检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物与感染 2019年第3期14卷 185-192页

作者：赵云王蕾郭雅萌陈力汤慧重庆大学生命科学学院重庆405200 复旦大学上海医学院基础医学院教育部、卫健委、医科院医学分子病毒学重点实验室上海200032 教育部感染性疾病分子生物学重点实验室重庆医科大学病毒性肝炎研究所重庆医科大学附属第二医院感染科重庆400010

数字聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)采用与定量PCR相同的荧光化学原理和不同的数学原理来实现对靶标核酸序列的绝对定量,其摒弃了对外部参照的依赖,同时具有更高的数据精密度,提高了重复性和再现性。数字PCR的应用涵盖生... 详细信息

数字聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)采用与定量PCR相同的荧光化学原理和不同的数学原理来实现对靶标核酸序列的绝对定量,其摒弃了对外部参照的依赖,同时具有更高的数据精密度,提高了重复性和再现性。数字PCR的应用涵盖生命科学众多领域,特别是在医学检验领域,其对疾病相关核酸分子标记的准确分析,为疾病的早期诊断、进展监测、疗效评估提供了动态量化指标。数字PCR的出现将推动基于核酸扩增技术的分子生物学检测迈入精准定量阶段。本文就数字PCR尤其是微滴式数字PCR在感染性疾病中的应用进展及前沿进行综述。

关键词：数字聚合酶链反应微滴式数字聚合酶链反应泊松分布绝对定量感染性疾病

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结核免疫应答相关白细胞介素的作用机制研究进展

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微生物与感染 2022年第1期17卷 41-46页

作者：刘曦沈洪波王菲菲徐军发广东医科大学检验医学研究所临床免疫学研究室广东东莞523808 同济大学附属上海市肺科医院结核病临床研究中心上海200433 复旦大学上海医学院基础医学院病原生物学系教育部、卫健委、医科院医学分子病毒学重点实验室上海200032

白细胞介素(简称白介素)能够调控免疫细胞的分化、增殖及效应功能。结核抗原特异性诱导的白介素的表达水平能够表征结核杆菌感染后的机体状态。在机体的抗结核免疫应答中,白介素可以直接调控吞噬细胞对胞内感染结核杆菌的杀菌活性;也能... 详细信息

白细胞介素(简称白介素)能够调控免疫细胞的分化、增殖及效应功能。结核抗原特异性诱导的白介素的表达水平能够表征结核杆菌感染后的机体状态。在机体的抗结核免疫应答中,白介素可以直接调控吞噬细胞对胞内感染结核杆菌的杀菌活性;也能够调控效应性T细胞的增殖,并进一步激活吞噬细胞的杀菌功能。目前,部分白介素已被证明有望用于结核病的免疫辅助治疗,正在进行相关临床实验。本文对白介素调控免疫细胞抗结核免疫应答的研究进展进行综述,以期为制定结核病的白介素免疫辅助治疗方案提供指导。

关键词：白细胞介素抗结核免疫结核病辅助治疗

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miR-125b-5p促进分枝杆菌在宿主细胞和小鼠体内存活的研究

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微生物与感染 2020年第2期15卷 82-87页

作者：黄桂贤梁珊珊彭影沈洪波王菲菲徐军发广东医科大学检验医学研究所临床免疫学研究室东莞523808 同济大学附属上海市肺科医院结核病临床研究中心上海200433 复旦大学上海医学院基础医学院病原生物学系教育部、卫健委、医科院医学分子病毒学重点实验室上海200032

通过观察miR-125b-5p对分枝杆菌在宿主细胞和小鼠体内存活情况的影响,探究其在抗结核免疫过程中的作用。采用不同培养基对分枝杆菌进行培养并计数;以1640培养基加10%胎牛血清培养所有实验用细胞。将终浓度50 nmol/L的miR-125b-5p模拟物... 详细信息

通过观察miR-125b-5p对分枝杆菌在宿主细胞和小鼠体内存活情况的影响,探究其在抗结核免疫过程中的作用。采用不同培养基对分枝杆菌进行培养并计数;以1640培养基加10%胎牛血清培养所有实验用细胞。将终浓度50 nmol/L的miR-125b-5p模拟物、miR-125b-5p抑制剂及磷酸盐缓冲液(PBS)对照加入细胞后,在不同时间点收集细胞。用分枝杆菌分别感染宿主细胞(A549、THP-1和RAW264.7)以及C57BL/6小鼠。采用定量聚合酶链反应检测miR-125b-5p的表达量。结果miR-125b-5p在分枝杆菌感染的多种宿主细胞及小鼠中都显著上调表达,其中小鼠肺部的表达量提高了约15倍。分别转染模拟物和抑制剂后,再用分枝杆菌感染细胞,结果发现miR-125b-5p可促进分枝杆菌在宿主细胞内的生长。当miR-125b-5p抑制剂注射到卡介苗(BCG)感染的小鼠体内时,小鼠体内的细菌载量显著降低(P<0.05)。本研究证明miR-125b-5p可调控分枝杆菌在宿主细胞及小鼠体内的生长,在抗结核免疫过程中发挥了重要作用。进一步对其作用机制的深入研究将为临床结核病的治疗提供理论指导。

关键词： miR-125b-5p 分枝杆菌结核病抗结核免疫

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CD137^(+)T细胞效应功能研究进展

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生命的化学 2023年第6期43卷 915-921页

作者：姬雪娇沈洪波王菲菲郑碧英广东医科大学检验医学研究所临床免疫学研究室东莞523808 同济大学附属上海市肺科医院结核病临床研究中心上海200433 复旦大学上海医学院基础医学院病原生物学系、教育部、卫健委、医科院医学分子病毒学重点实验室上海200032

CD137^(+)(又称4-1BB、TNFRSF9)T细胞亚群是一类抗原特异性活化的效应细胞。CD137^(+)T细胞产生细胞毒效应因子以及在抗原刺激后进行增殖的能力较强,使其在多种疾病中发挥免疫调节作用,其中CD137^(+)调节性T细胞分泌的分泌型CD137具有... 详细信息

CD137^(+)(又称4-1BB、TNFRSF9)T细胞亚群是一类抗原特异性活化的效应细胞。CD137^(+)T细胞产生细胞毒效应因子以及在抗原刺激后进行增殖的能力较强,使其在多种疾病中发挥免疫调节作用,其中CD137^(+)调节性T细胞分泌的分泌型CD137具有重要的免疫抑制作用。因此,全面了解CD137^(+)T细胞在疾病中的作用,对开发有效的疾病免疫防治策略至关重要。本文通过介绍CD137相关信号对T细胞尤其是CD8^(+)T细胞功能的调控机制、CD137^(+)T细胞的特征和效应功能、CD137^(+)T细胞在多种疾病进展中的免疫调控作用,为靶向CD137^(+)T细胞的免疫治疗提供参考。

关键词： CD137^(+)T细胞抗原特异性T细胞免疫微环境免疫治疗

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树突状细胞调控滤泡辅助性CD4+T(Tfh)细胞分化的机理研究

树突状细胞调控滤泡辅助性CD4+T(Tfh)细胞分化的机理研究

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第19次全国干扰素与细胞因子学术会议

作者：李建华 Erick Lu Tangsheng Yi Jason G.Cyster 复旦大学上海医学院病原生物学系、教育部/卫计委医学分子病毒学重点实验室上海 200032 加州大学旧金山分校免疫学系、霍华德·休斯医学研究所加州旧金山加州大学旧金山分校免疫学系、霍华德·休斯医学研究所加州旧金山

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生物安全三级实验室的工作满意度现状及其与职业紧张程度的关联

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微生物与感染 2014年第4期9卷 230-237页

作者：丁悦娜袁璧翡刘金也宋志刚林仲翁景清史智扬唐志佼孙志平韩文东田棣周志统戴俊明瞿涤复旦大学基础医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海复旦大学生物安全三级实验室上海200032 上海市卫生监督所上海200031 复旦大学上海医学院上海200032 上海市(复旦大学附属)公共卫生临床中心上海201508 福建省疾病预防控制中心福州350001 浙江省疾病预防控制中心杭州310051 江苏省疾病预防控制中心南京210008 武汉大学实验动物中心武汉430071 复旦大学公共卫生学院教育部公共卫生安全重点实验室上海200032

因生物安全三级（BSL‐3）实验室工作人员需在特殊工作环境中对高致病性病原微生物进行操作，其心理健康状态可影响实验室生物安全。本研究以工作满意度作为早期心理健康状况的评估指标，对江苏、浙江、上海、福建、湖北5个省市6家BSL‐... 详细信息

因生物安全三级（BSL‐3）实验室工作人员需在特殊工作环境中对高致病性病原微生物进行操作，其心理健康状态可影响实验室生物安全。本研究以工作满意度作为早期心理健康状况的评估指标，对江苏、浙江、上海、福建、湖北5个省市6家BSL‐3实验室工作人员进行调查，分析工作满意度与职业紧张程度的关联。调查结果显示，BSL‐3实验室人员的工作满意率为32．2％。职业紧张程度与工作满意度呈负相关。工作要求‐自主（JDC）模式中“社会支持”是提高工作满意度的因素，高社会支持组比数比（ OR ）值为4．60（95％ CI为1．25～16．97）。付出‐回报失衡（ERI）模式中“内在投入”是降低工作满意度的因素，高内在投入组 OR值为0．03（95％ CI为0．00～0．28）。分析结果提示，可通过加强“社会支持”和解除过度“内在投入”等措施，降低BSL‐3实验室人员的职业紧张程度，从而提高工作满意度。

关键词：生物安全三级实验室工作满意度职业紧张

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蜱传脑炎病毒全长感染性cDNA克隆的构建

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微生物与感染 2024年第6期19卷 321-331页

作者：王漫兮刘娜董妮华王永康曹恒龙钢上海市重大传染病与生物安全研究院上海200032 复旦大学上海医学院基础医学院教育部/卫健委/医科院医学分子病毒学重点实验室上海200032

本研究构建了蜱传脑炎病毒(tick-borne encephalitis virus,TBEV)的全长感染性克隆,为深入理解TBEV的复制和发病机制提供了重要工具。首先,预测TBEV全长序列中的原核启动子,并针对这些启动子进行同义突变以消除其活性,从而降低cDNA的细... 详细信息

本研究构建了蜱传脑炎病毒(tick-borne encephalitis virus,TBEV)的全长感染性克隆,为深入理解TBEV的复制和发病机制提供了重要工具。首先,预测TBEV全长序列中的原核启动子,并针对这些启动子进行同义突变以消除其活性,从而降低cDNA的细菌毒性。随后基于对序列复杂性和克隆效率的考虑,将TBEV cDNA序列分为两段进行合成,并利用同源重组技术将其克隆至pFK载体上。通过体外转录获得病毒RNA,并将RNA转染到细胞,通过实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR),使用TBEV病毒E蛋白的特异性引物成功检测到病毒RNA的复制;同时,通过Western blot,利用针对TBEV NS1蛋白的特异性抗体,成功检测到病毒蛋白的表达;半数组织培养感染量(50%tissue culture infectious dose,TCID50)检测显示,病毒滴度在48 h后显著上升,证实了病毒被成功拯救。最后,通过空斑实验,在BHK-21细胞中观察96 h后,验证了二代病毒的感染性,结果显示随着病毒液稀释度的减小,空斑数量显著增加,且病毒RNA的相对表达量和蛋白表达量随时间增加,表明二代病毒液具有感染性和在细胞内复制的能力。这些结果为TBEV的研究提供了新的工具以及感染性克隆构建的通用策略。

关键词：蜱传脑炎病毒全长感染性克隆病毒拯救

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