检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物与感染 2013年第2期8卷 72-79页

作者：刘华勇武有聪何年安胡健许涛龚婷韩海燕吴旸瞿涤复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032 大理学院基础医学院病原生物学综合实验室大理671000 安徽医科大学附属安徽省立医院合肥230001

表皮葡萄球菌是引起医院内感染的常见条件致病菌之一,可在植入性医疗材料表面形成生物膜而引起慢性持续性感染。为建立表皮葡萄球菌生物膜感染动物模型,选取新西兰白兔、樱桃谷鸭、豚鼠、C57小鼠、BALB/c小鼠和Sprague-Dawley(SD)大鼠... 详细信息

表皮葡萄球菌是引起医院内感染的常见条件致病菌之一,可在植入性医疗材料表面形成生物膜而引起慢性持续性感染。为建立表皮葡萄球菌生物膜感染动物模型,选取新西兰白兔、樱桃谷鸭、豚鼠、C57小鼠、BALB/c小鼠和Sprague-Dawley(SD)大鼠为受试对象,分别采集血清,在体外检测其对表皮葡萄球菌生物膜的抑制作用,筛选出抑制效应较弱的新西兰白兔用于建立生物膜感染模型。经兔皮下埋植小盘后接种表皮葡萄球菌(1ml,109CFU/ml),72h后用光学显微镜、激光共聚焦显微镜及扫描电子显微镜观察小盘表面生物膜的形态,并进行菌落计数。结果显示,动物模型内形成的生物膜与体外培养的生物膜在形态上相似。进而利用该模型初步研究万古霉素在体内对细菌生物膜形成的影响,结果显示,万古霉素局部给药组生物膜内的活菌数明显低于未处理组(P<0.01)。本研究成功建立了表皮葡萄球菌生物膜感染新西兰白兔模型,可用于研究表皮葡萄球菌在体内形成生物膜的能力及局部药物的抗生物膜效果评价。

关键词：动物模型生物膜表皮葡萄球菌

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分枝杆菌细胞壁脂质PDIM致病机制研究进展

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科技导报 2012年第7期30卷 63-67页

作者：黄新华王德成复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

结核分枝杆菌(MycobacteriumTuberculosis,MTB)是导致人和动物结核病的病原体。MTB细胞壁成分复杂,功能多样,不但帮助分枝杆菌抵御外界不良的生活环境,同时在细菌逃逸宿主免疫攻击和致病过程中也发挥重要作用。脂质占细胞壁干重的60%以... 详细信息

结核分枝杆菌(MycobacteriumTuberculosis,MTB)是导致人和动物结核病的病原体。MTB细胞壁成分复杂,功能多样,不但帮助分枝杆菌抵御外界不良的生活环境,同时在细菌逃逸宿主免疫攻击和致病过程中也发挥重要作用。脂质占细胞壁干重的60%以上,其高含量与细菌毒力密切相关。MTB不含内毒素,也不产生外毒素和侵袭性酶类,其致病性主要与占细胞壁干重60%以上的脂质成分密切相关。PDIM(phthioceroldimycocerosate)作为细胞壁组分中独特而重要的结构,在维持细菌正常结构上发挥重要作用。由于PDIM在细胞壁分布的广泛性,研究发现PDIM在病原体-宿主的相互作用过程中也扮演重要角色,尤其是在细菌的早期侵染及进入巨噬细胞环节中发挥积极作用。对PDIM重要致病和毒力损伤机制研究,不仅加深对病原体-宿主互作网络中的理解,还有望为结核病的治疗带来新的希望与突破。

关键词：分枝杆菌 PDIM 脂质致病机制

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从痘苗病毒天坛株看继承与创新

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微生物与感染 2013年第1期8卷 1-1页

作者：闻玉梅复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

2013年迎来了继续改革与创新的一年。作为我国约5000种科技期刊的一份子，《微生物与感染》该如何继续前进？“温故而知新”，了解过去、继承传统，将为我们探索、创新未来打下坚实的基础。本年度的封面图片为痘苗病毒天坛株的电子显微... 详细信息

2013年迎来了继续改革与创新的一年。作为我国约5000种科技期刊的一份子，《微生物与感染》该如何继续前进？“温故而知新”，了解过去、继承传统，将为我们探索、创新未来打下坚实的基础。本年度的封面图片为痘苗病毒天坛株的电子显微镜照片。追溯痘苗病毒天坛株的历史，可至1926年。当时天花在全球大为流行，在中国有位约25岁的西北军士兵因患天花住在那时的北平传染病医院。当时民国中央防疫处第三科痘苗股负责人兽医齐长庆到医院取该患者带脓液的痘痂，

关键词：痘苗病毒创新天坛传染病医院电子显微镜科技期刊继承传统微生物

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葡萄球菌呼吸相关双组分系统SrrAB研究进展

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微生物学通报 2012年第12期39卷 1796-1807页

作者：武有聪许涛刘华勇韩海燕吴旸白丽瞿涤复旦大学上海医学院医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室上海200032 大理学院基础医学院病原生物学综合实验室云南大理671000

葡萄球菌呼吸相关双组分系统SrrAB能感应外界O2浓度,并将信号传至胞内,调控下游基因的转录,以应对外界环境的变化。有研究表明,金黄色葡萄球菌SrrAB在有氧条件下促进毒力因子的表达,抑制生物膜的形成;在厌氧条件下抑制毒力因子的表达,... 详细信息

葡萄球菌呼吸相关双组分系统SrrAB能感应外界O2浓度,并将信号传至胞内,调控下游基因的转录,以应对外界环境的变化。有研究表明,金黄色葡萄球菌SrrAB在有氧条件下促进毒力因子的表达,抑制生物膜的形成;在厌氧条件下抑制毒力因子的表达,促进生物膜的形成。另外,在有氧及厌氧条件下,金黄色葡萄球菌SrrAB调控生长代谢的途径也不一致。表皮葡萄球菌中也存在类似的双组分系统SrrAB,且与金黄色葡萄球菌SrrAB具有较高同源性,但目前尚不清楚两者在生长代谢及毒力调控方面的异同。结合课题组研究工作,简要综述葡萄球菌SrrAB的调控机制,着重比较其在有氧及厌氧条件下的调控差异,这对临床诊治葡萄球菌引起的感染具有一定的借鉴意义。

关键词：双组分信号转导系统 SrrAB 葡萄球菌

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表皮葡萄球菌双组分信号转导系统saeRS对相关蛋白调控的研究

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西安交通大学学报（医学版） 2012年第6期33卷 680-684页

作者：娄强王艳歌瞿涤河南大学医学院细胞与分子免疫学实验室河南开封475004 河南大学医学院细胞生物学教研室河南开封475004 复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

目的利用双向电泳技术对表皮葡萄球菌菌体蛋白进行蛋白质组学分析,寻找双组分信号转导系统saeRS的调控网络。方法对表皮葡萄球菌1457双组分信号转导系统saeRS删除株与野生株菌体蛋白进行双向电泳差异比较;电泳图谱采用Image Master 2DPl... 详细信息

目的利用双向电泳技术对表皮葡萄球菌菌体蛋白进行蛋白质组学分析,寻找双组分信号转导系统saeRS的调控网络。方法对表皮葡萄球菌1457双组分信号转导系统saeRS删除株与野生株菌体蛋白进行双向电泳差异比较;电泳图谱采用Image Master 2DPlatinum软件分析;免疫印迹法验证saeRS调控的差异蛋白。结果在表皮葡萄球菌1457双组分信号转导系统saeRS删除株与野生株蛋白质图谱中共发现23个差异表达的蛋白点(10个下调,13个上调)。结论蛋白质双向电泳技术可以成功应用于分析表皮葡萄球菌双组分信号转导系统saeRS的调控网络;此图谱为进一步研究saeRS在表皮葡萄球菌中的调控机制奠定了基础。

关键词：表皮葡萄球菌双组分信号转导系统 saeRS 蛋白质组双向电泳

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鲍曼不动杆菌生物膜形成与耐药的相关性初探

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中国病原生物学杂志 2012年第7期7卷 500-502页

作者：游洋顾伟杰王铮李晓霞牛辰天津医科大学微生物学教研室天津300070 复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

目的探索鲍曼不动杆菌生物膜的形成与耐药的相关性。方法采用96孔板培养法模拟体内生物膜形成,结晶紫染色法鉴定各菌株生物膜生长情况。将鲍曼不动杆菌于黑色聚碳酸酯膜上形成生物膜,其上覆盖药敏纸片,然后将此结构置于涂有大肠埃希菌AT... 详细信息

目的探索鲍曼不动杆菌生物膜的形成与耐药的相关性。方法采用96孔板培养法模拟体内生物膜形成,结晶紫染色法鉴定各菌株生物膜生长情况。将鲍曼不动杆菌于黑色聚碳酸酯膜上形成生物膜,其上覆盖药敏纸片,然后将此结构置于涂有大肠埃希菌ATCC25922菌株的M-H平板上,通过测量抑菌圈直径观察生物膜对氯霉素和氧氟沙星的渗透限制作用。结果结晶紫染色测定各菌株均能于体外形成生物膜。除85号菌株外,各菌株与对照组相比,对氯霉素均有明显渗透限制作用,而对氧氟沙星无明显作用。结论生物膜对某些药物的渗透限制作用是细菌耐药的重要机制之一。

关键词：鲍曼不动杆菌生物膜耐药渗透性

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缺氧微环境与KSHV共致癌分子机制

缺氧微环境与KSHV共致癌分子机制

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2012全国临床微生物与感染免疫学术研讨会

作者：蔡启良复旦大学上海医学院医学分子病毒学教育部卫生部重点室

卡珀斯肉瘤(KS)是一种恶性血管性皮肤肿瘤,常发生于皮下组织或黏膜,是艾滋病患者中的最常见恶性肿瘤。但其主要病原卡珀斯肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)是如何通过免疫规避策略抑制机体的免疫应答、引起癌细胞生长的分子机理,并研发高效治疗... 详细信息

卡珀斯肉瘤(KS)是一种恶性血管性皮肤肿瘤,常发生于皮下组织或黏膜,是艾滋病患者中的最常见恶性肿瘤。但其主要病原卡珀斯肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)是如何通过免疫规避策略抑制机体的免疫应答、引起癌细胞生长的分子机理,并研发高效治疗性疫苗,成为了国内外迫切的研究任务。目前大量数据表明瘤内缺氧微环境易造成肿瘤细胞的转移和抗肿瘤治疗,由KSHV诱发的多种恶性肿瘤组织中同样发现存在缺氧现象。鉴于KSHV相关肿瘤细胞如何应答缺氧环境和调节宿主细胞内缺氧信号通路尚未清楚,近十年来围绕缺氧诱导因子(HIF)信号通路研究,我们揭示了KSHV利用基因表达调控和蛋白翻译后修饰等一系列特异调节分子机制,首次较全面地阐明了缺氧微环境压力对致瘤型病毒介导相关肿瘤发生发展的潜在作用。

关键词：缺氧微环境分子机制

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非霍奇金淋巴瘤患者脑膜脓毒黄杆菌肺部感染1例

非霍奇金淋巴瘤患者脑膜脓毒黄杆菌肺部感染1例

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2012全国临床微生物与感染免疫学术研讨会

作者：孙桂芹李蒙王蕾陈力复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室

目的阐述脑膜脓毒黄杆菌对免疫功能低下患者的1例肺部感染,以期临床能够重视该菌的分离、鉴定,在治疗时应根据药敏结果,合理选用抗生素。方法以一个非霍奇金淋巴瘤患者的肺部感染脑膜脓毒黄杆菌的病例分析为出发点,讨论脑膜脓毒黄杆菌... 详细信息

目的阐述脑膜脓毒黄杆菌对免疫功能低下患者的1例肺部感染,以期临床能够重视该菌的分离、鉴定,在治疗时应根据药敏结果,合理选用抗生素。方法以一个非霍奇金淋巴瘤患者的肺部感染脑膜脓毒黄杆菌的病例分析为出发点,讨论脑膜脓毒黄杆菌临床分离率增加、治疗困难的现状。结果脑膜脓毒黄杆菌感染因其多重耐药给临床治疗带来困难,使得该菌感染的死亡率升高,不合理使用抗生素和免疫抑制剂的使用给脑膜脓毒黄杆菌感染创造了条件,静脉导管、气管插管、呼吸机的广泛应用增加了脑膜脓毒黄杆菌接触感染的机率。结论脑膜脓毒性黄杆菌广泛存在,并引起人不同部位的感染,尤其随着广谱抗生素的广泛应用及导管在治疗时应根据药敏结果,合理选用抗生素。临床医务工作者应对脑膜炎脓毒黄杆菌有较全面的、新的认识,重视该菌的分离、鉴定及药敏实验,从而采取合理措施,控制该菌的感染,提高治疗效果。

关键词：脑膜脓毒黄杆菌非霍奇金淋巴瘤感染多重耐药

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鸭膜联蛋白2cDNA的克隆表达及抗体制备

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中华生物医学工程杂志 2012年第6期18卷 456-459页

作者：赵艳丰闫梁许斌贲海静杨金华周双宬瞿涤南京医科大学第二附属医院检验科 210011 复旦大学上海医学院教育部卫生部医学分子病毒学重点实验室

目的克隆樱桃谷鸭膜联蛋白2（AnnexinA2）并制备抗体，用于鸭AnnexinA2蛋白的表达分析。方法采用RT-PCR方法从鸭肝脏组织中克隆鸭AnnexinA2eDNA序列，将该cDNA序列亚克隆到原核表达载体pET-28a（＋），构建重组原核表达载体pET-28a（＋... 详细信息

目的克隆樱桃谷鸭膜联蛋白2（AnnexinA2）并制备抗体，用于鸭AnnexinA2蛋白的表达分析。方法采用RT-PCR方法从鸭肝脏组织中克隆鸭AnnexinA2eDNA序列，将该cDNA序列亚克隆到原核表达载体pET-28a（＋），构建重组原核表达载体pET-28a（＋）．AnnexinA2。异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷（IPTG）诱导AnnexinA2重组质粒原核表达，应用镍柱纯化AnnexinA2融合蛋白。腹腔注射AnnexinA2融合蛋白免疫小鼠，采用免疫印迹鉴定小鼠抗鸭AnnexinA2多克隆抗体并检测鸭原代肝细胞在培养12、24、72h以及120hAnnexinA2蛋白表达情况。结果成功构建了原核表达载体pET-28a（＋）．AnnexinA2，经NcoI和XhoI双酶切，琼脂糖凝胶电泳显示5369bp和1020bp条带，重组质粒测序结果显示重组序列正确。IPTG诱导重组质粒表达产生相对分子质量为36000的可溶性融合蛋白。AnnexinA2融合蛋白免疫小鼠，获得的抗血清1：2000稀释经免疫印迹仍能检测到靶蛋白，获得的小鼠抗鸭AnnexinA2多克隆抗体可应用于鸭原代肝细胞表达检测，AnnexinA2蛋白在鸭原代肝细胞培养12、24、72h以及120h均有表达。结论制备了小鼠抗鸭AnnexinA2多克隆抗体，可为探讨AnnexinA2影响鸭乙型肝炎病毒感染分子机制提供实验依据。

关键词：膜联蛋白2 多克隆抗体肝炎病毒乙型鸭

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系统性红斑狼疮儿童特异性全长抗体基因库的构建与分析

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南方医科大学学报 2012年第8期32卷 1082-1087页

作者：周志刚朱美华梁中锟陈振瑞贺微李长征谭万龙姜世勃刘叔文周烨周辰广州医学院第二附属医院儿科广东广州510260 南方医科大学南方医院南方医科大学药学院南方医科大学中医药学院复旦大学上海医学院分子病毒学教育部//卫生部重点实验室上海200032 南方医科大学基因工程研究所广东广州510515 香港Dgen生物技术有限公司香港999077

目的构建系统性红斑狼疮(SLE)儿童个体特异性哺乳动物细胞表面展示的全长人抗体基因库。方法采集SLE确诊患儿外周血,分离外周血淋巴细胞,提取外周血淋巴细胞总RNA,用RT-PCR扩增全长Kappa轻链(LCκ)和重链可变区(VH)基因、构建抗体轻链... 详细信息

目的构建系统性红斑狼疮(SLE)儿童个体特异性哺乳动物细胞表面展示的全长人抗体基因库。方法采集SLE确诊患儿外周血,分离外周血淋巴细胞,提取外周血淋巴细胞总RNA,用RT-PCR扩增全长Kappa轻链(LCκ)和重链可变区(VH)基因、构建抗体轻链基因库和抗体重链基因库,将抗体基因库转染293T细胞,流式细胞仪分析抗体在293T细胞表面的表达。结果以0.8μg总RNA为模板,用6套引物成功扩增全长Kappa轻链和重链可变区基因,插入表达载体,构建获得的重链基因库容量为9.4×104,轻链基因库容量为8.4×104。随机挑选的10个重链克隆有8个含有正确的阅读框架,编码8个不同的氨基酸序列,10个轻链克隆7个含有正确的阅读框架,编码7个不同的氨基酸序列。流式细胞仪分析挑选的单克隆和抗体基因库,均检测到全长抗体在293T细胞表面的表达,理论上抗体库中可表达的抗体多样性可以达到109。结论以0.8μg总RNA为模板,通过RT-PCR扩增,成功构建SLE儿童特异性全长人抗体基因库,并在293T细胞表面成功展示SLE儿童个体抗体库中的全长抗体,为进一步研究SLE儿童自身抗体的特点及自身抗体在SLE发病机制中的作用及临床应用打下良好基础。

关键词：系统性红斑狼疮儿童哺乳动物细胞表面展示全长人源抗体库

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