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第五届全国中医药免疫学术研讨会-暨环境·免疫与肿瘤防治综合交叉会议

作者：王维王静刘春红 ITALIANI,Paola BORASCHI,Diana 马世平瞿涤中国药科大学中药药理教研室复旦大学上海医学院生物医学研究院医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室病复旦大学上海医学院原微生物研究所医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室复旦大学上海医学院病原微生物研究所意大利国立研究院生物医学技术研究所免疫生物学组细胞因子实验室

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治疗性疫苗研究现状与前景

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生物产业技术 2009年第3期 1-1页

作者：闻玉梅复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学实验室医学微生物学研究所中国工程院

治疗性疫苗的应用已有非常长的历史．早在19世纪，已有将来自结核病，梅毒感染者的组分或细菌成分作为一种原始性的治疗性疫苗用于治疗患者。近20年来．由于HIV感染已成为全球性的严重问题．加之又出现了多重耐药性的细菌与病毒以及用... 详细信息

治疗性疫苗的应用已有非常长的历史．早在19世纪，已有将来自结核病，梅毒感染者的组分或细菌成分作为一种原始性的治疗性疫苗用于治疗患者。近20年来．由于HIV感染已成为全球性的严重问题．加之又出现了多重耐药性的细菌与病毒以及用药物及抗体均难以治疗的微生物持续性感染．治疗性疫苗已被提升为一种新的待开发的资源。此外．由于抗微生物免疫学的迅速发展，更为治疗性疫苗从理论上奠定了坚实的基础．治疗性疫苗的应用价值已进一步凸显。

关键词：治疗性疫苗持续性感染抗微生物多重耐药性结核病待开发 HIV

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DNA的识别分子及其识别模式

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自然科学进展 2008年第6期18卷 609-614页

作者：张伟娟徐洁杰徐薇熊思东复旦大学上海医学院免疫学系免疫生物学研究所上海200032 复旦大学上海医学院医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室上海200032

固有免疫以TLR9依赖和TLR9非依赖的方式对DNA识别,在保护性免疫和病理性自身免疫反应中发挥重要作用.目前发现TLR9,DAI(DLM-1/ZBP1),RIG-I,尚未定义的识别B-DNA的分子,损伤DNA结合分子如:DNA-PKcs,Ku70,p53,ATM,ATR和含有SAP或PHD结构... 详细信息

固有免疫以TLR9依赖和TLR9非依赖的方式对DNA识别,在保护性免疫和病理性自身免疫反应中发挥重要作用.目前发现TLR9,DAI(DLM-1/ZBP1),RIG-I,尚未定义的识别B-DNA的分子,损伤DNA结合分子如:DNA-PKcs,Ku70,p53,ATM,ATR和含有SAP或PHD结构域等的分子可以识别DNA,并且分别以不同的识别模式识别细胞不同部位或不同类型的DNA.近几年来国内外针对DNA识别的研究较多并取得了重要进展,给研究保护性免疫和自身免疫提供了新的视野.文中结合作者所在实验室的研究探索,对DNA的识别分子和识别模式的研究进展进行综述.

关键词：固有免疫 TLR9 RIG-I DAI(DLM-1/ZBPl)

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表皮葡萄球菌双组分信号转导系统arlS基因生物学功能研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2007年第10期27卷 946-953页

作者：王家学朱涛娄强吴旸韩聪瞿涤复旦大学上海医学院生物医学研究院病原生物学研究所教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室200032

目的探讨表皮葡萄球菌arlS/R双组分信号转导系统(two-component signal transduction system,TCS)的组氨酸激酶arlS基因删除对细菌生物学的影响。方法构建含有红霉素抗性基因(ermB)的pBT2-△arlS质粒,随后将电转入表皮葡萄球菌1457的重... 详细信息

目的探讨表皮葡萄球菌arlS/R双组分信号转导系统(two-component signal transduction system,TCS)的组氨酸激酶arlS基因删除对细菌生物学的影响。方法构建含有红霉素抗性基因(ermB)的pBT2-△arlS质粒,随后将电转入表皮葡萄球菌1457的重组质粒在43℃条件下振摇培养,筛选表皮葡萄球菌1457菌株的arlS缺失突变株(SE1457-△arlS);采用微量板半定量方法检测arlS删除突变对细菌生物被膜形成的影响,通过检测A595值观察其生长曲线,检测过夜培养上清液对菌细胞裂解的活性,并用0.1%TritonX-100诱导细菌自溶的方法检测SE1457-△arlS突变株的自溶情况。结果成功构建pBT2-△arlS质粒,利用同源重组基因删除的方法表皮葡萄球菌1457 arlS基因被删除。△arlS突变株与野生株的生长曲线基本相似,提示arlS基因删除对细菌的增殖无明显影响,但SE1457-△arlS突变株形成生物被膜的能力明显低于野生株,降低90.96%;在0.1%Triton X-100诱导下SE1457-△arlS基因删除突变株的裂解率为97.83%,野生株为55.38%;而△arlS突变株过夜培养上清液对靶细菌裂解的活性则低于野生株,其裂解率为20.50%,野生株为56.12%。结论表皮葡萄球菌arlS/R双组分信号转导系统arlS基因可调控细菌生物被膜形成、菌细胞自溶以及胞外细菌裂解酶的活性。

关键词：表皮葡萄球菌双组分信号转导系统 arLS基因

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组氨酸蛋白激酶EnvZ抑制剂对福氏志贺菌毒力影响的初步研究

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复旦学报（医学版） 2007年第3期34卷 317-322页

作者：陈明亮王琪董生福秦智强张健韩聪沈旭瞿涤复旦大学上海医学院-生物医学研究院和病原微生物研究所-医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室上海200032 中国科学院上海药物研究所药物发现与设计中心上海201203

目的初步研究福氏志贺菌组氨酸蛋白激酶EnvZ抑制剂对福氏志贺菌毒力的影响。方法通过构建志贺菌:EnvZ胞内段(SF-EnvZc)蛋白的原核表达质粒,表达并纯化SF-EnvZc蛋白,在SPECS公司的小分子化合物库中模拟筛选出的10个候选EnvZ抑制剂的基础... 详细信息

目的初步研究福氏志贺菌组氨酸蛋白激酶EnvZ抑制剂对福氏志贺菌毒力的影响。方法通过构建志贺菌:EnvZ胞内段(SF-EnvZc)蛋白的原核表达质粒,表达并纯化SF-EnvZc蛋白,在SPECS公司的小分子化合物库中模拟筛选出的10个候选EnvZ抑制剂的基础上,通过体外磷酸化的方法筛选出能够有效地抑制SF- EnvZc蛋白磷酸化的小分子化合物(EnvZ抑制剂),然后采用表面等离子共振(SPR)技术检测EnvZ抑制剂与SF-EnvZc蛋白的结合力,并采用小鼠角结膜志贺菌感染模型检测EnvZ抑制剂对福氏志贺菌株Sf9380毒力的影响。结果在10个候选EnvZ抑制剂中,化合物1、2、3能够有效地抑制SF-EnvZc蛋白的磷酸化,其IC50值分别为(70．17±5．83)、(10．18±0．86)和(37．66±9．64)μmol／L,且上述3个化合物表现出对SF-EnvZc蛋白的高亲和力,其平衡解离常数(Kd)分别为4．08、3．57和2．94μmol／L,其中化合物1和2能够明显抑制福氏志贺菌株Sf9380导致的小鼠角结膜炎症反应(由■变为-),化合物3能够明显降低其炎症反应(由■降为+),化合物1、2、3的最小有效浓度分别为12．5、12．5和100μmol／L结论筛选出3个EnvZ抑制剂,化合物1、2、3能够不同程度地抑制或降低福氏志贺菌导致的小鼠角结膜炎症反应,提示EnvZ抑制剂能够降低福氏志贺菌的毒力。

关键词：福氏志贺菌组氨酸蛋白激酶表面等离子共振

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汉坦病毒S片段标准品构建及在荧光定量PCR检测中的应用

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环境与职业医学 2007年第2期24卷 147-149页

作者：周欣李燕婷瞿涤复旦大学上海医学院生物医学研究院&病原微生物研究所医学分子病毒学教育部和卫生部重点实验室上海200032 上海市疾病预防控制中心上海200336

[目的]构建汉坦病毒S片段标准品,并建立以特异性荧光探针为特点的TaqMan荧光定量PCR方法检测汉坦病毒核酸。[方法]对76-118株的S片段基因进行序列分析,利用引物设计软件设计出一对引物和一条荧光探针,逆转录为cDNA,经PCR扩增,产物纯化后... 详细信息

[目的]构建汉坦病毒S片段标准品,并建立以特异性荧光探针为特点的TaqMan荧光定量PCR方法检测汉坦病毒核酸。[方法]对76-118株的S片段基因进行序列分析,利用引物设计软件设计出一对引物和一条荧光探针,逆转录为cDNA,经PCR扩增,产物纯化后与PMD 18-T Vector连接,转化到大肠杆菌DH5a,筛选得到标准品的质粒,提取质粒并进行定量。在S片段的保守区设计引物和TaqMan探针,对real-time PCR条件进行优化,并提取急性期发病病人总RNA,逆转录为cDNA,与标准品同时检测。[结果]该方法制备的质粒标准品应用于汉坦病毒早期检测,能对检测样品进行质量控制;应用荧光定量PCR检测急性期病人病毒含量,具有高特异性和灵敏度,从病毒核酸提取至检测完成仅需3h左右,重复性好,并能对病毒准确定量。[结论]汉坦病毒荧光定量标准品和TaqMan荧光定量PCR方法特异、敏感、快速,适用于汉坦病毒的早期检测;汉坦病毒S片段编码的核衣壳蛋白(NP)是流行性出血热早期诊断的理想抗原。

关键词：荧光定量PcR 标准品 TaqMan针 S片段汉坦病毒

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乙型肝炎表面抗原阳性转基因小鼠肝组织基因表达谱及蛋白组学的初步研究

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微生物与感染 2006年第1期1卷 7-14,44页

作者：任军赵超方彩云马张妹杨芃原闻玉梅复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032 复旦大学生物医学研究所

目的利用与乙型肝炎病毒(ItBV)携带者相类似的#59系HBV转基因小鼠动物模型研究乙型肝炎表面抗原(HBsAg)蛋白对肝组织生理、代谢状态的影响,以了解HBsAg持续表达对肝细胞影响的机制。方法用Affmertix基因芯片观察转基因小鼠肝组织基因表... 详细信息

目的利用与乙型肝炎病毒(ItBV)携带者相类似的#59系HBV转基因小鼠动物模型研究乙型肝炎表面抗原(HBsAg)蛋白对肝组织生理、代谢状态的影响,以了解HBsAg持续表达对肝细胞影响的机制。方法用Affmertix基因芯片观察转基因小鼠肝组织基因表达谱的改变。用蛋白组学方法鉴定部分代谢相关酶类在转基因小鼠肝组织内的丰度改变。结果基因芯片实验显示43个基因在转基因小鼠肝组织内显著(≥2倍)上调表达,104个基因显著下调表达。蛋白组学实验检出18个代谢相关酶在转基因小鼠肝组织内丰度高于对照鼠1．5倍以上,9个代谢相关酶低于对照鼠1．5倍以上。结论HBV蛋白的存在对宿主肝组织代谢状态产生显著影响。推测其表现为胆固醇合成增强、胆汁酸合成减弱。糖异生作用增强、糖酵解减弱。氨基酸分解代谢增强、尿素合成减弱。

关键词：乙型肝炎病毒转基因小鼠基因芯片蛋白组学代谢

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流感裂解疫苗H3N2-抗H3N2免疫原性复合物滴鼻诱导小鼠黏膜免疫应答的研究

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微生物与感染 2006年第1期1卷 3-6,56页

作者：姚忻陈列胜蔡明勇邵一斌闻玉梅复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032 上海生物制品研究所

目的研究流感裂解病毒疫苗抗原抗体复合物滴鼻诱生小鼠黏膜免疫应答。方法分别以15μgH3N2、H3N2- CpG、H3N2-鼠抗H3N2及H3N2-PEG滴鼻免疫小鼠,检测肺泡灌洗液抗H3N2 IgA、血清抗H3N2 IgG效价。取免疫小鼠脾细胞,体外抗原刺激,用定量酶... 详细信息

目的研究流感裂解病毒疫苗抗原抗体复合物滴鼻诱生小鼠黏膜免疫应答。方法分别以15μgH3N2、H3N2- CpG、H3N2-鼠抗H3N2及H3N2-PEG滴鼻免疫小鼠,检测肺泡灌洗液抗H3N2 IgA、血清抗H3N2 IgG效价。取免疫小鼠脾细胞,体外抗原刺激,用定量酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清液IFN-γ及IL-4分泌水平。结果H3N2-抗H3N2免疫原性复合物诱生的抗H3N2 IgA效价明显高于H3N2单独免疫组(P<0．01),而与H3N2-CpG组无显著性差异。此外,复合物诱生的血清抗H3N2也高于H3N2单独免疫组(P<0．05)。H3N2-CpG组诱生的IFN-γ水平明显升高,而其他组之间无明显差异。结论流感病毒血凝素抗原抗体复合物、血凝素抗原加CpG佐剂可以诱生较强的局部黏膜免疫和体液免疫。这两组诱生的IgA效价均明显高于H3N2单独免疫组。另外,H3N2-CoG组小鼠的脾脏细胞经特异性抗原诱导后培养上清液中的IFN-γ水平明显升高。

关键词：流感病毒抗原抗体复合物黏膜免疫

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走近医学真菌

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微生物与感染 2006年第3期1卷 131-131页

作者：闻玉梅复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室医学微生物研究所上海200032

真菌学科所研究的真菌至少包括50000种，其中多数在自然界有机物循环中起重要作用。在医学真菌中，真菌的次级代谢产物如抗生素以及免疫抑制药物如环孢素，均已被用于医疗。此外，酵母已作为一种模式生物进行基因组学、蛋白质组学、代... 详细信息

真菌学科所研究的真菌至少包括50000种，其中多数在自然界有机物循环中起重要作用。在医学真菌中，真菌的次级代谢产物如抗生素以及免疫抑制药物如环孢素，均已被用于医疗。此外，酵母已作为一种模式生物进行基因组学、蛋白质组学、代谢组学的研究对象，例如目前研究蛋白质一蛋白质相互作用中，酵母双杂交体系对推动生命科学卓有贡献。与人类疾病密切相关的真菌种类仅为几十种。

关键词：真菌学医学酵母双杂交体系蛋白质相互作用蛋白质组学次级代谢产物有机物循环免疫抑制

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