

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新疆野生及栽培一枝蒿多糖对树突状细胞免疫功能的影响

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生物技术通报 2016年第7期32卷 217-226页

作者：杨雨杨秀梅赵干俞益张慧珍张爱莲新疆大学生命科学与技术学院新疆生物资源基因工程重点实验室乌鲁木齐830046 复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

研究和比较新疆野生与栽培一枝蒿多糖对骨髓来源树突状细胞(dendritic cells,DCs)成熟和功能的影响。超声法制备野生及栽培一枝蒿粗多糖;Sevage法除蛋白;蒽酮-硫酸法测定多糖含量;流式细胞术检测DCs的成熟;ELISA法检测IL-12和TNF-α的... 详细信息

研究和比较新疆野生与栽培一枝蒿多糖对骨髓来源树突状细胞(dendritic cells,DCs)成熟和功能的影响。超声法制备野生及栽培一枝蒿粗多糖;Sevage法除蛋白;蒽酮-硫酸法测定多糖含量;流式细胞术检测DCs的成熟;ELISA法检测IL-12和TNF-α的表达水平。结果显示,野生及栽培一枝蒿多糖含量分别为26.18%和22.14%,去除蛋白质后多糖含量分别为30.94%和27.06%;野生及栽培一枝蒿多糖均可以显著增强小鼠骨髓来源CD11c+DCs表面分子CD40,CD86及CD80的表达(P<0.05);显著促进IL-12和TNF-α的表达(P<0.05);显著降低DCs吞噬FITC-Dextran的能力;且相同剂量对DCs的免疫活性无显著性差异(P>0.05);除蛋白和不除蛋白的野生及栽培一枝蒿多糖的免疫活性均无显著差异(P>0.05)。新疆野生和栽培一枝蒿多糖含量差异较小,并均可以促进小鼠骨髓来源DCs的成熟和功能,且差异不大。

关键词：野生一枝蒿栽培一枝蒿多糖树突状细胞

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