检索结果-内蒙古大学图书馆

非Toll样受体家族在天然免疫中的作用

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微生物与感染 2007年第1期2卷 64-64页

作者：王静瞿涤复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

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表皮葡萄球菌AtlE蛋白介导生物膜起始黏附的相关机制

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复旦学报（医学版） 2006年第5期33卷 569-573页

作者：欧元祝朱于莉陈洁敏秦智强江娟杨晓梅瞿涤复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

目的探讨表皮葡萄球菌atlE基因编码的AtlE蛋白介导生物膜起始黏附的相关机制。方法采用RT-PCR法检测表皮葡萄球菌atlE基因在不同时期的表达水平,用紫外分光光度计检测DNA的方法检测了相应时期的胞外DNA的释放量,并用DNA酶(DNaseⅠ)研究... 详细信息

目的探讨表皮葡萄球菌atlE基因编码的AtlE蛋白介导生物膜起始黏附的相关机制。方法采用RT-PCR法检测表皮葡萄球菌atlE基因在不同时期的表达水平,用紫外分光光度计检测DNA的方法检测了相应时期的胞外DNA的释放量,并用DNA酶(DNaseⅠ)研究表皮葡萄球菌胞外DNA在生物膜形成和起始黏附中的作用;采用pBT2质粒同源重组敲除的方法构建了表皮葡萄球菌1457的atlE基因突变株,研究atlE基因敲除突变对起始黏附能力、生物膜形成及胞外DNA释放能力的影响。结果表皮葡萄球菌atlE基因的表达与胞外DNA的释放量有相关性;DNA酶能影响未成熟生物膜且能降低起始黏附能力;ΔatlE菌株胞外DNA的释放减少,起始黏附能力明显降低,不形成生物膜。结论表皮葡萄球菌atlE基因编码的AtlE蛋白能通过释放胞外DNA在表皮葡萄球菌的生物膜起作用。

关键词：表皮葡萄球菌生物膜 atlE基因胞外DNA

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医源性表皮葡萄球菌ica操纵子转录水平对生物膜表型的影响

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上海医学 2006年第1期29卷 40-44页

作者：江娟孙景勇欧元祝秦智强陈洁敏瞿涤复旦大学上海医学院教育部卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

目的探讨表皮葡萄球菌临床株中ica操纵子转录水平对生物膜表型差异的影响。方法采用微量板半定量法检测细菌生物膜表型,用Southern杂交和聚合酶链反应检测icaA基因及ica操纵子中是否存在插入序列,用RNA狭缝杂交和逆转录实时定量聚合酶... 详细信息

目的探讨表皮葡萄球菌临床株中ica操纵子转录水平对生物膜表型差异的影响。方法采用微量板半定量法检测细菌生物膜表型,用Southern杂交和聚合酶链反应检测icaA基因及ica操纵子中是否存在插入序列,用RNA狭缝杂交和逆转录实时定量聚合酶链反应检测icaA基因和icaR基因的转录水平;采用χ2检验分析icaA基因与生物膜表型的相关性,采用单因素方差检验分析转录水平的差异。结果101株临床分离株中,32.7%(33/101株)能形成生物膜,其中22株icaA基因阳性;67.3%(68/101株)无生物膜形成,其中15株icaA基因阳性。15株icaA+/生物膜表型-分离株中,ica操纵子各基因中均不存在插入序列,icaA基因的转录水平明显低于生物膜阳性的ATCC35984株(P<0.05),其中2株icaR基因的转录水平高于ATCC35984株(P<0.01)。结论表皮葡萄球菌临床株中ica操纵子的存在与生物膜表型相关(χ2=19.045,P<0.01);ica操纵子的低转录是icaA+/生物膜表型-临床株不形成生物膜的主要原因。

关键词：表皮葡萄球菌生物膜 ica操纵子转录插入

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表皮葡萄球菌生物被膜形成相关icaC敲除突变株的构建及其表型的改变

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中华微生物学和免疫学杂志 2006年第12期26卷 1104-1107页

作者：陈洁敏朱于莉欧元祝谢红梅瞿涤复旦大学上海医学院医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室上海200032 复旦大学附属中山医院临床微生物中心

目的构建表皮葡萄球菌icaC阴性突变株,以期获得仅icaC基因不同而其他遗传背景与表皮葡萄球菌1457株相同的突变株,对icaC基因产物在细菌形成生物被膜中的作用进行研究。方法构建同源重组质粒pBT2-△icaC,经金黄色葡萄球菌RN4220株修饰后... 详细信息

目的构建表皮葡萄球菌icaC阴性突变株,以期获得仅icaC基因不同而其他遗传背景与表皮葡萄球菌1457株相同的突变株,对icaC基因产物在细菌形成生物被膜中的作用进行研究。方法构建同源重组质粒pBT2-△icaC,经金黄色葡萄球菌RN4220株修饰后电转化入表皮葡萄球菌1457株。将含重组质粒的表皮葡萄球菌1457株在40℃多次传代,筛选出icaC敲除突变株(△icaC株)。检测△icaC株生长曲线,采用微量板半定量法检测细菌生物被膜的形成能力,并采用斑点免疫印迹法检测细菌多糖黏附因子的合成。结果使用同源重组法敲除表皮葡萄球菌1457株基因组中的icaC基因,△icaC株的生长曲线与表皮葡萄球菌1457株相似,但生物被膜形成能力及细胞外多糖黏附因子含量显著降低。结论表皮葡萄球菌1457株中icaC基因的缺失对细菌生长无明显影响,但显著降低细胞外多糖黏附因子含量及生物被膜形成能力,为进一步研究表皮葡萄球菌icaC基因在生物被膜形成中的作用奠定基础。

关键词：同源重组表皮葡萄球菌生物被膜 icaC 多糖黏附因子

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trap基因表达在表皮葡萄球菌生物膜形成及附属基因调节(agr)系统活化中的作用

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复旦学报（医学版） 2006年第5期33卷 580-586页

作者：朱于莉杨晓梅李娜江娟陈洁敏秦智强李敏吕元魏武瞿涤复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032 复旦大学蛋白质组学研究中心上海200032 复旦大学附属华山医院检验医学中心上海200040 上海生物信息技术研究中心上海200235

目的研究表皮葡萄球菌trap基因表达与生物膜形成的相关性及其对agr系统的活化作用。方法采用微量板半定量法检测表皮葡萄球菌生物膜表型,二维电泳和高灵敏度的基质辅助激光解吸附飞行时间质谱分析比较表皮葡萄球菌标准株蛋白质表达谱,... 详细信息

目的研究表皮葡萄球菌trap基因表达与生物膜形成的相关性及其对agr系统的活化作用。方法采用微量板半定量法检测表皮葡萄球菌生物膜表型,二维电泳和高灵敏度的基质辅助激光解吸附飞行时间质谱分析比较表皮葡萄球菌标准株蛋白质表达谱,实时定量逆转录PCR检测trap基因和RNAⅢ的转录水平,CLUSTAL X对表皮葡萄球菌trap基因与金黄色葡萄球菌序列进行分析,Mega软件构建进化树。结果比较分析形成生物膜的表皮葡萄球菌ATCC 35984株与不形成生物膜的ATCC 12228株生长中期的蛋白质组,发现ATCC 35984株的TRAP蛋白量明显高于ATCC 12228株。转录水平的检测显示ATCC 12228株和生物膜阳性临床SE1457、SE671株的trap基因均低转录,但RNAⅢ的转录水平未降低。SE1457株agr系统突变后,RNAⅢ的转录明显降低,trap基因的转录无变化。RNAⅢ的转录随细菌生长变化而增加,trap基因转录保持不变。trap序列分析显示其在表皮葡萄球菌与金黄色葡萄球菌中较为保守,但存在明显的进化距离。结论在本论文所研究的表皮葡萄球菌菌株中,trap基因的转录和翻译与细菌生物膜的形成不存在直接的调控相关性;并提示TRAP蛋白不是表皮葡萄球菌agr系统活化所必需的细菌产物;表皮葡萄球菌trap基因序列与金黄色葡萄球菌之间存在差异,可能与其功能差异相关。

关键词：表皮葡萄球菌 trap基因附属基因调节系统 RNAⅢ 生物膜

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16S rRNA基因序列分析在临床微生物学中的应用

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微生物与感染 2006年第3期1卷 184-186页

作者：李霞高谦复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

20世纪70年代前，生物类群的区分主要是根据形态和结构、生理和生化特征、行为习性表现以及少量的化石资料来进行的。这种通过表型特征鉴定的方法对细菌之问的亲缘性判断有时不够准确。随着分子生物学的发展，人们开始利用生物大分子特... 详细信息

20世纪70年代前，生物类群的区分主要是根据形态和结构、生理和生化特征、行为习性表现以及少量的化石资料来进行的。这种通过表型特征鉴定的方法对细菌之问的亲缘性判断有时不够准确。随着分子生物学的发展，人们开始利用生物大分子特别是蛋白质和核酸的结构特征，作为判断生物进化关系的主要特征。其中Woese等通过寡核苷酸编目的方法，在20世纪70年代逐渐发展出1种新的鉴定细菌的标准，即通过比较1段稳定的遗传编码——16S rRNA基因序列来分析和鉴定细菌的种系发生关系，判断其亲缘性，对细菌进行分类。

关键词： rRNA基因序列临床微生物学基因序列分析 16S 应用种系发生关系生化特征结构特征

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美国微生物学会杂志摘要

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微生物与感染 2006年第2期1卷 124-125页

作者：闻玉梅复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

1．加拿大学者Patrik Lee在研究呼肠病毒（reovims）的细胞受体时，发现该病毒可在肿瘤细胞中阻断癌基因Fas的信号传导途径，并利用肿瘤细胞产生病毒的蛋白。由于约2／3人的肿瘤有Fas被激活的信号传导途径，这一作用具有用呼肠病毒治疗... 详细信息

1．加拿大学者Patrik Lee在研究呼肠病毒（reovims）的细胞受体时，发现该病毒可在肿瘤细胞中阻断癌基因Fas的信号传导途径，并利用肿瘤细胞产生病毒的蛋白。由于约2／3人的肿瘤有Fas被激活的信号传导途径，这一作用具有用呼肠病毒治疗肿瘤的潜在功能。在正常生长的细胞中有一种RNA-激活的蛋白激酶（PKR）可以阻止呼肠病毒的复制，但在肿瘤细胞中，活化的Fas途径缺少PKR活性，从而呼肠病毒可以在肿瘤细胞中增殖。自1998年开始Lee等开展了用呼肠病毒作为一种抗肿瘤制剂的研究，发现当呼肠病毒在肿瘤细胞中增殖后，细胞出现了凋亡或坏死。临床研究中，发现当有1亿病毒颗粒直接注入固体肿瘤中，病人无不良反应。

关键词：微生物学会信号传导途径呼肠病毒肿瘤细胞摘要杂志美国细胞受体蛋白激酶 Fas

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学科碰撞造就了诺贝尔奖获得者

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微生物与感染 2006年第1期1卷 39-39,44页

作者：闻玉梅复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

2005年诺贝尔生理学及医学奖授予澳大利亚大学的胃肠道医学家Barry ***和Perth，澳大利亚的病理学家*** Warren，前者是微生物学会的会员。2位学者的重大贡献就是发现并确认幽门螺杆菌及其感染是胃、十二指肠溃疡的主要病因。此外，也... 详细信息

2005年诺贝尔生理学及医学奖授予澳大利亚大学的胃肠道医学家Barry ***和Perth，澳大利亚的病理学家*** Warren，前者是微生物学会的会员。2位学者的重大贡献就是发现并确认幽门螺杆菌及其感染是胃、十二指肠溃疡的主要病因。此外，也是慢性活动性胃炎和较少见胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤的主要病因，与胃癌发生也有密切的关系。他们的研究不仅有重大的临床意义，还激发了对微生物引起慢性感染的兴趣及热潮。

关键词：诺贝尔奖获得者微生物学会碰撞学科十二指肠溃疡慢性感染澳大利亚 Robin 幽门螺杆菌淋巴组织

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利用转座子突变技术分离分枝杆菌耐乙胺丁醇相关新基因

利用转座子突变技术分离分枝杆菌耐乙胺丁醇相关新基因

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中华医学会结核病学分会2006年学术会议

作者：沈国妙高谦复旦大学上海医学院教育部分子病毒学重点实验室

研究背景和目的乙胺丁醇(EMB)是一种一线抗结核药,对分枝杆菌属细菌有抑菌作用。先前的研究发现分枝杆菌中编码阿拉伯糖基转移酶的embCAB操纵子与 EMB的耐药有关,其中,embB基因中306位点的突变被认为是引起耐药的主要原因。然而最近该...

研究背景和目的乙胺丁醇(EMB)是一种一线抗结核药,对分枝杆菌属细菌有抑菌作用。先前的研究发现分枝杆菌中编码阿拉伯糖基转移酶的embCAB操纵子与 EMB的耐药有关,其中,embB基因中306位点的突变被认为是引起耐药的主要原因。然而最近该观点受到质疑;近年来还检测到其它一些基因的突变如Rv0340,rmlD等

关键词：

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错配PCR反应技术在快速检测耐药结核分枝杆菌中的应用

错配PCR反应技术在快速检测耐药结核分枝杆菌中的应用

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中华医学会结核病学分会2006年学术会议

作者：朱良斌孙刚沈国妙骆菲菲孙笑阎粱高谦沈鑫梅建高谦复旦大学上海医学院教育部分子病毒学重点实验室复旦大学上海医学院教育部分子病毒学重点实验室复旦大学上海医学院教育部分子病毒学重点实验室复旦大学上海医学院教育部分子病毒学重点实验室复旦大学上海医学院教育部分子病毒学重点实验室复旦大学上海医学院教育部分子病毒学重点实验室复旦大学上海医学院教育部分子病毒学重点实验室上海市疾病预防控制中心结防科上海市疾病预防控制中心结防科上海市疾病预防控制中心结防科

目的以检测耐利福平的结核分枝杆菌rpoB基因531位点的点突变为对象,建立直接错配PCR法,并与间接错配PCR法进行比较,评价这两种方法在耐药结核分枝杆菌临床检测中的应用前景。材料上海市疾病预防控制中心结核病参比实验室保存的菌株中选... 详细信息

目的以检测耐利福平的结核分枝杆菌rpoB基因531位点的点突变为对象,建立直接错配PCR法,并与间接错配PCR法进行比较,评价这两种方法在耐药结核分枝杆菌临床检测中的应用前景。材料上海市疾病预防控制中心结核病参比实验室保存的菌株中选出63株结核分枝杆菌菌株,其中48株为利福平耐药株,15株为利福平敏感株。菌种鉴定方法按照中国防痨协会《结核病诊断细菌学检验规程》进行。药敏试验方法按照中国防痨协会《结核病诊断细菌学检验规程》中绝对浓度法进行。

关键词：耐药结核分枝杆菌 PCR 反应技术利福平细菌学检验快速检测

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