检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物与感染 2008年第2期3卷 84-89,117页

作者：刘华陈志翱成玉明袁正宏复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

目的研究乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)在乙型肝炎病毒(HBV)逃逸机体天然免疫中的作用。方法用乙酸肉豆蔻佛波酯(PMA)诱导人单核细胞白血病细胞(THP)-1分化成巨噬样细胞,并与HBsAg共培养作比较,在脂多糖(LPS,TLR4的配体)和Pam3CSK4(TLR1... 详细信息

目的研究乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)在乙型肝炎病毒(HBV)逃逸机体天然免疫中的作用。方法用乙酸肉豆蔻佛波酯(PMA)诱导人单核细胞白血病细胞(THP)-1分化成巨噬样细胞,并与HBsAg共培养作比较,在脂多糖(LPS,TLR4的配体)和Pam3CSK4(TLR1、2的配体)的刺激下,检测细胞上清液中细胞因子白细胞介素10(IL-10)、IL-12的表达及胞内IL-10、IL-12mRNA的含量,并利用免疫荧光法观察核转录因子-kappaB(NF-κB)p65入核和蛋白质印迹法(Western blot)检测IκB-α蛋白降解与胞外信号调节激酶(ERK)蛋白磷酸化水平来判定TLR信号通路活化程度。结果HBsAg的胞外处理能以剂量依赖的方式干扰Pam3CSK4和LPS诱导的IL-10和IL-12的产生,同时HBsAg的存在明显干扰Pam3CSK4和LPS诱导的NF-κB p65入核和IκB-α降解以及ERK蛋白磷酸化水平。结论HBsAg抑制TLR2和TLR4的激活。

关键词：乙型肝炎病毒表面抗原 Toll样受体巨噬样细胞人单核细胞白血病细胞-1

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海分枝杆菌mas基因的功能研究

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微生物与感染 2007年第3期2卷 138-143页

作者：朱江化于佳高谦复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

目的研究海分枝杆菌结核蜡酸合酶(mycocerosic acid synthase,mas)基因在致病中的机制。方法在海分枝杆菌转座子随机突变库中,以菌落形态和抗酸染色的索状形态为标志筛选出索状结构改变的突变株;检测细菌在巨噬细胞内的增殖能力以及斑... 详细信息

目的研究海分枝杆菌结核蜡酸合酶(mycocerosic acid synthase,mas)基因在致病中的机制。方法在海分枝杆菌转座子随机突变库中,以菌落形态和抗酸染色的索状形态为标志筛选出索状结构改变的突变株;检测细菌在巨噬细胞内的增殖能力以及斑马鱼感染后的生存率及病理改变。结果获得插入位点位于mas基因不同位置的3个索状结构突变株。海分枝杆菌mas突变株在巨噬细胞内增殖能力减弱;其对斑马鱼的致死能力急剧下降,在斑马鱼体内不能形成肉芽肿并很快被清除。结论海分枝杆菌mas基因与其索状结构形成密切相关,并且对其在巨噬细胞内及宿主体内的生存和繁殖十分重要。

关键词：海分枝杆菌转座子突变斑马鱼肉芽肿

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α-Actinin影响丙型肝炎病毒非结构蛋白与脂筏的关联及复制

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微生物与感染 2010年第4期5卷 218-224页

作者：宋武慧潘婷婷袁正宏复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

本文旨在探讨α-actinin参与丙型肝炎病毒(HCV)复制的机制。将α-actinin转染Huh7.5细胞,用JFH1感染,发现过表达α-actinin可显著增加HCVRNA水平及非结构蛋白表达,感染性HCV颗粒也同时增多。膜漂浮实验显示,α-actinin可与HCV非结构蛋白... 详细信息

本文旨在探讨α-actinin参与丙型肝炎病毒(HCV)复制的机制。将α-actinin转染Huh7.5细胞,用JFH1感染,发现过表达α-actinin可显著增加HCVRNA水平及非结构蛋白表达,感染性HCV颗粒也同时增多。膜漂浮实验显示,α-actinin可与HCV非结构蛋白NS5A共定位于脂筏。抑制内源性α-actinin表达,可使复制子细胞内NS5A表达减少,且对非离子去污剂敏感而从脂筏脱落。免疫荧光实验显示,NS5A与内质网标志分子calnexin核周共定位消失。以上结果提示,α-actinin可通过影响非结构蛋白与脂筏的关联而参与HCV RNA的合成,为临床治疗及研制新型抗HCV药物提供理论依据和实验基础。

关键词：丙型肝炎病毒非结构蛋白 α-Actinin 脂筏内质网

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乙型肝炎病毒e抗原的生物学功能及血清学转换的免疫学基础

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微生物与感染 2011年第4期6卷 193-198页

作者：闻玉梅复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

目前在临床乙型肝炎的治疗中,乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)消失及其抗体的出现已成为重要的疗效指标。本文回顾了HBeAg的发现及其生物学和医学意义,对HBeAg与乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)的免疫原性进行了比较,阐述了HBeAg血清学转换的免... 详细信息

目前在临床乙型肝炎的治疗中,乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)消失及其抗体的出现已成为重要的疗效指标。本文回顾了HBeAg的发现及其生物学和医学意义,对HBeAg与乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)的免疫原性进行了比较,阐述了HBeAg血清学转换的免疫学基础,并对出现HBeAg血清学转换的意义作了分析。

关键词：乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒e抗原血清学转换

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肠球菌属生物膜表型和基因型相关性分析

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中国感染与化疗杂志 2020年第2期20卷 157-162页

作者：丁丽吴旸李培林东昉复旦大学附属华山医院抗生素研究所国家卫健委抗生素临床药理重点实验室上海200040 复旦大学基础医学院病原生物学系医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室

目的了解肠球菌属生物膜形成能力及其毒力基因携带率,分析生物膜的形成能力与毒力基因间的相关性。方法收集复旦大学附属华山医院2015-2017年临床分离自无菌体液的肠球菌属细菌,使用结晶紫染色法测定肠球菌的生物膜形成能力并进行形成... 详细信息

目的了解肠球菌属生物膜形成能力及其毒力基因携带率,分析生物膜的形成能力与毒力基因间的相关性。方法收集复旦大学附属华山医院2015-2017年临床分离自无菌体液的肠球菌属细菌,使用结晶紫染色法测定肠球菌的生物膜形成能力并进行形成能力的强弱分级,采用PCR方法筛查7种常见的肠球菌毒力基因以及Fsr群体感应系统基因(fsrA、fsrB、fsrC)。结果共收集了112株肠球菌菌株,其中粪肠球菌52株,屎肠球菌60株;两者生物膜形成的阳性率分别为63.46%和13.33%,差异具有统计学意义(P<0.001)。52株粪肠球菌毒力基因携带率分别为:esp 40.38%、gelE 69.23%、sprE 73.08%、asa157.69%、cylA 46.15%、cylB 48.08%、cylM 50.00%、fsrA 40.38%、fsrB 42.31%、fsrC 80.77%,携带esp、asa1、cylA、cylB、cylM和fsrB基因的菌株更易形成生物膜。60株屎肠球菌毒力基因携带率分别为:esp 65.00%、gelE 10.00%。结论粪肠球菌比屎肠球菌更容易形成生物膜;多种毒力基因与生物膜形成相关,提示生物膜的形成并不是由单一基因调控,而是由多个基因多系统调控。

关键词：肠球菌生物膜毒力基因

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开展多学科双向性转化型研究

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微生物与感染 2009年第1期4卷 3-3,12页

作者：闻玉梅复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室

虽然转化型研究已被提出数年,但一般强调的是基础理论研究联系临床医学或预防医学的问题并在一定程度上予以解决.

关键词：转化型多学科双向性预防医学临床医学环境卫生基础理论基础医学

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一种高效的葡萄球菌基因敲除方法的建立与应用

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中国人兽共患病学报 2015年第12期31卷 1098-1102页

作者：朱涛段芹李朝品瞿涤皖南医学院医学寄生虫学教研室芜湖241002 皖南医学院口腔医学院芜湖241002 复旦大学教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

目的建立一种高效构建葡萄球菌基因敲除突变株的方法。方法通过融合PCR将vraSR操纵子上、下游同源片段连接起来;通过基于位点特异性重组的Gateway克隆技术将融合PCR产物连接入温度敏感型穿梭质粒pKOR1,转化修饰缺陷型大肠杆菌DC10B,获... 详细信息

目的建立一种高效构建葡萄球菌基因敲除突变株的方法。方法通过融合PCR将vraSR操纵子上、下游同源片段连接起来;通过基于位点特异性重组的Gateway克隆技术将融合PCR产物连接入温度敏感型穿梭质粒pKOR1,转化修饰缺陷型大肠杆菌DC10B,获得同源重组质粒pKOR1-vraSR;电转化表皮葡萄球菌RP62A株;在高温和氯霉素双重选择压力下,质粒通过第1次同源重组整合到表皮葡萄球菌染色体上;转移到无抗生素的培养基中继续培养,发生第2次同源重组;将菌液涂布于含1μg/mL脱水四环素的培养基上进行反向筛选,那些未发生重组的整合菌株因表达必需基因secY的反义RNA而无法生存,最后,挑取菌落通过PCR进行鉴定。结果成功构建了难以转化的表皮葡萄球菌RP62A株的vraSR基因敲除突变株。结论利用大肠杆菌DC10B和穿梭质粒pKOR1对葡萄球菌进行基因敲除的方法简便高效,适用的范围更广泛。

关键词：基因敲除葡萄球菌反向选择限制修饰系统

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从DNA疫苗到耐受疫苗:全新的适应症和抑炎前景

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生命的化学 2014年第1期34卷 23-28页

作者：耿爽钟一维王宾复旦大学上海医学院教育部和卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

DNA疫苗技术从1990年代发现到至今,已经创造成功了4个临床兽用疫苗或产品,并仍然有数十个产品正在临床验证的不同阶段。通过不断提高DNA质粒进入体细胞的效率,DNA疫苗将具有更强的免疫应答效率,从而使得DNA疫苗走向更多和更广泛的临床... 详细信息

DNA疫苗技术从1990年代发现到至今,已经创造成功了4个临床兽用疫苗或产品,并仍然有数十个产品正在临床验证的不同阶段。通过不断提高DNA质粒进入体细胞的效率,DNA疫苗将具有更强的免疫应答效率,从而使得DNA疫苗走向更多和更广泛的临床应用。DNA疫苗不仅可以增强机体免疫系统的应答反应,利用其与蛋白质疫苗共免疫的方式也可以产生特异性的免疫耐受反应用于抑制免疫反应。基于DNA疫苗的诱导免疫耐受的疫苗技术开辟了全新的过敏性疾病和自主免疫疾病的干预领域,具有重要的临床潜力和应用前景。

关键词： DNA疫苗耐受疫苗共免疫佐剂过敏性疾病自主免疫疾病

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新的动物模型给肠道病毒71型疫苗研发带来新希望

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微生物与感染 2010年第4期5卷 199-199,217页

作者：王宾复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室

近年来手足口病病例增多,逐渐成为人们担忧的公共卫生问题,研制出相应疫苗成为关注的焦点.但此项疫苗的开发并不如人们想象中的那样简单.其中一个重要原因是,没有一个合适的动物模型来对研发后的疫苗进行免疫效果和安全性评价.本期刊登... 详细信息

近年来手足口病病例增多,逐渐成为人们担忧的公共卫生问题,研制出相应疫苗成为关注的焦点.但此项疫苗的开发并不如人们想象中的那样简单.其中一个重要原因是,没有一个合适的动物模型来对研发后的疫苗进行免疫效果和安全性评价.本期刊登了关于"肠道病毒71型灭活疫苗免疫恒河猴在攻毒实验中的感染动力学"的论文,就前期工作基础上研制的EV71灭活疫苗在成年恒河猴模型中进行了免疫保护效果的评价.

关键词：动物模型肠道病毒71型疫苗发带公共卫生问题安全性评价免疫效果

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乙型肝炎病毒基因型与免疫复合物型治疗性乙型肝炎疫苗应答相关性的研究

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微生物与感染 2008年第1期3卷 7-10页

作者：李潇潇马张妹闻玉梅复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室

目的研究对免疫复合物型治疗性乙型肝炎疫苗不同应答的乙型肝炎患者的乙型肝炎病毒(HBV)基因型有无差别。方法收集67例经60μg乙型肝炎表面抗原-抗体(HBsAg-HBIG,YIC)治疗的慢性乙型肝炎患者血清,用S基因聚合酶链反应-限制性片段长度多... 详细信息

目的研究对免疫复合物型治疗性乙型肝炎疫苗不同应答的乙型肝炎患者的乙型肝炎病毒(HBV)基因型有无差别。方法收集67例经60μg乙型肝炎表面抗原-抗体(HBsAg-HBIG,YIC)治疗的慢性乙型肝炎患者血清,用S基因聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)法对其进行HBV基因分型,并结合患者对YIC治疗的不同应答进行分析。结果67例感染(HBV)患者中,HBVB基因型22例,C基因型43例,未确定者2例。感染HBVB、C两种基因型的患者对YIC免疫治疗的病毒学与HBeAg的血清转换应答差异无统计学意义。结论HBVB或C基因型不影响慢性乙型肝炎患者对YIC的治疗应答。

关键词：乙型肝炎病毒基因型治疗性乙型肝炎疫苗限制性片段长度多态性慢性乙型肝炎

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