检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物学报 2005年第6期45卷 930-936页

作者：靳嘉巍查锡良李华林瞿涤复旦大学上海医学院生物化学与分子生物学系卫生部糖复合物重点实验室上海200032 复旦大学上海医学院教育部医学分子病毒学重点实验室上海200032

生物被膜(Biofilm)是条件致病菌表皮葡萄球菌(Staphylococcusepidermidis)的主要致病因素,生物被膜的形成依赖多糖PIA的合成,PIA合成与细菌糖代谢相关。通过研究葡萄糖类似物甲基葡萄糖(MethylDglucoside,MG)对生物被膜的形成及相关基... 详细信息

生物被膜(Biofilm)是条件致病菌表皮葡萄球菌(Staphylococcusepidermidis)的主要致病因素,生物被膜的形成依赖多糖PIA的合成,PIA合成与细菌糖代谢相关。通过研究葡萄糖类似物甲基葡萄糖(MethylDglucoside,MG)对生物被膜的形成及相关基因表达的影响,考察生物被膜形成的调控机制并寻找抑制生物被膜形成的方法。甲基葡萄糖能抑制97337株生物被膜的形成,而且不同浓度的甲基葡萄糖对生物膜作用不同。甲基葡萄糖对97337株生物被膜形成的早期的粘附有较强的抑制作用;不同浓度的甲基葡萄糖处理后对ica和AtlE基因的mRNA表达水平影响不大,但能诱导agr基因的表达,这与甲基葡萄糖处理不同时间后的结果一致;而且甲基葡萄糖处理后97337的表面相关蛋白的组成明显改变。甲基葡萄糖对生物膜的抑制并不直接由于它对生长的抑制,它对细菌生长和生物被膜形成的抑制与其在细菌糖代谢中的竞争性相关;甲基葡萄糖能通过调控agr基因的表达改变细菌表面从而抑制97337的早期粘附和生物被膜的形成,但没有通过调控icaADBC、icaR的表达抑制生物膜的形成,可能与其对合成PIA相关糖基转移酶的竞争性抑制相关。

关键词：表皮葡萄球菌生物被膜多聚β-1 6-2脱氧-2-氨基-D-吡喃葡萄糖(PIA) 2-脱氧葡萄糖甲基葡萄糖 ica AtlE

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CpG ODN对活动性肺结核患者外周血Th1/Th2型免疫应答的调节作用

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复旦学报（医学版） 2005年第6期32卷 648-652页

作者：任涛金美玲蔡映云胡芸文袁正宏复旦大学附属中山医院呼吸病研究所复旦大学上海医学院医学分子病毒学教育部重点实验室上海200032

目的观察CpG寡脱氧核苷酸(CpG ODN)对活动性肺结核患者外周血单个核细胞(PBMC)γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-12以及IL-10表达的影响。方法20例活动性肺结核患者和20名健康人PBMC根据刺激物不同分为空白对照组、结核菌素纯化蛋白衍... 详细信息

目的观察CpG寡脱氧核苷酸(CpG ODN)对活动性肺结核患者外周血单个核细胞(PBMC)γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-12以及IL-10表达的影响。方法20例活动性肺结核患者和20名健康人PBMC根据刺激物不同分为空白对照组、结核菌素纯化蛋白衍化物(PPD)组(10ng/mL)、CpG ODN组(2nmoL/mL)和CpG ODN+PPD组。用real ti me-PCR法检测PBMCIFN-γmRNA、IL-12mRNA和IL-10mRNA的表达。结果①活动性肺结核患者PBMC空白对照组IFN-γmRNA和IL-12mRNA的表达低于健康人(P<0.01,P<0.05),IL-10mRNA的表达与健康人相似(P>0.05);②经PPD刺激,IFN-γmRNA、IL-12mRNA和IL-10mRNA的表达较空白对照组增高(P<0.01,P<0.01,P<0.01),但IFN-γmRNA的表达低于健康人(P<0.01),IL-12mRNA的表达与健康人相似(P>0.05),IL-10mRNA的表达高于健康人(P<0.01);③经CpGODN刺激,IFN-γmRNA和IL-12mRNA的表达高于空白对照组(P<0.01,P<0.01),但低于健康人(P<0.01,P<0.05),IL-10mRNA的表达与空白对照组相似(P>0.05),与健康人也无差别(P>0.05);④经CpGODN+PPD刺激,IFN-γmRNA和IL-12mRNA的表达较空白对照组增高(P<0.01,P<0.01),但IFN-γmR-NA的表达低于健康人(P<0.01),IL-12mRNA的表达与健康人相似(P>0.05),IL-10mRNA的表达与空白对照组相似(P>0.05),与健康人也无差别(P>0.05);⑤经CpG ODN+PPD刺激,肺结核患者IL-12mRNA的表达高于PPD组(P<0.05),IL-10mRNA的表达低于PPD组(P<0.01)。结论CpG ODN可促进活动性肺结核患者PBMC产生IFN-γ和IL-12,增强Th1型免疫反应。CpG ODN与PPD联合应用可进一步促进PPD对IL-12表达的诱导,并抑制PPD对IL-10表达的增强作用。

关键词：肺结核 CpG寡脱氧核苷酸 γ干扰素白细胞介素10 白细胞介素12

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福氏志贺菌喹诺酮类耐药临床分离株gyrA和parC的基因突变

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中华传染病杂志 2005年第3期23卷 150-153页

作者：唐传玲朱于莉汪萱怡赵守军瞿涤复旦大学上海医学院教育部医学分子病毒学重点实验室上海200032 韩国汉城国际疫苗研究所

目的检测福氏志贺菌喹诺酮类耐药临床分离株DNA旋转酶gyrA和拓扑异构酶ⅣparC基因的突变情况,探讨GyrA和ParC氨基酸改变与喹诺酮类耐药的相关性。方法根据药敏实验结果选取47株福氏志贺菌临床分离菌,对其gyrA、parC喹诺酮耐药决定区(QR... 详细信息

目的检测福氏志贺菌喹诺酮类耐药临床分离株DNA旋转酶gyrA和拓扑异构酶ⅣparC基因的突变情况,探讨GyrA和ParC氨基酸改变与喹诺酮类耐药的相关性。方法根据药敏实验结果选取47株福氏志贺菌临床分离菌,对其gyrA、parC喹诺酮耐药决定区(QRDR)进行聚合酶链反应(PCR)扩增和测序分析,并采用SAS(V8.2)软件分析GyrA和ParC改变和喹诺酮类耐药性的关联程度。结果44株喹诺酮类耐药菌在gyrA、parC基因QRDR均发生有义突变,gyrA83位密码子突变(TCG→TTG)最为常见,存在于43株耐药菌。混合模型分析结果显示GyrA83位、ParC80位氨基酸改变与萘啶酸的耐药性密切相关(P<0.01,R2=0.999),GyrA83、87位氨基酸改变与环丙沙星的耐药性密切相关(P<0.05,R2=0.872)。结论GyrASer83→Leu突变是导致福氏志贺菌临床株对喹诺酮类耐药的关键突变,此单位点突变即可介导福氏志贺菌对萘啶酸的耐药,但对环丙沙星耐药需同时存在GyrA和/或ParC多个位点突变或其他耐药机制。

关键词：志贺菌,福氏喹诺酮类抗药性,微生物 DNA促转酶 DNA拓扑异构酶Ⅳ parC基因耐药决定区福氏志贺菌基因突变临床分离株

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卡介菌多糖核酸免疫治疗结核病小鼠的实验研究

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复旦学报（医学版） 2005年第5期32卷 513-516,F0002页

作者：任涛蔡映云金美玲李传友袁正宏田苗赵冰复旦大学附属中山医院呼吸病研究所北京市结核病胸部肿瘤研究所北京101149 复旦大学上海医学院医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室上海200032

目的观察卡介菌多糖核酸(BCGPSN)对结核分枝杆菌感染小鼠的免疫保护作用及其免疫学机制。方法将BALB/c小鼠48只随机分成BCGPSN免疫治疗组和结核菌感染对照组,每组24只。两组小鼠制成结核分枝杆菌感染模型。感染后1周,每天分别腹腔内注射... 详细信息

目的观察卡介菌多糖核酸(BCGPSN)对结核分枝杆菌感染小鼠的免疫保护作用及其免疫学机制。方法将BALB/c小鼠48只随机分成BCGPSN免疫治疗组和结核菌感染对照组,每组24只。两组小鼠制成结核分枝杆菌感染模型。感染后1周,每天分别腹腔内注射BCGPSN(10mg/kg)或生理盐水(10mL/kg),连续7d。感染后3周和4周每组处死12只小鼠,检测小鼠体重以及肺、脾脏湿重,观察肺脏病理改变,取肺、脾组织进行结核菌培养和菌落计数,用real-timePCR法测定肺、脾组织IFNγmRNA、IL10mRNA和IL4mRNA的表达。结果感染后4周,治疗组小鼠体重和脾脏重量高于对照组,肺脏重量低于对照组,且肺部病变较轻。感染后3周和4周,治疗组小鼠肺、脾组织结核菌落均低于对照组,小鼠肺组织IFNγmRNA表达与对照组无差别,IL10mRNA和IL4mRNA的表达低于对照组。感染后3周,治疗组小鼠脾组织IFNγmRNA表达与对照组相似;感染后4周,脾组织治疗组脾组织IFNγmRNA的表达高于对照组。感染后3周和4周,IL10mRNA和IL4mRNA的表达低于对照组。结论BCGPSN可减轻结核病小鼠体重下降,减少结核病小鼠肺和脾脏结核菌数量,并增强Th1型免疫反应。

关键词：卡介菌多糖核酸分枝杆菌结核细胞因子

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白细胞介素-4,-13促进人肺成纤维细胞ADAM33基因的表达

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中华医学杂志 2005年第44期85卷 3148-3149页

作者：揭志军金美玲蔡映云袁正宏胡芸文徐扬复旦大学附属中山医院呼吸病研究所上海200032 复旦大学上海医学院教育部医学分子病毒学重点实验室

研究发现ADAM33基因的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms, SNPs)与哮喘的发生以及气道高反应性有显著相关[1].ADAM33基因主要在肺的平滑肌细胞、成肌纤维细胞和成纤维细胞表达,而在上皮细胞、T细胞或免疫细胞中表达较少.... 详细信息

研究发现ADAM33基因的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms, SNPs)与哮喘的发生以及气道高反应性有显著相关[1].ADAM33基因主要在肺的平滑肌细胞、成肌纤维细胞和成纤维细胞表达,而在上皮细胞、T细胞或免疫细胞中表达较少.由于ADAM33基因在肺间充质细胞的选择性表达,因此,ADAM33基因可能与小气道重塑有关.IL-4和IL-13都是Th2型细胞因子,在哮喘的慢性气道炎症中起重要作用.最近研究发现IL-4和IL-13可以通过增加支气管上皮细胞对转化生长因子-β的释放,从而促进气道重塑[2].因此,我们研究IL-4和IL-13对人肺成纤维细胞ADAM33基因表达的影响,探讨ADAM33基因表达异常在哮喘气道重塑中的作用。

关键词：人肺成纤维细胞白细胞介素-4 3基因支气管上皮细胞 Th2型细胞因子转化生长因子-β ADAM33 基因表达异常 IL-13 单核苷酸多态性

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葡萄糖对表皮葡萄球菌生物被膜形成的影响及调节机制的研究

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微生物学报 2005年第3期45卷 431-436页

作者：靳嘉巍张力查锡良李华林瞿涤复旦大学上海医学院生物化学与分子生物学系卫生部糖复合物重点实验室上海200032 复旦大学上海医学院生物化学与分子生物学系卫生部糖复合物重点实验室室上海200032 复旦大学上海医学院生物化学与分子生物学系教育部医学分子病毒学重点实验室上海200032

生物被膜(Biofilm)是条件致病菌表皮葡萄球菌(Staphylococcusepidermidis)的主要致病因素,生物被膜的形成依赖多糖PIA合成,合成PIA的糖基转移酶由icaADBC基因编码。以生物被膜形成能力不同的菌株为对象,通过研究不同环境对生物被膜形成... 详细信息

生物被膜(Biofilm)是条件致病菌表皮葡萄球菌(Staphylococcusepidermidis)的主要致病因素,生物被膜的形成依赖多糖PIA合成,合成PIA的糖基转移酶由icaADBC基因编码。以生物被膜形成能力不同的菌株为对象,通过研究不同环境对生物被膜形成、细菌总糖量及相关基因表达的变化,探索外界环境对生物被膜形成的影响及葡萄糖对生物被膜诱导的分子机制。有利于生物被膜形成培养条件促进生物被膜形成及多糖的表达,葡萄糖能诱导ica基因的表达和生物被膜形成,ica基因的反义寡核苷酸(ODN)能对抗葡萄糖的作用;葡萄糖作用下不同生长周期生物被膜形成相关基因ica、icaR、AtlE表达不同。表皮葡萄球菌生物被膜的形成与细菌糖代谢有关,葡萄糖通过上调ica表达诱导生物膜形成,但不需要ica基因的持续表达;

关键词：表皮葡萄球菌生物被膜多聚β-1 6-2脱氧-2-氨基-D-吡喃葡萄糖(PLA) 反义寡核苷酸(ODN) ica AtlE

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结核分枝杆菌散在分布重复单位基因型分型法的应用研究

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中华结核和呼吸杂志 2005年第5期28卷 292-296页

作者：沈国妙查佳徐琳孙斌桂晓红王奕峰梅建高谦复旦大学上海医学院教育部医学分子病毒学重点实验室 200032 上海市疾病预防控制中心结核病防治科

目的建立结核分枝杆菌散在分布重复单位(mycobacterialinterspersedrepetitiveunits,MIRU)基因型分型法,评估该方法在我国应用的可行性。方法采用简单数字表法随机抽取上海地区2000年至2002年保存的菌株,对其进行MIRU分型,并与间隔区寡... 详细信息

目的建立结核分枝杆菌散在分布重复单位(mycobacterialinterspersedrepetitiveunits,MIRU)基因型分型法,评估该方法在我国应用的可行性。方法采用简单数字表法随机抽取上海地区2000年至2002年保存的菌株,对其进行MIRU分型,并与间隔区寡核苷酸分型法(Spoligotyping)的结果进行比较。结果用Spoligotyping方法对随机抽样的91株临床菌株进行基因型分型,得到20种基因型,其中81株(89%)属于北京基因型菌株,而用MIRU分型方法可将这些菌株分为46种基因型。81株北京基因型菌株可以分为39种不同的MIRU基因型。12个MIRU位点的多态性分析表明各位点有较大的区别,其中位点26显示了较高的多态性,位点16、31、40显示了中等程度的多态性。结论MIRU分型方法简单快速,其数字化结果清晰可靠,是一种有效的结核分枝杆菌基因型分型方法。

关键词：结核分枝杆菌分型法 Spoligotyping 分布分型方法 2002年 2000年基因型分型多态性分析上海地区寡核苷酸临床菌株随机抽样位点数字表间隔区数字化北京显示

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复合HA-2氨基多肽可增强chitosan-DNA疫苗的免疫保护效果

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中国免疫学杂志 2005年第2期21卷 93-98页

作者：徐薇沈燕陈瑞珍王缨熊思东复旦大学上海医学院免疫学系教育部分子医学重点实验室上海基因免疫与疫苗研究中心上海200032 复旦大学附属中山医院卫生部病毒性心脏病重点实验室

目的:以具有促黏膜黏附吸收功能的脱乙酰多糖chitosan包裹质粒DNApcDNA3-VP1构建的新型chitosan-DNA疫苗,已证实可诱生CVB3特异性黏膜IgA和抗CVB3保护力,在此基础上,引入具有内体破坏功能的流感病毒HA-2氨基多肽(融内体多肽),构建chitos... 详细信息

目的:以具有促黏膜黏附吸收功能的脱乙酰多糖chitosan包裹质粒DNApcDNA3-VP1构建的新型chitosan-DNA疫苗,已证实可诱生CVB3特异性黏膜IgA和抗CVB3保护力,在此基础上,引入具有内体破坏功能的流感病毒HA-2氨基多肽(融内体多肽),构建chitosan-DNA-HApLys16疫苗,以期增强chitosan-DNA疫苗的免疫保护效果.方法:将融内体多肽与多聚赖氨酸顺序合成为"载体多肽"HA-pLys16,将其与DNA、chitosan依次复合形成chitosan-DNA-HApLys16疫苗.以50μgDNA剂量的chitosan-DNA疫苗滴鼻免疫BALB/c小鼠4次,检测CVB3特异性体液和细胞免疫应答;隔4周以致死性5×LDoCVB3攻击小鼠,观察攻击后存活情况.以免疫组化法检测了小鼠心肌内CVB3载量;并检测了黏膜IgA中和效价的改变.结果:chitosanDNA-HApLys16疫苗滴鼻免疫不仅诱生了高水平的IgG,而且诱生了高水平的黏膜IgA抗体.其诱生的IgG水平以及特异性CTL杀伤活性与chitosan-DNA疫苗无统计差别,而其IgA水平显著高于chitosan-DNA疫苗.CVB3攻击后,chitosan-DNA-HApLys16可保护50.0%小鼠长期存活,高于chitosan-DNA组42.9%的免疫保护率.病理学研究显示:chitosan-DNA-HApLys16免疫小鼠心肌炎症状况好于chitosan-DNA免疫小鼠.免疫组化结果显示:chitosan-DNA-HApLys16免疫小鼠心肌内几乎无CVB3颗粒的存在.黏膜IgA中和效价检测发现:chitosan-DNA-HApLys16免疫小鼠黏膜IgA中和效价为1:128,高于chitosan-DNA组1:64,而对照组仅为1:8.结论:复合了融内体多肽的chitosan-DNA-HApLys16病毒样疫苗可增强chitosan-DNA疫苗的免疫保护效果,这一增强作用可能与增强的黏膜IgA以及IgA中和效价的提高有关.

关键词： CVB3 chitosan-DNA HApLys16 滴鼻免疫保护中和效价

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组织细胞DNA含量变化与死亡时间的相关性研究

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法医学杂志 2005年第2期21卷 115-117页

作者：陈新沈忆文顾云菊刘志萍孙淑惠赵子琴上海市刑事科学技术研究所上海200083 复旦大学上海医学院法医学系上海200032 复旦大学上海医学院卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

目的研究人死后各器官组织细胞DNA降解变化规律,探讨其在推断死亡时间方面的应用价值,为推断死亡时间提供科学依据。方法已知死亡时间人尸体的心、肝、脾、肾,按死后6,12,24和48h四个时间段取材,制成石蜡切片,经Feulgen染色并图像分析;... 详细信息

目的研究人死后各器官组织细胞DNA降解变化规律,探讨其在推断死亡时间方面的应用价值,为推断死亡时间提供科学依据。方法已知死亡时间人尸体的心、肝、脾、肾,按死后6,12,24和48h四个时间段取材,制成石蜡切片,经Feulgen染色并图像分析;同时将各器官组织按不同时间段取材,制成单细胞悬液,应用流式细胞仪检测DNA含量。结果(1)人体各器官组织细胞经FCM检测,脾细胞核DNA随死亡时间延长呈现较好的下降梯度,而心、肝、肾,则由于自溶较快,死后6h细胞核DNA含量已很低,其变化情况与死亡时间的相关性不佳;(2)各器官组织细胞核DNA染色强度指数均随死亡时间的延长而下降。结论(1)机体死亡后,各器官组织细胞核DNA含量随死亡时间延长逐渐减少,具有一定的变化规律,其中以脾细胞核DNA含量的变化趋势与死亡时间最具相关性,肝、肾次之,而心最差;(2)方法学分析,图像分析技术(IAT)与流式细胞术(FCM)两种检测方法在研究组织细胞DNA含量变化方面,各有利弊,可互补不足。

关键词：组织细胞DNA 死亡时间含量变化相关性研究细胞核DNA含量流式细胞术(FCM) Feulgen染色流式细胞仪检测图像分析技术变化规律时间延长器官组织 DNA降解单细胞悬液 FCM检测 DNA染色方法学分析应用价值科学依据

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园林植物挥发油成分分析及抗菌活性测定

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城市环境与城市生态 2005年第6期18卷 23-25页

作者：段佳崔艳秋秦志强赵佳媛南蓬复旦大学生命科学学院生物多样性与生态工程教育部重点实验室上海200433 上海市园林科学研究所上海200232 复旦大学上海医学院教育部医学分子病毒学重点实验室上海200032

运用试管稀释法和平板涂布法,测定黄皮,白皮松,香榧,侧柏,龙柏,雪松,圆柏等7种常见园林植物的挥发油对表皮葡萄球菌,金黄色葡萄球菌,大肠杆菌及绿脓杆菌的抗菌活性(包括抑菌和杀菌两个方面)。结果显示,所有供试植物挥发油均具有一定的... 详细信息

运用试管稀释法和平板涂布法,测定黄皮,白皮松,香榧,侧柏,龙柏,雪松,圆柏等7种常见园林植物的挥发油对表皮葡萄球菌,金黄色葡萄球菌,大肠杆菌及绿脓杆菌的抗菌活性(包括抑菌和杀菌两个方面)。结果显示,所有供试植物挥发油均具有一定的抗菌活性。对金黄色葡萄球菌的抑菌活性为侧柏=龙柏>圆柏>雪松>香榧;对表皮葡萄球菌的抑菌活性为侧柏>圆柏>龙柏=雪松=黄皮>白皮松>香榧;仅圆柏挥发油对大肠杆菌具有抑菌作用,所有供试植物挥发油对绿脓杆菌均无抑菌作用。实验证明,圆柏,侧柏,龙柏,雪松具有较强抗菌活性,是较为理想的城市生态保健型绿化模式的栽培树种。

关键词：抗菌活性园林植物挥发油

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