检索结果-内蒙古大学图书馆

中华结核和呼吸杂志 2006年第2期29卷 118-120页

作者：沈鑫梅建高谦上海市疾病预防控制中心结核病防制科 200336 复旦大学上海医学院教育部医学分子病毒学重点实验室

分子流行病学是传统流行病学与分子生物学相结合的一门学科.结核病分子流行病学的建立和广泛应用使我们对结核病的传播规律和特点有了新的认识,解决了许多传统流行病学方法难以解决的问题,在结核病近期传播、暴发流行的调查、实验室污... 详细信息

分子流行病学是传统流行病学与分子生物学相结合的一门学科.结核病分子流行病学的建立和广泛应用使我们对结核病的传播规律和特点有了新的认识,解决了许多传统流行病学方法难以解决的问题,在结核病近期传播、暴发流行的调查、实验室污染的鉴定、内源性复燃和外源性再感染的区分、高危人群的鉴定等方面取得了一系列成果.国内已有这方面的综述[1],我们对近年来结核病分子流行病学研究进展作一综述.

关键词：分子流行病学研究结核病流行病学方法传播规律分子生物学实验室污染暴发流行高危人群再感染外源性

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猪乙脑病毒IgG抗体间接免疫荧光检测方法的建立与初步应用

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中国人兽共患病学报 2006年第2期22卷 150-152页

作者：朱兆奎张曦滕峥赵百慧李燕婷袁正宏卢伟上海市疾病预防控制中心上海200336 复旦大学上海医学院医学分子病毒学教育部重点实验室上海200032

目的建立检测猪血清中流行性乙型脑炎病毒(JEV)IgG抗体的间接免疫荧光试验(IFA)。方法用乙脑病毒感染C6/36白蚊伊蚊细胞制备抗原片,建立检测猪血清中JEV-IgG抗体的IFA方法,并用于猪乙脑血清流行病学调查。结果成功建立特异的猪JEV-IgG的... 详细信息

目的建立检测猪血清中流行性乙型脑炎病毒(JEV)IgG抗体的间接免疫荧光试验(IFA)。方法用乙脑病毒感染C6/36白蚊伊蚊细胞制备抗原片,建立检测猪血清中JEV-IgG抗体的IFA方法,并用于猪乙脑血清流行病学调查。结果成功建立特异的猪JEV-IgG的IFA检测方法,并对50份母猪、55份仔猪和65份屠宰猪的血清进行检测。乙脑血清抗体效价≥1:200的分别为88.00%,10.91%和24.62%。结论建立的IFA方法能较好的用于猪血清乙脑流行病学调查。

关键词：乙型脑炎病毒间接免疫荧光 IgG抗体

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胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤寡脱氧核苷酸对慢性支气管哮喘小鼠气道重塑的影响

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中华结核和呼吸杂志 2006年第9期29卷 612-616页

作者：揭志军金美玲蔡映云袁正宏胡芸文徐扬任涛杨振华上海第二医科大学附属新华医院呼吸科复旦大学附属中山医院呼吸疾病研究所上海200032 复旦大学上海医学院教育部医学分子病毒学重点实验室

目的研究含非甲基化的胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤（CpG）寡脱氧核苷酸（CpG-ODN）能否预防或减轻慢性支气管哮喘（简称哮喘）小鼠气道重塑的发生。方法 40只雌性清洁级C57BL／6小鼠按随机数字表法分为4组，每组10只。（1）慢性哮喘组（A组）... 详细信息

目的研究含非甲基化的胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤（CpG）寡脱氧核苷酸（CpG-ODN）能否预防或减轻慢性支气管哮喘（简称哮喘）小鼠气道重塑的发生。方法 40只雌性清洁级C57BL／6小鼠按随机数字表法分为4组，每组10只。（1）慢性哮喘组（A组）：分别于第1、14天小鼠腹腔注射1ml致敏液[卵蛋白（OVA，10μg）＋氢氧化铝凝胶（100μg）]；从第21天开始雾化吸入2．5％OVA溶液，每次30min，每周3次，连续8周。（2）CpG—ODN干预组（B组）：在OVA致敏的同时给予浓度为60μg／ml的CpG—ODN腹腔注射1ml共2次，以后每2周腹腔注射1次共4次。（3）GpC—ODN对照组（C组）：将CpG替换为鸟嘌呤-磷酸-胞嘧啶（GpC，剂量及用法同CpG-ODN）作为对照。（4）生理盐水（NS）对照组（D组）：给予NS进行致敏（每次1ml腹腔注射）和激发（用NS雾化吸入）。在末次激发24h后所有小鼠取血测嗜酸粒细胞（EOS）数和血清IgE；收集支气管肺泡灌洗液（BALF）做细胞分类计数，用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测上清液中自细胞介素13（IL-13）和转化生长因子β1（TGF—β1）的浓度。取左肺组织行苏木精-伊红（HE）染色和Masson三色染色，用抗α平滑肌肌动蛋白（α—SMA）抗体和抗TGF—β1抗体行免疫组化染色。结果 A组外周血EOS计数为（89±10）×10^4／ml、血清IgE为（279±53）ng／ml，BALF中EOS计数和分类分别为（6．30±1．30）×10^5／ml、0．181±0．030，A组IL-13浓度为（4015±361）pg／ml、TGF—β1浓度为（356±64）pg／ml，以上数值与D组比较差异有统计学意义（t值分别为24．0、15．7、14．7、18．4、12．0和18．9，P均〈0．01）；A组Masson三色染色、α-SMA、TGF-β1阳性染色面积百分比[分别为（29．7±4．2）％、（45±7）％、（34±4）％]与D组比较差异也有统计学意义（t值分别为18．0、15．6和17．9，P均〈0．01）。应用CpG-ODN干预后（B组）的Masson三色染色、α—SMA、TGF—β1阳性染色面积百分比[分别为（13．8±3．2）％、（25±3）％、（18±4）％]与A组比较差异也有统计学意义（t值分别为9．5、8．9、9．8，P均〈0．05）。结论应用CpG-ODN干预慢性哮喘模型，不仅能抑制Th2细胞反应和EOS肺浸润，还能抑制气道重塑的发生和发展，它可能是通过抑制TGF—β1、IL-13等因子而抑制气道重塑的。

关键词：哮喘气道重塑炎症小鼠 CpG-寡脱氧核苷酸

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16S rRNA基因序列分析在临床微生物学中的应用

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微生物与感染 2006年第3期1卷 184-186页

作者：李霞高谦复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

20世纪70年代前，生物类群的区分主要是根据形态和结构、生理和生化特征、行为习性表现以及少量的化石资料来进行的。这种通过表型特征鉴定的方法对细菌之问的亲缘性判断有时不够准确。随着分子生物学的发展，人们开始利用生物大分子特... 详细信息

20世纪70年代前，生物类群的区分主要是根据形态和结构、生理和生化特征、行为习性表现以及少量的化石资料来进行的。这种通过表型特征鉴定的方法对细菌之问的亲缘性判断有时不够准确。随着分子生物学的发展，人们开始利用生物大分子特别是蛋白质和核酸的结构特征，作为判断生物进化关系的主要特征。其中Woese等通过寡核苷酸编目的方法，在20世纪70年代逐渐发展出1种新的鉴定细菌的标准，即通过比较1段稳定的遗传编码——16S rRNA基因序列来分析和鉴定细菌的种系发生关系，判断其亲缘性，对细菌进行分类。

关键词： rRNA基因序列临床微生物学基因序列分析 16S 应用种系发生关系生化特征结构特征

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美国微生物学会杂志摘要

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微生物与感染 2006年第2期1卷 124-125页

作者：闻玉梅复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

1．加拿大学者Patrik Lee在研究呼肠病毒（reovims）的细胞受体时，发现该病毒可在肿瘤细胞中阻断癌基因Fas的信号传导途径，并利用肿瘤细胞产生病毒的蛋白。由于约2／3人的肿瘤有Fas被激活的信号传导途径，这一作用具有用呼肠病毒治疗... 详细信息

1．加拿大学者Patrik Lee在研究呼肠病毒（reovims）的细胞受体时，发现该病毒可在肿瘤细胞中阻断癌基因Fas的信号传导途径，并利用肿瘤细胞产生病毒的蛋白。由于约2／3人的肿瘤有Fas被激活的信号传导途径，这一作用具有用呼肠病毒治疗肿瘤的潜在功能。在正常生长的细胞中有一种RNA-激活的蛋白激酶（PKR）可以阻止呼肠病毒的复制，但在肿瘤细胞中，活化的Fas途径缺少PKR活性，从而呼肠病毒可以在肿瘤细胞中增殖。自1998年开始Lee等开展了用呼肠病毒作为一种抗肿瘤制剂的研究，发现当呼肠病毒在肿瘤细胞中增殖后，细胞出现了凋亡或坏死。临床研究中，发现当有1亿病毒颗粒直接注入固体肿瘤中，病人无不良反应。

关键词：微生物学会信号传导途径呼肠病毒肿瘤细胞摘要杂志美国细胞受体蛋白激酶 Fas

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学科碰撞造就了诺贝尔奖获得者

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微生物与感染 2006年第1期1卷 39-39,44页

作者：闻玉梅复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

2005年诺贝尔生理学及医学奖授予澳大利亚大学的胃肠道医学家Barry ***和Perth，澳大利亚的病理学家*** Warren，前者是微生物学会的会员。2位学者的重大贡献就是发现并确认幽门螺杆菌及其感染是胃、十二指肠溃疡的主要病因。此外，也... 详细信息

2005年诺贝尔生理学及医学奖授予澳大利亚大学的胃肠道医学家Barry ***和Perth，澳大利亚的病理学家*** Warren，前者是微生物学会的会员。2位学者的重大贡献就是发现并确认幽门螺杆菌及其感染是胃、十二指肠溃疡的主要病因。此外，也是慢性活动性胃炎和较少见胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤的主要病因，与胃癌发生也有密切的关系。他们的研究不仅有重大的临床意义，还激发了对微生物引起慢性感染的兴趣及热潮。

关键词：诺贝尔奖获得者微生物学会碰撞学科十二指肠溃疡慢性感染澳大利亚 Robin 幽门螺杆菌淋巴组织

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利用鸭乙型肝炎病毒感染模型评价血液成分中病毒的灭活效果

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微生物与感染 2006年第1期1卷 21-24,48页

作者：王文逸黄宇闻陆萍莫琴凌冰龙健儿韩小凌董生福瞿涤钱开诚复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032 上海市血液中心

目的利用鸭乙型肝炎病毒(DHBV)感染动物模型,评价亚甲蓝光化学病毒灭活方法对血液成分中DNA病毒的灭活效果。方法将超离纯化的DHBV分别加入人血浆或人红细胞,经亚甲蓝光化学灭活病毒,将含不同基因组拷贝数DHBV的血浆成分经静脉感染1 d... 详细信息

目的利用鸭乙型肝炎病毒(DHBV)感染动物模型,评价亚甲蓝光化学病毒灭活方法对血液成分中DNA病毒的灭活效果。方法将超离纯化的DHBV分别加入人血浆或人红细胞,经亚甲蓝光化学灭活病毒,将含不同基因组拷贝数DHBV的血浆成分经静脉感染1 d龄雏鸭。采用放射性核素核酸杂交法对血清中DHBV DNA进行检测,计算病毒灭活处理前、后人血浆及人红细胞中DHBV的半数感染计量(ID50)。结果结果显示加入DHBV的血浆在未经灭活处理前对1 d龄雏鸭的ID50值为103.33,而经病毒灭活处理后ID50值为1010拷贝,灭活处理可使病毒感染性滴度下降达6个Log;加入DHBV的红细胞灭活前ID50值为103.35,经灭活处理后ID50值为108.35拷贝,灭活处理使病毒感染性滴度下降5个Log。结论利用DHBV感染动物模型,可以检测到少量病毒在自然感染宿主体内的感染性,可用于评判血液成分中病毒灭活方法的效果,亚甲蓝光化学处理对血浆中DNA病毒的灭活效果较好于对红细胞中DNA病毒的灭活作用。

关键词：鸭乙型肝炎病毒感染动物模型病毒灭活

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乙型肝炎表面抗原阳性转基因小鼠肝组织基因表达谱及蛋白组学的初步研究

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微生物与感染 2006年第1期1卷 7-14,44页

作者：任军赵超方彩云马张妹杨芃原闻玉梅复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032 复旦大学生物医学研究所

目的利用与乙型肝炎病毒(ItBV)携带者相类似的#59系HBV转基因小鼠动物模型研究乙型肝炎表面抗原(HBsAg)蛋白对肝组织生理、代谢状态的影响,以了解HBsAg持续表达对肝细胞影响的机制。方法用Affmertix基因芯片观察转基因小鼠肝组织基因表... 详细信息

目的利用与乙型肝炎病毒(ItBV)携带者相类似的#59系HBV转基因小鼠动物模型研究乙型肝炎表面抗原(HBsAg)蛋白对肝组织生理、代谢状态的影响,以了解HBsAg持续表达对肝细胞影响的机制。方法用Affmertix基因芯片观察转基因小鼠肝组织基因表达谱的改变。用蛋白组学方法鉴定部分代谢相关酶类在转基因小鼠肝组织内的丰度改变。结果基因芯片实验显示43个基因在转基因小鼠肝组织内显著(≥2倍)上调表达,104个基因显著下调表达。蛋白组学实验检出18个代谢相关酶在转基因小鼠肝组织内丰度高于对照鼠1．5倍以上,9个代谢相关酶低于对照鼠1．5倍以上。结论HBV蛋白的存在对宿主肝组织代谢状态产生显著影响。推测其表现为胆固醇合成增强、胆汁酸合成减弱。糖异生作用增强、糖酵解减弱。氨基酸分解代谢增强、尿素合成减弱。

关键词：乙型肝炎病毒转基因小鼠基因芯片蛋白组学代谢

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基因枪接种乙型肝炎表面抗原促进DNA疫苗诱生的免疫应答转换

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微生物与感染 2006年第1期1卷 15-20页

作者：周晓辉刘玲刘华项黎袁正宏浙江省温州医学院生命科学院复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

目的为了克服基因枪接种乙型肝炎表面抗原(HBsAg)DNA疫苗诱生的免疫应答以Th2为主的缺点,在基因枪接种质粒HBsAg DNA疫苗的同时共导入或共表达乙型肝炎病毒壳(HBV core)基因作为佐剂,以促进其所诱生的HBsAg特异性的Th2型免疫应答向Tn1... 详细信息

目的为了克服基因枪接种乙型肝炎表面抗原(HBsAg)DNA疫苗诱生的免疫应答以Th2为主的缺点,在基因枪接种质粒HBsAg DNA疫苗的同时共导入或共表达乙型肝炎病毒壳(HBV core)基因作为佐剂,以促进其所诱生的HBsAg特异性的Th2型免疫应答向Tn1型转换。方法构建可单独或共同表达HBsAg或核心抗原(HBcAg)的DNA免疫用载体pIRKS／core、pIRES／C149、pIRES／S、pIRES／S／Core和pIRES／S／C149,并在真核细胞进行表达验证。对BALB／c雌鼠进行免疫并检测小鼠免疫后的特异性体液免疫和细胞免疫指标。结果共导入或共表达HBV core基因能增强基因枪接种HBsAg DNA疫苗诱生的Th1型免疫应答水平,包括HBsAg特异的IgG2a应答、CTL活性、IFN-γ产生能力等。结论以HBV core基因为佐剂能促进基因枪接种HBsAg DNA疫苗诱生的Th2型免疫应答向Th1型免疫应答转换。

关键词：基因枪核酸疫苗免疫应答类型乙型肝炎病毒壳基因

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流感裂解疫苗H3N2-抗H3N2免疫原性复合物滴鼻诱导小鼠黏膜免疫应答的研究

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微生物与感染 2006年第1期1卷 3-6,56页

作者：姚忻陈列胜蔡明勇邵一斌闻玉梅复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032 上海生物制品研究所

目的研究流感裂解病毒疫苗抗原抗体复合物滴鼻诱生小鼠黏膜免疫应答。方法分别以15μgH3N2、H3N2- CpG、H3N2-鼠抗H3N2及H3N2-PEG滴鼻免疫小鼠,检测肺泡灌洗液抗H3N2 IgA、血清抗H3N2 IgG效价。取免疫小鼠脾细胞,体外抗原刺激,用定量酶... 详细信息

目的研究流感裂解病毒疫苗抗原抗体复合物滴鼻诱生小鼠黏膜免疫应答。方法分别以15μgH3N2、H3N2- CpG、H3N2-鼠抗H3N2及H3N2-PEG滴鼻免疫小鼠,检测肺泡灌洗液抗H3N2 IgA、血清抗H3N2 IgG效价。取免疫小鼠脾细胞,体外抗原刺激,用定量酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清液IFN-γ及IL-4分泌水平。结果H3N2-抗H3N2免疫原性复合物诱生的抗H3N2 IgA效价明显高于H3N2单独免疫组(P<0．01),而与H3N2-CpG组无显著性差异。此外,复合物诱生的血清抗H3N2也高于H3N2单独免疫组(P<0．05)。H3N2-CpG组诱生的IFN-γ水平明显升高,而其他组之间无明显差异。结论流感病毒血凝素抗原抗体复合物、血凝素抗原加CpG佐剂可以诱生较强的局部黏膜免疫和体液免疫。这两组诱生的IgA效价均明显高于H3N2单独免疫组。另外,H3N2-CoG组小鼠的脾脏细胞经特异性抗原诱导后培养上清液中的IFN-γ水平明显升高。

关键词：流感病毒抗原抗体复合物黏膜免疫

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