检索结果-内蒙古大学图书馆

中国艾滋病性病 2011年第6期17卷 613-617,625页

作者：李亮助杨瑜袁松华贲银银徐建青张晓燕上海市公共卫生临床中心复旦大学附属公共卫生临床中心复旦大学生物医学研究院上海201508 复旦大学上海医学院医学分子病毒学重点实验室上海200032 中国疾病预防控制中心传染病预防控制国家重点实验室北京100050

目的建立实时相对定量反转录聚合酶链反应(real-time RQ RT-PCR)方法,能快速准确地检测各种炎症因子在阴道黏膜的转录表达情况,从而评价包括杀微生物剂在内的生殖道或直肠黏膜用候选药物的刺激毒性。方法以Eppendorf Mastercycler ep re... 详细信息

目的建立实时相对定量反转录聚合酶链反应(real-time RQ RT-PCR)方法,能快速准确地检测各种炎症因子在阴道黏膜的转录表达情况,从而评价包括杀微生物剂在内的生殖道或直肠黏膜用候选药物的刺激毒性。方法以Eppendorf Mastercycler ep realplex实时荧光定量PCR仪为检测平台,选择小鼠β-actin基因为内参,建立基于SYBR GreenⅠ荧光染料的real-time PCR检测方法,对白介素2(Interleukin 2,IL-2)、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17A、肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factorα,TNF-α)、γ干扰素(Interferonγ,IFN-γ)等炎症因子在生殖道黏膜的mRNA转录水平,同时进行检测,并用2-⊿⊿Ct方法计算实验组小鼠目的基因相对于空白组小鼠的表达差异情况。用微量样本多指标流式蛋白定量技术(Cytometric Bead Array,CBA)对结果进行验证。结果使用real-time RQRT-PCR能对小鼠阴道黏膜炎症因子的表达情况进行快速检测,结果与CBA检测结果相吻合。结论该方法快速、灵敏、特异性强、价格低廉、高通量。可用于杀微生物剂等生殖道或直肠黏膜用候选药物的临床前安全性评价工作。

关键词：实时相对定量反转录聚合酶链式反应阴道黏膜炎症因子安全性评价

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HIV-1潜伏感染人Jurkat T细胞模型的建立

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中国艾滋病性病 2011年第4期17卷 387-390,394页

作者：李琳仇超李亮助刘爱平邱趁丽周明哲张晓燕徐建青朱焕章复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室上海200433 复旦大学附属上海市公共卫生临床中心复旦大学生物医学研究院上海201508 复旦大学上海医学院分子病毒学重点实验室上海200032 中国疾病预防控制中心传染病预防控制国家重点实验室北京102206

目的建立Ⅰ型艾滋病病毒(HIV-1)潜伏感染人Jurkat T细胞的模型,为进一步研究HIV-1潜伏感染机制奠定基础。方法利用一种表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的HIV-1假病毒感染人Jurkat T细胞,采用流式细胞术分选出GFP-细胞群,之后经激活剂曲古... 详细信息

目的建立Ⅰ型艾滋病病毒(HIV-1)潜伏感染人Jurkat T细胞的模型,为进一步研究HIV-1潜伏感染机制奠定基础。方法利用一种表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的HIV-1假病毒感染人Jurkat T细胞,采用流式细胞术分选出GFP-细胞群,之后经激活剂曲古抑菌素A(Trichostatin A,TSA)刺激后,再次采用流式细胞术分选出GFP+细胞,并通过有限稀释法制备获得单克隆细胞系。利用流式细胞术及酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测单克隆细胞系在TSA刺激前后的GFP+细胞比例及HIV-1病毒抗原p24;并用Alu-长末端重复序列(LTR)套式聚合酶链反应(Nested PCR)检测单克隆细胞系中HIV-1基因组的整合情况。结果获得了5株HIV-1潜伏感染的Jurkat单克隆细胞系,对这5株单克隆细胞系分别进行激活剂处理,发现无论是GFP表达细胞比例或HIV-1病毒蛋白p24抗原的表达,皆显著高于激活剂处理前的背景表达水平(P<0.05);并能从这5个单克隆细胞系基因组中扩增出针对HIV-1基因组的特异条带。结论已获得的5株单克隆细胞系具有HIV-1潜伏细胞的生物学特点,表明已成功地建立了HIV-1潜伏感染细胞模型。该模型可用于各种药物或激活剂的筛选和检测,也为进一步研究HIV-1潜伏感染机制奠定了工作基础。

关键词：艾滋病病毒Ⅰ型 Jurkat T细胞系绿色荧光蛋白潜伏感染模型

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表皮葡萄球菌双组分信号系统作为抗生物膜药靶的研究

表皮葡萄球菌双组分信号系统作为抗生物膜药靶的研究

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2011 International Symposium of Microbizl Biofilm 2011年国际生物膜学术研讨会)

作者：黄仁政蒋华良瞿涤刘华勇韩世清秦志强张健潘斌胡健吴旸沈旭复旦大学上海医学院医学分子病毒学教育部卫生部重点实验室上海200032 中国科学院上海药物研究所南京工业大学制药和生命科学研究院南京市新模范马路5号210009

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继续加强学科间交叉与国际化,努力提升刊物的学术水平

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微生物与感染 2011年第1期6卷 1-1页

作者：闻玉梅复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

《微生物与感染》自从2006年由《国外医学.微生物学分册》改为学术性期刊并公开发行以来,已度过整整5年。在学术实力强大和学科门类交叉的编委会（包括9位国际编委和88位国内编委）、编辑部、作者与读者的共同关心与努力下。

关键词：学术水平国际化刊物学术性期刊编委会办刊宗旨微生物编辑部

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耐甲氧西林金黄葡萄球菌小鼠菌血症感染模型的建立与评估

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中华微生物学和免疫学杂志 2010年第7期30卷 603-607页

作者：王德成王星周文江彭秀华高谦教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室复旦大学上海医学院200032 上海市公共卫生临床中心复旦大学附属公共卫生临床中心

目的本研究采用临床分离鉴定的ST-239型耐甲氧西林金黄葡萄球菌（MRSA）感染BALB/c小鼠,建立菌血症感染模型.方法从小鼠的临床症状、生存曲线和主要组织器官的病理学变化进行了时相性监测,并用该模型验证万古霉素对小鼠菌血症的治疗效... 详细信息

目的本研究采用临床分离鉴定的ST-239型耐甲氧西林金黄葡萄球菌（MRSA）感染BALB/c小鼠,建立菌血症感染模型.方法从小鼠的临床症状、生存曲线和主要组织器官的病理学变化进行了时相性监测,并用该模型验证万古霉素对小鼠菌血症的治疗效果.结果 ST-239型MRSA感染的小鼠血液中细菌含量较高,小鼠炎症反应严重并伴有心、肺等多组织器官的损伤;对小鼠使用万古霉素后可显著降低血液中的细菌量,动物存活率明显提高,主要组织器官的病理学症状减轻.结论该模型的建立将为进一步研究临床分离的MRSA的病原特性、发病机制、治疗方法等提供可靠的实验动物模型.

关键词：耐甲氧西林金黄葡萄球菌菌血症小鼠模型

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剖析乙肝病毒的包膜——乙肝表面抗原的生物学功能及其致病机制

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自然杂志 2010年第6期32卷 314-318页

作者：田晓晨闻玉梅复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室中国工程院

乙肝表面抗原作为病毒的包膜蛋白,在病人体内大量存在,甚至远远超过成熟病毒颗粒的含量。这表明表面抗原在乙肝病毒感染过程中具有特殊的作用,在乙型肝炎发病机制中扮演了重要的角色。笔者介绍了乙肝表面抗原在乙肝持续性感染致病机制... 详细信息

乙肝表面抗原作为病毒的包膜蛋白,在病人体内大量存在,甚至远远超过成熟病毒颗粒的含量。这表明表面抗原在乙肝病毒感染过程中具有特殊的作用,在乙型肝炎发病机制中扮演了重要的角色。笔者介绍了乙肝表面抗原在乙肝持续性感染致病机制方面的最新研究进展。

关键词：乙型肝炎病毒表面抗原病毒受体致病机制

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哺乳动物细胞表面展示人源HIV特异性全长抗体库的构建

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中国医药指南 2011年第21期9卷 5-7页

作者：周烨李长征陈振瑞贺微杨于军刘叔文吴曙光马丽英姜世勃周辰南方医科大学基因工程研究所广东广州510515 南方医科大学中医药学院广东广州510515 南方医科大学南方医院广东广州510515 南方医科大学药学院广东广州510515 香港Dgen生物技术有限公司香港999077 中国疾控中心性病艾滋病中心北京100050 复旦大学上海医学院分子病毒学教育部/卫生部重点实验室上海200032

目的构建人源的HIV特异性全长抗体基因库并获得可稳定展示全长抗体的哺乳动物细胞库。方法提取HIV患者外周血淋巴细胞的总RNA,采用RT-PCR的方法扩增抗体重链可变区(VH)基因,插入哺乳动物细胞表达载体pDGB4,转化感受态大肠杆菌TOPO-10,... 详细信息

目的构建人源的HIV特异性全长抗体基因库并获得可稳定展示全长抗体的哺乳动物细胞库。方法提取HIV患者外周血淋巴细胞的总RNA,采用RT-PCR的方法扩增抗体重链可变区(VH)基因,插入哺乳动物细胞表达载体pDGB4,转化感受态大肠杆菌TOPO-10,构建抗体基因库,随后将抗体库的质粒DNA稳定转染FCHO细胞,获得可稳定展示全长抗体的细胞库,用流式细胞仪分析全长抗体在FCHO细胞表面的表达。结果本研究以少量外周血淋巴细胞RNA为来源,构建了库容量为7.77×104的全长抗体基因库;将基因库的质粒DNA稳定转染FCHO细胞后,获得了可稳定展示全长抗体的细胞库;经流式细胞仪分析,有67%的细胞表面可表达可被检测到的全长抗体。结论本研究构建了人源的HIV特异性全长抗体基因库并获得可稳定展示全长抗体的哺乳动物细胞库,为治疗HIV感染的特异性抗体的筛选打下了基础。

关键词：哺乳动物细胞表面展示全长抗体库人源抗体稳定展示

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结核病空间流行病学研究进展

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中华流行病学杂志 2010年第10期31卷 1188-1191页

作者：孙果梅高谦彭文祥复旦大学上海医学院教育部医学分子病毒学重点实验室复旦大学生物医学研究院上海200032 复旦大学公共卫生学院流行病学教研室公共卫生安全教育部重点实验室

结核病在全球范围内仍然是一个严重的公共卫生问题,我国是全球22个结核病高负担国家之一,据WHO报告,2007年全球共有927万结核病新发病例,其中我国约为130万[1].正确认识结核病流行传播规律对制定切实有效的控制措施具有重要意义,但由于... 详细信息

结核病在全球范围内仍然是一个严重的公共卫生问题,我国是全球22个结核病高负担国家之一,据WHO报告,2007年全球共有927万结核病新发病例,其中我国约为130万[1].正确认识结核病流行传播规律对制定切实有效的控制措施具有重要意义,但由于结核病具有潜伏感染等特点,使人们对其传播流行规律的认识还很不全面.

关键词：结核病空间流行病学聚集性分析

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乙肝病毒表面抗原持续表达的新致病机制

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生命科学 2010年第11期22卷 1097-1101页

作者：赵超田晓晨闻玉梅复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室复旦大学生物医学研究院

乙型肝炎表面抗原(HBsAg)持续阳性是控制乙肝中难以解决的重大问题。本研究通过揭示HBsAg致病机制的基础研究,寻找抑制或清除HBsAg的新途径。通过建立有可比性的HBsAg转基因鼠和稳定表达细胞系及相应对照,进行比较转录组学和蛋白质组学... 详细信息

乙型肝炎表面抗原(HBsAg)持续阳性是控制乙肝中难以解决的重大问题。本研究通过揭示HBsAg致病机制的基础研究,寻找抑制或清除HBsAg的新途径。通过建立有可比性的HBsAg转基因鼠和稳定表达细胞系及相应对照,进行比较转录组学和蛋白质组学研究,发现了HBsAg在HBV慢性感染中的一些新致病机制。其中包括:HBsAg促进肝细胞内CypA分泌,后者可趋化炎症细胞在HBsAg阳性灶周围浸润;在细胞模型中,HBsAg分泌可引起胞内GRP78蛋白下降,导致肝细胞抗凋亡能力减弱;发现HBsAg在细胞中可上调截短的LEF1基因的表达,缺乏活化全长LEF1促成瘤和增殖活性;而肝癌组织中LEF1则倾向于核内分布,并活化Wnt下游基因Cyclin D1与c-myc,有促肿瘤活性。在转基因鼠和细胞模型中都发现了物质和能量代谢相关的基因发生变化,并与临床慢性乙肝患者表现相符。研究中有关CypA的发现提供了抑制HBsAg的新途径;有关代谢的变化提出了改变饮食内容与习惯可能有利于HBsAg阳性感染者的预后。

关键词：乙肝病毒表面抗原致病机制慢性感染

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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌皮肤脓肿小鼠感染模型的建立与评估

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中国实验动物学报 2010年第3期18卷 221-224,I0007页

作者：王德成王星周文江彭秀华高谦教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室复旦大学上海医学院上海200032 上海市公共卫生临床中心复旦大学附属公共卫生临床中心上海201508

目的建立耐甲氧西林金黄葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)小鼠皮肤脓肿感染模型,观察脓肿形成动态变化及药物对脓肿愈合的影响。方法 45只SPF级裸鼠随机分为PBS对照组、感染组及给药组,用临床分离鉴定的ST-... 详细信息

目的建立耐甲氧西林金黄葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)小鼠皮肤脓肿感染模型,观察脓肿形成动态变化及药物对脓肿愈合的影响。方法 45只SPF级裸鼠随机分为PBS对照组、感染组及给药组,用临床分离鉴定的ST-239型MRSA菌株皮下注射感染裸鼠,对脓肿的形成过程进行时相性观察,测定脓肿体积的变化,并通过H.E染色观察皮肤的组织病理学改变。结果 PBS处理组小鼠皮肤无脓肿形成,显微镜下皮肤各层结构清楚;感染组和给药组可见到典型的脓肿,临床症状的时相性过程明显,感染组小鼠皮肤真皮层的胶原纤维消失,可见大量炎性细胞浸润,给药组小鼠的脓肿体积在整个实验周期内低于感染组,且在第5天时与感染组相比有差异。结论成功建立MRSA小鼠皮肤脓肿感染模型,该模型的建立可为进一步研究来源于临床MRSA菌株的病原特性、发病机制、治疗方法等提供可靠的动物模型。

关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌皮肤脓肿裸鼠

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