检索结果-内蒙古大学图书馆

中国中西医结合杂志 2007年第7期27卷 619-622页

作者：董竞成赵福东谢瑾玉崔焱刘宝君宫兆华巫善美复旦大学附属华山医院中西医结合肺炎症和肿瘤研究室复旦大学上海医学院中西医结合系上海200040

目的观察益气药黄芪对支气管哮喘(以下简称哮喘)反复发作模型大鼠神经内分泌免疫(NEI)网络相关指标的影响。方法取健康清洁级雄性挪威大鼠54只,分为正常组、模型组、黄芪低、中、高剂量组。除正常组外,其他4组均行哮喘造模,黄芪不同剂... 详细信息

目的观察益气药黄芪对支气管哮喘(以下简称哮喘)反复发作模型大鼠神经内分泌免疫(NEI)网络相关指标的影响。方法取健康清洁级雄性挪威大鼠54只,分为正常组、模型组、黄芪低、中、高剂量组。除正常组外,其他4组均行哮喘造模,黄芪不同剂量组分别灌胃给予相应剂量的黄芪,模型组给予等量生理盐水。用Realtime-PCR法检测下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)mRNA的表达;放免法检测血浆中促肾上腺皮质激素(ACTH)的含量;酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清细胞因子(IL-4、IL-6、IFN-γ)和血清皮质酮(CORT)的含量;肺组织采用HE染色观察其病理变化。结果各组大鼠下丘脑CRHmRNA表达和血清ACTH无明显变化,造模后各组大鼠血清CORT水平升高(P<0.05);黄芪低组大鼠血清CORT含量显著高于其他各组(P<0.05或P<0.01);黄芪高组血清IL-4和IL-6含量显著下降(P<0.01),且有量效关系;IFN-γ各组间比较差异无显著性。各组大鼠肺组织病理变化比较差异无显著性。结论哮喘大鼠存在NEI网络相关指标的紊乱;黄芪可以增强下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴的功能,改善Th1和Th2型细胞因子的平衡,从而调节了NEI网络的紊乱。

关键词：黄芪支气管哮喘炎症神经内分泌免疫网络

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表达hCGβ的重组乳酸杆菌经口接种小鼠产生抗hCGβ体液免疫应答

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中国免疫学杂志 2007年第7期23卷 610-614页

作者：姚晓英李大金复旦大学上海医学院附属妇产科医院暨妇产科研究所生殖免疫研究室上海200011

目的：用表达hCGβ的重组乳酸杆菌活疫苗经口接种不同品系小鼠产生抗hCGβ免疫应答。方法：用10^8、10^9、10^10个重组乳酸杆菌***β灌服6～8周龄雌性BALB／c和C57BL／6小鼠。3周后用相同剂量加强免疫1次。间接ELISA检测初次免疫后2～8... 详细信息

目的：用表达hCGβ的重组乳酸杆菌活疫苗经口接种不同品系小鼠产生抗hCGβ免疫应答。方法：用10^8、10^9、10^10个重组乳酸杆菌***β灌服6～8周龄雌性BALB／c和C57BL／6小鼠。3周后用相同剂量加强免疫1次。间接ELISA检测初次免疫后2～8周血清和阴道灌洗液抗hCGβIsG和IgA抗体滴度。流式细胞仪分析B和T细胞的增殖情况，ELISpot计数抗hCGβIsG和IsA抗体分泌细胞克隆数。结果：不同品系小鼠经口腔接种10^9、10^***β可诱导相近的免疫应答；而10。诱导的抗体滴度较低。在加强免疫后，10^9和10^***β诱导的抗血清结合hCGβ抗原的能力〉100ng／n11。***β口腔接种后，BALB／c小鼠子宫和阴道的B细胞增殖；C57BL／6小鼠子宫及阴道的抗体分泌细胞克隆数较脾脏明显增多（P〈0．05）。结论：重组乳酸杆菌活疫苗***β可经口接种诱导有效的抗hCGβ免疫应答，产生的应答强度与免疫剂量呈正相关。

关键词：重组乳酸杆菌活疫苗 hCGβ 口腔接种生殖道黏膜免疫

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大鼠缺血性脑损伤致星形神经胶质细胞内β-淀粉样蛋白聚集与β-分泌酶增加相关

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复旦学报（医学版） 2007年第5期34卷 641-646页

作者：熊曼孙凤艳复旦大学上海医学院神经生物学系-医学神经生物学国家重点实验室-生物医学研究院上海200032

目的研究大鼠缺血损伤后脑内星形胶质细胞中β-淀粉样蛋白(Aβ)的形成是否与β-分泌酶的增加相关。方法采用大脑中动脉栓塞30min制备SD大鼠短暂性脑缺血模型。用免疫组化和荧光双标结合共聚焦扫描的方法来检测Aβ和β-分泌酶在脑内的表... 详细信息

目的研究大鼠缺血损伤后脑内星形胶质细胞中β-淀粉样蛋白(Aβ)的形成是否与β-分泌酶的增加相关。方法采用大脑中动脉栓塞30min制备SD大鼠短暂性脑缺血模型。用免疫组化和荧光双标结合共聚焦扫描的方法来检测Aβ和β-分泌酶在脑内的表达及细胞分布。结果大鼠脑缺血损伤后同侧纹状体内Aβ和β-分泌酶免疫阳性细胞较对侧显著增加(P<0.05),且Aβ和β-分泌酶主要分布在缺血侧星形胶质细胞中。此外,缺血侧纹状体内存在大量Aβ与β-分泌酶共定位细胞。结论脑缺血诱导星形胶质细胞中Aβ的形成伴随着β-分泌酶的表达增加,提示中风引起星形胶质细胞中Aβ的表达与β-分泌酶的活性增加有关。

关键词： β-分泌酶 β-淀粉样蛋白脑缺血

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度他雄胺对大鼠附睾精子成熟和生育的影响

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中国实验动物学报 2007年第4期15卷 308-312,I0007页

作者：谢淑武马丽刘向云李志玲王蕾李冬梅孙祖越曹霖复旦大学上海医学院上海200032 上海市计划生育科学研究所药理毒理研究室上海200032

目的通过度他雄胺对大鼠附睾精子和生育的影响,探索调节雄性生育的睾丸后作用靶点。方法使用度他雄胺20和40 mg/(kg.d)大鼠灌胃给药,连续2周。给药结束后雄雌鼠按1∶2合笼,计算生殖指数;采用计算机辅助精子分析系统分析精子活力和形态;... 详细信息

目的通过度他雄胺对大鼠附睾精子和生育的影响,探索调节雄性生育的睾丸后作用靶点。方法使用度他雄胺20和40 mg/(kg.d)大鼠灌胃给药,连续2周。给药结束后雄雌鼠按1∶2合笼,计算生殖指数;采用计算机辅助精子分析系统分析精子活力和形态;采用SYBR-14和PI双重荧光染色计算精子存活率;采用Elisa法测定大鼠睾酮(T)和双氢睾酮(DHT)血清浓度;采用HE染色法对各组睾丸、附睾进行组织学分析。结果度他雄胺低、高剂量组双氢睾酮浓度均显著下降,分别为0.54和0.28 nmol/L(P<0.01),精子活力明显降低,分别为39.0%和28.7%(P<0.01),畸形率分别增加为10.3%和15.6%(P<0.05),最后受孕率分别降为62.5%和38.4%。而睾酮水平和交配指数均无明显变化(P>0.05),睾丸和附睾亦无明显病理学改变。结论度他雄胺通过抑制DHT生成,影响附睾精子成熟而导致大鼠不育,为今后男性避孕和不育药物研发提供了新思路。

关键词：度他雄胺附睾精子成熟生育力

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去卵巢骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞体外成脂肪分化能力的研究

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生物医学工程学杂志 2007年第3期24卷 641-645页

作者：李冬菊李良吴江复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200232 四川大学华西医学中心生物医学工程研究室成都610041

探讨不同月龄、去卵巢对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向脂肪细胞分化能力的影响。选用健康3月龄和6月龄Spraque-Dawley(SD)雌性大鼠行双侧卵巢切除术,建立骨质疏松症的动物模型;使用密度梯度离心法分别获取各组骨髓间充质干细胞(MSCs),... 详细信息

探讨不同月龄、去卵巢对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向脂肪细胞分化能力的影响。选用健康3月龄和6月龄Spraque-Dawley(SD)雌性大鼠行双侧卵巢切除术,建立骨质疏松症的动物模型;使用密度梯度离心法分别获取各组骨髓间充质干细胞(MSCs),体外培养传至3代,加入成脂肪诱导液进行诱导,油红O染色观察细胞内脂滴;并用RT-PCR法检测成脂肪分化标志物脂蛋白脂酶(LPL)mRNA表达水平。实验分为8组:1)3月龄正常大鼠骨髓间充质干细胞组(MSCs3control);2)3月龄去卵巢骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞组(MSCs3ovx);3)6月龄正常大鼠骨髓间充质干细胞组(MSCs6control);4)6月龄去卵巢骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞组(MSCs6ovx);5)3月龄正常大鼠骨髓间充质干细胞成脂肪诱导组(MSCs ADI3control);6)3月龄去卵巢骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞成脂肪诱导组(MSCs ADI3ovx);7)6月龄正常大鼠骨髓间充质干细胞成脂肪诱导组(MSCs ADI6control);8)6月龄去卵巢骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞成脂肪诱导组(MSCs ADI6ovx)。结果显示:(1)年老组大鼠MSCs成脂肪细胞分化能力大于年幼组大鼠;(2)成脂肪诱导后,成脂肪诱导各组MSCs胞浆内均有脂滴形成,MSCs ADI3ovx和MSCs ADI6ovx明显多于相应对照组。(3)成脂诱导后,与相应的对照组相比,MSCs ADI3ovx和MSCs ADI6ovx LPL mRNA表达水平明显增高。研究结果表明,年老组和去卵巢骨质疏松大鼠(MSCs)向脂肪细胞分化能力皆增强。

关键词：骨髓间充质干细胞去卵巢骨质疏松成脂肪分化

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胚胎干细胞来源的内皮细胞构建内皮化血管支架

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复旦学报（医学版） 2007年第3期34卷 335-339页

作者：钟贞杨健李平谭理应其龙宋后燕复旦大学上海医学院生物化学与分子生物学系-教育部分子医学重点实验室上海200032 英国爱丁堡大学干细胞研究中心

目的探索胚胎干细胞定向分化为血管内皮细胞,并用于构建内皮化血管支架,为临床心血管疾病治疗提供实验基础。方法采用改良后单层分化体系,血管内皮生长因子(VEGF)作为独立诱导因子定向诱导胚胎干细胞分化为血管内皮细胞,用RT-PCR法检测... 详细信息

目的探索胚胎干细胞定向分化为血管内皮细胞,并用于构建内皮化血管支架,为临床心血管疾病治疗提供实验基础。方法采用改良后单层分化体系,血管内皮生长因子(VEGF)作为独立诱导因子定向诱导胚胎干细胞分化为血管内皮细胞,用RT-PCR法检测分化时程各时间点内皮特异性标志的表达,用免疫荧光法检测分化体系中的内皮细胞蛋白标志。将分化成熟的内皮细胞种植于支架表面,构建内皮化血管支架。结果胚胎干细胞全能性分子标志Oct3／4,早期内皮标志Flk-1,Tie-2,PECAM-1,以及成熟内皮标志VE-cadherin在胚胎干细胞分化体系中呈现一定的转录时序性;免疫荧光结果显示分化细胞Flk-1,VE-cadheiin阳性,血管支架被表达VE-cadherin的内皮细胞覆盖。结论我们改良了胚胎干细胞分化为血管内皮细胞的方法,并用于探索内皮化血管支架的构建。

关键词：胚胎干细胞分化内皮化血管支架

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表皮葡萄球菌双组分信号转导系统arlS基因生物学功能研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2007年第10期27卷 946-953页

作者：王家学朱涛娄强吴旸韩聪瞿涤复旦大学上海医学院生物医学研究院病原生物学研究所教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室200032

目的探讨表皮葡萄球菌arlS/R双组分信号转导系统(two-component signal transduction system,TCS)的组氨酸激酶arlS基因删除对细菌生物学的影响。方法构建含有红霉素抗性基因(ermB)的pBT2-△arlS质粒,随后将电转入表皮葡萄球菌1457的重... 详细信息

目的探讨表皮葡萄球菌arlS/R双组分信号转导系统(two-component signal transduction system,TCS)的组氨酸激酶arlS基因删除对细菌生物学的影响。方法构建含有红霉素抗性基因(ermB)的pBT2-△arlS质粒,随后将电转入表皮葡萄球菌1457的重组质粒在43℃条件下振摇培养,筛选表皮葡萄球菌1457菌株的arlS缺失突变株(SE1457-△arlS);采用微量板半定量方法检测arlS删除突变对细菌生物被膜形成的影响,通过检测A595值观察其生长曲线,检测过夜培养上清液对菌细胞裂解的活性,并用0.1%TritonX-100诱导细菌自溶的方法检测SE1457-△arlS突变株的自溶情况。结果成功构建pBT2-△arlS质粒,利用同源重组基因删除的方法表皮葡萄球菌1457 arlS基因被删除。△arlS突变株与野生株的生长曲线基本相似,提示arlS基因删除对细菌的增殖无明显影响,但SE1457-△arlS突变株形成生物被膜的能力明显低于野生株,降低90.96%;在0.1%Triton X-100诱导下SE1457-△arlS基因删除突变株的裂解率为97.83%,野生株为55.38%;而△arlS突变株过夜培养上清液对靶细菌裂解的活性则低于野生株,其裂解率为20.50%,野生株为56.12%。结论表皮葡萄球菌arlS/R双组分信号转导系统arlS基因可调控细菌生物被膜形成、菌细胞自溶以及胞外细菌裂解酶的活性。

关键词：表皮葡萄球菌双组分信号转导系统 arLS基因

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凋亡相关分子的表达上调在免疫性肝损伤中的作用探讨

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现代免疫学 2007年第6期27卷 458-464页

作者：叶菲阎淑储以微任学芳熊思东王缨复旦大学上海医学院免疫学系、免疫生物学研究所教育部分子医学重点实验室上海200032

检测刀豆蛋白A(concanavalin A,ConA)诱导的小鼠急性肝损伤模型中凋亡相关分子的表达,并探讨其意义.以小鼠尾静脉注射15 mg/kg ConA建立急性肝损伤模型;Annexin Ⅴ染色检测肝细胞的凋亡率;流式细胞术检测不同时间点肝细胞表面凋亡受体Fa... 详细信息

检测刀豆蛋白A(concanavalin A,ConA)诱导的小鼠急性肝损伤模型中凋亡相关分子的表达,并探讨其意义.以小鼠尾静脉注射15 mg/kg ConA建立急性肝损伤模型;Annexin Ⅴ染色检测肝细胞的凋亡率;流式细胞术检测不同时间点肝细胞表面凋亡受体Fas、DR5的表达,以及肝浸润淋巴细胞表面凋亡配体FasL、TRAIL的表达.结果显示,与正常小鼠肝细胞凋亡率3.36%±0.69%相比,ConA诱导小鼠急性肝损伤后肝细胞的凋亡率显著上升,12 h为13.52%±0.68%,24 h达20.92%±0.66%.同时,肝细胞表面Fas、DR5的表达明显上升,肝浸润淋巴细胞表面FasL、TRAIL亦呈显著上调表达.结果表明,在ConA诱导的急性肝损伤发生发展过程中,肝细胞表面凋亡相关分子Fas、DR5与肝浸润淋巴细胞表面凋亡配体FasL、TRAIL的表达上调以及相互作用是导致肝损伤的重要因素.

关键词： Fas FasL TRAIL DR5 肝细胞凋亡

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现代医学生科研素质和实践能力培养的探索与实践

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复旦教育论坛 2007年第6期5卷 88-91页

作者：孙利军汪青(审校) 复旦大学上海医学院教学办公室医学教育研究室

复旦大学上海医学院经过多年不断改革与探索,建立了一套行之有效的科研素质及临床实践能力培养机制,主要体现在全程导师制的实施、课程体系的优化及教学方法的改进、床旁教学的实施、课外科技活动的开展等诸方面。通过鼓励本科生早期接... 详细信息

复旦大学上海医学院经过多年不断改革与探索,建立了一套行之有效的科研素质及临床实践能力培养机制,主要体现在全程导师制的实施、课程体系的优化及教学方法的改进、床旁教学的实施、课外科技活动的开展等诸方面。通过鼓励本科生早期接触科研实践、早期接触临床病人,培养学生严谨的科学态度、创新意识和团队合作精神,显著提高了医学生的研究创新能力和临床实践能力。

关键词：医学生科研素质实践能力创新能力

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用同源重组法构建小鼠卵母细胞cDNA酵母双杂交文库的探索

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复旦学报（医学版） 2007年第4期34卷 599-602页

作者：沈煜申宗候左嘉客同济大学基础医学院组织与胚胎学教研室上海200092 复旦大学上海医学院生物化学与分子生物学系上海200092 上海市计划生育科学研究所上海200032

目的探索卵巢成熟及明确早胚发育过程中,构建小鼠卵母细胞cDNA文库筛选所涉及的相互作用蛋白。方法利用SMART技术,构建酵母双杂交筛选卵母细胞中与输卵管蛋白相互作用的靶分子成分为目的,构建小鼠卵母细胞cDNA酵母双杂交文库。采用Strat... 详细信息

目的探索卵巢成熟及明确早胚发育过程中,构建小鼠卵母细胞cDNA文库筛选所涉及的相互作用蛋白。方法利用SMART技术,构建酵母双杂交筛选卵母细胞中与输卵管蛋白相互作用的靶分子成分为目的,构建小鼠卵母细胞cDNA酵母双杂交文库。采用Stratagene RNA prepkit抽提500枚卵母细胞总RNA,应用线性化载体pGADT7-Rec在体构建小鼠卵母细胞cDNA酵母双杂交文库。结果文库的滴度为3.7×106,重组片段大小主要集中在0.6-0.9kb,重组率为60%。结论所构建的小鼠卵母细胞cDNA文库可用于酵母双杂交筛选。

关键词：酵母双杂交 cDNA文库同源重组小鼠卵母细胞

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