检索结果-内蒙古大学图书馆

复旦学报（医学版） 2013年第1期40卷 1-4页

作者：柳清云孙刚高谦复旦大学上海医学院生物医学研究院-医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室上海200032

异质性耐药,是指在同一样本中同时存在耐药菌和敏感菌的现象,这体现了细菌群体从部分耐药向完全耐药转变的过程。研究异质性耐药对于认识耐药结核病的发展过程,以及评估治疗方案和指导临床用药具有重要的意义。本文对结核分枝杆菌(Mycob... 详细信息

异质性耐药,是指在同一样本中同时存在耐药菌和敏感菌的现象,这体现了细菌群体从部分耐药向完全耐药转变的过程。研究异质性耐药对于认识耐药结核病的发展过程,以及评估治疗方案和指导临床用药具有重要的意义。本文对结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)异质性耐药的产生及其对临床的影响进行了综述。

关键词：结核分枝杆菌(MTB) 异质性耐药耐药结核病

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高内涵筛选结合活细胞实时成像技术分析谷氨酸诱导的小鼠神经瘤母细胞N2a凋亡

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复旦学报（医学版） 2015年第4期42卷 538-542页

作者：乔可崔士超胡捷先陈献华复旦大学基础医学院医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室上海200032 复旦大学基础医学院医学分子病毒学教育部医学神经生物学国家重点实验室上海200032

目的利用高内涵筛选(high-content screening,HCS)技术结合活细胞实时成像技术研究谷氨酸诱导的小鼠神经瘤母细胞N2a凋亡的形态学变化特征。方法用HCS技术分析摸索不同浓度谷氨酸诱导的N2a细胞早期凋亡百分比的变化,同时结合活细胞实时... 详细信息

目的利用高内涵筛选(high-content screening,HCS)技术结合活细胞实时成像技术研究谷氨酸诱导的小鼠神经瘤母细胞N2a凋亡的形态学变化特征。方法用HCS技术分析摸索不同浓度谷氨酸诱导的N2a细胞早期凋亡百分比的变化,同时结合活细胞实时成像技术追踪谷氨酸诱导的N2a凋亡的形态学变化特征。结果当谷氨酸浓度为750μg/mL时,发生早期凋亡的N2a细胞比例达到峰值(42.07%)。对同一谷氨酸浓度,随着拍摄追踪时间的增加,凋亡细胞数目逐渐增多,胞核荧光强度的变异系数逐渐增大,胞核面积逐渐缩小,胞核逐渐出现碎片化。结论使用HCS结合活细胞实时成像技术能直观清晰地捕捉谷氨酸诱导N2a细胞凋亡的形态学变化特征,是一种体外追踪单一细胞凋亡形态学变化的可靠方法。该方法也可应用于药物对细胞凋亡的促进或抑制作用的形态学变化特征的研究。

关键词：谷氨酸神经瘤母细胞N2a 高内涵筛选变异系数

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干扰素和核苷(酸)类似物治疗对HBV cccDNA的影响与慢性乙型肝炎的功能性治愈

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临床肝胆病杂志 2019年第6期35卷 1181-1187页

作者：陈捷亮袁正宏复旦大学上海医学院基础医学院教育部/卫健委医学分子病毒学重点实验室

目前临床治疗慢性乙型肝炎的药物主要包括干扰素和核苷(酸)类似物两大类,但均无法有效清除病毒和治愈乙型肝炎。HBV共价闭合环状DNA(cccDNA)作为HBV转录复制的模板,以微小染色体形式持续存在于细胞核内,被认为是HBV慢性感染和难以治愈... 详细信息

目前临床治疗慢性乙型肝炎的药物主要包括干扰素和核苷(酸)类似物两大类,但均无法有效清除病毒和治愈乙型肝炎。HBV共价闭合环状DNA(cccDNA)作为HBV转录复制的模板,以微小染色体形式持续存在于细胞核内,被认为是HBV慢性感染和难以治愈的关键核心。鉴于cccDNA很难被彻底清除,近年来以cccDNA持续沉默为基础的慢性乙型肝炎功能性治愈已成为临床和基础研究的主要目标。从现有治疗手段对cccDNA的影响切入,介绍当前对cccDNA含量和活性受控因素的认知,探讨cccDNA池难以清除的关键特性环节,在此基础上展望功能性治愈慢性乙型肝炎目标下研究cccDNA的重点。

关键词：乙型肝炎病毒抗病毒药共价闭合环状DNA

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外周血单个核细胞IFN-γ mRNA的测定及应用

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中华传染病杂志 2003年第3期21卷 229-232页

作者：龙健儿黄莉娜秦智强王文逸陈敏婕瞿涤复旦大学上海医学院教育部医学分子病毒学重点实验室 200032

目的　研究鸭IFN γ(DuIFN γ)在感染及控制病毒过程中的作用和机制。方法　基于β actin的高度保守序列设计引物 ,通过RT PCR方法获得了 β actin的部分cDNA为看家基因 ,然后构建DuIFN γ靶片段的竞争性内参照 ,建立检测DuIFN γ基因... 详细信息

目的　研究鸭IFN γ(DuIFN γ)在感染及控制病毒过程中的作用和机制。方法　基于β actin的高度保守序列设计引物 ,通过RT PCR方法获得了 β actin的部分cDNA为看家基因 ,然后构建DuIFN γ靶片段的竞争性内参照 ,建立检测DuIFN γ基因转录的半定量竞争性RT PCR方法。结果　建立了检测DuIFN γ基因转录的半定量竞争性RT PCR方法 ,并检测了在PHA刺激下鸭外周血单核细胞IFN γmRNA动态变化 ,结果表明PHA刺激 2 4～ 36h ,DuIFN γmRNA转录量最高。以此方法对用DHBVpreSDNA或与IFN γDNA共免疫DHBV感染鸭进行了测定 ,结果表明IFN γ表达质粒作为DNA免疫佐剂 ,可以增强宿主IFN γ的应答。结论　IFN γ表达质粒为DNA疫苗的有效佐剂。DuIFN γ基因转录的半定量竞争性RT PCR方法为研究鸭IFN γ在DHBV感染及清除中的作用和机制奠定了基础。

关键词：外周血单个核细胞 IFN—γ mRNA 测定临床应用乙型肝炎病毒

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葡萄糖类似物甲基葡萄糖对表皮葡萄球菌生物被膜形成的影响及调节机制的研究

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微生物学报 2005年第6期45卷 930-936页

作者：靳嘉巍查锡良李华林瞿涤复旦大学上海医学院生物化学与分子生物学系卫生部糖复合物重点实验室上海200032 复旦大学上海医学院教育部医学分子病毒学重点实验室上海200032

生物被膜(Biofilm)是条件致病菌表皮葡萄球菌(Staphylococcusepidermidis)的主要致病因素,生物被膜的形成依赖多糖PIA的合成,PIA合成与细菌糖代谢相关。通过研究葡萄糖类似物甲基葡萄糖(MethylDglucoside,MG)对生物被膜的形成及相关基... 详细信息

生物被膜(Biofilm)是条件致病菌表皮葡萄球菌(Staphylococcusepidermidis)的主要致病因素,生物被膜的形成依赖多糖PIA的合成,PIA合成与细菌糖代谢相关。通过研究葡萄糖类似物甲基葡萄糖(MethylDglucoside,MG)对生物被膜的形成及相关基因表达的影响,考察生物被膜形成的调控机制并寻找抑制生物被膜形成的方法。甲基葡萄糖能抑制97337株生物被膜的形成,而且不同浓度的甲基葡萄糖对生物膜作用不同。甲基葡萄糖对97337株生物被膜形成的早期的粘附有较强的抑制作用;不同浓度的甲基葡萄糖处理后对ica和AtlE基因的mRNA表达水平影响不大,但能诱导agr基因的表达,这与甲基葡萄糖处理不同时间后的结果一致;而且甲基葡萄糖处理后97337的表面相关蛋白的组成明显改变。甲基葡萄糖对生物膜的抑制并不直接由于它对生长的抑制,它对细菌生长和生物被膜形成的抑制与其在细菌糖代谢中的竞争性相关;甲基葡萄糖能通过调控agr基因的表达改变细菌表面从而抑制97337的早期粘附和生物被膜的形成,但没有通过调控icaADBC、icaR的表达抑制生物膜的形成,可能与其对合成PIA相关糖基转移酶的竞争性抑制相关。

关键词：表皮葡萄球菌生物被膜多聚β-1 6-2脱氧-2-氨基-D-吡喃葡萄糖(PIA) 2-脱氧葡萄糖甲基葡萄糖 ica AtlE

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天然免疫与中西医结合

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中西医结合学报 2004年第1期2卷 1-2页

作者：闻玉梅复旦大学上海医学院教育部卫生部医学分子病毒学实验室上海200032

天然免疫(innate immunity) 是生物体在长期进化过程中所获得的有普遍性的重要防御机制.在机体中,维持体内平衡,抵抗外来的不良刺激,天然免疫是最早、最快发生应答的机制.虽然天然免疫不如针对特异性刺激所产生的特异性免疫强,但天然免... 详细信息

天然免疫(innate immunity) 是生物体在长期进化过程中所获得的有普遍性的重要防御机制.在机体中,维持体内平衡,抵抗外来的不良刺激,天然免疫是最早、最快发生应答的机制.虽然天然免疫不如针对特异性刺激所产生的特异性免疫强,但天然免疫稳定而保守,具有应对广泛刺激的效应[1].近来有关天然免疫机制的研究发展迅速,不仅涉及抗感染、抗肿瘤、自身免疫及保持自身稳定等领域,还发现了一系列新的天然免疫机制(如Toll样受体和CpG在增强免疫中的作用)[2].天然免疫范围很广,包括人体的屏障、细胞(如吞噬细胞、树突细胞、天然杀伤细胞等)、细胞因子(干扰素、白细胞介素等)、体液因子(补体、溶菌酶、短肽等).已有较多编码天然免疫因素的基因被克隆,表达的产品已制成成品,有的已用于临床.天然免疫是特异性免疫不可缺少的基础.

关键词：天然免疫中西医结合分子免疫学干扰素巨噬细胞树突状细胞 Toll样受体

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质谱在免疫学中的应用及研究进展

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中华微生物学和免疫学杂志 2004年第8期24卷 670-674页

作者：方彩云刘锋易志刚袁正宏杨芃原复旦大学化学系复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室

质谱(mass spectrometer,MS)分析是分析化学中进行物质成分和结构分析的主要技术之一,其基本原理是将分析样品在特定的条件下转变为高速运动的离子,这些离子根据质量、电荷比的不同在静电场和磁场的作用下得到分离,然后用特定的检测器... 详细信息

质谱(mass spectrometer,MS)分析是分析化学中进行物质成分和结构分析的主要技术之一,其基本原理是将分析样品在特定的条件下转变为高速运动的离子,这些离子根据质量、电荷比的不同在静电场和磁场的作用下得到分离,然后用特定的检测器记录各种离子的相对强度并形成质谱图。

关键词：质谱免疫学 MS 免疫系统抗原免疫应答

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表皮葡萄球菌生物被膜形成相关icaC敲除突变株的构建及其表型的改变

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中华微生物学和免疫学杂志 2006年第12期26卷 1104-1107页

作者：陈洁敏朱于莉欧元祝谢红梅瞿涤复旦大学上海医学院医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室上海200032 复旦大学附属中山医院临床微生物中心

目的构建表皮葡萄球菌icaC阴性突变株,以期获得仅icaC基因不同而其他遗传背景与表皮葡萄球菌1457株相同的突变株,对icaC基因产物在细菌形成生物被膜中的作用进行研究。方法构建同源重组质粒pBT2-△icaC,经金黄色葡萄球菌RN4220株修饰后... 详细信息

目的构建表皮葡萄球菌icaC阴性突变株,以期获得仅icaC基因不同而其他遗传背景与表皮葡萄球菌1457株相同的突变株,对icaC基因产物在细菌形成生物被膜中的作用进行研究。方法构建同源重组质粒pBT2-△icaC,经金黄色葡萄球菌RN4220株修饰后电转化入表皮葡萄球菌1457株。将含重组质粒的表皮葡萄球菌1457株在40℃多次传代,筛选出icaC敲除突变株(△icaC株)。检测△icaC株生长曲线,采用微量板半定量法检测细菌生物被膜的形成能力,并采用斑点免疫印迹法检测细菌多糖黏附因子的合成。结果使用同源重组法敲除表皮葡萄球菌1457株基因组中的icaC基因,△icaC株的生长曲线与表皮葡萄球菌1457株相似,但生物被膜形成能力及细胞外多糖黏附因子含量显著降低。结论表皮葡萄球菌1457株中icaC基因的缺失对细菌生长无明显影响,但显著降低细胞外多糖黏附因子含量及生物被膜形成能力,为进一步研究表皮葡萄球菌icaC基因在生物被膜形成中的作用奠定基础。

关键词：同源重组表皮葡萄球菌生物被膜 icaC 多糖黏附因子

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结核分枝杆菌利福平耐药菌株补偿性突变的系统性鉴定

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中华结核和呼吸杂志 2018年第3期41卷 207-212页

作者：左天宇柳清云甘明宇高谦复旦大学基础医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

目的系统性鉴定MTB利福平耐药菌株rpoA、rpoB及rpoC基因补偿性突变的类型，评估不同rpoB基因耐药突变类型及MTB遗传背景对补偿性突变发生的影响。方法搜索并下载已发表的MTB全基因组测序数据，根据已知的利福平耐药突变从中鉴定出利福... 详细信息

目的系统性鉴定MTB利福平耐药菌株rpoA、rpoB及rpoC基因补偿性突变的类型，评估不同rpoB基因耐药突变类型及MTB遗传背景对补偿性突变发生的影响。方法搜索并下载已发表的MTB全基因组测序数据，根据已知的利福平耐药突变从中鉴定出利福平耐药的MTB株，构建系统发育树并利用平行进化的筛选标准鉴定出可能的补偿性突变；统计不同rpoB基因耐药突变类型和不同型的利福平耐药菌株携带补偿性突变的比例，利用卡方检验进行统计学分析。结果从欧洲核酸序列数据库共获得全球8 453株MTB全基因组测序数据（覆盖12个国家），其中1 749株为利福平耐药菌株。通过系统发育分析共鉴定出60种补偿性突变类型（rpoA基因上的突变6种，rpoB基因上的突变16种，rpoC基因上的突变38种）；携带rpoB S450L突变的利福平耐药菌株（41.7%，279/669）比其他利福平耐药突变积累补偿性突变的比例更高[8.0%（31/388），χ2＝378.5，P〈0.000 1]；2型的利福平耐药菌株（34.0%）比其他型的菌株积累补偿性突变的比例更高[1型：4.7%（2/43），3型：12.5%（4/32），4型：15.1%（78/517）；χ2＝238.5，P〈0.000 1]。结论本研究系统性鉴定了MTB利福平耐药相关的补偿性突变类型，并发现携带rpoB基因S450L突变或属于2型的利福平耐药菌株更容易积累补偿性突变。

关键词：分枝杆菌结核抗药性利福平突变

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耐甲氧西林金黄葡萄球菌小鼠菌血症感染模型的建立与评估

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中华微生物学和免疫学杂志 2010年第7期30卷 603-607页

作者：王德成王星周文江彭秀华高谦教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室复旦大学上海医学院200032 上海市公共卫生临床中心复旦大学附属公共卫生临床中心

目的本研究采用临床分离鉴定的ST-239型耐甲氧西林金黄葡萄球菌（MRSA）感染BALB/c小鼠,建立菌血症感染模型.方法从小鼠的临床症状、生存曲线和主要组织器官的病理学变化进行了时相性监测,并用该模型验证万古霉素对小鼠菌血症的治疗效... 详细信息

目的本研究采用临床分离鉴定的ST-239型耐甲氧西林金黄葡萄球菌（MRSA）感染BALB/c小鼠,建立菌血症感染模型.方法从小鼠的临床症状、生存曲线和主要组织器官的病理学变化进行了时相性监测,并用该模型验证万古霉素对小鼠菌血症的治疗效果.结果 ST-239型MRSA感染的小鼠血液中细菌含量较高,小鼠炎症反应严重并伴有心、肺等多组织器官的损伤;对小鼠使用万古霉素后可显著降低血液中的细菌量,动物存活率明显提高,主要组织器官的病理学症状减轻.结论该模型的建立将为进一步研究临床分离的MRSA的病原特性、发病机制、治疗方法等提供可靠的实验动物模型.

关键词：耐甲氧西林金黄葡萄球菌菌血症小鼠模型

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