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第四届临床微生物学与感染病学国际论坛暨首届微生物耐药防控高峰论坛

作者：王小飞韩海燕吴旸瞿涤复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海 200032

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抑制葡萄球菌组氨酸激酶YycG的噻唑烷酮类衍生物抗菌活性的研究

抑制葡萄球菌组氨酸激酶YycG的噻唑烷酮类衍生物抗菌活性的研究

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第四届临床微生物学与感染病学国际论坛暨首届微生物耐药防控高峰论坛

作者：吕智慧刘华勇吴旸瞿涤复旦大学上海医学院医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海 200030

背景：表皮葡萄球菌是引起医院感染的一种重要机会致病菌。它的主要致病力是在植入性医疗材料上形成生物膜，生物膜一旦形成就很难再被清除，从而给临床治疗带来极大困难。目的：葡萄球菌组氨酸激酶YycG抑制剂噻唑烷酮类衍生物抗菌和抗... 详细信息

背景：表皮葡萄球菌是引起医院感染的一种重要机会致病菌。它的主要致病力是在植入性医疗材料上形成生物膜，生物膜一旦形成就很难再被清除，从而给临床治疗带来极大困难。目的：葡萄球菌组氨酸激酶YycG抑制剂噻唑烷酮类衍生物抗菌和抗生物膜活性的研究。

关键词：表皮葡萄球菌 YycG抑制剂最低抑菌浓度杀生物膜活性

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外泌体与病毒感染及HBV相关肝病的关系

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临床肝胆病杂志 2017年第8期33卷 1465-1470页

作者：贾小芳褚巧芳袁正宏上海市公共卫生临床中心复旦大学上海201508 医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室基础医学院病原生物学系上海医学院复旦大学上海200032

HBV感染后可导致肝脏组织炎症和肝细胞坏死,甚至发生肝纤维化等病理变化,驱动着"慢性肝炎-肝硬化-肝癌"的进展,但其机制尚不完全明了。被HBV感染的肝细胞与其他未感染细胞及宿主免疫系统之间发生相互作用的可能机制即通过肝... 详细信息

HBV感染后可导致肝脏组织炎症和肝细胞坏死,甚至发生肝纤维化等病理变化,驱动着"慢性肝炎-肝硬化-肝癌"的进展,但其机制尚不完全明了。被HBV感染的肝细胞与其他未感染细胞及宿主免疫系统之间发生相互作用的可能机制即通过肝脏微环境中由外泌体介导的细胞与细胞间的相互沟通。多项研究表明病毒感染可以调节外泌体的生成并影响其组成,病毒microRNA、蛋白质甚至整个病毒都可能被包裹进入外泌体,从而影响病毒的免疫识别或调节邻近细胞的功能。阐述了外泌体的产生和组成,及其在病毒感染过程中的作用,并进一步对外泌体与HBV感染等方面的研究进展进行了讨论。

关键词：外泌体肝炎病毒,乙型肝疾病

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表皮葡萄球菌SrrAB生物信息分析及SrrA蛋白的原核表达

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中国人兽共患病学报 2016年第11期32卷 952-958页

作者：武有聪王涛韩海燕瞿涤白丽大理大学基础医学院病原生物学综合实验室大理671000 复旦大学上海医学院分子病毒学教育部/卫生部重点实验室上海200032

目的分析表皮葡萄球菌SrrAB生物信息,表达及纯化SrrA蛋白,为SrrA功能研究奠定基础。方法以表皮葡萄球菌SE1457基因组为模板,PCR扩增srrA基因,构建重组表达质粒pET28a-srrA,转入大肠杆菌BL21,利用纯化的重组蛋白SrrA免疫小鼠,制备SrrA多... 详细信息

目的分析表皮葡萄球菌SrrAB生物信息,表达及纯化SrrA蛋白,为SrrA功能研究奠定基础。方法以表皮葡萄球菌SE1457基因组为模板,PCR扩增srrA基因,构建重组表达质粒pET28a-srrA,转入大肠杆菌BL21,利用纯化的重组蛋白SrrA免疫小鼠,制备SrrA多克隆抗体,并检测SrrA在表皮葡萄球菌不同生长时期的表达水平。序列比对利用Clustalw2软件,蛋白结构域分析用DNAMAN软件。结果表皮葡萄球菌SE1457SrrAB单独组成一个操作子,SrrA位于胞浆中,与金黄色葡萄球菌和枯草杆菌类似物的同源性分别为95%和65%,SrrB为跨膜蛋白,与上述细菌类似物的同源性分别为71%和33%;表皮葡萄球菌SrrA于对数生长中期表达量最高。结论成功表达并纯化了表皮葡萄球菌SrrA蛋白,为SrrAB下游调控机制研究奠定基础。

关键词：表皮葡萄球菌 SrrAB 生物信息原核表达

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粪肠球菌临床株生物膜形成特征及相关毒力因子研究

粪肠球菌临床株生物膜形成特征及相关毒力因子研究

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第四届临床微生物学与感染病学国际论坛暨首届微生物耐药防控高峰论坛

作者：郑金鑫吴旸林志伟姚伟明陈重李多云邓启文余治健瞿涤深圳大学附属南山区人民医院感染疾病科深圳市内源性感染诊治重点实验室深圳市 518052 复旦大学医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室复旦大学上海医学院上海市 200032

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GeneXpert MTB／RIF技术在结核病早诊断中的应用

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中国防痨杂志 2017年第1期39卷 71-75页

作者：路丽苹陆斌刘梅洪建军郭晓芹高谦上海市松江区疾病预防控制中心结核病防治科 201620 上海市松江区中心医院检验科复旦大学上海医学院教育部、卫生部医学分子病毒学重点实验室

目的评估GeneXpertMTB／RIF技术（简称XpertMTB／RIF）检测结核分枝杆菌（MTB）及其利福平耐药的可行性。方法选取2015年1—6月上海市松江区结核病定点医院结核科门诊连续纳入、初次就诊的疑似结核病患者，共556例。收集患者痰液标本，... 详细信息

目的评估GeneXpertMTB／RIF技术（简称XpertMTB／RIF）检测结核分枝杆菌（MTB）及其利福平耐药的可行性。方法选取2015年1—6月上海市松江区结核病定点医院结核科门诊连续纳入、初次就诊的疑似结核病患者，共556例。收集患者痰液标本，分别进行涂片抗酸染色镜检法（简称“涂片法”）、液体分枝杆菌培养管（MGIT）培养法（简称“液体培养法”）、传统比例法药物敏感性试验（简称“药敏试验”）和XpertMTB／RIF检测，比较XpertMTB／RIF法和传统方法检测痰标本中MTB及其耐药性的效能。结果537例患者经涂片法、液体培养法和XpertMTB／RIF检测，阳性率分别为17．32％（93／537）、28．31％（152／537）和28．12％（151／537）。以液体培养为金标准，XpertMTB／RIF检测的敏感度和特异度分别为90．60％（135／149）和95．84％（369／385），且敏感度高于涂片法[涂片法的敏感度为60．53％（92／152）]，差异有统计学意义（χ2=36．71，P％0．01）；XpertMTB／RIF检测涂阳标本的敏感度为96．63％（86／89），明显高于检测涂阴标本的敏感度ES1．67％（49／60）]，差异有统计学意义（χ2=9．43，P〈0．01）。以比例法药敏试验结果为金标准，XpertMTB／RIF检测利福平耐药的敏感度为90．00％（9／10），特异度为99．07％（106／107），一致率为98．29％（115／117）。结论XpertMTB／RIF技术操作简便、快速、安全，敏感度和特异度较高，对基层实验室早期检测MTB及判定利福平耐药具有重要价值。

关键词：分枝杆菌,结核痰核酸扩增技术早期诊断利福平抗药性

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结核分枝杆菌潜伏感染的预防治疗及面临的问题

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中华结核和呼吸杂志 2016年第1期39卷 8-12页

作者：田际云梅建高谦复旦大学上海医学院医学分子病毒学重点实验室 200032 澳门特别行政区卫生局结核病防治中心

结核病是由MTB引起的严重危害人类健康的慢性传染性疾病。据世界卫生组织估计，2013年，全球新发结核病例900万例，死亡病例数为150万例。中国是22个结核病高负担国家之一，患者数仅次于印度，结核病防控形势不容乐观。

关键词：结核分枝杆菌潜伏感染慢性传染性疾病结核病例治疗预防世界卫生组织人类健康

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医学微生物学实验教学中的生物安全问题探讨

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中国病原生物学杂志 2016年第2期11卷 I0001-I0003页

作者：武有聪王涛白丽瞿涤大理大学病原生物学综合实验室云南大理671000 复旦大学上海医学院分子病毒学教育部/卫生部重点实验室上海200032

医学院校医学微生物学实验室是培养医学生生物安全意识和无菌观念的重要场所,其开展的实验内容多与人类感染性疾病关系密切。在保证生物安全的条件下培养高素质医学人才是高校管理者探究的热点问题。结合本校医学微生物学实验室存在的... 详细信息

医学院校医学微生物学实验室是培养医学生生物安全意识和无菌观念的重要场所,其开展的实验内容多与人类感染性疾病关系密切。在保证生物安全的条件下培养高素质医学人才是高校管理者探究的热点问题。结合本校医学微生物学实验室存在的生物安全问题,对实验室的安全管理展开探讨,为预防实验室生物安全事故提供参考。

关键词：生物安全实验教学医学微生物学

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高压水动力法建立表面抗原表达缺失的乙型肝炎转染小鼠模型及初步评估

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肝脏 2017年第10期22卷 894-898页

作者：张毅陈捷亮方钟徐国光李军南京医科大学 210029 上海市公共卫生临床中心肝病一科复旦大学上海医学院医学分子病毒学教育部/卫计委重点实验室南京医科大学第一附属医院感染病科

目的探讨HBsAg在小鼠体内模型中对宿主免疫应答调节及病毒感染慢性化中的作用。方法在已有高压水动力法转染pAAV-HBV1.2质粒建立乙肝小鼠模型的基础上,通过点突变技术引入终止密码子至pAAV-HBV1.2质粒上的HBsAg读码框,构建HBsAg无法转... 详细信息

目的探讨HBsAg在小鼠体内模型中对宿主免疫应答调节及病毒感染慢性化中的作用。方法在已有高压水动力法转染pAAV-HBV1.2质粒建立乙肝小鼠模型的基础上,通过点突变技术引入终止密码子至pAAV-HBV1.2质粒上的HBsAg读码框,构建HBsAg无法转录的突变质粒,再利用该质粒构建HBsAg表达缺失的乙肝小鼠模型。通过比较原始质粒建立的乙肝模型小鼠,检测分析外周血中HBV抗原与DNA等病毒感染指标,比较肝脏病变和免疫细胞浸润情况。结果成功构建了HBsAg缺失的乙肝模型小鼠:在乙肝模型小鼠和HBsAg缺失突变的模型小鼠外周血中均能检测到4 COI/mL水平的HBeAg,两组小鼠没有差异,但只有乙肝小鼠体内能检测到102 COI/mL以上的HBsAg和103至106拷贝/mL的HBV DNA,HBsAg缺失的小鼠中无法检测到HBsAg和HBV DNA;动态监测显示HBeAg在乙肝和HBsAg缺失突变的两组小鼠中的阳性率均逐步降低,在HBsAg缺失突变组中降低的更明显,第8周时仅有20%的小鼠为HBeAg阳性,而此时未突变乙肝组的阳性率为60%;免疫组织化学结果显示:在阴性对照小鼠的肝脏结构较完整,未见聚集的浸润免疫细胞,而乙肝和HBsAg缺失的乙肝小鼠肝小叶结构均松散,乙肝小鼠肝脏中有聚集的浸润性免疫细胞,HBsAg缺失的小鼠肝脏缺少免疫细胞的聚集,却存在严重的肝细胞毛玻璃样变性。结论成功构建了HBsAg缺失的乙肝转染小鼠模型;并发现HBsAg在HBV完整病毒颗粒包装和出胞,以及肝脏病变和免疫细胞浸润过程中发挥了重要的作用。

关键词：慢性乙型肝炎乙肝病毒乙肝表面抗原高压水动力法毛玻璃样病变免疫细胞浸润

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新疆野生及栽培一枝蒿多糖对树突状细胞免疫功能的影响

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生物技术通报 2016年第7期32卷 217-226页

作者：杨雨杨秀梅赵干俞益张慧珍张爱莲新疆大学生命科学与技术学院新疆生物资源基因工程重点实验室乌鲁木齐830046 复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

研究和比较新疆野生与栽培一枝蒿多糖对骨髓来源树突状细胞(dendritic cells,DCs)成熟和功能的影响。超声法制备野生及栽培一枝蒿粗多糖;Sevage法除蛋白;蒽酮-硫酸法测定多糖含量;流式细胞术检测DCs的成熟;ELISA法检测IL-12和TNF-α的... 详细信息

研究和比较新疆野生与栽培一枝蒿多糖对骨髓来源树突状细胞(dendritic cells,DCs)成熟和功能的影响。超声法制备野生及栽培一枝蒿粗多糖;Sevage法除蛋白;蒽酮-硫酸法测定多糖含量;流式细胞术检测DCs的成熟;ELISA法检测IL-12和TNF-α的表达水平。结果显示,野生及栽培一枝蒿多糖含量分别为26.18%和22.14%,去除蛋白质后多糖含量分别为30.94%和27.06%;野生及栽培一枝蒿多糖均可以显著增强小鼠骨髓来源CD11c+DCs表面分子CD40,CD86及CD80的表达(P<0.05);显著促进IL-12和TNF-α的表达(P<0.05);显著降低DCs吞噬FITC-Dextran的能力;且相同剂量对DCs的免疫活性无显著性差异(P>0.05);除蛋白和不除蛋白的野生及栽培一枝蒿多糖的免疫活性均无显著差异(P>0.05)。新疆野生和栽培一枝蒿多糖含量差异较小,并均可以促进小鼠骨髓来源DCs的成熟和功能,且差异不大。

关键词：野生一枝蒿栽培一枝蒿多糖树突状细胞

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