检索结果-内蒙古大学图书馆

***提出了一个可以讨论的问题:'如果在感染初期采用联合抗微生物治疗,人类是否可以控制微生物感染?'支持这一观点的理由为:①当抗微生物药物的作用机制不同,同时采用2～3种抗微生物制剂将可减少微生物因突变而同时出现对数种药物耐药的菌株;②联合使用抗生素后,可在病人血清中出现杀死微生物的浓度;③近来临床采用局部联合消毒剂,较单用一种消毒剂更有效,而并未增加其不良反应;④基因转录的图谱显示如表达过多的抗性基因,微生物的一些重要基因产物将被上调;⑤如果某种抗生素的药物动态学显示互相之间并无拮抗作用,联合使用抗菌药物可缩短疗程.作者认为联合使用的抗菌药物应分别具有不同作用机制,方有价值,但是经济问题应做深入研究以作全面考虑.

关键词：微生物学会抗微生物药物微生物感染摘要杂志美国抗微生物制剂生物治疗

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表皮葡萄球菌AtlE蛋白介导生物膜起始黏附的相关机制

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复旦学报（医学版） 2006年第5期33卷 569-573页

作者：欧元祝朱于莉陈洁敏秦智强江娟杨晓梅瞿涤复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

目的探讨表皮葡萄球菌atlE基因编码的AtlE蛋白介导生物膜起始黏附的相关机制。方法采用RT-PCR法检测表皮葡萄球菌atlE基因在不同时期的表达水平,用紫外分光光度计检测DNA的方法检测了相应时期的胞外DNA的释放量,并用DNA酶(DNaseⅠ)研究... 详细信息

目的探讨表皮葡萄球菌atlE基因编码的AtlE蛋白介导生物膜起始黏附的相关机制。方法采用RT-PCR法检测表皮葡萄球菌atlE基因在不同时期的表达水平,用紫外分光光度计检测DNA的方法检测了相应时期的胞外DNA的释放量,并用DNA酶(DNaseⅠ)研究表皮葡萄球菌胞外DNA在生物膜形成和起始黏附中的作用;采用pBT2质粒同源重组敲除的方法构建了表皮葡萄球菌1457的atlE基因突变株,研究atlE基因敲除突变对起始黏附能力、生物膜形成及胞外DNA释放能力的影响。结果表皮葡萄球菌atlE基因的表达与胞外DNA的释放量有相关性;DNA酶能影响未成熟生物膜且能降低起始黏附能力;ΔatlE菌株胞外DNA的释放减少,起始黏附能力明显降低,不形成生物膜。结论表皮葡萄球菌atlE基因编码的AtlE蛋白能通过释放胞外DNA在表皮葡萄球菌的生物膜起作用。

关键词：表皮葡萄球菌生物膜 atlE基因胞外DNA

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医源性表皮葡萄球菌ica操纵子转录水平对生物膜表型的影响

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上海医学 2006年第1期29卷 40-44页

作者：江娟孙景勇欧元祝秦智强陈洁敏瞿涤复旦大学上海医学院教育部卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

目的探讨表皮葡萄球菌临床株中ica操纵子转录水平对生物膜表型差异的影响。方法采用微量板半定量法检测细菌生物膜表型,用Southern杂交和聚合酶链反应检测icaA基因及ica操纵子中是否存在插入序列,用RNA狭缝杂交和逆转录实时定量聚合酶... 详细信息

目的探讨表皮葡萄球菌临床株中ica操纵子转录水平对生物膜表型差异的影响。方法采用微量板半定量法检测细菌生物膜表型,用Southern杂交和聚合酶链反应检测icaA基因及ica操纵子中是否存在插入序列,用RNA狭缝杂交和逆转录实时定量聚合酶链反应检测icaA基因和icaR基因的转录水平;采用χ2检验分析icaA基因与生物膜表型的相关性,采用单因素方差检验分析转录水平的差异。结果101株临床分离株中,32.7%(33/101株)能形成生物膜,其中22株icaA基因阳性;67.3%(68/101株)无生物膜形成,其中15株icaA基因阳性。15株icaA+/生物膜表型-分离株中,ica操纵子各基因中均不存在插入序列,icaA基因的转录水平明显低于生物膜阳性的ATCC35984株(P<0.05),其中2株icaR基因的转录水平高于ATCC35984株(P<0.01)。结论表皮葡萄球菌临床株中ica操纵子的存在与生物膜表型相关(χ2=19.045,P<0.01);ica操纵子的低转录是icaA+/生物膜表型-临床株不形成生物膜的主要原因。

关键词：表皮葡萄球菌生物膜 ica操纵子转录插入

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表皮葡萄球菌生物被膜形成相关icaC敲除突变株的构建及其表型的改变

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中华微生物学和免疫学杂志 2006年第12期26卷 1104-1107页

作者：陈洁敏朱于莉欧元祝谢红梅瞿涤复旦大学上海医学院医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室上海200032 复旦大学附属中山医院临床微生物中心

目的构建表皮葡萄球菌icaC阴性突变株,以期获得仅icaC基因不同而其他遗传背景与表皮葡萄球菌1457株相同的突变株,对icaC基因产物在细菌形成生物被膜中的作用进行研究。方法构建同源重组质粒pBT2-△icaC,经金黄色葡萄球菌RN4220株修饰后... 详细信息

目的构建表皮葡萄球菌icaC阴性突变株,以期获得仅icaC基因不同而其他遗传背景与表皮葡萄球菌1457株相同的突变株,对icaC基因产物在细菌形成生物被膜中的作用进行研究。方法构建同源重组质粒pBT2-△icaC,经金黄色葡萄球菌RN4220株修饰后电转化入表皮葡萄球菌1457株。将含重组质粒的表皮葡萄球菌1457株在40℃多次传代,筛选出icaC敲除突变株(△icaC株)。检测△icaC株生长曲线,采用微量板半定量法检测细菌生物被膜的形成能力,并采用斑点免疫印迹法检测细菌多糖黏附因子的合成。结果使用同源重组法敲除表皮葡萄球菌1457株基因组中的icaC基因,△icaC株的生长曲线与表皮葡萄球菌1457株相似,但生物被膜形成能力及细胞外多糖黏附因子含量显著降低。结论表皮葡萄球菌1457株中icaC基因的缺失对细菌生长无明显影响,但显著降低细胞外多糖黏附因子含量及生物被膜形成能力,为进一步研究表皮葡萄球菌icaC基因在生物被膜形成中的作用奠定基础。

关键词：同源重组表皮葡萄球菌生物被膜 icaC 多糖黏附因子

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白介素-4和白介素-13促进人肺成纤维细胞ADAM33基因的表达

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复旦学报（医学版） 2006年第3期33卷 295-300页

作者：揭志军金美玲蔡映云袁正宏胡芸文徐杨复旦大学附属中山医院呼吸病研究所复旦大学上海医学院教育部医学分子病毒学重点实验室上海200032

目的探讨白介素-4(IL-4)和白介素-13(IL-13)对人肺成纤维细胞ADAM33(a disintegrin and a metal-loproteinase33,ADAM33)mRNA表达的影响。方法以不同浓度的IL-4或/和IL-13刺激培养的人肺成纤维细胞(MRC-5),然后用实时定量反转录多聚酶链反应(real-time RT-PCR)法测定ADAM33mRNA表达的变化。结果人肺成纤维细胞上存在着ADAM33mRNA的表达,当分别以10ng/mL的IL-4或IL-13刺激时,AD-AM33mRNA的表达增加呈现时间依赖性,至24h达到高峰。随着IL-4和IL-13刺激浓度的增加,ADAM33mRNA的表达也明显增加:以100ng/mL的IL-4和100ng/mL的IL-13刺激时,ADAM33mRNA的表达较未刺激细胞分别增加了(9.49±2.83)倍和(14.21±3.35)倍(P<0.01);而以10ng/mL的IL-4和10ng/mL的IL-13联合刺激时,ADAM33mRNA的表达较未刺激细胞增加了(15.06±4.57)倍(P<0.01)。结论IL-4和IL-13能明显促进肺成纤维细胞ADAM33mRNA的表达。

关键词：分裂素区和金属蛋白酶区基因哮喘成纤维细胞气道重塑

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异氟醚对人单核细胞株THP-1细胞炎性细胞因子mRNA表达的影响

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复旦学报（医学版） 2006年第3期33卷 343-346,367页

作者：张光明蒋豪瞿涤薛张纲复旦大学附属中山医院麻醉科复旦大学上海医学院-教育部医学分子病毒学重点实验室上海200032

目的研究异氟醚对人类单核细胞株（THP-1）细胞、白细胞介素-1β（IL-1β）、IL-8、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、干扰素-γ7（IFN-γ）、IL-4和IL-10 mRNA表达的影响。方法在吸入不同浓度异氟醚0、2、4、6h收获THP-1细胞．从收获的细胞... 详细信息

目的研究异氟醚对人类单核细胞株（THP-1）细胞、白细胞介素-1β（IL-1β）、IL-8、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、干扰素-γ7（IFN-γ）、IL-4和IL-10 mRNA表达的影响。方法在吸入不同浓度异氟醚0、2、4、6h收获THP-1细胞．从收获的细胞中提取RNA，逆转录合成cDNA，以β—actin作内对照半定量PCR后电泳扫描求积．检测THP-1细胞与炎性反应关系密切的上述细胞因子mRNA表达。结果在吸入异氟醚过程中观察到明显的促炎性细胞因子IL-1β、IL-8、TNF-α mRNA表达增加，未检测到IFN-γ、IL-4和IL-10 mRNA表达。IL-1β、IL-8、TNF-α mRNA表达在异氟醚吸入过程中的4和6h比0h增加4～8倍。在异氟醚吸入浓度为2．0最低肺泡有效浓度（minimal alveolar ***）时，IL-1β mRNA表达呈时间依赖关系（0h：0．55±0．06；2h：3．12±0．11；4h：3．45±0．14；6h：3．92±0．07）。在吸入4和6h时，IL-1β mRNA表达呈剂量依赖关系．分别为[对照：0．71±0．13；异氟醚：（1．69±0．07）1．0MAC；（3．45±0．14）2．0MAC]和[对照：0．65±0．09；isoflurane：（2．11±0．12）1．0MAC；（3．92±0．07）2．0MAC]。这些数据提示THP-1细胞吸人异氟醚过程中伴随有促炎性细胞因子mRNA表达增加。结论异氟醚能在转录水平上调节THP-1细胞炎性反应，当吸人浓度〉1．0MAC时．异氟醚以剂量和时间依赖方式显著增加THP-1细胞促炎性细胞因子mRNA表达。

关键词：异氟醚人类单核细胞株细胞因子逆转录-聚合酶链反应

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trap基因表达在表皮葡萄球菌生物膜形成及附属基因调节(agr)系统活化中的作用

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复旦学报（医学版） 2006年第5期33卷 580-586页

作者：朱于莉杨晓梅李娜江娟陈洁敏秦智强李敏吕元魏武瞿涤复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032 复旦大学蛋白质组学研究中心上海200032 复旦大学附属华山医院检验医学中心上海200040 上海生物信息技术研究中心上海200235

目的研究表皮葡萄球菌trap基因表达与生物膜形成的相关性及其对agr系统的活化作用。方法采用微量板半定量法检测表皮葡萄球菌生物膜表型,二维电泳和高灵敏度的基质辅助激光解吸附飞行时间质谱分析比较表皮葡萄球菌标准株蛋白质表达谱,... 详细信息

目的研究表皮葡萄球菌trap基因表达与生物膜形成的相关性及其对agr系统的活化作用。方法采用微量板半定量法检测表皮葡萄球菌生物膜表型,二维电泳和高灵敏度的基质辅助激光解吸附飞行时间质谱分析比较表皮葡萄球菌标准株蛋白质表达谱,实时定量逆转录PCR检测trap基因和RNAⅢ的转录水平,CLUSTAL X对表皮葡萄球菌trap基因与金黄色葡萄球菌序列进行分析,Mega软件构建进化树。结果比较分析形成生物膜的表皮葡萄球菌ATCC 35984株与不形成生物膜的ATCC 12228株生长中期的蛋白质组,发现ATCC 35984株的TRAP蛋白量明显高于ATCC 12228株。转录水平的检测显示ATCC 12228株和生物膜阳性临床SE1457、SE671株的trap基因均低转录,但RNAⅢ的转录水平未降低。SE1457株agr系统突变后,RNAⅢ的转录明显降低,trap基因的转录无变化。RNAⅢ的转录随细菌生长变化而增加,trap基因转录保持不变。trap序列分析显示其在表皮葡萄球菌与金黄色葡萄球菌中较为保守,但存在明显的进化距离。结论在本论文所研究的表皮葡萄球菌菌株中,trap基因的转录和翻译与细菌生物膜的形成不存在直接的调控相关性;并提示TRAP蛋白不是表皮葡萄球菌agr系统活化所必需的细菌产物;表皮葡萄球菌trap基因序列与金黄色葡萄球菌之间存在差异,可能与其功能差异相关。

关键词：表皮葡萄球菌 trap基因附属基因调节系统 RNAⅢ 生物膜

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