检索结果-内蒙古大学图书馆

Chitosan-pcDNA3-VP1 DNA疫苗预防病毒性心肌炎的实验研究

现代免疫学 2004年第2期24卷 156-160页

作者：徐薇张进平陈瑞珍熊思东复旦大学上海医学院教育部分子医学重点实验室上海基因免疫与疫苗研究中心上海200032 复旦大学附属中山医院卫生部病毒性心脏病重点实验室上海200032

为研究新型chitosan-DNA疫苗预防CVB3病毒性心肌炎的效果,以天然生物多糖chitosan包裹含CVB3主要结构蛋白VP1编码基因的质粒pcDNA3-VP1,制备新型chitosan-pcDNA3-VP1疫苗.以含50μgDNA的该疫苗于0、7、14、21d滴鼻免疫小鼠4次,末次免疫... 详细信息

为研究新型chitosan-DNA疫苗预防CVB3病毒性心肌炎的效果,以天然生物多糖chitosan包裹含CVB3主要结构蛋白VP1编码基因的质粒pcDNA3-VP1,制备新型chitosan-pcDNA3-VP1疫苗.以含50μgDNA的该疫苗于0、7、14、21d滴鼻免疫小鼠4次,末次免疫后3周以3×LD50剂量CVB3经腹腔感染小鼠,称量小鼠体重、心脏重,并行心脏HE染色.结果:chitosan-pcDNA3-VP1疫苗滴鼻免疫诱生了高水平的血清特异IgG和肠粘膜IgA;同时诱生了较高强度的特异性CTL活性.以致病毒性心肌炎剂量CVB3感染小鼠7 d后发现:pcDNA3组小鼠100%出现病毒性心肌炎,其心室壁呈现严重灶性坏死和炎性浸润;而chitosan-pcDNA3-VP1组仅16.7%小鼠产生心肌炎,坏死灶少且程度轻.其它病毒性心肌炎体征显示:pcDNA3组体重降幅为4.50%;而chitosan-pcDNA3-VP1组类似正常小鼠,体重略增1.75%;pcDNA3免疫组体重/心脏重比为171.75;chitosan-pcDNA3-VP1免疫组为186.36.提示chitosan-pcDNA3-VP1疫苗滴鼻可诱生全身及粘膜特异免疫,并可有效预防病毒性心肌炎的发生,可能成为CVB3及病毒性心肌炎预防性候选疫苗.

关键词： chitosan CVB3 病毒性心肌炎滴鼻预防

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SARS病人特异性抗体的检测及其与T细胞亚群计数和激素治疗的相关性

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世界感染杂志 2004年第1期4卷 40-43页

作者：周志统沈芳袁正宏蒋伟伦骆成榆巫善明上海市传染病医院，上海200083 复旦大学上海医学院教育部、卫生部分子病毒重点实验室，上海200032

目的：了解SARS病人抗SARS—CoV的检出与病程、T淋巴细胞亚群数值变化及激素治疗间的关系。方法：用ELISA和流式细胞术分别检测SARS病人系列血清标本的抗SARS—CoV和血液T淋巴细胞亚群的绝对值，并进行动态观察。结果：大多数SARS病人的... 详细信息

目的：了解SARS病人抗SARS—CoV的检出与病程、T淋巴细胞亚群数值变化及激素治疗间的关系。方法：用ELISA和流式细胞术分别检测SARS病人系列血清标本的抗SARS—CoV和血液T淋巴细胞亚群的绝对值，并进行动态观察。结果：大多数SARS病人的抗SARS—CoV，需在发病10d后的系列血清可检出，其不随T淋巴细胞亚群计数的减少，和激素治疗而转为阴性或明显降低。结论：SARS病人抗SARS—CoV的检出与病程有关，但与T淋巴细胞亚群数值的变化和激素治疗均无显著相关。

关键词： SARS 特异性抗体 T细胞亚群激素治疗糖皮质激素抗SARS-CoV 细胞计数

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基因芯片分析干扰素对乙型肝炎病毒转染细胞基因表达的影响(英文)

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2003年第12期35卷 1053-1060页

作者：熊炜王迅刘晓颖项黎郑玲洁刘江霞袁正宏复旦大学上海医学院教育部医学分子病毒学重点实验室复旦大学上海医学院教育部医学分子病毒学重点实验室上海200032

乙型肝炎病毒 (HepatitisBvirus ,HBV)的持续性感染是影响人类健康的重大问题 ,而α 干扰素 (IFN α)和γ 干扰素(IFN γ)分别具有抗HBV的作用。为了研究HBV持续存在对IFN效应基因表达的影响 ,将HepG2细胞和来源于HepG2细胞并整合有HBV... 详细信息

乙型肝炎病毒 (HepatitisBvirus ,HBV)的持续性感染是影响人类健康的重大问题 ,而α 干扰素 (IFN α)和γ 干扰素(IFN γ)分别具有抗HBV的作用。为了研究HBV持续存在对IFN效应基因表达的影响 ,将HepG2细胞和来源于HepG2细胞并整合有HBV基因组的HepG2 .2 .15细胞经IFN α或IFN γ处理 6h后 ,用含 14 112个靶基因的人cDNA基因芯片检测了各组基因表达谱的差异。结果证实 ,许多与细胞周期、增殖、凋亡相关的基因及部分EST和功能未知基因受IFN调节 ;IFN诱导后 ,一些与激酶和信号转导、转录调节、抗原递呈和处理相关的基因在两株细胞间表达存在差异 ,提示HBV影响IFN诱导的细胞基因的表达。进一步挑选部分显著差异表达的基因 ,研究其对HBV复制的影响 ,结果发现在两个细胞株中IFN诱导后基因表达差异的双遍在蛋白 (Diubiquitin)和髓样细胞分化蛋白 (MyD88)均可显著降低HBV抗原表达 ,并证实MyD88能抑制HBV复制。这有助于揭示IFN抗病毒效应及HBV持续性感染机制 ,为分子水平寻找新型抗HBV药物的靶点打下基础。

关键词：基因芯片乙型肝炎病毒干扰素细胞基因表达谱

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外周血单个核细胞IFN-γ mRNA的测定及应用

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中华传染病杂志 2003年第3期21卷 229-232页

作者：龙健儿黄莉娜秦智强王文逸陈敏婕瞿涤复旦大学上海医学院教育部医学分子病毒学重点实验室 200032

目的　研究鸭IFN γ(DuIFN γ)在感染及控制病毒过程中的作用和机制。方法　基于β actin的高度保守序列设计引物 ,通过RT PCR方法获得了 β actin的部分cDNA为看家基因 ,然后构建DuIFN γ靶片段的竞争性内参照 ,建立检测DuIFN γ基因... 详细信息

目的　研究鸭IFN γ(DuIFN γ)在感染及控制病毒过程中的作用和机制。方法　基于β actin的高度保守序列设计引物 ,通过RT PCR方法获得了 β actin的部分cDNA为看家基因 ,然后构建DuIFN γ靶片段的竞争性内参照 ,建立检测DuIFN γ基因转录的半定量竞争性RT PCR方法。结果　建立了检测DuIFN γ基因转录的半定量竞争性RT PCR方法 ,并检测了在PHA刺激下鸭外周血单核细胞IFN γmRNA动态变化 ,结果表明PHA刺激 2 4～ 36h ,DuIFN γmRNA转录量最高。以此方法对用DHBVpreSDNA或与IFN γDNA共免疫DHBV感染鸭进行了测定 ,结果表明IFN γ表达质粒作为DNA免疫佐剂 ,可以增强宿主IFN γ的应答。结论　IFN γ表达质粒为DNA疫苗的有效佐剂。DuIFN γ基因转录的半定量竞争性RT PCR方法为研究鸭IFN γ在DHBV感染及清除中的作用和机制奠定了基础。

关键词：外周血单个核细胞 IFN—γ mRNA 测定临床应用乙型肝炎病毒

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拉米夫定治疗前后HBV全基因序列检测对比

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中华传染病杂志 2003年第4期21卷 260-264页

作者：张继明刘芳尹有宽张清波邬祥惠翁心华复旦大学附属华山医院上海200040 复旦大学上海医学院教育部卫生部医学分子病毒学重点实验室

目的　对比研究同一慢性乙型肝炎患者拉米夫定治疗前及病情急性恶化后乙型肝炎病毒 (HBV)株的结构基因组。方法　对治疗前及出现病情急性恶化后的慢性乙型肝炎患者的两株HBV全基因进行克隆、测序 ,分析各读码框架核苷酸和氨基酸的变化... 详细信息

目的　对比研究同一慢性乙型肝炎患者拉米夫定治疗前及病情急性恶化后乙型肝炎病毒 (HBV)株的结构基因组。方法　对治疗前及出现病情急性恶化后的慢性乙型肝炎患者的两株HBV全基因进行克隆、测序 ,分析各读码框架核苷酸和氨基酸的变化。结果　出现病情急性恶化后的HBV株与治疗前毒株比较 ,共有 30个氨基酸发生替代 (包括YMDD基序的M 5 5 0V变异和上游的L5 2 6M变异 ) ,P、X、S和PreC/Core 4个开放读码框架的替代氨基酸数 (变异率 )分别为 10 (1.2 % )、4(2 .6 % )、8(2 .0 % )和 8(3.8% ) ,氨基酸总变异率为 1.9%。其中 ,HBVPreC区的第 1898位核苷酸发生G→A变异 ,产生一个终止密码子 ,导致HBeAg缺失 ;PreS2的起始密码子出现ATG→ATA变异 ,可致PreS2表达缺陷 ;另有变异位点分布于已知CTL、B和T细胞的细胞表位。结论　对拉米夫定耐药并致病情急性恶化的HBV株在YMDD基序之处共有 2 9个氨基酸变异。

关键词：慢性乙型肝炎拉米夫定治疗 HBV全基因基因克隆基因测序

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柯萨奇病毒B3感染对心肌趋化因子表达谱的调控作用

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中华医学杂志 2003年第11期83卷 981-985页

作者：沈燕徐薇邵先安陈瑞珍杨英珍熊思东 200032 上海复旦大学上海医学院免疫学系教育部分子医学重点实验室复旦大学卫生部病毒性心脏病重点实验室

目的研究柯萨奇病毒(CV)B3感染对心肌组织/细胞趋化因子(ChKs)表达谱的调控作用.方法以CVB3感染BALB/c小鼠和体外培养的BALB/c乳鼠心脏细胞,建立体内、外CVB3感染模型;RT-PCR定性和实时定量分析不同CVB3感染时间点和不同CVB3载量下11种C... 详细信息

目的研究柯萨奇病毒(CV)B3感染对心肌组织/细胞趋化因子(ChKs)表达谱的调控作用.方法以CVB3感染BALB/c小鼠和体外培养的BALB/c乳鼠心脏细胞,建立体内、外CVB3感染模型;RT-PCR定性和实时定量分析不同CVB3感染时间点和不同CVB3载量下11种ChKs的表达.结果在体内,CVB3感染后心肌组织中MIP-2和IP-10诱导性表达,组成性表达的SDF-1、MCP-1、MCP-2、MCP-3、MCP-5、MDC、FKN和Ltn中MCP-1、MCP-2、MCP-3、MCP-5、MDC和Ltn上调表达,分别是未感染对照的1.8、1.9、3.7、1.7、1.3和1.2倍,均差异有显著性(P均小于0.01),SDF-1和FKN与未感染对照相比,差异均无显著意义(P＞0.05).Eot在感染和未感染心肌组织均未检出表达.在不同的感染时间点ChKs的表达不同,MIP-2在感染第4天的表达量分别是第7天和第14天的1.1和1.5倍,均差异有显著性(P＜0.01);IP-10的表达在第4天和第7天未表现显著性区别(P＞0.05),但分别是第9天的2.47和2.54倍(P＜0.01);MCP-1第14天的表达量分别是第4、7和9天的1.3、1.2和1.0倍,相差均有显著性意义.MCP-2第4天的表达量是第7、9和14天的1.4、1.5和2.2倍,差异有显著意义(P＜0.01),且14 d表达量低于基础表达量.在体外,MCP-1和MCP-3的表达明显上调,但时间点不同;MIP-2和MCP-5的表达下调.MCP-2、MCP-3、MCP-5和MDC的表达与CVB3载量变化趋势相似,FKN和SDF-1等其他ChKs表达的变化趋势与CVB3载量无明显的相似性.在感染14 d内MCP-3的表达与CVB3载量的变化相关(r=0.881,P=0.048);抗-CVB3特异性抗体变化趋势与MCP-1和MCP-3的表达变化相似,而与MCP-2、MCP-5和MDC的表达变化相反,与IP-10等其他ChKs的表达未呈明显的相似性.抗-CVB3特异性抗体变化与MCP-1的表达呈正相关(r=0.976,P＜0.05).结论CVB3体内外感染可使心肌ChKs的表达发生成簇性改变,成簇性改变的ChKs构成ChKs表达谱,表达谱中ChKs的变化呈现复杂性和不均衡性.提示CVB3感染可能以不同的方式调控心肌ChKs表达谱.

关键词：柯萨奇病毒感染趋化因子基因表达调控

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新型冠状病毒(SARS)的主要特性及其防治

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上海医学 2003年第5期26卷 297-298页

作者：闻玉梅复旦大学医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

2002年11月左右在我国广州省境内发现了一些病因不明，有严重呼吸系统症状的疾病。香港、越南等地也先后发现该疾病，并向世界多国传播。2003年该疾病由意大利医师沃比钠在越南发现后建议命名为SARS(se-vere acute respiratory syndrom... 详细信息

2002年11月左右在我国广州省境内发现了一些病因不明，有严重呼吸系统症状的疾病。香港、越南等地也先后发现该疾病，并向世界多国传播。2003年该疾病由意大利医师沃比钠在越南发现后建议命名为SARS(se-vere acute respiratory syndrome),并向世界卫生组织发出“警报”，而沃比钠医师却因感染SARS不治而亡。经过全世界十个国家(包括我国)的科学家们集体研究，至2003年4月16日世界卫生组织已公布SARS的病原体为一种新型冠状病毒。该病毒作为病原符合KocK氏三定律，即自多数患者中分离出该病毒；该病毒可在体外传代培养；该病毒接种猴后，猴现现典型SARS症状，并可自感染动物中分离出同样的病毒。虽然自2003年2～3月以来，已陆续分离出新型冠状病毒，并作全基因组测序，但最终由荷兰实验室进行的猴体实验结果确定这一病毒为SARS的病原体。在确定冠状病毒为SARS的病原体后，科学家们也不排除个别患者合并其他微生物的共同感染。因共同感染的微生物一般均未能显示在感染者的相应抗体效价升高4倍以上，因此不能作为该病的主要病原体。

关键词：新型冠状病毒主要特性防治 SARS 病原体非典型肺炎

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病毒性心肌炎心肌组织中MIP-1β和MCP-1的表达及其意义

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上海免疫学杂志 2003年第2期23卷 95-98页

作者：沈燕陈瑞珍徐薇熊思东复旦大学上海医学院免疫学系教育部分子医学重点实验室上海200032 复旦大学附属中山医院卫生部病毒性心脏病重点实验室上海200032

为了研究病毒性心肌炎(VMC)心肌组织中MIP-1β和MCP-1的表达及其意义,以B3型柯萨奇病毒(CVB3)腹腔注射BALB/c小鼠建立VMC小鼠模型,RT-PCR实时定量分析正常对照组和VMC组心肌组织中CC家族趋化因子MIP-1β和MCP-1的表达,图像分析定量心肌... 详细信息

为了研究病毒性心肌炎(VMC)心肌组织中MIP-1β和MCP-1的表达及其意义,以B3型柯萨奇病毒(CVB3)腹腔注射BALB/c小鼠建立VMC小鼠模型,RT-PCR实时定量分析正常对照组和VMC组心肌组织中CC家族趋化因子MIP-1β和MCP-1的表达,图像分析定量心肌组织切片浸润细胞数,以TCID5o分析心肌组织中CVB3载量变化,速率法检测血清CK-MB水平.结果显示:(1)MIP-1β和MCP-1在正常组均有表达,在VMC组MIP-1β和MCP-1的表达显著高于正常组(P＜0.01).与0天基础表达量相比,MIP-1β的表达在感染后第4天达高峰,第7、9天下降.MCP-1在感染后第4天上调表达,第7、9天时表达量持续升高,第9天到高峰;(2)在感染后第4天时,心肌组织中开始出现单个核细胞浸润,7～9 d浸润的单个核细胞逐渐增加.而正常心肌组织中未见明显的细胞浸润;(3)MCP-1的表达分别与浸润的单个核细胞数及CK-MB水平相关(均P＞0.05)、MIP-1β未呈明显相关.MIP-1β和MCP-l的表达与心肌组织中CVB3载量未呈明显相关性.说明MCP-1可能参与VMC心肌组织中单个核细胞的浸润.提示MCP-1可能与心肌组织中浸润细胞的效应功能发挥有关.

关键词：病毒性心肌炎趋化因子细胞浸润发病机制

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DNA的电荷转移

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生命的化学 2003年第5期23卷 335-336页

作者：王志军袁正宏闻玉梅复旦大学上海医学院教育部卫生部分子病毒重点实验室上海200032

在双链DNA分子中,电荷常出现远距离的迁移现象,这与很多生物学功能有密切的关系,本文说明了DNA电荷转移的形成机制,分析了误配、绞联、三股螺旋及DNA结合蛋白对DNA电荷转移效率的影响,同时论述了DNA电荷转移的生物学意义。

关键词： DNA 电荷转移氧化损伤

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葡萄球菌基因组研究及其启示

葡萄球菌基因组研究及其启示

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中华医学会第八次全国感染病暨首届SARS专题学术会议

作者：闻玉梅复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室

基因组研究是指对研究对象的全部染色体或DNA染色体外遗传物质的核苷核进行测序,并作其功能预测或分析.葡萄球菌属中共有20余种,其中金葡菌引起的皮肤感染,全身性感染及毒素致病与表葡因生物膜引起的机会性感染最为常见.金葡被列为致病... 详细信息

基因组研究是指对研究对象的全部染色体或DNA染色体外遗传物质的核苷核进行测序,并作其功能预测或分析.葡萄球菌属中共有20余种,其中金葡菌引起的皮肤感染,全身性感染及毒素致病与表葡因生物膜引起的机会性感染最为常见.金葡被列为致病菌,而表葡则被列为条件致病菌.表葡菌中TIGR已对生物膜形成菌株RP62A进行了测序和分析,但尚未作报道.该室对不形成生物膜的表葡ATCC 12228株完成了基因组测序,分析.

关键词：葡萄球菌基因组测序致病基因组

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