检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物与感染 2024年第3期19卷 177-185页

作者：张旸王德禹吴旸复旦大学上海医学院基础医学院教育部、卫健委、医科院医学分子病毒学重点实验室上海市病原微生物与感染前沿科学研究基地上海200032

Ⅶ型分泌系统(type VII secretion system,T7SS)是唯一的仅存在于革兰氏阳性细菌中的分泌系统。T7SS在细菌与细菌、细菌与宿主、细菌与环境的相互作用中发挥着重要功能,与细菌的生长和致病性密切相关。T7SS的功能多样性与其所分泌的效... 详细信息

Ⅶ型分泌系统(type VII secretion system,T7SS)是唯一的仅存在于革兰氏阳性细菌中的分泌系统。T7SS在细菌与细菌、细菌与宿主、细菌与环境的相互作用中发挥着重要功能,与细菌的生长和致病性密切相关。T7SS的功能多样性与其所分泌的效应蛋白的多样性密切相关。因此,本文将围绕T7SS所分泌的效应蛋白展开讨论,对效应蛋白的结构和功能、分泌机制及其基因转录水平的调控方式等研究进行综述,以期为进一步研究细菌的T7SS提供新的思路。

关键词： Ⅶ型分泌系统结核分枝杆菌金黄色葡萄球菌效应蛋白

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构建表达Flag-GPI的重组乙型肝炎病毒载体

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微生物与感染 2019年第4期14卷 199-208页

作者：胡孔颖谷陈建吴敏乐陶帅刘楠楠刘晶谢幼华复旦大学上海医学院基础医学院病原生物学系教育部、卫健委、医科院医学分子病毒学重点实验室上海200032 上海市浦东医院复旦大学附属浦东医院检验科上海201399

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)是小型的嗜肝DNA病毒,能够特异性地感染人肝实质细胞。HBV的易感性可以归于多个方面,包括细胞表面的受体以及细胞内的蛋白或其他因子,目前对HBV易感性的了解还有待深入。本课题利用课题组原有的HBV ... 详细信息

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)是小型的嗜肝DNA病毒,能够特异性地感染人肝实质细胞。HBV的易感性可以归于多个方面,包括细胞表面的受体以及细胞内的蛋白或其他因子,目前对HBV易感性的了解还有待深入。本课题利用课题组原有的HBV 5c3c载体和糖基磷脂酰肌醇(glycosylphosphatidylinositol,GPI)的特性,构建了重组HBV载体5c3c-CD59-Flag-GPI和5c3cT-Flag-GPI,转染Huh7细胞后可以将Flag标签锚定在细胞膜上,且可利用Flag抗体通过流式细胞术对其进行分选。在回补HBV包膜蛋白的情况下,5c3cT-Flag-GPI能包装形成完整的重组HBV颗粒。本研究为后续优化重组HBV的包装效率,进而为HBV易感性研究提供工具并奠定基础。

关键词：乙型肝炎病毒 5c3c 糖基磷脂酰肌醇重组乙型肝炎病毒载体

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人类诺如病毒反向遗传体系的构建与验证

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微生物与感染 2021年第2期16卷 71-78页

作者：陈水叶宋武慧易志刚复旦大学上海医学院基础医学院病原生物学系教育部/卫健委/医科院医学分子病毒学重点实验室上海200032 复旦大学附属上海市公共卫生临床中心上海201508

为验证已报道的能复制人类诺如病毒(human norovirus,HuNoV)GⅡ.3 U201感染性克隆的复制能力,进一步在HuNoV临床病毒株中寻找更优序列,构建能高效复制的感染性克隆,本研究合成含有T7启动子和EF-1α启动子的HuNoV GⅡ.3 U201全长序列,构... 详细信息

为验证已报道的能复制人类诺如病毒(human norovirus,HuNoV)GⅡ.3 U201感染性克隆的复制能力,进一步在HuNoV临床病毒株中寻找更优序列,构建能高效复制的感染性克隆,本研究合成含有T7启动子和EF-1α启动子的HuNoV GⅡ.3 U201全长序列,构建质粒pU201和pEF-1α-U201及对应的病毒RNA聚合酶失活的突变质粒。在COS 7细胞和Huh 7细胞中分别共转染T7聚合酶与pU201以及单独转染pEF-1α-U201,利用实时荧光定量聚合酶链反应检测转染后不同时间点细胞内病毒RNA水平。结果显示,与对照组相比,pU201和pEF-1α-U201的病毒RNA水平升高约2倍和3倍。为便于检测HuNoV复制,在pU201和pEF-1α-U201质粒中分别插入NanoLuc TM荧光素酶报告基因,并命名为pU201-Nluc和pEF-1α-U201-Nluc。将质粒分别转染COS 7细胞和Huh 7细胞,检测转染后不同时间点Nluc荧光素酶活性。结果显示,pEF-1α-U201-Nluc的Nluc荧光素酶活性相较于对照组增高近2倍,而pU201-Nluc无明显升高,提示EF-1α启动子起始病毒复制优于T7启动子。为寻找优于HuNoV GⅡ.3 U201的HuNoV序列,合成HuNoV GⅡ.4临床病毒株全长序列,将其插入EF-1α启动子载体中并转染细胞,于不同时间点检测上清及细胞中病毒RNA水平。结果显示,上清及细胞中病毒RNA水平与对照组相比无显著差异。以上结果提示,已报道可复制的HuNoV GⅡ.3 U201反向遗传体系复制效率有限,且HuNoV反向遗传体系复制能力可能与不同序列的病毒相关。

关键词：人类诺如病毒 T7启动子 EF-1α启动子感染性克隆亚基因组克隆临床病毒株

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一种非天然广谱抗病毒多肽的发现、活性评价及作用机制研究

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沈阳药科大学学报 2023年第12期40卷 1598-1607页

作者：梁国栋李瑞娟田阳丽夏帅马宇衡内蒙古医科大学药学院基于化学生物学的候选药物设计与筛选重点实验室内蒙古呼和浩特010110 军事科学院军事医学研究院北京100850 复旦大学基础医学院教育部/卫健委/医科院医学分子病毒学重点实验室上海200032

目的本文以MERS-CoV、H1N1和HIV-13种病毒Ⅰ型包膜蛋白中跨膜亚基的NHR区域为靶标,设计能够与靶标特异性结合并对3种病毒均发挥抑制活性的完全非天然广谱抗病毒多肽。方法对非天然多肽IIS序列优化改造并经Fmoc固相合成法获得目标肽,开展... 详细信息

目的本文以MERS-CoV、H1N1和HIV-13种病毒Ⅰ型包膜蛋白中跨膜亚基的NHR区域为靶标,设计能够与靶标特异性结合并对3种病毒均发挥抑制活性的完全非天然广谱抗病毒多肽。方法对非天然多肽IIS序列优化改造并经Fmoc固相合成法获得目标肽,开展3种病毒的抑制活性测试,通过圆二色谱、分析型超离心和等温滴定量热实验研究目标肽与靶标的作用机制。结果目标肽对MERS-CoV、H1N1和HIV-13种病毒均具有抑制活性,能够与3种病毒的NHR区域作用阻止病毒的膜融合过程。结论本文建立以病毒膜融合过程为基础的非天然抗病毒多肽设计方法和评价思路,为广谱抗病毒药物的开发提供一种新兴且有效的研究路径。

关键词：非天然抗病毒多肽病毒膜融合六股螺旋广谱性

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脑膜炎败血伊丽莎白菌耐药性的研究进展

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微生物与感染 2022年第1期17卷 47-54页

作者：巫祺乐方子璇袁舒颖陈妍雯陈力孙桂芹浙江中医药大学医学技术与信息工程学院浙江杭州310053 复旦大学上海医学院基础医学院教育部、卫健委、医科院医学分子病毒学重点实验室上海200032

脑膜炎败血伊丽莎白菌(Elizabethkingia meningoseptica,EM)可引起肺部感染、新生儿脑膜炎、菌血症等疾病,医院重症监护病房检出率较高,是院内感染的重要病原体之一。随着抗菌药物的广泛使用,EM对β-内酰胺类、氨基糖苷类、氟喹诺酮类... 详细信息

脑膜炎败血伊丽莎白菌(Elizabethkingia meningoseptica,EM)可引起肺部感染、新生儿脑膜炎、菌血症等疾病,医院重症监护病房检出率较高,是院内感染的重要病原体之一。随着抗菌药物的广泛使用,EM对β-内酰胺类、氨基糖苷类、氟喹诺酮类等临床常用抗菌药物呈多重耐药,给临床治疗带来极大困难。目前EM的耐药机制研究主要集中于产生药物灭活酶、药物作用靶位改变、外排泵、形成生物膜等方面。EM可同时携带多个耐药基因,如GOB、BlaB、CME等,从而介导多重耐药。本文就国内外EM耐药现状、耐药机制进行综述,旨在为预防和控制EM的医院内感染提供参考。

关键词：脑膜炎败血伊丽莎白菌耐药耐药基因耐药机制

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从菌群和免疫的角度理解2019新型冠状病毒增龄易感的潜在机制

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老年医学与保健 2020年第2期26卷 321-324页

作者：邬永琳赵超杨浩肖振明复旦大学上海医学院基础医学院教育部/卫健委/医科院医学分子病毒学重点实验室上海200032 国家老年疾病临床医学研究中心(复旦大学附属华山医院) 上海200040

2019年12月下旬,多家卫生机构报告了与中国湖北省武汉市流行病学相关的不明原因肺炎患者。中国疾病预防控制中心采集了暴发早期的标本,确定了肺炎的来源,并在肺炎患者中检测到1种新型冠状病毒——2019新型冠状病毒(2019 novel coronavir... 详细信息

2019年12月下旬,多家卫生机构报告了与中国湖北省武汉市流行病学相关的不明原因肺炎患者。中国疾病预防控制中心采集了暴发早期的标本,确定了肺炎的来源,并在肺炎患者中检测到1种新型冠状病毒——2019新型冠状病毒(2019 novel coronavirus, 2019-nCoV)^([1])。2020年1月24日,国内首次报告了2019-nCoV^([1]),随后世界卫生组织将该毒感染引起的肺炎命名为2019冠状病毒病(coronavirus disease 2019, COVID-19)。

关键词：肺炎患者卫生机构流行病学冠状病毒病潜在机制

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高血压患者严重急性呼吸综合征冠状病毒2型的易感性和血管紧张素转换酶抑制剂用药探讨

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微生物与感染 2020年第5期15卷 316-321页

作者：顾可羿汪慧菁赵超上海健康医学院基础医学院神经精神药理学实验室上海201318 复旦大学上海医学院基础医学院教育部、卫健委、医科院医学分子病毒学重点实验室上海200032 复旦大学附属华山医院国家老年疾病临床医学研究中心上海200041

严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)引起的2019冠状病毒病(coronavirus disease 2019,COVID-19)呈现出两个高比例态势,一是病毒感染者合并高血压比例较高;二是合并高血压的病毒感染者发展为重症和危重病例的比例高。这提示病毒感染与高血压之间存在密切联系,因此对高血压患者这一特殊群体的合理用药提出了需求。本文通过分析血管紧张素转换酶2(angiotensin converting enzyme 2,ACE2),即SARS-CoV-2的功能性受体与ACE之间的平衡关系,探讨高血压与病毒易感性之间的联系,以及高血压人群罹患COVID-19可能的发病规律。由于高血压群体中,血管紧张素转换酶抑制剂(angiotensin converting enzyme inhibitors,ACEI)的应用占有重要地位,本文从药理学和病原学角度进行分析,对该人群病毒感染前后的高血压用药给出指导建议,以供临床参考。

关键词： 2019冠状病毒病高血压血管紧张素转换酶2 血管紧张素转换酶抑制剂

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靶向SARS-CoV-2受体结合结构域的嵌合抗体表达及功能研究

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微生物与感染 2023年第1期18卷 2-12页

作者：石慧春焦凡珂徐巍陈永康陆路邹鹏复旦大学附属公共卫生临床中心上海201508 复旦大学上海医学院基础医学院教育部/卫健委/医科院医学分子病毒学重点实验室上海200032 上海市重大传染病和生物安全研究院上海200032

严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)感染所致的2019冠状病毒病(coronavirus disease 2019,COVID-19)给人民的生命健康造成了严重的威胁,目前该病毒仍然在广泛传播,针对SARS-CoV-2有效的治疗方法仍有限,因此寻找广谱中和抗体阻断SARS-CoV-2感染具有重要的意义。本文成功表达并纯化了3株靶向SARS-CoV-2的受体结合结构域(receptor-binding domain,RBD)的人鼠嵌合抗体,并且检测了这几株抗体对多种SARS-CoV-2假病毒和活病毒的中和活性。本研究表明这3株抗体能特异性地中和SARS-CoV-2野生型假病毒,IC 50分别为0.03μg/mL、0.06μg/mL、0.03μg/mL。此外,这3株抗体对Alpha株假病毒、Delta株假病毒和Lambda株假病毒也具有广谱中和活性,并可以抑制SARS-CoV-2 Delta株活病毒的复制。机制研究表明,这些抗体可以阻断SARS-CoV-2的S蛋白介导的细胞-细胞融合,且RBD上的K417、E484和N501位点可能是其与这3株抗体结合的关键位点。

关键词：严重急性呼吸综合征冠状病毒2 受体结合结构域嵌合抗体中和抗体

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新型冠状病毒上海株(nCoV-SH01)的分离和鉴定

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微生物与感染 2020年第1期15卷 16-21页

作者：张荣易志刚王玉燕滕峥徐巍宋武慧蔡霞孙志平谷陈建周艳秋陈洪友叶荣韩文东朱云凯冯飞房方皓李崇山张曦瞿涤付晨谢幼华袁正宏复旦大学上海医学院基础医学院病原生物学系教育部、卫健委、医科院医学分子病毒学重点实验室上海200032 上海市疾病预防控制中心上海200336

新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19)疫情对人类生命健康构成极大威胁。病毒的分离是构建新型冠状病毒(2019 novel coronavirus,2019-nCoV)细胞感染模型和动物感染模型的基础。本研究利用冠状病毒易感的Vero E6细胞,从... 详细信息

新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19)疫情对人类生命健康构成极大威胁。病毒的分离是构建新型冠状病毒(2019 novel coronavirus,2019-nCoV)细胞感染模型和动物感染模型的基础。本研究利用冠状病毒易感的Vero E6细胞,从1例上海感染者的咽拭子中分离到一株2019-nCoV,命名为nCoV-SH01。对该毒株全基因组采用一代Sanger和二代Illumina法测序,发现该毒株与GenBank MN908947的同源性>99.99%。免疫荧光检测显示,该毒株与COVID-19康复者的血清呈阳性反应。当nCoV-SH01感染Vero E6细胞后,导致典型的合胞体病变,细胞病变效应明显且进展迅速,提示nCoV-SH01可用于进一步建立2019-nCoV的细胞感染和动物感染模型,为开展致病性研究以及抗病毒药物和疫苗研发奠定了基础。

关键词：新型冠状病毒合胞体 Vero E6细胞鼻/咽拭子细胞模型

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慢性乙型肝炎患者外周血循环免疫复合物的临床意义探索

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微生物与感染 2022年第6期17卷 347-359页

作者：唐怡洁邬敏陆伟冯艳玲袁正宏张小楠张占卿复旦大学附属上海市公共卫生临床中心上海201508 复旦大学上海医学院基础医学院教育部/卫健委/中国医科院医学分子病毒学重点实验室上海200032 堪培拉大学澳大利亚首都直辖区2617

免疫复合物的形成是病毒在感染过程中造成机体损伤的重要原因之一。对病毒感染者进行免疫复合物的定量有助于监测疾病进展,了解病毒与宿主之间的相互作用。本研究对早期固相C1q结合荧光免疫法进行优化,并利用补体分子C1q特异性结合慢性... 详细信息

免疫复合物的形成是病毒在感染过程中造成机体损伤的重要原因之一。对病毒感染者进行免疫复合物的定量有助于监测疾病进展,了解病毒与宿主之间的相互作用。本研究对早期固相C1q结合荧光免疫法进行优化,并利用补体分子C1q特异性结合慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者血液中的循环免疫复合物(circulating immune complex,CIC),通过荧光标记的羊抗人IgG对CIC进行检测。针对220例CHB患者、20例非乙型肝炎的肝炎患者、20例健康者、10例CHB功能性治愈者,分析了CHB患者中的CIC水平及其与CHB诊断所用病毒学指标、肝功能生化指标之间的关系。结果显示:约97%的CHB患者存在CIC水平升高,且与病毒学指标乙型肝炎病毒表面抗原(hepatitis B virus surface antigen,HBsAg)(r=0.1973,P=0.0058)、HBV DNA(r=0.2178,P=0.0023)显著正相关;与肝脏损伤相关生化指标丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)(r=0.1580,P=0.0200)、天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)(r=0.1513,P=0.0353)呈正相关,而与补体C4(r=-0.21,P=0.003)呈负相关。不同程度的炎症和纤维化患者之间CIC和补体水平有显著性差异,且随临床分期产生相应波动。在免疫耐受期和低复制期,患者CIC水平较低而补体水平升高;在免疫激活期和HBV e抗原(HBV e antigen,HBeAg)阴性肝炎患者中的结果则相反。结果提示,CHB患者血液循环中存在CIC生成所造成的肝脏损伤及补体大量消耗,对CIC进行监测能在一定程度上反映CHB患者潜在的肝损伤。

关键词：乙型肝炎病毒免疫复合物补体肝脏炎症

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