检索结果-内蒙古大学图书馆

声学技术 2011年第2期30卷 158-160页

作者：何年安王文平黄备建朱涛瞿涤复旦大学附属中山医院超声科上海200032 复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒实验室上海200032

为探讨超声辐照对体外培养的HepG2细胞存活力的影响,采用正交设计方法,选定声强、占空比和辐照时间3因素,每因素5水平的参数条件设计正交表,对贴壁培养的HepG2细胞进行超声辐照,之后继续培养24 h后行MTT(噻唑蓝)实验检测细胞存活率,期... 详细信息

为探讨超声辐照对体外培养的HepG2细胞存活力的影响,采用正交设计方法,选定声强、占空比和辐照时间3因素,每因素5水平的参数条件设计正交表,对贴壁培养的HepG2细胞进行超声辐照,之后继续培养24 h后行MTT(噻唑蓝)实验检测细胞存活率,期间光学显微镜观察培养板内的细胞生长状况及形态。结果表明:当超声声强大于2 W/cm2任何情况及声强1.5 W/cm2、占空比大于60%时,细胞出现明显脱壁、形态变圆、弹坑样聚集以及脱壁细胞内出现颗粒和细胞碎裂等现象,细胞存活率大大降低。超声声强在0.5～1.0 W/cm2,占空比在10%-20%时,细胞存活率可确保达到90%以上。正交设计统计分析提示超声声强和占空比是影响细胞存活率的主要因素,且声强影响大于占空比(P<0.05),而辐照时间并非主要因素(P>0.05)。

关键词：超声细胞存活率 HepG2细胞正交设计

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哺乳动物细胞表面展示全长类风湿关节炎抗体库的构建

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南方医科大学学报 2011年第8期31卷 1369-1373页

作者：周烨陈振瑞贺微娄海波张哲欢刘叔文姜世勃吴曙光李长征周辰南方医科大学基因工程研究所广东广州510515 南方医院广东广州510515 药学院广东广州510515 中医药学院广东广州510515 复旦大学上海医学院分子病毒学教育部/卫生部重点实验室上海200032 香港Dgen生物技术有限公司香港999077

目的采用哺乳动物细胞表面展示技术构建全长人源类风湿关节炎抗体库。方法分离类风湿关节炎患者的外周血淋巴细胞,提取总RNA,采用RT-PCR的方法扩增抗体全长轻链基因和重链可变区基因,分别插入哺乳动物细胞表达载体pDGB-HC-TM,电击转化... 详细信息

目的采用哺乳动物细胞表面展示技术构建全长人源类风湿关节炎抗体库。方法分离类风湿关节炎患者的外周血淋巴细胞,提取总RNA,采用RT-PCR的方法扩增抗体全长轻链基因和重链可变区基因,分别插入哺乳动物细胞表达载体pDGB-HC-TM,电击转化感受态大肠杆菌TOPO-10,分别构建抗体轻链基因库和抗体重链基因库,然后将抗体轻链、重链基因库联合转染293T细胞,用流式细胞仪分析全长人源抗体在293T细胞表面的表达。结果成功构建了类风湿关节炎患者来源的IgG1-Kappa型抗体基因库,随机挑选单克隆经DNA序列分析显示轻链库、重链库的序列正确率分别为80%和60%,可表达的抗体库多样性为6.13×1010。结论类风湿关节炎抗体基因库转染293T细胞后能够在细胞表面表达全长人源抗体,所展示的抗体库具有良好的多样性,能够为下一步筛选特异性抗体奠定基础。

关键词：哺乳动物细胞表面展示类风湿关节炎抗体基因库全长人源抗体流式细胞仪

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四环素诱导的丙型肝炎病毒非结构蛋白5B稳定细胞株的构建和检测

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微生物与感染 2011年第2期6卷 84-89页

作者：王耀辉丁焕平王燏婵袁正宏复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032 复旦大学生物医学研究院上海200032 上海市(复旦大学附属)公共卫生临床中心上海201508

丙型肝炎病毒(HCV)感染个体后在宿主细胞内长时间保持低水平复制,与慢性肝炎、肝硬化及肝细胞肝癌的发生密切相关。目前,HCV感染后肝细胞发生转化的具体机制还不清楚。非结构蛋白5B(NS5B)是HCV编码的非结构蛋白之一,具有RNA依赖的RNA聚... 详细信息

丙型肝炎病毒(HCV)感染个体后在宿主细胞内长时间保持低水平复制,与慢性肝炎、肝硬化及肝细胞肝癌的发生密切相关。目前,HCV感染后肝细胞发生转化的具体机制还不清楚。非结构蛋白5B(NS5B)是HCV编码的非结构蛋白之一,具有RNA依赖的RNA聚合酶活性(RdRp),是病毒复制所需的关键酶。除参与病毒复制外,NS5B通过直接与宿主蛋白相互作用影响细胞的正常功能逐渐成为人们关注的焦点。为深入了解NS5B在病毒复制和致病过程中的作用,本研究在肝癌细胞系HepG2细胞中构建了可由四环素诱导(Tet-On)的NS5B稳定细胞株。结果显示,与对照组相比,加入四环素可成功诱导NS5B。加入不同浓度的四环素或经过不同的诱导时间,目的蛋白均能同时被标签抗体和抗NS5B抗体检测。免疫荧光法进一步证实NS5B存在于细胞质内。本研究所构建的NS5B稳定细胞株可用于诸多后续试验,为深入研究NS5B的功能提供了细胞模型。

关键词：丙型肝炎病毒非结构蛋白5B HepG2 Tet-On

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新生儿重症监护室多重耐药鲍氏不动杆菌耐药性及膜蛋白机制研究

新生儿重症监护室多重耐药鲍氏不动杆菌耐药性及膜蛋白机制研究

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3rd Shanghai Neonatal Forum(第三届上海国际新生儿医学论坛)

作者：闫钢风曹云瞿涤王传清陈超复旦大学附属儿科医院新生儿科复旦大学上海医学院教育部卫生部医学分子病毒学重点实验室

目的了解NICU内MDR-AB耐药性及耐药机制,为控制医院感染及合理用药提供依据.方法收集我院NICU分离的26株MDR-AB,采用琼脂稀释法检测对抗菌药的MIC,用超声波和超速离心法提取细菌的膜孔蛋白并用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-...

目的了解NICU内MDR-AB耐药性及耐药机制,为控制医院感染及合理用药提供依据.方法收集我院NICU分离的26株MDR-AB,采用琼脂稀释法检测对抗菌药的MIC,用超声波和超速离心法提取细菌的膜孔蛋白并用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行分析.结果鲍氏不动杆菌在呼吸道标本中检出率最高,达73.1％;有25例患儿在鲍氏不动杆菌感染前至少使用过一种抗菌药物治疗,17例应用过第三代头孢菌素,有9例使用过碳青酶烯类药物,早产儿、低出生体重儿、接受机械通气和全静脉营养者被感染者占多数;26株MDR-AB临床分离株对常用抗菌药均产生较高的耐药性,耐药率在80％以上.膜蛋白分析结果提示,26株多重耐药菌株在25KDa附近外膜孔蛋白缺失.结论 NICU分离鲍曼不动杆菌对临床常用抗菌药耐药率严重,应予警惕;外膜孔蛋白条带缺失可能是我院NICU内MDR-AB的主要耐药机制.[关键词]鲍曼不动杆菌;多重耐药;外膜蛋白;耐药机制.

关键词：

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微小RNA对人类免疫缺陷病毒感染的影响:飞向入侵者的子弹?

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微生物与感染 2011年第3期6卷 158-164页

作者：朱凌燕仇超徐建青上海市(复旦大学附属)公共卫生临床中心上海201508 温州医学院温州325035 复旦大学生物医学研究院上海201508 复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

微小RNA(miRNA)是一类内源性小RNA,通过结合mRNA的3′非翻译区对基因进行转录后的调节,具有广泛的生物学功能。已有研究表明,宿主miRNA能调节人类免疫缺陷病毒(HIV)的基因表达,影响HIV的复制能力、感染性,并可能与HIV的潜伏有关。与此同... 详细信息

微小RNA(miRNA)是一类内源性小RNA,通过结合mRNA的3′非翻译区对基因进行转录后的调节,具有广泛的生物学功能。已有研究表明,宿主miRNA能调节人类免疫缺陷病毒(HIV)的基因表达,影响HIV的复制能力、感染性,并可能与HIV的潜伏有关。与此同时,HIV来源的病毒miRNA同样在病毒的生活史以及病毒与宿主的相互作用中发挥重要作用。更多与HIV相关的miRNA仍然有待发现,其相应的调节机制也有待进一步阐明。

关键词：人类免疫缺陷病毒微小RNA 复制潜伏

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新生儿重症监护病房多重耐药鲍曼不动杆菌β-内酰胺酶的基因型

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中华围产医学杂志 2011年第5期14卷 257-260页

作者：闫钢风曹云瞿涤王传清陈超复旦大学附属儿科医院新生儿科上海201102 复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒重点实验室复旦大学附属儿科医院细菌室

目的了解新生儿重症监护病房内多重耐药鲍曼不动杆菌耐药性及其β-内酰胺酶基因携带情况，为控制医院感染及合理用药提供依据。方法收集本院新生儿重症监护病房分离出的26株多重耐药鲍曼不动杆菌，采用琼脂稀释法检测其对抗菌药物的最... 详细信息

目的了解新生儿重症监护病房内多重耐药鲍曼不动杆菌耐药性及其β-内酰胺酶基因携带情况，为控制医院感染及合理用药提供依据。方法收集本院新生儿重症监护病房分离出的26株多重耐药鲍曼不动杆菌，采用琼脂稀释法检测其对抗菌药物的最低抑菌浓度，聚合酶链反应技术检测多重耐药鲍曼不动杆菌菌株8内酰胺酶基因携带情况。结果26株多重耐药鲍曼不动杆菌临床分离菌株对头孢他啶、头孢西丁、哌拉西林-他唑巴坦及环丙沙星耐药率100．0％，对其余抗菌药物耐药率为80．8％～96．2％。26株测试菌株中axa-51均为阳性，20株（77％）axa-23阳性，14株（54％）ampC阳性，11株（42％）axa-23和ampC同时阳性。未检出携带axa-24、axa-58、imp1、imp-4和vim2基因的菌株。结论鲍曼不动杆菌的耐药性严重，axa23和ampC是本院新生儿重症监护病房内多重耐药鲍曼不动杆菌携带的主要口内酰胺酶基因。

关键词：鲍氏不动杆菌抗药性多种细菌口内酰胺酶类基因型重症监护病房新生儿

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含双环哌啶结构HIV-1抑制剂的设计合成及生物活性研究

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中国药物化学杂志 2011年第3期21卷 169-177页

作者：毛文祥董铭心朱卫国姜世勃戴秋云湘潭大学化学学院湖南湘潭411105 军事医学科学院生物工程研究所北京100071 复旦大学上海医学院分子病毒学教育部/卫生部重点实验室上海200032

目的设计合成一系列具有新型结构特征的双环哌啶类C-C族趋化因子受体5(CCR5)抑制剂并测定其抗HIV-1活性。方法以HIV-1辅助受体CCR5抑制剂Vicriviroc的结构为模板,通过改变左侧哌嗪结构、取代基位置等方法设计并合成一系列新化合物。并利... 详细信息

目的设计合成一系列具有新型结构特征的双环哌啶类C-C族趋化因子受体5(CCR5)抑制剂并测定其抗HIV-1活性。方法以HIV-1辅助受体CCR5抑制剂Vicriviroc的结构为模板,通过改变左侧哌嗪结构、取代基位置等方法设计并合成一系列新化合物。并利用MS及1H-NMR谱对这些化合物进行结构表征。结果与结论合成了15个新结构化合物,活性测试结果表明,该系列化合物具有较强的抗HIV-1 R5病毒株的活性(IC50=1.20～66.24μmol.L-1)。当R1为芳基结构且两个氮原子满足标准的丙二胺结构时,化合物的活性更好。

关键词： CCR5 HIV-1 抑制剂合成

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表皮葡萄球菌双组分信号系统作为抗生物膜药靶的研究

表皮葡萄球菌双组分信号系统作为抗生物膜药靶的研究

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2011 International Symposium of Microbizl Biofilm 2011年国际生物膜学术研讨会)

作者：黄仁政蒋华良瞿涤刘华勇韩世清秦志强张健潘斌胡健吴旸沈旭复旦大学上海医学院医学分子病毒学教育部卫生部重点实验室上海200032 中国科学院上海药物研究所南京工业大学制药和生命科学研究院南京市新模范马路5号210009

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继续加强学科间交叉与国际化,努力提升刊物的学术水平

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微生物与感染 2011年第1期6卷 1-1页

作者：闻玉梅复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

《微生物与感染》自从2006年由《国外医学.微生物学分册》改为学术性期刊并公开发行以来,已度过整整5年。在学术实力强大和学科门类交叉的编委会（包括9位国际编委和88位国内编委）、编辑部、作者与读者的共同关心与努力下。

关键词：学术水平国际化刊物学术性期刊编委会办刊宗旨微生物编辑部

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耐甲氧西林金黄葡萄球菌小鼠菌血症感染模型的建立与评估

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中华微生物学和免疫学杂志 2010年第7期30卷 603-607页

作者：王德成王星周文江彭秀华高谦教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室复旦大学上海医学院200032 上海市公共卫生临床中心复旦大学附属公共卫生临床中心

目的本研究采用临床分离鉴定的ST-239型耐甲氧西林金黄葡萄球菌（MRSA）感染BALB/c小鼠,建立菌血症感染模型.方法从小鼠的临床症状、生存曲线和主要组织器官的病理学变化进行了时相性监测,并用该模型验证万古霉素对小鼠菌血症的治疗效... 详细信息

目的本研究采用临床分离鉴定的ST-239型耐甲氧西林金黄葡萄球菌（MRSA）感染BALB/c小鼠,建立菌血症感染模型.方法从小鼠的临床症状、生存曲线和主要组织器官的病理学变化进行了时相性监测,并用该模型验证万古霉素对小鼠菌血症的治疗效果.结果 ST-239型MRSA感染的小鼠血液中细菌含量较高,小鼠炎症反应严重并伴有心、肺等多组织器官的损伤;对小鼠使用万古霉素后可显著降低血液中的细菌量,动物存活率明显提高,主要组织器官的病理学症状减轻.结论该模型的建立将为进一步研究临床分离的MRSA的病原特性、发病机制、治疗方法等提供可靠的实验动物模型.

关键词：耐甲氧西林金黄葡萄球菌菌血症小鼠模型

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