检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物与感染 2009年第3期4卷 140-145,151页

作者：蒋定锋闫梁贲海静赵艳丰秦智强瞿涤复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

为研究鸭乙型肝炎病毒核心抗原(DHBcAg)真核表达质粒的免疫原性,分析DHBcAgDNA疫苗诱导的体液免疫应答,首先借助生物信息学方法对鸭乙型肝炎病毒(DHBV)Core基因编码的氨基酸序列进行亲疏水性分析,分别构建DHBcAg全基因(E-DHBc263)及去... 详细信息

为研究鸭乙型肝炎病毒核心抗原(DHBcAg)真核表达质粒的免疫原性,分析DHBcAgDNA疫苗诱导的体液免疫应答,首先借助生物信息学方法对鸭乙型肝炎病毒(DHBV)Core基因编码的氨基酸序列进行亲疏水性分析,分别构建DHBcAg全基因(E-DHBc263)及去除疏水性序列的DHBcAg片段(E-DHBc180)的真核表达质粒,间接免疫荧光检测结果显示可在COS7细胞内表达。进一步构建原核表达质粒p-DHBc263和p-DHBc180,仅p-DHBc180可表达蛋白,纯化后作为酶联免疫吸附试验(ELISA)包被抗原,用于DHBcAb的检测。分别用E-DHBc263和E-DHBc180免疫小鼠,采用间接ELISA检测DHBcAb。结果显示,E-DHBc180可诱导免疫小鼠产生DHBcAb免疫应答,加强免疫后效价可达1∶100～1∶400。结果提示,E-DHBc180可作为DHBcAgDNA疫苗,在DHBV感染鸭模型中评价其效果。

关键词：鸭乙型肝炎病毒核心抗原克隆 DNA疫苗

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开展多学科双向性转化型研究

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微生物与感染 2009年第1期4卷 3-3,12页

作者：闻玉梅复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室

虽然转化型研究已被提出数年,但一般强调的是基础理论研究联系临床医学或预防医学的问题并在一定程度上予以解决。实现多学科、双向性转化型研究(muhidisciplinary bidirectional translational research),如加强基础医学与临床医学、... 详细信息

虽然转化型研究已被提出数年,但一般强调的是基础理论研究联系临床医学或预防医学的问题并在一定程度上予以解决。实现多学科、双向性转化型研究(muhidisciplinary bidirectional translational research),如加强基础医学与临床医学、预防医学及实验诊断学等多学科之间的相互交叉,将可促进转化型研究向更高、更深层次发展。在医学及生命科学中,一个常用的词是从实验室到临床(frombenchtobed),实际上基础研究不仅应解决患者的疾苦,还应着眼于预防疾病、环境卫生、卫生经济学等多学科的问题。[第一段]

关键词：转化型多学科双向性预防医学临床医学环境卫生基础理论基础医学

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embB306位点作为耐多药结核分枝杆菌分子检测标记初探

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中华检验医学杂志 2009年第2期32卷 153-156页

作者：秦晓华马志承沈鑫乔霓丹王辰辰张树蓉贾亭松梅建高谦复旦大学上海医学院教育部医学分子病毒学重点实验室 200032 上海市疾病预防控制中心结核病防制科

目的研究embB基因306位点（embB306）突变在耐多药结核分枝杆菌中的分布，探讨以该位点作为耐多药分子检测标记的应用前景。方法从上海疾病预防控制中心获得其保存的已知耐药表型的结核分枝杆菌291株，使用错配PCR及DNA测序两种方法检测... 详细信息

目的研究embB基因306位点（embB306）突变在耐多药结核分枝杆菌中的分布，探讨以该位点作为耐多药分子检测标记的应用前景。方法从上海疾病预防控制中心获得其保存的已知耐药表型的结核分枝杆菌291株，使用错配PCR及DNA测序两种方法检测其embB306位点的突变，分析耐药表型与结核分枝杆菌embB306位点的突变的相关性。结果74株耐多药菌株中有38株（51．4％）该位点有突变（X2=93．8，P〈0．01），而其他24株多耐药菌株中有9株（37．5％）为embB306突变株（r=60．1，P〈0．01）；41株耐单药菌株中仅有2株（4．9％）存在该位点的突变（X2=6．8，P=0.0093），而152株全敏感菌株中无一存在该位点突变。以embB306位点作为耐多药结核分枝杆菌（MDR—TB）分子检测标记的特异度达94．9％（206／217）。结论以embB306作为耐药突变位点，特别是耐多药结核分枝杆菌的分子检测标记，具有一定的灵敏度和较高的特异度，而且检测方法简单易行，可用于耐多药结核分枝杆菌的临床快速检测。

关键词：抗药性多种细菌分枝杆菌结核突变生物学标记聚合酶链反应

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ArlR反应调节蛋白在表皮葡萄球菌不同生长期表达的检测

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微生物与感染 2009年第2期4卷 92-96页

作者：刘敬然孙志平许涛吴旸李达文瞿涤复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

表皮葡萄球菌（Staphylococcus epidermidis,SE）是寄居在人体和黏膜表面的条件致病菌,因可在医疗植入材料表面形成生物膜（biofilm）而具有致病性。细菌双组分信号转导系统可调控生物膜形成,但其调控机制在SE中研究甚少。本课题对arlR... 详细信息

表皮葡萄球菌（Staphylococcus epidermidis,SE）是寄居在人体和黏膜表面的条件致病菌,因可在医疗植入材料表面形成生物膜（biofilm）而具有致病性。细菌双组分信号转导系统可调控生物膜形成,但其调控机制在SE中研究甚少。本课题对arlRS双组分信号转导系统的反应蛋白ArlR在细菌不同生长期的表达情况进行初步研究。首先构建ArlR原核表达质粒,用纯化重组ArlR免疫小鼠,获得多克隆抗-ArlR抗体,免疫Dot方法检测结果显示小鼠抗-ArlR血清效价〉1∶100000。进一步采用蛋白免疫印迹法检测ArlR在SE1457野生株不同生长期中的表达水平,结果显示,ArlR在2h表达量较低,到4h达高峰,6-10h表达量较4h降低。利用反转录实时荧光定量聚合酶链反应检测arlR基因在不同生长期的转录水平,结果显示相应时间点ArlR蛋白表达水平与arlR基因转录水平一致。本研究结果为后期研究双组分信号转导系统arlRS对SE生物膜形成的影响奠定基础。

关键词：表皮葡萄球菌双组分信号转导系统 arlR基因 ArlR

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流感病毒致病机理的几个问题

流感病毒致病机理的几个问题

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第二届传染病诊治高峰论坛暨2009年浙江省感染病、肝病学术年会

作者：闻玉梅复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学实验室

流感病毒的致病性可从群体、个体及分子不同水平来分析:1.群体水平主要是从传播性、群体发病的严重性及群体对该病毒株的免疫保护性等方面综合评估。至8月底"甲流"确诊已达20.9余万例,死亡2185例,传播性极高。在所有死亡病例... 详细信息

流感病毒的致病性可从群体、个体及分子不同水平来分析:1.群体水平主要是从传播性、群体发病的严重性及群体对该病毒株的免疫保护性等方面综合评估。至8月底"甲流"确诊已达20.9余万例,死亡2185例,传播性极高。在所有死亡病例中40%年龄为青少

关键词：流感病毒传播性几个问题

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ADAM33基因在慢性哮喘小鼠气道重塑中的表达

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实用医学杂志 2009年第6期25卷 868-870页

作者：揭志军金美玲蔡映云袁正宏胡芸文徐扬上海交通大学附属新华医院呼吸内科 200092 复旦大学附属中山医院呼吸病研究所 200032 复旦大学上海医学院教育部医学分子病毒学重点实验室 200032

目的:研究ADAM33(a disintegrin and a metallo proteinase 33)mRNA在慢性哮喘小鼠模型气道重塑中的表达。方法:20只雌性C57BL/6小鼠随机分为2组,每组10只。A组(慢性哮喘组)分别于第1、14天小鼠腹腔注射1mL致敏液,从第21天开始雾化吸入2... 详细信息

目的:研究ADAM33(a disintegrin and a metallo proteinase 33)mRNA在慢性哮喘小鼠模型气道重塑中的表达。方法:20只雌性C57BL/6小鼠随机分为2组,每组10只。A组(慢性哮喘组)分别于第1、14天小鼠腹腔注射1mL致敏液,从第21天开始雾化吸入2.5%的卵蛋白(OVA)溶液,每次30min,每周3次,连续8周。(2)B组(生理盐水对照组)给予生理盐水进行致敏和激发。在末次激发24h后,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)做细胞分类计数。用实时定量反转录多聚酶链反应(real-timeRT-PCR)法测定肺组织中ADAM33、白介素-4(IL-4)和白介素-13(IL-13)mRNA表达量。取左肺组织分别行苏木紫-伊红(HE)染色和Masson′sTrichrome染色,用抗α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)抗体行免疫组化染色。结果:A组BALF中嗜酸粒细胞[(6.3±1.3)×105/mL]及百分比[(18.1±3.0)%)]、肺组织中ADAM33、IL-4和IL-13等mRNA表达量[分别为(1.41±0.93)×10-2、(5.72±3.89)×10-2、(9.45±5.91)×10-2)]与B组相比明显增高(P<0.01)。而且Masson′sTrichrome染色示上皮下胶原纤维沉积增加、α-SMA免疫组化示气道平滑肌层明显增厚。结论:ADAM33 mRNA在小剂量OVA反复激发复制的慢性哮喘小鼠模型中表达增加,可能参与气道重塑的发生和发展。

关键词：哮喘基因 ADAM33 气道重塑小鼠

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一起邮轮诺如病毒痰隋的病原学检测

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中国国境卫生检疫杂志 2009年第2期32卷 69-71页

作者：王家栋韩晓辉刘江霞章琪方筠田桢干陆晔张晓航王健上海国际旅行卫生保健中心复旦大学上海医学院医学分子病毒学教育部、卫生部重点实验室

[目的]总结诺如病毒实验室诊断经验，进一步完善诺如病毒的检测方法。（方法]针对上海口岸发生的又1起邮轮急性胃肠炎爆发疫情，应用酶联免疫吸附实验（ELISA）、逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）、电镜观察等技术，对送检的9份粪便标本... 详细信息

[目的]总结诺如病毒实验室诊断经验，进一步完善诺如病毒的检测方法。（方法]针对上海口岸发生的又1起邮轮急性胃肠炎爆发疫情，应用酶联免疫吸附实验（ELISA）、逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）、电镜观察等技术，对送检的9份粪便标本进行检测。[结果]运用2种ELISA试剂盒在9份标本中分别检出4份和5份标本诺如病毒抗原阳性；运用逆转录-聚合酶链方法，发现9份标本中有7份扩增出诺如病毒特异性条带；运用电镜在镜下观察到诺如病毒颗粒。[结论]诺如病毒检测方法的建立将为口岸公共卫生突发事件应急体系的建设提供重要的技术支持。

关键词：诺如病毒急性胃肠炎实验室诊断口岸

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不同来源人肝细胞系β干扰素诱生及其信号通路的比较

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微生物与感染 2009年第2期4卷 81-87页

作者：陈辉邬敏于士颜陈捷亮袁正宏复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032 上海市(复旦大学附属)公共卫生临床中心上海201508

β干扰素(IFN-β)是一种在抗病毒固有免疫应答过程中具有重要作用的细胞因子,而肝细胞作为肝炎病毒的宿主细胞被认为具有IFN-β诱生的能力,但目前尚未建立合适的体外人肝细胞模型用以研究乙型肝炎病毒(HBV)与肝细胞干扰素系统的相互作... 详细信息

β干扰素(IFN-β)是一种在抗病毒固有免疫应答过程中具有重要作用的细胞因子,而肝细胞作为肝炎病毒的宿主细胞被认为具有IFN-β诱生的能力,但目前尚未建立合适的体外人肝细胞模型用以研究乙型肝炎病毒(HBV)与肝细胞干扰素系统的相互作用。为此,本研究选取了3株人肝细胞系PH5CH8、Huh7、HepG2作为研究对象,以IFN-β诱生剂新城疫病毒(NDV)与多聚次黄苷酸-胞苷酸〔poly(I∶C)〕处理细胞,从转录、蛋白水平及功能学角度检测产生IFN-β的能力。结果显示,与Huh7和HepG2细胞相比,PH5CH8细胞经NDV与poly(I∶C)诱导可产生高水平的IFN-β。进一步利用蛋白免疫印迹法比较3株细胞系内IFN-β诱生信号通路相关蛋白的表达水平,结果显示,与PH5CH8细胞相比,Huh7和HepG2细胞内多种信号蛋白的表达水平偏低。本研究结果为选择合适肝细胞系用于HBV与干扰素系统作用的研究提供了实验依据,并为重建IFN诱生系统选择性缺陷的肝细胞系提供了理论基础。

关键词：肝细胞 β干扰素诱生信号通路 β干扰素诱生剂

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Viperin蛋白可通过影响非结构蛋白与脂筏的关联抑制丙型肝炎病毒复制

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微生物与感染 2009年第4期4卷 203-208,222页

作者：吴显芳王珊珊潘婷婷易志刚袁正宏复旦大学生物医学研究院上海200032 复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

目前,对丙型肝炎病毒(HCV)感染患者主要采用以Ⅰ型干扰素为主的治疗方案,但干扰素抑制病毒的具体机制仍然不详。本研究通过实时聚合酶链反应(PCR)检测HCV的RNA水平,蛋白免疫印迹法检测HCV非结构蛋白的表达,以及膜飘浮实验检测非结构蛋... 详细信息

目前,对丙型肝炎病毒(HCV)感染患者主要采用以Ⅰ型干扰素为主的治疗方案,但干扰素抑制病毒的具体机制仍然不详。本研究通过实时聚合酶链反应(PCR)检测HCV的RNA水平,蛋白免疫印迹法检测HCV非结构蛋白的表达,以及膜飘浮实验检测非结构蛋白与脂筏的关联性,探讨干扰素诱导蛋白Viperin抑制HCV复制的机制。结果显示,在体外HCV亚基因复制子及感染细胞模型中过量表达Viperin可显著降低细胞内HCV非结构蛋白的表达及RNA的水平。膜漂浮实验发现,过量表达的Viperin可通过干扰HCV非结构蛋白NS3、NS5A与细胞内脂筏膜的关联,使其对非离子去污剂敏感。进一步研究发现,与脂筏膜结构组成相关的法尼基合成酶(FPPS)可通过与Viperin相互作用,部分反转Viperin的抗HCV复制效应。以上结果提出一种新的干扰素抗HCV机制,即干扰素诱导蛋白Viperin可通过影响非结构蛋白与脂筏的关联,干扰HCV复制复合体的稳定性,从而抑制HCV复制。

关键词：丙型肝炎病毒干扰素诱导蛋白脂筏微结构 Viperin

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乙型肝炎治疗性疫苗研究进展

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世界临床药物 2009年第6期30卷 321-327页

作者：汪萱怡复旦大学生物医学研究院复旦大学上海医学院教育部医学分子病毒学实验室上海200032

乙型肝炎病毒感染所导致的慢性肝炎是全球性的公共卫生问题,给患者及社会带来巨额经济负担。慢性乙型肝炎的现行治疗主要依靠核苷(酸)类似物及干扰素,其存在高耐药、低耐受及不良反应等问题。新的、更为安全且有效的治疗药物及途径亟待... 详细信息

乙型肝炎病毒感染所导致的慢性肝炎是全球性的公共卫生问题,给患者及社会带来巨额经济负担。慢性乙型肝炎的现行治疗主要依靠核苷(酸)类似物及干扰素,其存在高耐药、低耐受及不良反应等问题。新的、更为安全且有效的治疗药物及途径亟待发展。治疗性疫苗极具开发前景,是当前国内外乙型肝炎治疗的研究热点。正在研究中的乙型肝炎治疗性疫苗包括蛋白类疫苗、肽类疫苗、DNA疫苗及自体树突状细胞疫苗。但目前尚未有疫苗进入注册阶段,国内有3个疫苗在临床评价中。

关键词：乙型肝炎病毒感染慢性治疗性疫苗

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